王青威；岳庆祝；闫召华；李永强；李敬；滕淑贞
目的 探讨风疹病毒E2包膜糖蛋白中部分亮氨酸的突变对特异性细胞融合的影响.方法 于E2蛋白中选取9个亮氨酸位点,采用基因定点突变的方法分别将其突变成丙氨酸,采用流式细胞术检测各突变株蛋白在细胞表面的表达效率,Giemsa染色法与指示基因法检测特异性细胞融合,血吸附实验检测其吸附活性.结果 与野毒株蛋白相比,除L144A与L225A之外,其它突变株蛋白在细胞表面的表达效率均有不同程度的降低.排除各突变株蛋白在细胞表面表达效率变化的影响后,其引起的细胞融合效率均有不同程度的降低,其中位于E2蛋白氨基酸序列中间靠近氨基端的亮氨酸(L58、L105、L128与L144)突变时,其细胞融合效率降低更为明显,相应的血吸附效率也有所降低.结论 E2蛋白中,其氨基酸序列中间靠近氨基端的蛋白区域(L58～L144)对引起的特异性细胞融合具有重要的作用.
作者：吴冰；刘晓丽；王志玉 刊期： 2009年第04期
目的 监测远端坏死的穿支皮瓣经皮氧分压(tcPaO2)的变化规律,为临床工作提供实验依据.方法 应用体质量400～450g雄性Wistar大鼠100只,在其背部作以髂腰皮动脉为蒂的穿支皮瓣,面积约12 cm×3 cm,以穿支穿出点为近端到皮瓣远端均分为4个区域依次为1、2、3、4区,分别在术前及术后0、1、2.4、7d监测各区域的tcPaO2值.结果 术后各区域0 dtcPaO2值较术前明显降低(P<0.01).术后1、2、4、7d近端3个区域的tePaO2值逐渐升高(P<0.01),术后7 d达到高,其中近端2个区域基本达到正常水平;远端4区的tcPaO2值逐渐降低(P<0.01),术后4d全部坏死.术后1、2d由近端到远端tePaO2值先升高后降低,2区明显高于1区与3,4区(P<0.05);术后4、7 d由近端到远端tcPaO2值呈降低趋势(P<0.05),1、2两个区域tcPaO2值差异无统计学意义(P>0.05).结论 tcPaO2可以客观、连续、定量地反映皮瓣的血液供应状态,有助于早期发现皮瓣的血运障碍,在临床上有很大的应用前景.
作者：尹国瑞；何波；丰荣杰；李淑媛；毕本军；许庆家；朱小雷 刊期： 2009年第04期
目的 通过克隆形成及致瘤能力研究肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的比例.方法 采用有限稀释法,检测细胞单克隆形成的数量及大小;收集来自于1个细胞形成的克隆细胞,种于BALB/C裸鼠皮下,观察其致瘤能力;采用CD133磁珠分选A549细胞,测定CD133+、CD133-细胞的克隆形成能力,测定Hoechst33342染色对非SP细胞的增殖能力和单克隆形成能力的影响.结果 45%以上的A549细胞能够形成大于100个细胞的大克隆,其传代后又能形成新的克隆,来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上,10 d左右能形成肉眼可见的肿瘤;CD133+、CD133-细胞克隆形成能力相同;Hcechst33342染色能够明显干预细胞的克隆形成及增殖能力.结论 45%以上的A549细胞是肿瘤始发细胞.
作者：孟祥姣；王亚伟；王秀问 刊期： 2009年第04期
目的 比较国产实时荧光定量PER(FQ-PCR)试剂与罗氏COBAS Amplicor方法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的结果.方法 据COBAS Amplicor的FQ-PCR试剂(A)的检测结果,抽取151份慢性乙型肝炎(慢乙肝)血清标本,采用两种国产实时FQQ-PCR试剂B、C对血清标本进行HBV-DNA平行检测,以分析国产试剂的敏感度、特异度及与试剂A的相关性.结果 试剂A、B、C测得的HBV-DNA结果分别为(5.87±1.64)、(5.11±1.34)、(4.93±1.35)log10 copies/mL,试刺B、C与试剂A的相关系数分别为0.947、0.937.3种试剂检测结果总体差异有统计学意义(P<0.05),试剂B、C与试剂A检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05).低HBV载量标本,试剂B、C与试剂A相关性较低.以试剂A为准,总体灵敏度、特异度分别为试剂B 90.4%、56.3%,试剂C 77.0%、100%.结论 试剂B、C与试剂A在检测HBV-DNA方面有较好一致性,但在低HBV载量时可靠性较低.试剂B灵敏度高,试荆C特异度高.
