黄方;康瑞;吴春林
目的 构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用.方法 应用互为引物模板法合成两端具有Noel和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段.将所得SAC和已有HA2-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT重组质粒.PER扩增NT4-SAC-HA2-TATcDNA片段,并将其克隆到pGEM-T easy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析.结果 经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SAC cDNA片段,并将NT4-SAC-HA2-TAT亚克隆于pBV220内.结论 成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达栽体pBV220NT4-SAC-HA2-TAT.
作者:张士宝;刘庆勇;阮喜云;陈杰;张建军;李宗武;杨广笑;王全颖 刊期: 2009年第06期
目的 探讨不同类型甲状腺上动脉收缩期峰值流速(PV),包括PSVleft、PSVrlsht、PSVmax、PSVmin和PSVmean对Graves病与桥本氏甲状腺炎鉴别诊断的价值.方法 收集Graves病患者(GD组)19例,桥本氏甲状腺炎患者(HT组)18例,另有正常对照组(N组)20例,所有患者及正常人均进行二维超声及彩色多普勒超声检查,测量双侧甲状腺上动脉PSV,并计算双侧平均PSV.采用ROE曲线判断不同类型PSV鉴别GD与HT的灵敏性和特异性.结果 GD组、HT组和N组两两之间PSVleft、PSVright、PSVmax、PSVmin、PSVmean均有明显差异(P<0.01).PSVmean与PSVmaxROC曲线下面积大于0.9,二者诊断界点分别为71cm/s与85cm/s,PSVmean和PSVmax对GD和HT鉴别诊断的灵敏度与特异度分别为94.7%、83.3%、89.5%、88.9%.结论 不同类型甲状腺上动脉PSV时GD与HT鉴别诊断的价值不同,PSVmax与PSVmean具有较高的应用价值.当所测量的第一侧PSV大于85 cm/s时,可不必测量对侧PSV.但所测第一侧的PSV小于85 cm/s时,则应测量对侧PSV,进行综合诊断.
作者:徐平;于国放;李霞 刊期: 2009年第06期
目的 探讨PPAR-γ在脑膜瘤中的基因和蛋白表达以及其激动剂可能的抗肿瘤作用.方法 应用RT-PCR、免疫组化方法对48例脑膜瘤的手术标本进行PPAR-γ的基因和蛋白表达分析,并体外培养16例人脑膜瘤细胞,应用MTT方法探讨曲格列酮对脑膜瘤细胞生长的作用,应用流式细胞仪检测曲格列酮干预后凋亡情况.结果 PPAR-γ在48例脑膜瘤细胞中均有表达,且非典型组高于良性组(P<0.05),女性患者PPAR-γ基因表达高于男性;其表达与脑膜瘤增殖性正相关,曲格列酮体外抑制脑膜瘤细胞生长,并可以诱导脑膜瘤细胞凋亡,其作用具有时间和浓度的依赖性.结论 非典型脑膜瘤PPAR-γ表达高于良性组,其表达与增殖活性成正相关;其配体活化后体外可以抑制脑膜瘤细胞生长并可诱导凋亡.
作者:鹿向东;杨伟;徐广明;曲元明 刊期: 2009年第06期
目的 探讨DKK-1在食管癌患者血清中表达的临床意义.方法 应用酶联免疫(Elisa)法检测80例食管鳞癌患者和35例正常人血清中的DKK-1的表达水平,并与常规肿瘤标记物进行比较,探讨其在食管癌中的诊断价值.结果 食管鳞癌患者血清中DKK-1浓度为(90.44±57.41)ng/mL,而正常人血清浓度为(11.29±9.45)ng,/mL,两者之间差异有统计学意义(P<0.01).若以正常人血清DKK-1浓度95%可信区间上限为界值(14.54ng,/mL),则食管癌鳞患者血清中DKK-1的敏感性为66.25%(53/80),特异性为82.86%;血清中的DKK-1的阳性率仅为17.14%(6/35),两者之间差异有统计学意义(P<0.01).经过统计学分析显示,食管鳞癌患者血清中的DKK-1水平与肿瘤大小、分期及淋巴结转移等因素相关(P<0.05),而与性别、年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05).通过与其他标记物比较发现DKK-1的检测对食管鳞癌诊断的敏感度明显高于常规肿瘤标记物(CEA39.44%,CY-FRA21-1 25.35%,P<0.01),三者联合检测能明显提高诊断食管癌的敏感性.结论 DKK-1可作为检测食管癌的一种新的肿瘤标记物,对食管癌的诊断和病情评估有一定的辅助参考价值.
