尚慧；陈丽君；邢静
目的 体外分离培养鉴定躯干神经嵴干细胞,探讨其生物学特性,为研究周围神经再生修复提供新的细胞来源.方法 取大鼠胚胎躯干部神经管,组织块法培养获取躯干神经嵴干细胞,通过形态学及免疫细胞化学观察其细胞生长、增殖、分化等特性.结果 原代培养的躯干神经嵴千细胞呈梭形,其特异性标记物nestin和p75表达阳性,并有较高的增殖活性.传代培养后,在含血清培养基中,其分化细胞呈GFAP、MAP-2、α-SMA阳性.结论 成功地培养了躯干神经嵴干细胞,细胞表现出多潜能干细胞特性,为研究周围神经组织工程种子细胞来源提供实验依据.
作者：卢静；孙晋浩；张静；丛丽；綦晓霞；庄园；杨洁；李振华 刊期： 2009年第04期
目的 探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)和Ki67蛋白在不同期蕈样肉芽肿(MF)皮损中的表达.方珐选择27例MF病变皮肤及5例正常皮肤组织蜡块,分为:红斑/斑块期MF(n=21)、肿瘤期MF(n=6)和正常对照组(n=5),应用免疫组织化学Envison两步法分别检测3组标本表皮及真皮中PDCD4及Ki67的表达.结果 ①红斑/斑块期MF皮损表皮PDCD4+细胞与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),真皮PDCD4+细胞明显少于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损表皮及真皮PDCD4+细胞均少于正常对照组和红斑/斑块期MF(P<0.05);②两组MF表皮Ki67'细胞的数量与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),红斑/斑块期MF及肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞均多于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞高于红斑/斑块期MF皮损(P<0.05);③各期MF的表皮及真皮中PDCD4和Ki67的表达无相关性(P>0.05).结论 PDCD4的表达从MF的红斑/斑块期到肿瘤期逐渐减低,真皮中Ki67的表达逐渐增强,MF的发生与发展可能与PDCD4表达降低或缺失有关.
作者：于淑萍；马春虎；王玉坤 刊期： 2009年第04期
目的 探测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对背根神经节(DRG)神经元谷氨酸(Glu)损伤的保护作用.方法 Wistar胎鼠DRG神经元分散培养48 h后,用Glu(200 μmol/L)造成神经元损伤,并同时给予IGF-1(10 mnol/L),观察添加IGF-1和未添加IGF-1孵育的Glu损伤的神经元的活细胞生长状况,并用流式细胞仪检测神经元的凋亡率,用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)检测细胞内钙离子荧光强度.结果 用IGF-1孵育的神经元生长状况良好,凋亡率、细胞内钙离子荧光强度均低于无IGF-1孵育的标本.结论 IGF-1可通过减低钙离子内流,抑制细胞凋亡,从而对Glu损伤的DRG神经元产生保护作用.
作者：张凤军；王丽红；刘真；邢子英；王怀经；李振中 刊期： 2009年第04期
目的 观察脑神康胶囊对缺氧复氧损伤大鼠海马神经元凋亡及其Bel-2、Bax mRNA表达的影响.方法 随机将原代培养大鼠海马神经元分为对照组、损伤组、中药低、中、高浓度组.对照组正常培养,损伤组及中药组建立缺氧复氧损伤模型,中药各浓度组于复氧时换以不同浓度含药血清的培养液,采用MTT法测各组细胞存活率,采用流式细胞仪检测凋亡率,采用RT-PcR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达并计算两者比值.结果 损伤组细胞存活率及Bcl-2 mRNA表达明显下降(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达显著升高(P均<0.01),Bel-2/Bax降低(P<0.01);中药各浓度组较损伤组细胞存活率及Bel-2 mRNA表达均升高(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),Bcl-2/Bax增加(P<0.01),且呈明显的剂量依赖性.结论 脑神康胶囊对海马神经元缺氧复氧损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其调节凋亡相关蛋白、减少凋亡密切相关.
