宋艳;毕建忠;王萍;赵翠萍;谢兆宏;王允
目的 探讨大鼠肺移植受体闭塞性细支气管炎(OB)与细胞凋亡的关系.方法 采用大鼠气管异位移植模型模拟肺移植术后OB.随机分为对照组、移植组和免疫抑制剂治疗组,分别于术后7、14和28 d取出移植物.原位末端标记法(TUNEL)检测移植气管细胞凋亡情况;免疫组织化学EnVison法检测移植气管Caspase-3和Bax基因蛋白的表达.结果 ①动物模型气管HE染色检测到术后排斥反应,与OB组织学改变符合;②TUNEL检测到大鼠OB模型存在细胞凋亡,免疫抑制剂治疗组较移植组细胞凋亡数少,移植中后期两组差异有统计学意义(P<0.05);③免疫组织化学检测到大鼠OB模型Caspase-3、Bax基因蛋白表达在移植组和免疫抑制剂治疗组增高,移植中后期两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 ①大鼠肺移植受体OB与细胞凋亡相关;②抑制细胞凋亡可治疗肺移植受体OB.
作者:魏煜程;王滋宗;杨荣华;沈毅 刊期: 2009年第04期
目的 研究单腔两用气管导管(新型导管)在开胸术中通气效果及安全性.方法 选择开胸食管癌切除术病例90例,随机分为A、B两组,使用单腔两用气管导管和双腔支气管导管行单肺通气的效果观察,着重比较气道压及肺内分流率.结果 双肺通气时两组气道压及分流率差异无统计学意义(P>0.05),单肺通气时B组气道压及分流率均明显高于A组(P<0.5).结论 两种气管导管均能达到满意的单肺通气效果,但因单腔两用气管导管通气面积大,气道阻力小,分流率低,故安全性较高.
作者:王青威;岳庆祝;闫召华;李永强;李敬;滕淑贞 刊期: 2009年第04期
目的 通过克隆形成及致瘤能力研究肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的比例.方法 采用有限稀释法,检测细胞单克隆形成的数量及大小;收集来自于1个细胞形成的克隆细胞,种于BALB/C裸鼠皮下,观察其致瘤能力;采用CD133磁珠分选A549细胞,测定CD133+、CD133-细胞的克隆形成能力,测定Hoechst33342染色对非SP细胞的增殖能力和单克隆形成能力的影响.结果 45%以上的A549细胞能够形成大于100个细胞的大克隆,其传代后又能形成新的克隆,来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上,10 d左右能形成肉眼可见的肿瘤;CD133+、CD133-细胞克隆形成能力相同;Hcechst33342染色能够明显干预细胞的克隆形成及增殖能力.结论 45%以上的A549细胞是肿瘤始发细胞.
作者:孟祥姣;王亚伟;王秀问 刊期: 2009年第04期
目的 调查成年人被动吸烟情况,了解人们对被动吸烟的知识、态度和行为,为制定控烟政策提供依据.方法 采用拦截调查的方法,在山东省济南市、聊城市、平阴县三地共调查543人,其中不吸烟者397人.采用X2检验、Logistic回归分析方法统计分析有关因素与被动吸烟的关系.结果 不吸烟者中42.6%的人被动吸烟,其中52.4%的男性被动吸烟,47.8%的女性被动吸烟,男性被动吸烟率高于女性.59.7%的不吸烟者主动反对吸烟者在自己面前吸烟.男性、从事室内工作、不主动拒绝被动吸烟和吸烟者吸烟前不征求他人意见是不吸烟者被动吸烟的危险因素.结论 人群中被动吸烟率仍然较高,人们对被动吸烟危害的认识尚不足,拒绝被动吸烟的意识淡漠.对不同公共场所全部禁烟的态度不尽一致,多数人支持在学校、医院、公交工具中全部禁烟.需要进一步加强对公众的控烟宣传,加大公共场所禁烟的力度,减少全人群的烟草暴露特别是加强对不吸烟者的保护力度.
