吴冰；刘晓丽；王志玉
目的 构建真核表达质粒pIRES-Rb94,观察Rb94基因对鞘氨醇激酶(SphK)表达的影响.方法 根据Rb94基因序列设计、合成引物,构建以内部核糖体进入位点(IRES)相连的Rb94基因的真核表达质粒pIRKS-Rb94,经脂质体转染A549细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株.采用Real-time RT-PCR和Western boltting法检测Rb94基因并观察其对人肺腺癌A549细胞株SphK表达的影响.结杲成功构建重组表达质粒pIRE-Rb94,转染A549细胞后获得稳定转染细胞株pIRES-Rb94-A549,该细胞株中Rb94基因高效表达;SphK1表达下调而SphK2表达上调.结论 真核表达质粒pIRES-Rb94科构建成功并可有效转染A549细胞,Rb94基因抑制SphK1的表达,增强SphK2的表达.
作者：刘芳；马道新；谭炳煦；高晖；王建波；张萍；郭颖；程玉峰 刊期： 2009年第04期
目的 探讨丹参对大鼠原位肝移植供肝缺血-再灌流损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的影响.方法 将40只SD大鼠分为对照组、丹参组及假手术组,建立原位肝移植模型,在供肝灌注冷保存时,以4℃乳酸林格氏液为基液,丹参组灌注保存液中加丹参注射液(60mL/L),对照组不加丹参.保存5 h后置入受体.移植后6h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT水平;测定肝组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素1(IL-1)的含量,并对比观察病理形态学的改变.结果 对照组、丹参组较假手术组肝移植术后AST、ALT明显升高,肝组织中MDA含量、TNF-α和IL-1明显升高,但丹参组上述指标的异常变化均明显减轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).丹参组较对照组肝组织的再灌注损害程度明显减轻.结论 丹参可以降低大鼠移植肝脏再灌注损伤中TNF-α及IL-1水平,对移植肝脏缺血-再灌注损伤具有保护作用.
作者：王宇；周杰；蒋晓青 刊期： 2009年第04期
目的 研究糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后血管他丁、基质金属蛋白酶-9在不同时间点的表达,探讨其病理生理机制.方法 随机将Goto-Kakizaki(GK)、Wistar大鼠分为脑梗死组(CI组)、糖尿病脑梗死组(DM+CI组)及假手术组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,在不同的缺血再灌注时间点(3h、24h、3d、7d),采用Western blot法检测血管他丁蛋白表达、用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性.结果 脑缺血再灌注后大鼠脑组织中血管他丁于再灌注3 h开始升高,至24h达到高峰,随后逐渐降低,在24 h时,DM+CI组较CI组增加显著(P<0.05);DM+CI组和CI组大鼠脑组织中MMP-9的活性较假手术组明显增加,DM+CI组明显高于CI组(P<0.01),且血管他丁的表达与MMP-9的活性存在直线相关关系.结论 糖尿病缺血再灌注大鼠脑组织中的血管他丁的表达增加与MMP-9的活性相关,参与糖尿病合并脑梗死的病理生理过程.
作者：毕喜壮；朱梅佳；上官士娜；贾茜 刊期： 2009年第04期
目的 观察脑神康胶囊对缺氧复氧损伤大鼠海马神经元凋亡及其Bel-2、Bax mRNA表达的影响.方法 随机将原代培养大鼠海马神经元分为对照组、损伤组、中药低、中、高浓度组.对照组正常培养,损伤组及中药组建立缺氧复氧损伤模型,中药各浓度组于复氧时换以不同浓度含药血清的培养液,采用MTT法测各组细胞存活率,采用流式细胞仪检测凋亡率,采用RT-PcR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达并计算两者比值.结果 损伤组细胞存活率及Bcl-2 mRNA表达明显下降(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达显著升高(P均<0.01),Bel-2/Bax降低(P<0.01);中药各浓度组较损伤组细胞存活率及Bel-2 mRNA表达均升高(P均<0.01),凋亡率及Bax mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),Bcl-2/Bax增加(P<0.01),且呈明显的剂量依赖性.结论 脑神康胶囊对海马神经元缺氧复氧损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其调节凋亡相关蛋白、减少凋亡密切相关.
