赵立星;宋代辉;魏魁杰;殷恺
目的 观察不同月龄的自发性高血压大鼠(SHR)的肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)的mRNA和蛋白质表达水平,探讨ACE2与血压状态的内在联系.方法 12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)18只和12周龄Wistar-Kyo-to(wl(Y)大鼠18只.随机分为SHR组和WKY组,每组抽取各9只处死后与喂养12周后处死的24周龄大鼠一并进行ACE2的检测.采用实时定量RT-PCR法检测ACE2 mRNA的表达,免疫组织化学检测ACE2蛋白的表达.结果 与同周龄WKY组比较,SHR组大鼠的血压显著增加(P均<0.001),ACE2 mRNA表达显著降低(P均<0.001);与12周龄SHR组比较,24周龄SHR的血压显著增加(P<0.01),ACE2 mRNA表达显著降低(P<0.01);与同周龄的WKY组比较,SHR组肾脏ACE2免疫染色表达显著减少.结论 肾脏ACE2 mRNA和蛋白质的表达与血压升高相关.
作者:吴逸南;葛志明;李方;贺红;姜虹;张运 刊期: 2009年第06期
目的 观察葡萄子原花青素(GSPE)对链脲佐菌素(SIZ)诱导的糖尿病大鼠主动脉栽脂蛋白A-I(apoA-I)的影响.方法 雄性Wistar大鼠随机分成对照组(C组,n=10)、糖尿病组(DM组,n=9)和糖尿病GSPE治疗组(DM+GSPE组,n=13).24周后处死动物,留取主动脉标本,HE染色观察各组动物主动脉形态变化,并应用荧光差异凝胶电泳技术观察GSPE对糖尿病大鼠主动脉apoA-I表达的影响.结果 糖尿病组大鼠主动脉内皮细胞肥大,结构紊乱,平滑肌细胞增生,内弹力板破坏,管腔变小,经GSPE治疗后,上述变化均未出现,血管结构接近对照组.糖尿病组大鼠apoA-I表达较对照组明显下降(DM组/C组:-1.68),而应用GSPE治疗后apoA-I表达上调(DM+GSPE组/DM组:1.77).结论 GSPE能够促进STZ诱导的糖尿病大鼠主动脉apoA-I表达,该机制可能与GSPE的血管保护作用相关.
作者:翟茜;李保应;高海青;江蓓 刊期: 2009年第06期
目的 探讨PPAR-γ在脑膜瘤中的基因和蛋白表达以及其激动剂可能的抗肿瘤作用.方法 应用RT-PCR、免疫组化方法对48例脑膜瘤的手术标本进行PPAR-γ的基因和蛋白表达分析,并体外培养16例人脑膜瘤细胞,应用MTT方法探讨曲格列酮对脑膜瘤细胞生长的作用,应用流式细胞仪检测曲格列酮干预后凋亡情况.结果 PPAR-γ在48例脑膜瘤细胞中均有表达,且非典型组高于良性组(P<0.05),女性患者PPAR-γ基因表达高于男性;其表达与脑膜瘤增殖性正相关,曲格列酮体外抑制脑膜瘤细胞生长,并可以诱导脑膜瘤细胞凋亡,其作用具有时间和浓度的依赖性.结论 非典型脑膜瘤PPAR-γ表达高于良性组,其表达与增殖活性成正相关;其配体活化后体外可以抑制脑膜瘤细胞生长并可诱导凋亡.
作者:鹿向东;杨伟;徐广明;曲元明 刊期: 2009年第06期
目的 探讨尿中阿尔茨海默病相关的神经丝蛋白(AD7c-NTP)含量在老年性痴呆(AD)诊断中的价值.方法 采用酶联免疫吸附测定法(ELISA),检测AD组(分轻、中、重3组)65例、血管性痴呆组(VaD组)60例、智能正常老年对照组120例尿液中AD7c-NIP含量,所有数据均经SPSS 13.0软件进行统计学处理.结果 AD组、VaD组与智能正常老年对照组尿液中AD7c-NTP含量分别为(2.50±0.45)、(1.19±0.68)、(1.21±0.74)ng/mL,AD组明显高于另外两组,而VaD组与智能正常老年对照组差异无统计学意义(P>0.05);AD组内患者尿液AD7c-NTP含量与其痴呆程度呈正相关.结论 尿液中AD7e-NIP含量在AD诊断和病情评估中有重要的临床参考价值.