作者：薛艳；王磊；徐皖苏 刊期： 2009年第04期
目的 构建真核表达质粒pIRES-Rb94,观察Rb94基因对鞘氨醇激酶(SphK)表达的影响.方法 根据Rb94基因序列设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的Rb94基因的真核表达质粒pIRKS-Rb94,经脂质体转染A549细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株.采用Real-time RT-PCR和Western boltting法检测Rb94基因并观察其对人肺腺癌A549细胞株SphK表达的影响.结杲成功构建重组表达质粒pIRE-Rb94,转染A549细胞后获得稳定转染细胞株pIRES-Rb94-A549,该细胞株中Rb94基因高效表达;SphK1表达下调而SphK2表达上调.结论 真核表达质粒pIRES-Rb94科构建成功并可有效转染A549细胞,Rb94基因抑制SphK1的表达,增强SphK2的表达.
作者：刘芳；马道新；谭炳煦；高晖；王建波；张萍；郭颖；程玉峰 刊期： 2009年第04期
目的 探讨绒毛膜促性腺激素(hcG)对滋养层细胞系HTR8-SVneo侵袭活性的影响及其可能的调控机制.方法 将培养的HTR8-SVneo细胞根据处理因素分为对照组、低浓度hCG(10 IU/mL)刺激组、高浓度hCG(100 IU/mL)刺激组,再将HTR8-SVneo细胞分为对照组、hCG(100 IU/mL)刺激组、DPCPX(A1R特异性阻断剂)+hcG(100IU/mL)联合刺激组.采用RT-PCR检测各组HTR8-SVneo细胞基质金属蛋白酶-2(MRS-2)的表达变化,明胶酶谱检测各组HTR8-SVneo细胞MMP-2蛋白水平的分泌变化.结果 高浓度hCG(100 IU/mL)较低浓度hCG(10 IU/mL)刺激后的HTR8-SVneo细胞MMP-2的表达与分泌均上升(P<均0.05);腺苷受体AlR的表达同时升高(P<0.05).阻断A1R的作用通路后,MMP-2的表达与分泌均下降(P均<0.05).结论 随着hCG浓度的升高,HTR8-SVneo细胞的侵袭性逐步增强,其调控机制为通过促进A1R的表达而使MMP-2的分泌升高.
作者：李泽武；杨美香；孙锦堂；解奇；邓碧萍；刘佳；宋丙凤；毛海婷；曲迅 刊期： 2009年第04期
目的 研究EGFR、NM23和Bcl-2基因在下咽鳞状细胞癌组织中的表达规律及与下咽癌临床病理因素的关系,评价其在临床应用的价值.方珐下咽癌29例手术后石蜡包埋组织,制作切片,用免疫组化SP法检测EGFR、NM23和Bcl-2基因的表达,分析它们与下咽癌临床病理因素之间的相关关系.结果 EGFR、NM23和Bcl-2的阳性表达率,分别为62%(18/29)、79%(23/29)和86%(25/29).EGFR在低分化癌组的阳性表达率高于高中分化组(P=0.021),在淋巴结转移组的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P=0.018).NM23和Bcl-2与临床病理因素无关.结论 EGFR在下咽癌的高表达与分化及淋巴结转移密切相关,可以作为辅助判断下咽癌临床特性的生物学指标.NM23和Bcl-2表达的规律,有待进一步研究.
作者：杨秋安；杨金霞；付卫江；张廷国；王妍；刘文君；章晓梅；赵维萍 刊期： 2009年第04期
目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对快速老化模型小鼠PIO(SAMP10)炎症反应的抑制作用.方法 随机将48只SAMP10分为对照组、rhG-CSF治疗组,每组24只.治疗组皮下注射rhG-CSF100μg/(kg·d),对照组给予等体积生理盐水,连续7 d.分别于给药结束后第7、14、28、56天取脑组织进行免疫荧光染色,检测TNF-α和iNOS的表达,用Image-proPlus图像分析软件,分析TNF-α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值.结果 治疗组小鼠脑组织额叶皮质TNF-α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值明显减少(P<0.05).结论 rhG-CSF能明显抑制SAMP10脑组织炎症反应.