作者：李伟；刘德山；常萍；林炜炜 刊期： 2009年第04期
目的 探讨膝关节周围骨肉瘤保肢术中MRI的应用及其临床意义.方法 43例骨肉瘤患者,均行X线及MRI成像检查,对肿瘤进行外科分期,评价肿瘤在骨髓及周围软组织中的浸润范围,制定手术方案并定制假体,化疗结束后行瘤段切除定制人工假体置换术.术后对标本进行病理组织学检查,与MR成像进行对比分析.随访评估患肢的功能,并定期化疗.结果 43例患者,Ⅱa期10例,Ⅱ b期33例,均按术前制定方案顺利完成手术,术后平均功能恢复率为76.7%.骨肉瘤MRI上表现缺乏特异性,但在骨髓浸润的显示,肿瘤与肌肉、血管、神经、相邻关节的关系,跳跃病灶的显示及骨肉瘤内出血和坏死的显示,MRI具有无可比拟的优势.结论 在骨肉瘤保肢术中MPI的应用具有重要意义,它可以为保肢手术提供丰富的信息,这对合理制定手术方案及保证手术效果有极大的临床价值.
作者：杨强；李建民；杨志平；李振峰；迟增德 刊期： 2009年第04期
目的 探讨子痫前期惠者胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Endoglin和血清中可溶性Endoghn(sEng)的表达.方法 用免疫组织化学SP法检测20例正常妊娠妇女(对照组)和加例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期组10例,重度子痫前期组30例)胎盘组织中HIF-1α和Endoglin的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清sEng的水平,并进行统计分析.结果 ①HIF-1α、Endoglin及gEng水平在子痫前期组中的表达较对照组明显升高(P<0.01),三者在重度子痫前期组中的表达较轻度子痫前期组明显升高(P<0.01);②子痫前期组HIF-1α的表达与Endoglin及血清中sEng的表达均呈正相关关系(r分别为0.686、0.866).结论 子痫前期患者胎盘HIF-1α的表达增高可引起胎盘中Endogtin和血清中sSng增多,从而共同参与子痫前期的病理过程.
作者：尚慧；陈丽君；邢静 刊期： 2009年第04期
目的 探讨自制质控血清在肿瘤标志物及激素电化学发光分析室内质量控制中的应用价值.方法 选择日常工作中甲胎蛋白、癌胚抗原等所需检测项目的 高浓度标本,加至正常浓度的血清中调节各检测项目至所需浓度配成自制质控血清.自制质控血清灭活,离心、分装后置于-80℃冰箱保存,每天取出1管于37℃水浴溶化后, 随同当日标本检测.结果 在罗氏E170仪器上检测,自制质控血清稳定,控制效果良好,重复精度好.结论 自制质控血清可以满足室内质控要求,且来源方便,成本低.
作者：高扬；单宁宁；李心河；刘延红；夏洪印；王慧敏 刊期： 2009年第04期
目的 了解国内在育龄妇女人群中实施神经管缺陷(NTDs)综合干预措施的预防效果.方珐全面搜集国内发表的关于在育龄妇女人群中实施NTDs综合干预措施文献,共有12篇文献符合纳入标准(累计381 561人接受综合干预措施).将纳入文献按南北地域归类,分别汇总文献的总体效应值.采用Woolf法对文献研究结果进行齐性检验,根据结果选取汇总纳入文献研究结果总体效应值的分析方法.研究结果趋于一致时,采用Peto法;研究结果问差异较大时,采用D-L法.结果 ①12篇文献的研究结果差异较大(Q=20.443 6,P<0.05),综合干预措施效应强度RR为0.5565(95%CI:0.5446～0.568 7),保护率(PR)为44.35%;②南方地域的2篇文献研究结果趋于一致(Q=0.0684,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.6735(95%CI:0.5767～0.7865),PR为32.65%.北方地域的10篇文献研究结果趋于一致(Q=16.553 8,P>0.05).综合干预措施效应强度RR为0.5131(95%(CI:0.4283～0.6146),PR为48.69%;结论目前国内在育龄妇女人群中综合干预措施可降低NTDs的发病风险,但预防率仍然较低.北方地域综合干预措施预防率高于南方地域.在育龄妇女中开展的NTDs综合干预措施尚需进一步完善.