作者:闫鹏;王蓉;杜怡峰;沈伦乾 刊期: 2009年第06期
目的 探讨S-100阳性的神经节细胞和C-kit阳性的Caial间质细胞在儿童先天性巨输尿管症发病中的作用.方法 取25侧先天性巨输尿管症末端输尿管标本(末端组)和25侧先天性巨输尿管症扩张段输尿管标本(扩张组),另取15例肾母细胞瘤输尿管下段无肿瘤细胞浸润的标本作对照组,采用免疫组化SP法对3组进行S-100和C-kit染色.计数平均高倍镜下S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Caial间质细胞数,分析计算S-100染色高倍镜平均光密度,进行统计学分析.结果 末端组中S-100阳性神经节细胞教及S-100染色平均光密度值较扩张组和对照组明显减少(P均<0.01);扩张组S-100阳性神经节细胞数及S-100染色平均光密度值和对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05);末端组C-kit阳性Cajal间质细胞数与扩张组和对照组比较明显减少(P均<0.01).直线相关分析显示,S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Caial间质细胞数在对照组、末端组和扩张组中均呈正相关关系(r分别为1.08、0.81、1.33).结论 S-100蛋白和C-kit蛋白在儿童先天性巨输尿管末端输尿管组织中表达减少,在扩张段输尿管组织中表达正常,提示S-100阳性的神经节细胞数和C-kit阳性的Cajal间质细胞数的减少与本病关系密切.
作者:于嘉智;王克来;庄岩;张连海 刊期: 2009年第06期
目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对阻塞性黄疸大鼠小肠粘膜的保护作甩.方法 Wistar大鼠50只,随机分成阻塞性黄疸组(A组)10只、阻塞性黄疸再通组(B组)10只、阻塞性黄疸PGE2干预组(C组)10只、阻塞性黄疸再通加PGE2干预组(D组)10只和假手术组(E组)10只.采用直接结扎法制成阻塞性黄疸大鼠模型.再通组采用导管法再通.结扎后1周给予PGE2,结扎后2周再通,再通手术后1周取标本,观察大鼠小肠粘膜的形态学变化.结果 PGE2干预组小肠粘膜损伤评分为(2.21±0.75),手术再通组大鼠小肠损伤评分为(2.05±0.71),均较黄疸组减轻(5.26±0.57,P<0.05).结论 阻塞性黄疸大鼠小肠粘膜明显受损,PGE2及手术再通均可减少其损伤.但两者没有协同作用.
作者:祝林;胡三元;张光永;丁祥就 刊期: 2009年第06期
目的 探索从脐带组织中分离培养间充质干细胞的无动物血清方法,并将其向肝细胞诱导分化.方法 分离自体脐血清用于后续细胞培养,利用酶消化法从脐带组织中分离培养问充质干细胞,检测其形态和免疫表型,并采用两步法诱导其向肝细胞诱导分化.结果 流式细胞术检测结果表明,自体脐血清培养得到的贴壁细胞表型符合间充质干细胞特征,且在合适诱导条件下能肝样细胞分化,经过4周处理,能表达肝细胞特异性基因.部分细胞具有吞噬低密度脂蛋白的能力.结论 采用自体脐血清有效地培养脐带闻充质干细胞,具备向肝细胞的分化能力.
作者:张辉;时庆;侯怀水;李栋 刊期: 2009年第06期
目的 探讨中国汉族人环氧化酶2的单核苷酸多态性位点及单元型与动脉粥样硬化缺血性脑卒中的关系.方法 对626名缺血性脑卒中患者和604名健康者检测环氧化酶2的两个多态位点:-1195G/A和8473T/C,并对每个基因位点和两个位点的单元型进行分析.结果 8473T/C位点的基因型TC在疾病组中明显增多(经混杂因素校正后,OR=1.329,95%CI=1.028-1.719),单元型A-1195C8473的比率在疾病组较对照组高,Logistic回归分析显示带有单元型A-1195C8473仍的个体更容易患缺血性脑卒中(经混杂因素校正后,OR=1.372,95%CI=1.070-1.760).结论 在汉族人环氧化酶2的基因型TC(8473T/C位点)和单元型A-1195-C8473可能是脑梗塞的遗传易感因素.