作者:李斐斐;孙桐;刘言训;侯家祥 刊期: 2009年第04期
目的 监测远端坏死的穿支皮瓣经皮氧分压(tcPaO2)的变化规律,为临床工作提供实验依据.方法 应用体质量400~450g雄性Wistar大鼠100只,在其背部作以髂腰皮动脉为蒂的穿支皮瓣,面积约12 cm×3 cm,以穿支穿出点为近端到皮瓣远端均分为4个区域依次为1、2、3、4区,分别在术前及术后0、1、2.4、7d监测各区域的tcPaO2值.结果 术后各区域0 dtcPaO2值较术前明显降低(P<0.01).术后1、2、4、7d近端3个区域的tePaO2值逐渐升高(P<0.01),术后7 d达到高,其中近端2个区域基本达到正常水平;远端4区的tcPaO2值逐渐降低(P<0.01),术后4d全部坏死.术后1、2d由近端到远端tePaO2值先升高后降低,2区明显高于1区与3,4区(P<0.05);术后4、7 d由近端到远端tcPaO2值呈降低趋势(P<0.05),1、2两个区域tcPaO2值差异无统计学意义(P>0.05).结论 tcPaO2可以客观、连续、定量地反映皮瓣的血液供应状态,有助于早期发现皮瓣的血运障碍,在临床上有很大的应用前景.
作者:尹国瑞;何波;丰荣杰;李淑媛;毕本军;许庆家;朱小雷 刊期: 2009年第04期
目的 探讨术后同步放化疗对局部晚期头颈部鳞癌的疗效.方珐将术后局部晚期头颈部鳞癌患者146例随机分为观察(组(73例)和对照组(73例),均给予放疗,常规分割,总剂量50 Gy.观察组在放疗同时给予DDP 15mg/(m2·周)化疗.结果 观察组和对照组2年的局部控制率分别为79%和64%(P=0.042),3年无瘤生存率分别为49%和33%(P=0.043),3年总生存率分别为61%和49%(P=0.134),3年局部复发率分别为21%和35%(P=0.042),3年远处转移率分别为23%和27%(P=0.568).Ⅲ、Ⅳ级骨髓抑制发生率分别为38%和15%(P<0.001):Ⅲ、Ⅳ级放射性黏膜损伤发生率分别为55%和29%(P<0.001).结论 术后同步放化疗疗效优于术后单纯放疗,但未改善总生存率及远处转移率.
作者:张昊;韩俊庆;杨哲;穆学茹;赵红莉;王鹏 刊期: 2009年第04期
目的 探讨膝关节周围骨肉瘤保肢术中MRI的应用及其临床意义.方法 43例骨肉瘤患者,均行X线及MRI成像检查,对肿瘤进行外科分期,评价肿瘤在骨髓及周围软组织中的浸润范围,制定手术方案并定制假体,化疗结束后行瘤段切除定制人工假体置换术.术后对标本进行病理组织学检查,与MR成像进行对比分析.随访评估患肢的功能,并定期化疗.结果 43例患者,Ⅱa期10例,Ⅱ b期33例,均按术前制定方案顺利完成手术,术后平均功能恢复率为76.7%.骨肉瘤MRI上表现缺乏特异性,但在骨髓浸润的显示,肿瘤与肌肉、血管、神经、相邻关节的关系,跳跃病灶的显示及骨肉瘤内出血和坏死的显示,MRI具有无可比拟的优势.结论 在骨肉瘤保肢术中MPI的应用具有重要意义,它可以为保肢手术提供丰富的信息,这对合理制定手术方案及保证手术效果有极大的临床价值.
作者:杨强;李建民;杨志平;李振峰;迟增德 刊期: 2009年第04期
目的 应用脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,检测细胞因子肿瘤坏死因子-a(TMF-a)、白细胞介素-6(IL-6)和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA/uPAR)的mRNA和蛋白含量的变化及辛伐他汀对其表达的影响.方法 实验分为12h组和24h组,各组又分为空白对照组、脂多糖(100 ng/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)和脂多糖(100 ns/mL)共作用组,用实时荧光定量PCR和ELISA方法测定12 h组、24 h组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA和蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,脂多糖组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清波中IL-6蛋白的表达均明显增加(P均<0.05);与脂多糖组相比,辛伐他汀和脂多糖共作用组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中IL-6蛋白的表达均明显降低(P均<0.05).结论 辛伐他汀可抑制HUVECs分泌的细胞因子TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的表达.