作者:李波波;李道堂;刘曙光;王兴武 刊期: 2009年第06期
目的 探讨体外原代培养胎鼠大脑皮层神经元NMDAR1(NR1)亚基表达的发育性变化.方法 利用体外原代培养Wistar孕14~15 d胎鼠大脑皮层神经元,采用免疫荧光法鉴定神经元的纯度和NR1亚基在神经元上的定位,采用流式细胞术和免疫印迹法(Western blot)检测不同培养时间神经元NR1亚基的表达情况.结果 体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元纯度均达到90%以上,免疫荧光标记显示NR1亚基主要分布在神经元胞膜及树突干膜上,流式细胞仪检测培养1、2、3、4、6、9、12 d神经元NR1亚基平均荧光强度分别为4.57±0.99、8.18±1.22、13.67±1.99、20.33±1.03、26.30±2.88、31.71±2.47、28.63±1.40,Western blot显示细胞膜蛋白中NR1亚基在1~2d表达微弱,3~6 d表达逐渐增高,6d以后保持稳定.结论 q体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元NR1亚基有发育性变化,这种变化与神经元的成熟度有关.
作者:张道来;孙涛;谢珊珊;王玉卓;赵玲;冯玉新;辛华 刊期: 2009年第06期
目的 了解多药耐药基因1(MDR1)C1236T多态性在癫痫患者中的分布,并探讨其与癫痫患者耐药的相关性.方法 选择70例难治性癫痫患者及88例对抗癫痫药物敏感的癫痫总者,提取其外周血DNA,应用多聚合酶链反应(PCR)扩增后继以限制性内切酶片断长度多态性(RFLP)分析,检测基因MDR1的第12个外显子中C1236T的多态性.结果 两组病例的基因型频率和等位基因频率相比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MDR1Cl236T多态性与癫痫患者对抗癫痫药物反应没有相关性.
作者:葛丽娟;金瑞;王纪文;许新升;李堃 刊期: 2009年第06期
目的 探讨三氯化铁(FeCl3)及络合铁(Fe-EDTA)抗银屑病的作用.方法 建立昆明种雌激素周期雌鼠阴道上皮细胞有丝分裂和雄鼠尾鳞片表皮颗粒层两种银屑病的动物实验模型.将昆明小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组,FeCl3低、中、高剂量组,Fe-EDTA低、中、高剂量组和朴雪口服液组.后1次给药后,脱颈椎处死小鼠,光学显微镜下观察雌鼠阴道上皮细胞有丝分裂情况及雄鼠尾鳞片表皮颗粒层形成情况,计算有丝分裂指数和100个鳞片中有颗粒层的鳞片数.结果 与阴性对照组比较,各补铁组和阳性对照组均可抑制雌鼠阴道上皮细胞的有丝分裂(P<0.05),均对雄鼠尾鳞片表皮颗粒层形成起促进作用(P<0.05);除阴性对照组外,其余各组两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 三氯化铁及络合铁均有一定的抗银屑病作用.
作者:杨晓倩;季静;刘娜;郭冬梅;崔晞 刊期: 2009年第06期
目的 探讨血清脂联素水平与胰岛素抵抗之间的关系,以及肥胖和胰岛素抵抗的交互作用对脂联素的影响.方法 将167例研究对象分成胰岛素抵抗伴肥胖、单纯胰岛素抵抗、单纯肥胖和正常状态四组,运用方差分析、协方差分析对观察指标进行研究.结果 在扣除性别、收缩压、舒张压、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇对血清脂联素水平的线性影响后,脂联素在四组中的修正均数依次为3.477μg/mL、3.681 μg/mL、4.447μg/mL和4.614μ/mL(P=0.033),胰岛素抵抗伴肥胖组的血清脂联素水平明显低于单纯肥胖组(P=0.036)和正常组(P=0.009),未发现胰岛素抵抗和肥胖的交互作用的存在.结论 血清脂联素水平降低与胰岛素抵抗之间互为因果,肥胖和胰岛素抵抗均与脂联素水平下降独立相关.