作者:郝跃伟;刘雪平;赵婷婷;郑敏;王一兵 刊期: 2009年第06期
目的 通过对侵袭性白念珠菌感染时磷酸丙酮酸水合酶血清水平检测,评价磷酸丙酮酸水合酶抗原在诊断中的价值.方法 选择40例患者,其中确诊、临床拟诊、浅表定植白念珠菌患者分别为18、12、10例作为实验组,同时选择健康体检人员10例作为阴性对照组,留取血标本.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清中磷酸丙酮酸水合酶的OD值,通过标准曲线反应出待测血清中抗原含量.结果 确诊组和临床诊断组血清磷酸丙酮酸水合酶的平均浓度与后两组差异显著;用ELISA检测血清磷酸丙酮酸水合酶的浓度,以0.35μg/mL诊断阈值的敏感性、特异性分别为77%、100%.结论 侵袭性白念珠菌感染时血清磷酸丙酮酸水合酶水平明显高于定植组和健康组.提示血清磷酸丙酮酸水合酶抗原检测可作为侵袭性白念殊菌感染的诊断指标,以0.35 μg/mL为诊断阈值对诊断侵袭性白念珠菌感染的敏感性、特异性较为理想.
作者:王欣;邢春燕;杨艳平 刊期: 2009年第06期
目的 探讨急性ST段抬高性心肌梗死(STEMI)患者在接受急诊经皮冠状动脉介入手术(PCI)前口服阿托伐他汀40mg,对外周静脉和梗死相关冠状动脉(ICA)中的炎症介质水平与左心室功能的影响.方法 选取接受急诊PCI的STEMI患者60例,随机分为治疗组(PCI术前口服阿托伐他汀40mg,/n=32)和对照组(n=28).两组分别于PCI术前即刻、术后24h抽取外周静脉血和术中抽取ICA血,测定并比较白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和可溶性CD40配体(sCD40L)的浓度;PCI术后1周常规行超声心动图检查,测定左心室舒张期容积(EDV-LV)、左心室收缩末期容积(ESV-LV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室峰值射血率(PER-LV)、左心室峰值充盈率(PFR-LV).结果 组间对比,PCI术前,治疗组外周静脉中IL-6的浓度显著低于对照组;PCI术后24h,治疗组外周静脉血中的IL-6、sCD40L和MMP-9浓度显著低于对照组.AMI后第7天,治疗组的EDV-LV、ESV-LV、LVEF、PER-LV、PER-LV较对照组无显著变化;组内对比,在两组患者中,PCI术前ICA中的IL-6、sCD40L和MMP-9浓度均显著高于其外周静脉水平.术后24h,所有患者外周静脉血IL-6和MMP-9的浓度均显著增高(P均<0.05),而sCD40L的浓度只有对照组明显升高(P均<0.05).结论 STEMI发生时,ICA中的MMP-9、IL-6和sCD40L的水平显著高于外周静脉,而患者于急诊PCI术前口服阿托伐他汀能够不同程度降低炎症介质的水平,但对近期左心室功能无明显改善.
作者:徐宁宇;王磊;郝恩魁;苏国海 刊期: 2009年第06期
目的 探讨不同类型甲状腺上动脉收缩期峰值流速(PV),包括PSVleft、PSVrlsht、PSVmax、PSVmin和PSVmean对Graves病与桥本氏甲状腺炎鉴别诊断的价值.方法 收集Graves病患者(GD组)19例,桥本氏甲状腺炎患者(HT组)18例,另有正常对照组(N组)20例,所有患者及正常人均进行二维超声及彩色多普勒超声检查,测量双侧甲状腺上动脉PSV,并计算双侧平均PSV.采用ROE曲线判断不同类型PSV鉴别GD与HT的灵敏性和特异性.结果 GD组、HT组和N组两两之间PSVleft、PSVright、PSVmax、PSVmin、PSVmean均有明显差异(P<0.01).PSVmean与PSVmaxROC曲线下面积大于0.9,二者诊断界点分别为71cm/s与85cm/s,PSVmean和PSVmax对GD和HT鉴别诊断的灵敏度与特异度分别为94.7%、83.3%、89.5%、88.9%.结论 不同类型甲状腺上动脉PSV时GD与HT鉴别诊断的价值不同,PSVmax与PSVmean具有较高的应用价值.当所测量的第一侧PSV大于85 cm/s时,可不必测量对侧PSV.但所测第一侧的PSV小于85 cm/s时,则应测量对侧PSV,进行综合诊断.