作者：郝连正；李辉；王志萍；赵仲堂 刊期： 2009年第04期
目的 探讨风疹病毒E2包膜糖蛋白中部分亮氨酸的突变对特异性细胞融合的影响.方法 于E2蛋白中选取9个亮氨酸位点,采用基因定点突变的方法分别将其突变成丙氨酸,采用流式细胞术检测各突变株蛋白在细胞表面的表达效率,Giemsa染色法与指示基因法检测特异性细胞融合,血吸附实验检测其吸附活性.结果 与野毒株蛋白相比,除L144A与L225A之外,其它突变株蛋白在细胞表面的表达效率均有不同程度的降低.排除各突变株蛋白在细胞表面表达效率变化的影响后,其引起的细胞融合效率均有不同程度的降低,其中位于E2蛋白氨基酸序列中间靠近氨基端的亮氨酸(L58、L105、L128与L144)突变时,其细胞融合效率降低更为明显,相应的血吸附效率也有所降低.结论 E2蛋白中,其氨基酸序列中间靠近氨基端的蛋白区域(L58～L144)对引起的特异性细胞融合具有重要的作用.
作者：吴冰；刘晓丽；王志玉 刊期： 2009年第04期
目的 探讨山东地区宫颈癌发病危险因素.方法 采用以医院为基础的1:2病例对照研究,用统一的调查表对山东省三所省级医院893例宫颈癌患者及1786例对照进行调查,应用条件Logistic回归分析筛选宫颈癌发病危险因素.结果 在单因素Logistic回归分析的基础上,HPV16感染、HPV52感染、吸烟、首次性交年龄、性伴侣个数、人工流产次数、配偶有阴茎癌或前列腺癌、绝经和使用避孕套共9个因素被引入回归模型,其OR值依次为:28.256、10.164、2.946、4.529、4.012、4.211、1.312、0.507和0.612.结论 HPV16、HPV52感染是山东地区宫颈癌发生的主要危险因素,首次性交年龄早、性伴侣个数多、人工流产次数多、吸烟以及配偶有阴茎癌或前列腺癌可增加宫颈癌发生的危险,而绝经和使用避孕套则降低宫颈癌的发生风险.
作者：阚士锋；芦鑫；王传新；郑桂喜；李伟；张晓 刊期： 2009年第04期
目的 探讨二甲双胍对初发2型糖尿病(T2DM)及糖耐量异常(IGT)者的疗效.方法 初发T2DM、IGT患者各30例,健康志愿者30例,分别设为T2DM组、IGT组及正常对照组,比较各组血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)、血脂、血压、体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、尿酸(UA)、血浆脂联素及内脂素的差异.T2DM组及IGT组患者在合理膳食和适当运动的同时加服二甲双胍1 500mg/d,疗程为1年,检测治疗前后各项指标的变化.用酶联免疫吸附法检测血浆脂联素、内脂素水平;血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和UA用全自动生化仪测定;空腹血糖(FPG)和糖负荷后2h血糖(2hPG)采用葡萄糖氧化酶法,HbAlc测定采用高压液相法.结果 ①与对照组相比,IGT组及T2DM组BMI、TC、FPG、2hPG和HbAlc显著增高(P<0.01.P<0.05),脂联素和内脂素水平明显降低(P<0.05,P<0.01);②二甲双胍治疗后,T2DM组BMI、WHR、TC、FPG、2hPG和HbAlc较治疗前明显降低(P<0.05或P<0.01),IGT组BMI、WHR、LDL-c、TC、FPG和2hPG显著降低(P<0.05或P<0.01),但两组脂联素均明显高于治疗前(P<0.01,P<0.05).结论 初发T2DM及IGT患者在生活方式改善的同时服用二甲双胍干预治疗疗效明确.