作者：宋艳；毕建忠；王萍；赵翠萍；谢兆宏；王允 刊期： 2009年第04期
目的 探讨术后同步放化疗对局部晚期头颈部鳞癌的疗效.方珐将术后局部晚期头颈部鳞癌患者146例随机分为观察(组(73例)和对照组(73例),均给予放疗,常规分割,总剂量50 Gy.观察组在放疗同时给予DDP 15mg/(m2·周)化疗.结果 观察组和对照组2年的局部控制率分别为79%和64%(P=0.042),3年无瘤生存率分别为49%和33%(P=0.043),3年总生存率分别为61%和49%(P=0.134),3年局部复发率分别为21%和35%(P=0.042),3年远处转移率分别为23%和27%(P=0.568).Ⅲ、Ⅳ级骨髓抑制发生率分别为38%和15%(P<0.001):Ⅲ、Ⅳ级放射性黏膜损伤发生率分别为55%和29%(P<0.001).结论 术后同步放化疗疗效优于术后单纯放疗,但未改善总生存率及远处转移率.
作者：张昊；韩俊庆；杨哲；穆学茹；赵红莉；王鹏 刊期： 2009年第04期
目的 观察大黄素对体外培养的人眼角膜基质细胞分泌白细胞介素6(IL-6)的干预作用.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度大黄素对人眼角膜基质细胞活性的影响.绿脓杆茵脂多糖(LPS)刺激角膜基质细胞(LPS组),并用大黄素进行干预(大黄素预处理组).分别于LPS刺激前(Oh),刺激后1、2、4、8h收集各组细胞及细胞上清液.Western blot检测不同时点角膜基质细胞kB抑制因子-α(IkB-α)蛋白的表达及大黄素的作用,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同时点角膜基质细胞IL-6蛋白的分泌及大黄素的作用.结果 不同浓度大黄素对角膜基质细胞的活性没有影响.与0 h相比,LPS刺激角膜基质细胞1 h时,胞浆IkB-α蛋白表达出现下降,其电泳条带随着刺激时间的延长而逐渐变暗,4 h时暗.LPS刺激后各时点IkB-α蛋白表达较LPS刺激前均明显下降(P<0.01).LPS刺激可引起人眼角膜基质细胞IL-6蛋白分泌增多,刺激后8h达峰值,LPS刺激细胞后各时点细胞分泌IL-6均较刺激前明显增加(P<0.01).大黄素预处理后,与LPS组相比较,角膜基质细胞表达IrB-α蛋白下降、细胞分泌IL-6减少(P<0.01).结论 绿脓杆菌LPS可引起人眼角膜基质细胞IkB-α降解,引起细胞因子表达,在角膜炎的过程中可能起一定的作用.大黄素能有效抑制吣诱导的人角膜基质细胞IkB-a降解,从而减少相应细胞因子的分泌.
作者：陈国玲；陈双；刘艳丽；魏璐婉；刘执玉 刊期： 2009年第04期
目的 探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)和Ki67蛋白在不同期蕈样肉芽肿(MF)皮损中的表达.方珐选择27例MF病变皮肤及5例正常皮肤组织蜡块,分为:红斑/斑块期MF(n=21)、肿瘤期MF(n=6)和正常对照组(n=5),应用免疫组织化学Envison两步法分别检测3组标本表皮及真皮中PDCD4及Ki67的表达.结果 ①红斑/斑块期MF皮损表皮PDCD4+细胞与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),真皮PDCD4+细胞明显少于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损表皮及真皮PDCD4+细胞均少于正常对照组和红斑/斑块期MF(P<0.05);②两组MF表皮Ki67'细胞的数量与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),红斑/斑块期MF及肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞均多于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞高于红斑/斑块期MF皮损(P<0.05);③各期MF的表皮及真皮中PDCD4和Ki67的表达无相关性(P>0.05).结论 PDCD4的表达从MF的红斑/斑块期到肿瘤期逐渐减低,真皮中Ki67的表达逐渐增强,MF的发生与发展可能与PDCD4表达降低或缺失有关.
作者：于淑萍；马春虎；王玉坤 刊期： 2009年第04期
目的 研究单腔两用气管导管(新型导管)在开胸术中通气效果及安全性.方法 选择开胸食管癌切除术病例90例,随机分为A、B两组,使用单腔两用气管导管和双腔支气管导管行单肺通气的效果观察,着重比较气道压及肺内分流率.结果 双肺通气时两组气道压及分流率差异无统计学意义(P>0.05),单肺通气时B组气道压及分流率均明显高于A组(P<0.5).结论 两种气管导管均能达到满意的单肺通气效果,但因单腔两用气管导管通气面积大,气道阻力小,分流率低,故安全性较高.