作者:张媛;李英敏;冯月秋;常彩云;潘华伟;王束玫 刊期: 2009年第06期
目的 探讨舒血宁注射液对高碘致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株HUECV-304,在培养液中预先加入不同浓度的碘化钾和舒血宁注射液.在碘化钾的终浓度分别为4.0、5.0、6.0、8.0μmol/L组中分别加入浓度为0、2、5、10μl/mL的舒血宁注射液,观测4,8,12和24 h时细胞形态、细胞计数、MTT法测定细胞活性及上清液中SOD的含量.结果 ①在碘浓度5.0μmol/L以上组,4h时可见内皮细胞内有中毒颗粒出现,且随浓度增加和时间延长而增加.加入舒血宁后,碘浓度5.0μmol/L以上组该变化明显减轻,且与时间和剂量相关(P<0.05);②随时间的延长及舒血宁浓度的升高,细胞增殖活性受到抑制的碘浓度相应升高(P<0.05);③SOD含量随碘浓度的升高而升高(P<0.05),加入舒血宁后,SOD含量变化不明显.结论 舒血宁注射液对高碘所引起的内皮细胞损伤有一定的对抗作用,其作用存在时间-剂量效应关系;舒血宁的作用可通过增强细胞的抗氧化作用拮抗高碘的损伤作用.
作者:王晓磊;张海涛;张辉;郭成浩 刊期: 2009年第06期
无顶冠状静脉窦综合征(unroofed coronary sinussyndrome,UCSS)是由于胚胎发育过程中,左侧心房静脉皱襞完全性或部分性缺损,使冠状窦与左房直接交通而形成的一组先天性心脏病,多伴有其他心内畸形[1,2] .
作者:巩性军;吴树明;张供;李守先;庞昕焱 刊期: 2009年第06期
目的 探讨急性ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者在接受急诊经皮冠状动脉介入手术(PCI)前口服阿托伐他汀40mg,对外周静脉和梗死相关冠状动脉(ICA)中的炎症介质水平与左心室功能的影响.方法 选取接受急诊PCI的STEMI患者60例,随机分为治疗组(PCI术前口服阿托伐他汀40mg,/n=32)和对照组(n=28).两组分别于PCI术前即刻、术后24h抽取外周静脉血和术中抽取ICA血,测定并比较白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和可溶性CD40配体(sCD40L)的浓度;PCI术后1周常规行超声心动图检查,测定左心室舒张期容积(EDV-LV)、左心室收缩末期容积(ESV-LV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室峰值射血率(PER-LV)、左心室峰值充盈率(PFR-LV).结果 组间对比,PCI术前,治疗组外周静脉中IL-6的浓度显著低于对照组;PCI术后24h,治疗组外周静脉血中的IL-6、sCD40L和MMP-9浓度显著低于对照组.AMI后第7天,治疗组的EDV-LV、ESV-LV、LVEF、PER-LV、PER-LV较对照组无显著变化;组内对比,在两组患者中,PCI术前ICA中的IL-6、sCD40L和MMP-9浓度均显著高于其外周静脉水平.术后24h,所有患者外周静脉血IL-6和MMP-9的浓度均显著增高(P均<0.05),而sCD40L的浓度只有对照组明显升高(P均<0.05).结论 STEMI发生时,ICA中的MMP-9、IL-6和sCD40L的水平显著高于外周静脉,而患者于急诊PCI术前口服阿托伐他汀能够不同程度降低炎症介质的水平,但对近期左心室功能无明显改善.
作者:徐宁宇;王磊;郝恩魁;苏国海 刊期: 2009年第06期
目地 探讨肝细胞癌(HCC)血管生成及其成熟度对其生物学行为的影响.方法 选取行手术切除并经病理证实的HCC病例31例,手术后分别在边缘和中心进行标本取材并综合分析.利用免疫组化技术检测VEGP、Flk-1、PCNA的表达情况,并对微血管和成熟血管的数目、平均面积、总面积、周长、直径、异型指数、血管间距、表达部位,以及动脉数、静脉数、动脉比、静脉比、血管成熟指数和平均灌注分数等进行计数.分析以上血管生成相关参数与病灶大小、Edmondson病理分级、包膜情况、肝硬化及侵袭转移的关系.结果 在小、中、大病灶之间,微血管总面积和成熟血管总面积均具有统计学差异(P<0.05);在EdmondaonⅠ~Ⅳ级之间,灌注分数逐渐增加,也存在统计学差异(F=3.452,P=0.049).有包膜病灶的成熟血管平均面积、成熟血管周长、成熟血管平均直径及成熟血管管距明显大于无包膜的病灶(P<0.05);侵袭转移组的成熟血管异型指数也大于阴性组(t=2.260,P=0.039).在有、无肝硬化组之间,所有血管相关参数未见统计学差异(P>0.05).结论 HCC的一些生物学行为更多依赖肿瘤的成熟血管.