作者：陈丹玲；米念荣；王淑芳 刊期： 2009年第04期
目的 应用脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,检测细胞因子肿瘤坏死因子-a(TMF-a)、白细胞介素-6(IL-6)和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA/uPAR)的mRNA和蛋白含量的变化及辛伐他汀对其表达的影响.方法 实验分为12h组和24h组,各组又分为空白对照组、脂多糖(100 ng/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)组、辛伐他汀(5μg/mL)和脂多糖(100 ns/mL)共作用组,用实时荧光定量PCR和ELISA方法测定12 h组、24 h组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA和蛋白表达的变化.结果 与对照组相比,脂多糖组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清波中IL-6蛋白的表达均明显增加(P均<0.05);与脂多糖组相比,辛伐他汀和脂多糖共作用组TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中IL-6蛋白的表达均明显降低(P均<0.05).结论 辛伐他汀可抑制HUVECs分泌的细胞因子TNF-α、IL-6及uPA/uPAR的表达.
作者：窦姗姗；邓景惕；季冉；扈燕来；张伟红；张立平 刊期： 2009年第04期
目的 监测远端坏死的穿支皮瓣经皮氧分压(tcPaO2)的变化规律,为临床工作提供实验依据.方法 应用体质量400～450g雄性Wistar大鼠100只,在其背部作以髂腰皮动脉为蒂的穿支皮瓣,面积约12 cm×3 cm,以穿支穿出点为近端到皮瓣远端均分为4个区域依次为1、2、3、4区,分别在术前及术后0、1、2.4、7d监测各区域的tcPaO2值.结果 术后各区域0 dtcPaO2值较术前明显降低(P<0.01).术后1、2、4、7d近端3个区域的tePaO2值逐渐升高(P<0.01),术后7 d达到高,其中近端2个区域基本达到正常水平;远端4区的tcPaO2值逐渐降低(P<0.01),术后4d全部坏死.术后1、2d由近端到远端tePaO2值先升高后降低,2区明显高于1区与3,4区(P<0.05);术后4、7 d由近端到远端tcPaO2值呈降低趋势(P<0.05),1、2两个区域tcPaO2值差异无统计学意义(P>0.05).结论 tcPaO2可以客观、连续、定量地反映皮瓣的血液供应状态,有助于早期发现皮瓣的血运障碍,在临床上有很大的应用前景.
作者：尹国瑞；何波；丰荣杰；李淑媛；毕本军；许庆家；朱小雷 刊期： 2009年第04期
目的 观察大黄素对体外培养的人眼角膜基质细胞分泌白细胞介素6(IL-6)的干预作用.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度大黄素对人眼角膜基质细胞活性的影响.绿脓杆茵脂多糖(LPS)刺激角膜基质细胞(LPS组),并用大黄素进行干预(大黄素预处理组).分别于LPS刺激前(Oh),刺激后1、2、4、8h收集各组细胞及细胞上清液.Western blot检测不同时点角膜基质细胞kB抑制因子-α(IkB-α)蛋白的表达及大黄素的作用,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测不同时点角膜基质细胞IL-6蛋白的分泌及大黄素的作用.结果 不同浓度大黄素对角膜基质细胞的活性没有影响.与0 h相比,LPS刺激角膜基质细胞1 h时,胞浆IkB-α蛋白表达出现下降,其电泳条带随着刺激时间的延长而逐渐变暗,4 h时暗.LPS刺激后各时点IkB-α蛋白表达较LPS刺激前均明显下降(P<0.01).LPS刺激可引起人眼角膜基质细胞IL-6蛋白分泌增多,刺激后8h达峰值,LPS刺激细胞后各时点细胞分泌IL-6均较刺激前明显增加(P<0.01).大黄素预处理后,与LPS组相比较,角膜基质细胞表达IrB-α蛋白下降、细胞分泌IL-6减少(P<0.01).结论 绿脓杆菌LPS可引起人眼角膜基质细胞IkB-α降解,引起细胞因子表达,在角膜炎的过程中可能起一定的作用.大黄素能有效抑制吣诱导的人角膜基质细胞IkB-a降解,从而减少相应细胞因子的分泌.