作者：王青威；岳庆祝；闫召华；李永强；李敬；滕淑贞 刊期： 2009年第04期
目的 探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制.方法 从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度.用EZ-SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real-time PCR测定T淋巴细胞IL-10 mRNA、IFN-γ mRNA的表达水平.结果 MScs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著(P<0.01).MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独KSCs组抑制作用更加明显(P<0.01).MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN-γ mRNA表达和协同抑制IL-10 mRNA表达的作用.单独MSCs或MSCS联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响.结论 MSCS联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN-γ mRNA、IL-10 mRNA表达有关.
作者：殷玉俊；李晶；汤郁；尤海燕；朱伟；许文荣；焦志军 刊期： 2009年第04期
目的 探讨二甲双胍对初发2型糖尿病(T2DM)及糖耐量异常(IGT)者的疗效.方法 初发T2DM、IGT患者各30例,健康志愿者30例,分别设为T2DM组、IGT组及正常对照组,比较各组血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)、血脂、血压、体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、尿酸(UA)、血浆脂联素及内脂素的差异.T2DM组及IGT组患者在合理膳食和适当运动的同时加服二甲双胍1 500mg/d,疗程为1年,检测治疗前后各项指标的变化.用酶联免疫吸附法检测血浆脂联素、内脂素水平;血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和UA用全自动生化仪测定;空腹血糖(FPG)和糖负荷后2h血糖(2hPG)采用葡萄糖氧化酶法,HbAlc测定采用高压液相法.结果 ①与对照组相比,IGT组及T2DM组BMI、TC、FPG、2hPG和HbAlc显著增高(P<0.01.P<0.05),脂联素和内脂素水平明显降低(P<0.05,P<0.01);②二甲双胍治疗后,T2DM组BMI、WHR、TC、FPG、2hPG和HbAlc较治疗前明显降低(P<0.05或P<0.01),IGT组BMI、WHR、LDL-c、TC、FPG和2hPG显著降低(P<0.05或P<0.01),但两组脂联素均明显高于治疗前(P<0.01,P<0.05).结论 初发T2DM及IGT患者在生活方式改善的同时服用二甲双胍干预治疗疗效明确.
作者：陈丹玲；米念荣；王淑芳 刊期： 2009年第04期
目的 探讨膝关节周围骨肉瘤保肢术中MRI的应用及其临床意义.方法 43例骨肉瘤患者,均行X线及MRI成像检查,对肿瘤进行外科分期,评价肿瘤在骨髓及周围软组织中的浸润范围,制定手术方案并定制假体,化疗结束后行瘤段切除定制人工假体置换术.术后对标本进行病理组织学检查,与MR成像进行对比分析.随访评估患肢的功能,并定期化疗.结果 43例患者,Ⅱa期10例,Ⅱ b期33例,均按术前制定方案顺利完成手术,术后平均功能恢复率为76.7%.骨肉瘤MRI上表现缺乏特异性,但在骨髓浸润的显示,肿瘤与肌肉、血管、神经、相邻关节的关系,跳跃病灶的显示及骨肉瘤内出血和坏死的显示,MRI具有无可比拟的优势.结论 在骨肉瘤保肢术中MPI的应用具有重要意义,它可以为保肢手术提供丰富的信息,这对合理制定手术方案及保证手术效果有极大的临床价值.
作者：杨强；李建民；杨志平；李振峰；迟增德 刊期： 2009年第04期
目的 探讨丹参对大鼠原位肝移植供肝缺血-再灌流损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的影响.方法 将40只SD大鼠分为对照组、丹参组及假手术组,建立原位肝移植模型,在供肝灌注冷保存时,以4℃乳酸林格氏液为基液,丹参组灌注保存液中加丹参注射液(60mL/L),对照组不加丹参.保存5 h后置入受体.移植后6h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT水平;测定肝组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的含量,并对比观察病理形态学的改变.结果 对照组、丹参组较假手术组肝移植术后AST、ALT明显升高,肝组织中MDA含量、TNF-α和IL-1明显升高,但丹参组上述指标的异常变化均明显减轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).丹参组较对照组肝组织的再灌注损害程度明显减轻.结论 丹参可以降低大鼠移植肝脏再灌注损伤中TNF-α及IL-1水平,对移植肝脏缺血-再灌注损伤具有保护作用.