作者：李伟；刘德山；常萍；林炜炜 刊期： 2009年第04期
目的 探讨绒毛膜促性腺激素(hcG)对滋养层细胞系HTR8-SVneo侵袭活性的影响及其可能的调控机制.方法 将培养的HTR8-SVneo细胞根据处理因素分为对照组、低浓度hCG(10 IU/mL)刺激组、高浓度hCG(100 IU/mL)刺激组,再将HTR8-SVneo细胞分为对照组、hCG(100 IU/mL)刺激组、DPCPX(A1R特异性阻断剂)+hcG(100IU/mL)联合刺激组.采用RT-PCR检测各组HTR8-SVneo细胞基质金属蛋白酶-2(MRS-2)的表达变化,明胶酶谱检测各组HTR8-SVneo细胞MMP-2蛋白水平的分泌变化.结果 高浓度hCG(100 IU/mL)较低浓度hCG(10 IU/mL)刺激后的HTR8-SVneo细胞MMP-2的表达与分泌均上升(P<均0.05);腺苷受体AlR的表达同时升高(P<0.05).阻断A1R的作用通路后,MMP-2的表达与分泌均下降(P均<0.05).结论 随着hCG浓度的升高,HTR8-SVneo细胞的侵袭性逐步增强,其调控机制为通过促进A1R的表达而使MMP-2的分泌升高.
作者：李泽武；杨美香；孙锦堂；解奇；邓碧萍；刘佳；宋丙凤；毛海婷；曲迅 刊期： 2009年第04期
目的 探讨风疹病毒E2包膜糖蛋白中部分亮氨酸的突变对特异性细胞融合的影响.方法 于E2蛋白中选取9个亮氨酸位点,采用基因定点突变的方法分别将其突变成丙氨酸,采用流式细胞术检测各突变株蛋白在细胞表面的表达效率,Giemsa染色法与指示基因法检测特异性细胞融合,血吸附实验检测其吸附活性.结果 与野毒株蛋白相比,除L144A与L225A之外,其它突变株蛋白在细胞表面的表达效率均有不同程度的降低.排除各突变株蛋白在细胞表面表达效率变化的影响后,其引起的细胞融合效率均有不同程度的降低,其中位于E2蛋白氨基酸序列中间靠近氨基端的亮氨酸(L58、L105、L128与L144)突变时,其细胞融合效率降低更为明显,相应的血吸附效率也有所降低.结论 E2蛋白中,其氨基酸序列中间靠近氨基端的蛋白区域(L58～L144)对引起的特异性细胞融合具有重要的作用.
作者：吴冰；刘晓丽；王志玉 刊期： 2009年第04期
目的 构建真核表达质粒pIRES-Rb94,观察Rb94基因对鞘氨醇激酶(SphK)表达的影响.方法 根据Rb94基因序列设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的Rb94基因的真核表达质粒pIRKS-Rb94,经脂质体转染A549细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株.采用Real-time RT-PCR和Western boltting法检测Rb94基因并观察其对人肺腺癌A549细胞株SphK表达的影响.结杲成功构建重组表达质粒pIRE-Rb94,转染A549细胞后获得稳定转染细胞株pIRES-Rb94-A549,该细胞株中Rb94基因高效表达;SphK1表达下调而SphK2表达上调.结论 真核表达质粒pIRES-Rb94科构建成功并可有效转染A549细胞,Rb94基因抑制SphK1的表达,增强SphK2的表达.
作者：刘芳；马道新；谭炳煦；高晖；王建波；张萍；郭颖；程玉峰 刊期： 2009年第04期
目的 调查成年人被动吸烟情况,了解人们对被动吸烟的知识、态度和行为,为制定控烟政策提供依据.方法 采用拦截调查的方法,在山东省济南市、聊城市、平阴县三地共调查543人,其中不吸烟者397人.采用X2检验、Logistic回归分析方法统计分析有关因素与被动吸烟的关系.结果 不吸烟者中42.6%的人被动吸烟,其中52.4%的男性被动吸烟,47.8%的女性被动吸烟,男性被动吸烟率高于女性.59.7%的不吸烟者主动反对吸烟者在自己面前吸烟.男性、从事室内工作、不主动拒绝被动吸烟和吸烟者吸烟前不征求他人意见是不吸烟者被动吸烟的危险因素.结论 人群中被动吸烟率仍然较高,人们对被动吸烟危害的认识尚不足,拒绝被动吸烟的意识淡漠.对不同公共场所全部禁烟的态度不尽一致,多数人支持在学校、医院、公交工具中全部禁烟.需要进一步加强对公众的控烟宣传,加大公共场所禁烟的力度,减少全人群的烟草暴露特别是加强对不吸烟者的保护力度.