作者：陈国玲；陈双；刘艳丽；魏璐婉；刘执玉 刊期： 2009年第04期
目的 体外分离培养鉴定躯干神经嵴干细胞,探讨其生物学特性,为研究周围神经再生修复提供新的细胞来源.方法 取大鼠胚胎躯干部神经管,组织块法培养获取躯干神经嵴干细胞,通过形态学及免疫细胞化学观察其细胞生长、增殖、分化等特性.结果 原代培养的躯干神经嵴千细胞呈梭形,其特异性标记物nestin和p75表达阳性,并有较高的增殖活性.传代培养后,在含血清培养基中,其分化细胞呈GFAP、MAP-2、α-SMA阳性.结论 成功地培养了躯干神经嵴干细胞,细胞表现出多潜能干细胞特性,为研究周围神经组织工程种子细胞来源提供实验依据.
作者：卢静；孙晋浩；张静；丛丽；綦晓霞；庄园；杨洁；李振华 刊期： 2009年第04期
目的 观察姜黄素对糖尿病大鼠肾脏结构和功能的影响.方法 用链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病组和姜黄素治疗组,另设一正常对照组.治疗组给予姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃,为期8周.然后进行肾脏形态学观察和血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAER)等的检测.结果 糖尿病组大鼠Ccr、UAER、尿白蛋白/肌酐、肾小球平均截面积(MGA)、肾小球平均体积(MGV)均显著高于正常对照组(P<0.01或P<0.05).光镜和电镜下观察显示,糖尿病组大鼠较正常对照组大鼠肾小球明显增大,细胞数目增多,基底膜节段性增厚,部分足细胞足突融合.姜黄素治疗组上述异常均明显减轻.三组大鼠间血BUN和Scr两两比较无明显差异(P>0.05).结论 姜黄素可明显改善糖尿病大鼠肾脏病理改变,减轻肾脏肥大和高滤过状态,降低尿白蛋白,时糖尿病大鼠有肾脏保护作用.
作者：于冬青；刘金波；邓华聪 刊期： 2009年第04期
目的 调查成年人被动吸烟情况,了解人们对被动吸烟的知识、态度和行为,为制定控烟政策提供依据.方法 采用拦截调查的方法,在山东省济南市、聊城市、平阴县三地共调查543人,其中不吸烟者397人.采用X2检验、Logistic回归分析方法统计分析有关因素与被动吸烟的关系.结果 不吸烟者中42.6%的人被动吸烟,其中52.4%的男性被动吸烟,47.8%的女性被动吸烟,男性被动吸烟率高于女性.59.7%的不吸烟者主动反对吸烟者在自己面前吸烟.男性、从事室内工作、不主动拒绝被动吸烟和吸烟者吸烟前不征求他人意见是不吸烟者被动吸烟的危险因素.结论 人群中被动吸烟率仍然较高,人们对被动吸烟危害的认识尚不足,拒绝被动吸烟的意识淡漠.对不同公共场所全部禁烟的态度不尽一致,多数人支持在学校、医院、公交工具中全部禁烟.需要进一步加强对公众的控烟宣传,加大公共场所禁烟的力度,减少全人群的烟草暴露特别是加强对不吸烟者的保护力度.