作者:于德新;蔡跃红;马祥兴;张晓明;李传福 刊期: 2009年第06期
目的 观察不同剂量舒芬太尼在脊柱手术患者全麻诱导期对机体血流动力学和Cor的影响.方法 将60例择期行脊柱手术患者随机分为S1、S2、S3三组,各组诱导所用舒芬太尼剂量分别为0.2、0.4、0.6μg/kg.各组分别于诱导前(T0,基础值),插管前即刻(T1),插管后1 min(T2)、3 min(T3)、5 min(T4),记录患者SBP、DBP、MAP、HR、SPO2,并在各时点抽取静脉血,用放射免疫法检测血浆Cor浓度.结果 同组比较:各组不同时点的SBP、DBP、MAP、HR差异具有统计学意义(P<0.05);各组T1时SBP、DBP、MAP、HR均低于T0时(P<0.05).组间比较:T1时S1、S2组MAP高于S3组(P<0.05);T2、T3时:S1组SBP、DBP、MAP、HR均高于S2、S3组(P<0.05);T4时:S1、S2组SBP、MAP、HR均高于S3组(P<0.05),S1组DBP高于S2、S3组(P<0.05).S1组血浆Cor的浓度在T2、T3时高于T0,亦高于相同时点的S2、S3组(P<0.05).结论 和0.2μg/kg舒芬太尼相比,0.4μg/kg和0.6μg/kg均能有效抑制插管时应激反应,0.4μg/kg舒芬太尼更有利于血流动力学稳定.
作者:张小艳;李刚;王令平 刊期: 2009年第06期
目的 分析农村居民日常活动的净效应值,探讨提高主观幸福感的途径.方法 采用昨日重现法调查农村居民的日常活动,比较分析不同活动的净效应值.结果 休闲娱乐类活动的主观幸福感高,而不得不做事情的低,性别、年龄和文化程度对农村居民日常活动所带来的主观幸福感都有影响.结论 在农村增加体闲娱乐活动种类,延长娱乐活动时间,提高不同性别、年龄和文化程度居民对各类活动兴趣,有助于整体提高农村居民的主观幸福感.
作者:王健;孟庆跃;曲江斌;王丽娜 刊期: 2009年第06期
目的 探讨凝集素受体WGA、RCA和ECL在过量维甲酸(RA)致小鼠腭裂畸形中的作用.方法 以生物素标记的凝集素受体WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和细胞组织化学染色方法检测上述3种凝集素受体在RA致畸鼠胚(实验组)和相应对照组鼠胚腭板上皮及其间充质的分布状况和变化规律.结果 3种凝集素受体在实验组不同发育阶段的小鼠胚胎腭突上皮内的表达量显著低于相应时照组.3种凝集素受体在小鼠胚胎腭板间充质中的表达量在实验组及对照组之间差异无统计学意义.结论 WGA、RCA、ECL 3种凝集素受体在腭板上皮中表达量的下调与RA致昆明小鼠腭裂发生相关.
作者:段淑红;刘凯;尹海燕;赵世斗;刘丰韬 刊期: 2009年第06期
目的 考察复方烟酸辛伐他汀双层片中缓释层烟酸与速释层辛伐他汀的体外释放度.方法 以国内上市的烟酸缓释片(商品名本悦)作为对照片,用UV法比较了本院自制的复方烟酸辛伐他汀双层片缓释层中烟酸在水、0.1 mol/L盐酸及pH 6.8磷酸盐缓冲液三种介质中的释放情况,同时以含0.5%十二烷基硫酸钠(SLS)的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)为溶出介质,采用眦法测定了速释层中辛伐他汀的释放情况.结果 自制复方烟酸辛伐他汀双层片中烟酸在3、9和16h的累积百分释放度在10%~30%、40%~60%和75%以上,符合规定.复方烟酸辛伐他汀双层自制片和对照片中烟酸的释放曲线均符合Higuchi方程,相关系数大于0.99,相似因子f2值在规定的50~100之内.速释层中辛伐他汀在45min内溶出80%以上.结论 自制复方烟酸辛伐他汀双层片与对照片中烟酸的释放性能相似,辛伐他汀溶出度亦符合要求.