作者:窦姗姗;邓景惕;季冉;扈燕来;张伟红;张立平 刊期: 2009年第04期
目的 观察脑神康胶囊对缺氧复氧损伤大鼠海马神经元凋亡及其Bel-2、Bax mRNA表达的影响.方法 随机将原代培养大鼠海马神经元分为对照组、损伤组、中药低、中、高浓度组.对照组正常培养,损伤组及中药组建立缺氧复氧损伤模型,中药各浓度组于复氧时换以不同浓度含药血清的培养液,采用MTT法测各组细胞存活率,采用流式细胞仪检测凋亡率,采用RT-PcR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达并计算两者比值.结果 损伤组细胞存活率及Bcl-2 mRNA表达明显下降(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达显著升高(P均<0.01),Bel-2/Bax降低(P<0.01);中药各浓度组较损伤组细胞存活率及Bel-2 mRNA表达均升高(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),Bcl-2/Bax增加(P<0.01),且呈明显的剂量依赖性.结论 脑神康胶囊对海马神经元缺氧复氧损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其调节凋亡相关蛋白、减少凋亡密切相关.
作者:李伟;刘德山;常萍;林炜炜 刊期: 2009年第04期
目的 探讨子痫前期惠者胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Endoglin和血清中可溶性Endoghn(sEng)的表达.方法 用免疫组织化学SP法检测20例正常妊娠妇女(对照组)和加例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期组10例,重度子痫前期组30例)胎盘组织中HIF-1α和Endoglin的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清sEng的水平,并进行统计分析.结果 ①HIF-1α、Endoglin及gEng水平在子痫前期组中的表达较对照组明显升高(P<0.01),三者在重度子痫前期组中的表达较轻度子痫前期组明显升高(P<0.01);②子痫前期组HIF-1α的表达与Endoglin及血清中sEng的表达均呈正相关关系(r分别为0.686、0.866).结论 子痫前期患者胎盘HIF-1α的表达增高可引起胎盘中Endogtin和血清中sSng增多,从而共同参与子痫前期的病理过程.
作者:尚慧;陈丽君;邢静 刊期: 2009年第04期
目的 构建真核表达质粒pIRES-Rb94,观察Rb94基因对鞘氨醇激酶(SphK)表达的影响.方法 根据Rb94基因序列设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的Rb94基因的真核表达质粒pIRKS-Rb94,经脂质体转染A549细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株.采用Real-time RT-PCR和Western boltting法检测Rb94基因并观察其对人肺腺癌A549细胞株SphK表达的影响.结杲成功构建重组表达质粒pIRE-Rb94,转染A549细胞后获得稳定转染细胞株pIRES-Rb94-A549,该细胞株中Rb94基因高效表达;SphK1表达下调而SphK2表达上调.结论 真核表达质粒pIRES-Rb94科构建成功并可有效转染A549细胞,Rb94基因抑制SphK1的表达,增强SphK2的表达.
作者:刘芳;马道新;谭炳煦;高晖;王建波;张萍;郭颖;程玉峰 刊期: 2009年第04期
目的 比较国产实时荧光定量PER(FQ-PCR)试剂与罗氏COBAS Amplicor方法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的结果.方法 据COBAS Amplicor的FQ-PCR试剂(A)的检测结果,抽取151份慢性乙型肝炎(慢乙肝)血清标本,采用两种国产实时FQQ-PCR试剂B、C对血清标本进行HBV-DNA平行检测,以分析国产试剂的敏感度、特异度及与试剂A的相关性.结果 试剂A、B、C测得的HBV-DNA结果分别为(5.87±1.64)、(5.11±1.34)、(4.93±1.35)log10 copies/mL,试刺B、C与试剂A的相关系数分别为0.947、0.937.3种试剂检测结果总体差异有统计学意义(P<0.05),试剂B、C与试剂A检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05).低HBV载量标本,试剂B、C与试剂A相关性较低.以试剂A为准,总体灵敏度、特异度分别为试剂B 90.4%、56.3%,试剂C 77.0%、100%.结论 试剂B、C与试剂A在检测HBV-DNA方面有较好一致性,但在低HBV载量时可靠性较低.试剂B灵敏度高,试荆C特异度高.
作者:薛艳;王磊;徐皖苏 刊期: 2009年第04期
目的 观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏结构和功能的影响.方法 用链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病组和姜黄素治疗组,另设一正常对照组.治疗组给予姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃,为期8周.然后进行肾脏形态学观察和血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAER)等的检测.结果 糖尿病组大鼠Ccr、UAER、尿白蛋白/肌酐、肾小球平均截面积(MGA)、肾小球平均体积(MGV)均显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05).光镜和电镜下观察显示,糖尿病组大鼠较正常对照组大鼠肾小球明显增大,细胞数目增多,基底膜节段性增厚,部分足细胞足突融合.姜黄素治疗组上述异常均明显减轻.三组大鼠间血BUN和Scr两两比较无明显差异(P>0.05).结论 姜黄素可明显改善糖尿病大鼠肾脏病理改变,减轻肾脏肥大和高滤过状态,降低尿白蛋白,时糖尿病大鼠有肾脏保护作用.