作者：李斐斐；孙桐；刘言训；侯家祥 刊期： 2009年第04期
目的 探讨绒毛膜促性腺激素(hcG)对滋养层细胞系HTR8-SVneo侵袭活性的影响及其可能的调控机制.方法 将培养的HTR8-SVneo细胞根据处理因素分为对照组、低浓度hCG(10 IU/mL)刺激组、高浓度hCG(100 IU/mL)刺激组,再将HTR8-SVneo细胞分为对照组、hCG(100 IU/mL)刺激组、DPCPX(A1R特异性阻断剂)+hcG(100IU/mL)联合刺激组.采用RT-PCR检测各组HTR8-SVneo细胞基质金属蛋白酶-2(MRS-2)的表达变化,明胶酶谱检测各组HTR8-SVneo细胞MMP-2蛋白水平的分泌变化.结果 高浓度hCG(100 IU/mL)较低浓度hCG(10 IU/mL)刺激后的HTR8-SVneo细胞MMP-2的表达与分泌均上升(P<均0.05);腺苷受体AlR的表达同时升高(P<0.05).阻断A1R的作用通路后,MMP-2的表达与分泌均下降(P均<0.05).结论 随着hCG浓度的升高,HTR8-SVneo细胞的侵袭性逐步增强,其调控机制为通过促进A1R的表达而使MMP-2的分泌升高.
作者：李泽武；杨美香；孙锦堂；解奇；邓碧萍；刘佳；宋丙凤；毛海婷；曲迅 刊期： 2009年第04期
目的 探讨难治性癫痫忠儿外周血中多药耐药基因(MDR1)的表达及氟桂利嗪在其辅助治疗中的作用.方珐采用RT-PCR技术,检测MDR1在22例正常儿童和64例患儿辅助治疗前、后外周血中的表达情况,观察临床疗效和药物不良反应.结果 难治性癫痫组未进行辅助治疗前MDR1 mRNA的表达水平明显高于正常对照组(P<0.01).辅助治疗后,氟桂利嗪组MDR1 mRNA的表达低于安慰剂组(P<0.01),但高于正常对照组(P<0.05);安慰刺组MDR1 mRNA的表达比正常对照组高1.14倍,与辅助治疗前相比,氟桂利嗪组MDR1 mRNA表达水平降低(P<0.01),安慰剂组增高(P<0.05).氟桂利嗪组与安慰剂组治疗有效率分别为55.56%和3.57%.氟桂利嗪不良反应发生率为8.33%.结论 检测外周血MDR1 mRNA的表达可以评估难治性癫痫患儿对抗癫痫药物的敏感程度;氟桂利嗪对MDR1 mRNA的表达有逆转作用,能减轻癫痫的发作,且小剂量氟桂利嗪副作用小,耐受性好.
作者：李保敏；于臻；张冬青；孙若鹏 刊期： 2009年第04期
目的 通过克隆形成及致瘤能力研究肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的比例.方法 采用有限稀释法,检测细胞单克隆形成的数量及大小;收集来自于1个细胞形成的克隆细胞,种于BALB/C裸鼠皮下,观察其致瘤能力;采用CD133磁珠分选A549细胞,测定CD133+、CD133-细胞的克隆形成能力,测定Hoechst33342染色对非SP细胞的增殖能力和单克隆形成能力的影响.结果 45%以上的A549细胞能够形成大于100个细胞的大克隆,其传代后又能形成新的克隆,来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上,10 d左右能形成肉眼可见的肿瘤;CD133+、CD133-细胞克隆形成能力相同;Hcechst33342染色能够明显干预细胞的克隆形成及增殖能力.结论 45%以上的A549细胞是肿瘤始发细胞.
作者：孟祥姣；王亚伟；王秀问 刊期： 2009年第04期
山东大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：山东大学