作者：李斐斐；孙桐；刘言训；侯家祥 刊期： 2009年第04期
目的 了解国内在育龄妇女人群中实施神经管缺陷(NTDs)综合干预措施的预防效果.方珐全面搜集国内发表的关于在育龄妇女人群中实施NTDs综合干预措施文献,共有12篇文献符合纳入标准(累计381 561人接受综合干预措施).将纳入文献按南北地域归类,分别汇总文献的总体效应值.采用Woolf法对文献研究结果进行齐性检验,根据结果选取汇总纳入文献研究结果总体效应值的分析方法.研究结果趋于一致时,采用Peto法;研究结果问差异较大时,采用D-L法.结果 ①12篇文献的研究结果差异较大(Q=20.443 6,P<0.05),综合干预措施效应强度RR为0.5565(95%CI:0.5446～0.568 7),保护率(PR)为44.35%;②南方地域的2篇文献研究结果趋于一致(Q=0.0684,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.6735(95%CI:0.5767～0.7865),PR为32.65%.北方地域的10篇文献研究结果趋于一致(Q=16.553 8,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.5131(95%(CI:0.4283～0.6146),PR为48.69%;结论目前国内在育龄妇女人群中综合干预措施可降低NTDs的发病风险,但预防率仍然较低.北方地域综合干预措施预防率高于南方地域.在育龄妇女中开展的NTDs综合干预措施尚需进一步完善.
作者：郝连正；李辉；王志萍；赵仲堂 刊期： 2009年第04期
目的 建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案,比较当前国内外常用的无血清培养基(Neurobasal+B27,NCM)与传统含血清培养基(DMEN/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM)对体外培养脊髓神经元生长状态的影响.方法 取E14-15 d Wistar大鼠的胚胎脊髓组织行胰酶消化获取脊髓神经元的单细胞悬液,分别用NCM与SCM进行培养,差速贴壁法及Ara-C干预纯化培养的神经元.于接种后第1、2、3、4、5、6、7 d倒置相差显微镜下观察细胞生长状态的变化,并用免疫荧光细胞化学法比较两种培养基培养下获取的神经元纯度.结果 采用NCM培养的脊髓神经元生长良好,对环境变化如换液及加入Ara-C更为耐受;NCM培养的神经元的纯度为(87.70±8.70)%,SCM培养的神经元纯度为(78.61±7.00)%,前者纯度更高(P=0.019).结论 NCM较之SCM更加适合脊髓神经元的体外培养.
作者：袁玉静；傅志俭；孙涛 刊期： 2009年第04期
目的 应用脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,检测细胞因子肿瘤坏死因子-a(TMF-a)、白细胞介素-6(IL-6)和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA/uPAR)的mRNA和蛋白含量的变化及辛伐他汀对其表达的影响.方法 实验分为12h组和24h组,各组又分为空白对照组、脂多糖(100 ng/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)和脂多糖(100 ns/mL)共作用组,用实时荧光定量PCR和ELISA方法测定12 h组、24 h组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA和蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,脂多糖组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清波中IL-6蛋白的表达均明显增加(P均<0.05);与脂多糖组相比,辛伐他汀和脂多糖共作用组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中IL-6蛋白的表达均明显降低(P均<0.05).结论 辛伐他汀可抑制HUVECs分泌的细胞因子TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的表达.
作者：窦姗姗；邓景惕；季冉；扈燕来；张伟红；张立平 刊期： 2009年第04期
目的 研究单腔两用气管导管(新型导管)在开胸术中通气效果及安全性.方法 选择开胸食管癌切除术病例90例,随机分为A、B两组,使用单腔两用气管导管和双腔支气管导管行单肺通气的效果观察,着重比较气道压及肺内分流率.结果 双肺通气时两组气道压及分流率差异无统计学意义(P>0.05),单肺通气时B组气道压及分流率均明显高于A组(P<0.5).结论 两种气管导管均能达到满意的单肺通气效果,但因单腔两用气管导管通气面积大,气道阻力小,分流率低,故安全性较高.