作者:于冬青;刘金波;邓华聪 刊期: 2009年第04期
目的 探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)和Ki67蛋白在不同期蕈样肉芽肿(MF)皮损中的表达.方珐选择27例MF病变皮肤及5例正常皮肤组织蜡块,分为:红斑/斑块期MF(n=21)、肿瘤期MF(n=6)和正常对照组(n=5),应用免疫组织化学Envison两步法分别检测3组标本表皮及真皮中PDCD4及Ki67的表达.结果 ①红斑/斑块期MF皮损表皮PDCD4+细胞与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),真皮PDCD4+细胞明显少于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损表皮及真皮PDCD4+细胞均少于正常对照组和红斑/斑块期MF(P<0.05);②两组MF表皮Ki67'细胞的数量与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),红斑/斑块期MF及肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞均多于正常对照组(P<0.05);肿瘤期MF皮损真皮Ki67+细胞高于红斑/斑块期MF皮损(P<0.05);③各期MF的表皮及真皮中PDCD4和Ki67的表达无相关性(P>0.05).结论 PDCD4的表达从MF的红斑/斑块期到肿瘤期逐渐减低,真皮中Ki67的表达逐渐增强,MF的发生与发展可能与PDCD4表达降低或缺失有关.
作者:于淑萍;马春虎;王玉坤 刊期: 2009年第04期
目的 探测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对背根神经节(DRG)神经元谷氨酸(Glu)损伤的保护作用.方法 Wistar胎鼠DRG神经元分散培养48 h后,用Glu(200 μmol/L)造成神经元损伤,并同时给予IGF-1(10 mnol/L),观察添加IGF-1和未添加IGF-1孵育的Glu损伤的神经元的活细胞生长状况,并用流式细胞仪检测神经元的凋亡率,用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)检测细胞内钙离子荧光强度.结果 用IGF-1孵育的神经元生长状况良好,凋亡率、细胞内钙离子荧光强度均低于无IGF-1孵育的标本.结论 IGF-1可通过减低钙离子内流,抑制细胞凋亡,从而对Glu损伤的DRG神经元产生保护作用.
作者:张凤军;王丽红;刘真;邢子英;王怀经;李振中 刊期: 2009年第04期
目的 建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案,比较当前国内外常用的无血清培养基(Neurobasal+B27,NCM)与传统含血清培养基(DMEN/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM)对体外培养脊髓神经元生长状态的影响.方法 取E14-15 d Wistar大鼠的胚胎脊髓组织行胰酶消化获取脊髓神经元的单细胞悬液,分别用NCM与SCM进行培养,差速贴壁法及Ara-C干预纯化培养的神经元.于接种后第1、2、3、4、5、6、7 d倒置相差显微镜下观察细胞生长状态的变化,并用免疫荧光细胞化学法比较两种培养基培养下获取的神经元纯度.结果 采用NCM培养的脊髓神经元生长良好,对环境变化如换液及加入Ara-C更为耐受;NCM培养的神经元的纯度为(87.70±8.70)%,SCM培养的神经元纯度为(78.61±7.00)%,前者纯度更高(P=0.019).结论 NCM较之SCM更加适合脊髓神经元的体外培养.
作者:袁玉静;傅志俭;孙涛 刊期: 2009年第04期
目的 探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制.方法 从5~6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度.用EZ-SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real-time PCR测定T淋巴细胞IL-10 mRNA、IFN-γ mRNA的表达水平.结果 MScs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著(P<0.01).MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独KSCs组抑制作用更加明显(P<0.01).MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN-γ mRNA表达和协同抑制IL-10 mRNA表达的作用.单独MSCs或MSCS联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响.结论 MSCS联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN-γ mRNA、IL-10 mRNA表达有关.