作者:徐平;于国放;李霞 刊期: 2009年第06期
目的 探讨血清脂联素水平与胰岛素抵抗之间的关系,以及肥胖和胰岛素抵抗的交互作用对脂联素的影响.方法 将167例研究对象分成胰岛素抵抗伴肥胖、单纯胰岛素抵抗、单纯肥胖和正常状态四组,运用方差分析、协方差分析对观察指标进行研究.结果 在扣除性别、收缩压、舒张压、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇对血清脂联素水平的线性影响后,脂联素在四组中的修正均数依次为3.477μg/mL、3.681 μg/mL、4.447μg/mL和4.614μ/mL(P=0.033),胰岛素抵抗伴肥胖组的血清脂联素水平明显低于单纯肥胖组(P=0.036)和正常组(P=0.009),未发现胰岛素抵抗和肥胖的交互作用的存在.结论 血清脂联素水平降低与胰岛素抵抗之间互为因果,肥胖和胰岛素抵抗均与脂联素水平下降独立相关.
作者:张媛;李英敏;冯月秋;常彩云;潘华伟;王束玫 刊期: 2009年第06期
目的 调查济南居民每日人均硒(Se)摄入量,探讨血清硒(Sse)含量的参考值范围以及性别、年龄对Sse含量的影响.方法 2007年8月至2008年1月以485名济南市区健康成人作为调查对象,采用7 d膳食摄入表法进行每人每日硒摄入量调查;采用微波消解-氢化物发生-原子吸收分光光度法检测Sse含量,并行统计分析.结果 济南市区健康成人人均摄入硒55.93μg/d,男性硒摄入量66.98μg/d,高于女性的49.57μg/d(P<0.05),年龄对硒摄入量无明显影响.Sse含量为(61.84±13.25)μg/L,参考值范围为(35.87~87.81)μg/L,男性Sse含量均值为63.40μg/L,高于女性的60.77μg/L(P<0.05),年龄对Sse水平没有显著影响.结论 初步确定济南居民Sse的参考值范围;发现济南居民膳食硒摄入量及血清硒含量处于低水平,建议居民适量饮食补硒.
作者:李宁;张征;张宏群;高希宝 刊期: 2009年第06期
目的 探讨舒血宁注射液对高碘致人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株HUECV-304,在培养液中预先加入不同浓度的碘化钾和舒血宁注射液.在碘化钾的终浓度分别为4.0、5.0、6.0、8.0μmol/L组中分别加入浓度为0、2、5、10μl/mL的舒血宁注射液,观测4,8,12和24 h时细胞形态、细胞计数、MTT法测定细胞活性及上清液中SOD的含量.结果 ①在碘浓度5.0μmol/L以上组,4h时可见内皮细胞内有中毒颗粒出现,且随浓度增加和时间延长而增加.加入舒血宁后,碘浓度5.0μmol/L以上组该变化明显减轻,且与时间和剂量相关(P<0.05);②随时间的延长及舒血宁浓度的升高,细胞增殖活性受到抑制的碘浓度相应升高(P<0.05);③SOD含量随碘浓度的升高而升高(P<0.05),加入舒血宁后,SOD含量变化不明显.结论 舒血宁注射液对高碘所引起的内皮细胞损伤有一定的对抗作用,其作用存在时间-剂量效应关系;舒血宁的作用可通过增强细胞的抗氧化作用拮抗高碘的损伤作用.