作者：王青威；岳庆祝；闫召华；李永强；李敬；滕淑贞 刊期： 2009年第04期
目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对快速老化模型小鼠PIO(SAMP10)炎症反应的抑制作用.方法 随机将48只SAMP10分为对照组、rhG-CSF治疗组,每组24只.治疗组皮下注射rhG-CSF100μg/(kg·d),对照组给予等体积生理盐水,连续7 d.分别于给药结束后第7、14、28、56天取脑组织进行免疫荧光染色,检测TNF-α和iNOS的表达,用Image-proPlus图像分析软件,分析TNF-α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值.结果 治疗组小鼠脑组织额叶皮质TNF-α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值明显减少(P<0.05).结论 rhG-CSF能明显抑制SAMP10脑组织炎症反应.
作者：宋艳；毕建忠；王萍；赵翠萍；谢兆宏；王允 刊期： 2009年第04期
目的 探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制.方法 从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度.用EZ-SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real-time PCR测定T淋巴细胞IL-10 mRNA、IFN-γ mRNA的表达水平.结果 MScs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著(P<0.01).MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独KSCs组抑制作用更加明显(P<0.01).MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN-γ mRNA表达和协同抑制IL-10 mRNA表达的作用.单独MSCs或MSCS联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响.结论 MSCS联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN-γ mRNA、IL-10 mRNA表达有关.
作者：殷玉俊；李晶；汤郁；尤海燕；朱伟；许文荣；焦志军 刊期： 2009年第04期
目的 探讨丹参对大鼠原位肝移植供肝缺血-再灌流损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的影响.方法 将40只SD大鼠分为对照组、丹参组及假手术组,建立原位肝移植模型,在供肝灌注冷保存时,以4℃乳酸林格氏液为基液,丹参组灌注保存液中加丹参注射液(60mL/L),对照组不加丹参.保存5 h后置入受体.移植后6h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT水平;测定肝组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的含量,并对比观察病理形态学的改变.结果 对照组、丹参组较假手术组肝移植术后AST、ALT明显升高,肝组织中MDA含量、TNF-α和IL-1明显升高,但丹参组上述指标的异常变化均明显减轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).丹参组较对照组肝组织的再灌注损害程度明显减轻.结论 丹参可以降低大鼠移植肝脏再灌注损伤中TNF-α及IL-1水平,对移植肝脏缺血-再灌注损伤具有保护作用.
作者：王宇；周杰；蒋晓青 刊期： 2009年第04期
目的 监测远端坏死的穿支皮瓣经皮氧分压(tcPaO2)的变化规律,为临床工作提供实验依据.方法 应用体质量400～450g雄性Wistar大鼠100只,在其背部作以髂腰皮动脉为蒂的穿支皮瓣,面积约12 cm×3 cm,以穿支穿出点为近端到皮瓣远端均分为4个区域依次为1、2、3、4区,分别在术前及术后0、1、2.4、7d监测各区域的tcPaO2值.结果 术后各区域0 dtcPaO2值较术前明显降低(P<0.01).术后1、2、4、7d近端3个区域的tePaO2值逐渐升高(P<0.01),术后7 d达到高,其中近端2个区域基本达到正常水平;远端4区的tcPaO2值逐渐降低(P<0.01),术后4d全部坏死.术后1、2d由近端到远端tePaO2值先升高后降低,2区明显高于1区与3,4区(P<0.05);术后4、7 d由近端到远端tcPaO2值呈降低趋势(P<0.05),1、2两个区域tcPaO2值差异无统计学意义(P>0.05).结论 tcPaO2可以客观、连续、定量地反映皮瓣的血液供应状态,有助于早期发现皮瓣的血运障碍,在临床上有很大的应用前景.