作者：王宇；周杰；蒋晓青 刊期： 2009年第04期
目的 探讨自制质控血清在肿瘤标志物及激素电化学发光分析室内质量控制中的应用价值.方法 选择日常工作中甲胎蛋白、癌胚抗原等所需检测项目的 高浓度标本,加至正常浓度的血清中调节各检测项目至所需浓度配成自制质控血清.自制质控血清灭活,离心、分装后置于-80℃冰箱保存,每天取出1管于37℃水浴溶化后, 随同当日标本检测.结果 在罗氏E170仪器上检测,自制质控血清稳定,控制效果良好,重复精度好.结论 自制质控血清可以满足室内质控要求,且来源方便,成本低.
作者：高扬；单宁宁；李心河；刘延红；夏洪印；王慧敏 刊期： 2009年第04期
目的 探测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对背根神经节(DRG)神经元谷氨酸(Glu)损伤的保护作用.方法 Wistar胎鼠DRG神经元分散培养48 h后,用Glu(200 μmol/L)造成神经元损伤,并同时给予IGF-1(10 mnol/L),观察添加IGF-1和未添加IGF-1孵育的Glu损伤的神经元的活细胞生长状况,并用流式细胞仪检测神经元的凋亡率,用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)检测细胞内钙离子荧光强度.结果 用IGF-1孵育的神经元生长状况良好,凋亡率、细胞内钙离子荧光强度均低于无IGF-1孵育的标本.结论 IGF-1可通过减低钙离子内流,抑制细胞凋亡,从而对Glu损伤的DRG神经元产生保护作用.
作者：张凤军；王丽红；刘真；邢子英；王怀经；李振中 刊期： 2009年第04期
目的 建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案,比较当前国内外常用的无血清培养基(Neurobasal+B27,NCM)与传统含血清培养基(DMEN/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM)对体外培养脊髓神经元生长状态的影响.方法 取E14-15 d Wistar大鼠的胚胎脊髓组织行胰酶消化获取脊髓神经元的单细胞悬液,分别用NCM与SCM进行培养,差速贴壁法及Ara-C干预纯化培养的神经元.于接种后第1、2、3、4、5、6、7 d倒置相差显微镜下观察细胞生长状态的变化,并用免疫荧光细胞化学法比较两种培养基培养下获取的神经元纯度.结果 采用NCM培养的脊髓神经元生长良好,对环境变化如换液及加入Ara-C更为耐受;NCM培养的神经元的纯度为(87.70±8.70)%,SCM培养的神经元纯度为(78.61±7.00)%,前者纯度更高(P=0.019).结论 NCM较之SCM更加适合脊髓神经元的体外培养.
作者：袁玉静；傅志俭；孙涛 刊期： 2009年第04期
目的 了解国内在育龄妇女人群中实施神经管缺陷(NTDs)综合干预措施的预防效果.方珐全面搜集国内发表的关于在育龄妇女人群中实施NTDs综合干预措施文献,共有12篇文献符合纳入标准(累计381 561人接受综合干预措施).将纳入文献按南北地域归类,分别汇总文献的总体效应值.采用Woolf法对文献研究结果进行齐性检验,根据结果选取汇总纳入文献研究结果总体效应值的分析方法.研究结果趋于一致时,采用Peto法;研究结果问差异较大时,采用D-L法.结果 ①12篇文献的研究结果差异较大(Q=20.443 6,P<0.05),综合干预措施效应强度RR为0.5565(95%CI:0.5446～0.568 7),保护率(PR)为44.35%;②南方地域的2篇文献研究结果趋于一致(Q=0.0684,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.6735(95%CI:0.5767～0.7865),PR为32.65%.北方地域的10篇文献研究结果趋于一致(Q=16.553 8,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.5131(95%(CI:0.4283～0.6146),PR为48.69%;结论目前国内在育龄妇女人群中综合干预措施可降低NTDs的发病风险,但预防率仍然较低.北方地域综合干预措施预防率高于南方地域.在育龄妇女中开展的NTDs综合干预措施尚需进一步完善.
作者：郝连正；李辉；王志萍；赵仲堂 刊期： 2009年第04期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