作者:殷玉俊;李晶;汤郁;尤海燕;朱伟;许文荣;焦志军 刊期: 2009年第04期
目的 探讨绒毛膜促性腺激素(hcG)对滋养层细胞系HTR8-SVneo侵袭活性的影响及其可能的调控机制.方法 将培养的HTR8-SVneo细胞根据处理因素分为对照组、低浓度hCG(10 IU/mL)刺激组、高浓度hCG(100 IU/mL)刺激组,再将HTR8-SVneo细胞分为对照组、hCG(100 IU/mL)刺激组、DPCPX(A1R特异性阻断剂)+hcG(100IU/mL)联合刺激组.采用RT-PCR检测各组HTR8-SVneo细胞基质金属蛋白酶-2(MRS-2)的表达变化,明胶酶谱检测各组HTR8-SVneo细胞MMP-2蛋白水平的分泌变化.结果 高浓度hCG(100 IU/mL)较低浓度hCG(10 IU/mL)刺激后的HTR8-SVneo细胞MMP-2的表达与分泌均上升(P<均0.05);腺苷受体AlR的表达同时升高(P<0.05).阻断A1R的作用通路后,MMP-2的表达与分泌均下降(P均<0.05).结论 随着hCG浓度的升高,HTR8-SVneo细胞的侵袭性逐步增强,其调控机制为通过促进A1R的表达而使MMP-2的分泌升高.
作者:李泽武;杨美香;孙锦堂;解奇;邓碧萍;刘佳;宋丙凤;毛海婷;曲迅 刊期: 2009年第04期
目的 探讨双源CT在先天性心脏病诊断中的应用价值.方法 采用西门子Siemens Somatom Definition DSCT增强扫描检查先天性心脏病50例,其中40例采用心电门控扫描模式,10例因心率过快采用普通胸部增强扫描模式.50例均行心脏超声检查,其中27例经手术证实、9例经X线心血管造影证实.本组以手术或X线心血管造影结果为标准,比较双源CT和心脏超声的诊断准确率.结果 经手术或X线心血管造影证实的36例先天性心脏病中,含单纯房间隔缺损、单纯室间隔缺损、主动脉弓离断、单心室、完全型大动脉错位、肺动脉起源异常、冠状窦无顶综合征各1例,单纯动脉导管未闭、校正型大动脉错位、冠状动脉起源异常、肺动脉闭锁并室间隔缺损、左室双出口各2例,右室双出口4例,主动脉缩窄5例,法洛四联症10例.36例共计107处畸形,均以手术或X线心血管造影结果证实,其中心内畸形30处,双源CT和心脏超声诊断准确率分别为93.33%和96.67%(P=1.000).心外畸形77处,双源CT和心脏超声诊断准确率分别为96.10%和87.01%,双源CT诊断准确率高于心脏超声(X2=4.117,P=0.042).双源CT与心脏超声联合诊断准确率为99.21%.结论 双源CT对比增强扫描对先天性心脏痛心外畸形的诊断准确率高于心脏超声,但二者联合可提高对先天性心脏病的诊断准确率.
作者:汪洁;王青;崔凤玉 刊期: 2009年第04期
目的 观察大黄素对体外培养的人眼角膜基质细胞分泌白细胞介素6(IL-6)的干预作用.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度大黄素对人眼角膜基质细胞活性的影响.绿脓杆茵脂多糖(LPS)刺激角膜基质细胞(LPS组),并用大黄素进行干预(大黄素预处理组).分别于LPS刺激前(Oh),刺激后1、2、4、8h收集各组细胞及细胞上清液.Western blot检测不同时点角膜基质细胞kB抑制因子-α(IkB-α)蛋白的表达及大黄素的作用,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同时点角膜基质细胞IL-6蛋白的分泌及大黄素的作用.结果 不同浓度大黄素对角膜基质细胞的活性没有影响.与0 h相比,LPS刺激角膜基质细胞1 h时,胞浆IkB-α蛋白表达出现下降,其电泳条带随着刺激时间的延长而逐渐变暗,4 h时暗.LPS刺激后各时点IkB-α蛋白表达较LPS刺激前均明显下降(P<0.01).LPS刺激可引起人眼角膜基质细胞IL-6蛋白分泌增多,刺激后8h达峰值,LPS刺激细胞后各时点细胞分泌IL-6均较刺激前明显增加(P<0.01).大黄素预处理后,与LPS组相比较,角膜基质细胞表达IrB-α蛋白下降、细胞分泌IL-6减少(P<0.01).结论 绿脓杆菌LPS可引起人眼角膜基质细胞IkB-α降解,引起细胞因子表达,在角膜炎的过程中可能起一定的作用.大黄素能有效抑制吣诱导的人角膜基质细胞IkB-a降解,从而减少相应细胞因子的分泌.
作者:陈国玲;陈双;刘艳丽;魏璐婉;刘执玉 刊期: 2009年第04期