作者：尹国瑞；何波；丰荣杰；李淑媛；毕本军；许庆家；朱小雷 刊期： 2009年第04期
目的 探讨大鼠肺移植受体闭塞性细支气管炎(OB)与细胞凋亡的关系.方法 采用大鼠气管异位移植模型模拟肺移植术后OB.随机分为对照组、移植组和免疫抑制剂治疗组,分别于术后7、14和28 d取出移植物.原位末端标记法(TUNEL)检测移植气管细胞凋亡情况;免疫组织化学EnVison法检测移植气管Caspase-3和Bax基因蛋白的表达.结果 ①动物模型气管HE染色检测到术后排斥反应,与OB组织学改变符合;②TUNEL检测到大鼠OB模型存在细胞凋亡,免疫抑制剂治疗组较移植组细胞凋亡数少,移植中后期两组差异有统计学意义(P<0.05);③免疫组织化学检测到大鼠OB模型Caspase-3、Bax基因蛋白表达在移植组和免疫抑制剂治疗组增高,移植中后期两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 ①大鼠肺移植受体OB与细胞凋亡相关;②抑制细胞凋亡可治疗肺移植受体OB.
作者：魏煜程；王滋宗；杨荣华；沈毅 刊期： 2009年第04期
目的 研究乙醇对体外培养的人肝L02细胞糖原含量及糖原合成酶激酶(CSK-3β)、磷酸化的AMP激活的蛋白激酶(P-AMPK)的影响.方法 培养L02细胞,按加入的乙醇浓度分为0、50和100 mmol/L三组,培养24 h,用蒽酮-硫酸比色法测定细胞糖原含量,蛋白免疫印记法(Western Blot)检测GSK-3β及P-AMPK的表达水平;并加入AMPK的激动剂(AICAR)或AMPK的阻断剂(Compound C),检测GSK-3β含量的变化.结果 与0mmol/L组比较,50和100mmol/L组糖原含量下降、GSK-3β及P-AMPK表达增强(P均<0.05),50 mmol/L组与100mmol/L组比较,糖原含量及蛋白表达均未见明显统计学差异(P>0.05);AICAR和Compound C对GSK-3β的表达无明显影响(P>0.05).结论 乙醇能减少L02细胞糖原含量,可能与GSK-3β表达增加有关.
作者：于慧；陈少华；赵家军；高聆 刊期： 2009年第04期
目的 探讨子痫前期惠者胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Endoglin和血清中可溶性Endoghn(sEng)的表达.方法 用免疫组织化学SP法检测20例正常妊娠妇女(对照组)和加例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期组10例,重度子痫前期组30例)胎盘组织中HIF-1α和Endoglin的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清sEng的水平,并进行统计分析.结果 ①HIF-1α、Endoglin及gEng水平在子痫前期组中的表达较对照组明显升高(P<0.01),三者在重度子痫前期组中的表达较轻度子痫前期组明显升高(P<0.01);②子痫前期组HIF-1α的表达与Endoglin及血清中sEng的表达均呈正相关关系(r分别为0.686、0.866).结论 子痫前期患者胎盘HIF-1α的表达增高可引起胎盘中Endogtin和血清中sSng增多,从而共同参与子痫前期的病理过程.
作者：尚慧；陈丽君；邢静 刊期： 2009年第04期
目的 测定慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)小鼠外周血中IL-11及其受体(IL-11R)的水平,探讨CITP的发病机制,为ITP的治疗提供新的理论依据.方法 BALA/C小鼠60只,随机分为对照组(20只)和CITP组(40只),通过腹腔注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)的方法建立CITP模型.于造模第8 d分别采用ELISA、流式细胞术测定两组小鼠外周血中IL-11及IL-11R的水平.结果 CITP小鼠外周血中IL-11及IL-11R平均水平均较对照组升高(P<0.05);其中有31只小鼠同时存在IL-11及IL-11R水平的升高,余9只小鼠仅存在IL-11水平的升高,而IL-11R水平降低.结论 IL-11及IL-11R在CITP的发病机制中起一定作用,但它们发挥作用的原理及过程尚需进一步探讨.
作者：牛婷婷；陈力军；黄丽华；杜雪；张孝卫 刊期： 2009年第04期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