作者:高秀蕊;臧恒昌 刊期: 2009年第06期
目的 利用31P磁共振波谱分析数据,区别肝细胞肝癌、肝硬化和正常的肝组织.方法 从33例包括肝细胞肝癌、肝硬化和正常肝的志愿者中选择66个有效体素样本,利用1.5T超导MR扫描仪采集31P MRS数据,通过BP神经网络和SVM模型的实验来区别肝细胞肝癌、肝硬化和正常肝脏组织.结果 有限的样本实现了良好的分类性能,反向传播神经网络(BP)和支持向量机(SVM)模型可以提高31P MRS识别率,识别率可达92.31%.结论 基于BP和SVM的31P MRS数据分析,对于活体肝细胞肝癌的诊断提供了一种可选择的有价值的技术.
作者:王韶卿;刘毅慧;付婷婷;成金勇;刘强 刊期: 2009年第06期
目的 建立全颞下颌关节骨关节病(TMJOA)实验动物模型.方法 选择8只新西兰大白兔,在大白兔的右侧颞下颌关节上腔以及下腔注射注射2%木瓜蛋白酶各0.2mL,注射两次,3天一次,左侧为对照,注射后第1、3、5周取材,对TMJ进行组织病理学观察.结果 注射木瓜蛋白酶早期,颞骨关节面、关节盘、髁状突软骨即出现明显的骨关节病的改变;后期出现关节软骨纤维层剥脱,关节软骨以及关节盘中的裂隙明显,局部颞骨关节面和髁状突出现关节软骨剥脱等损害.结论 实验结果表明,颞下颌关节上、下腔注入木瓜蛋白酶是造成全颞下颌关节退行性改变动物模型的有效方法,该方法快速、简单、重复性好.
作者:赵立星;宋代辉;魏魁杰;殷恺 刊期: 2009年第06期
目的 探讨S-100阳性的神经节细胞和C-kit阳性的Caial间质细胞在儿童先天性巨输尿管症发病中的作用.方法 取25侧先天性巨输尿管症末端输尿管标本(末端组)和25侧先天性巨输尿管症扩张段输尿管标本(扩张组),另取15例肾母细胞瘤输尿管下段无肿瘤细胞浸润的标本作对照组,采用免疫组化SP法对3组进行S-100和C-kit染色.计数平均高倍镜下S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Caial间质细胞数,分析计算S-100染色高倍镜平均光密度,进行统计学分析.结果 末端组中S-100阳性神经节细胞教及S-100染色平均光密度值较扩张组和对照组明显减少(P均<0.01);扩张组S-100阳性神经节细胞数及S-100染色平均光密度值和对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05);末端组C-kit阳性Cajal间质细胞数与扩张组和对照组比较明显减少(P均<0.01).直线相关分析显示,S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Caial间质细胞数在对照组、末端组和扩张组中均呈正相关关系(r分别为1.08、0.81、1.33).结论 S-100蛋白和C-kit蛋白在儿童先天性巨输尿管末端输尿管组织中表达减少,在扩张段输尿管组织中表达正常,提示S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Cajal间质细胞数的减少与本病关系密切.
作者:于嘉智;王克来;庄岩;张连海 刊期: 2009年第06期
目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对阻塞性黄疸大鼠小肠粘膜的保护作甩.方法 Wistar大鼠50只,随机分成阻塞性黄疸组(A组)10只、阻塞性黄疸再通组(B组)10只、阻塞性黄疸PGE2干预组(C组)10只、阻塞性黄疸再通加PGE2干预组(D组)10只和假手术组(E组)10只.采用直接结扎法制成阻塞性黄疸大鼠模型.再通组采用导管法再通.结扎后1周给予PGE2,结扎后2周再通,再通手术后1周取标本,观察大鼠小肠粘膜的形态学变化.结果 PGE2干预组小肠粘膜损伤评分为(2.21±0.75),手术再通组大鼠小肠损伤评分为(2.05±0.71),均较黄疸组减轻(5.26±0.57,P<0.05).结论 阻塞性黄疸大鼠小肠粘膜明显受损,PGE2及手术再通均可减少其损伤.但两者没有协同作用.
作者:祝林;胡三元;张光永;丁祥就 刊期: 2009年第06期