作者:王晓磊;张海涛;张辉;郭成浩 刊期: 2009年第06期
目的 探讨凝集素受体WGA、RCA和ECL在过量维甲酸(RA)致小鼠腭裂畸形中的作用.方法 以生物素标记的凝集素受体WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和细胞组织化学染色方法检测上述3种凝集素受体在RA致畸鼠胚(实验组)和相应对照组鼠胚腭板上皮及其间充质的分布状况和变化规律.结果 3种凝集素受体在实验组不同发育阶段的小鼠胚胎腭突上皮内的表达量显著低于相应时照组.3种凝集素受体在小鼠胚胎腭板间充质中的表达量在实验组及对照组之间差异无统计学意义.结论 WGA、RCA、ECL 3种凝集素受体在腭板上皮中表达量的下调与RA致昆明小鼠腭裂发生相关.
作者:段淑红;刘凯;尹海燕;赵世斗;刘丰韬 刊期: 2009年第06期
目的 探讨体外原代培养胎鼠大脑皮层神经元NMDAR1(NR1)亚基表达的发育性变化.方法 利用体外原代培养Wistar孕14~15 d胎鼠大脑皮层神经元,采用免疫荧光法鉴定神经元的纯度和NR1亚基在神经元上的定位,采用流式细胞术和免疫印迹法(Western blot)检测不同培养时间神经元NR1亚基的表达情况.结果 体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元纯度均达到90%以上,免疫荧光标记显示NR1亚基主要分布在神经元胞膜及树突干膜上,流式细胞仪检测培养1、2、3、4、6、9、12 d神经元NR1亚基平均荧光强度分别为4.57±0.99、8.18±1.22、13.67±1.99、20.33±1.03、26.30±2.88、31.71±2.47、28.63±1.40,Western blot显示细胞膜蛋白中NR1亚基在1~2d表达微弱,3~6 d表达逐渐增高,6d以后保持稳定.结论 q体外原代培养的胎鼠大脑皮层神经元NR1亚基有发育性变化,这种变化与神经元的成熟度有关.
作者:张道来;孙涛;谢珊珊;王玉卓;赵玲;冯玉新;辛华 刊期: 2009年第06期
目的 研究贴壁培养的神经前体细胞(NPCs)间隙连接蛋白43(Cx43)的表达及酒精时其表达的影响.方法 采用贴壁培养的方法,取孕14d的胎鼠端脑进行NPCs体外培养,经形态学观察和纯度鉴定后,再采用免疫荧光化学方法,观察NPCs中Cx43的表达,利用体外NPCs酒精损伤实验模型,蛋白质免疫印迹技术和刻痕标记/荧光扩散实验,分析酒精对NPCs中Cx43表达及间隙连接功能的影响.结果 原代贴壁培养7 d的细胞NPCs阳性率达86.74%,免疫荧光化学法证实NPCs能表达Cx43,蛋白质免疫印迹实验证实酒精可以减少Cx43的表达,刻痕标记/荧光扩散实验显示酒精对NPCs的间隙连接功能具有抑制作用.结论 原代贴壁培养的NPCs可大量表达Cx43,酒精可以通过降低Cx43表达量抑制间隙连接功能,并且该抑制作用随酒精作用浓度的增加而提高.
作者:孙涛;张道来;谢珊珊;王玉卓;冯玉新;辛华 刊期: 2009年第06期
目的 通过检测VEGF-C、NF-кBp65及Survivin在鼻咽癌组织(实验组)及鼻咽部慢性炎症组织(对照组)中的表达,探讨它们在鼻咽癌发生、发展过程中的作用及相互关系.方法 采用免疫组织化学技术SP法检测VEGF-C、NF-кBp65及Survivin在57例鼻咽癌和20例对照组中的表达情况,并观察其与鼻咽癌的临床病理特征的关系.结果 VEGF-C、NF-кB065及Survivin在鼻咽癌组织的阳性表达率分别为73.68%、61.40%、68.42%,而在对照组中的表达率分别为40.00%、30.00%、20.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05).VEGF-C、NF-кBp65及Survivin的表达与临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05).NF-кBp65的表达与VEGF-C及Survivin的表达呈显著正相关,VEGF-C与Survivin的表达亦呈显著正相关.结论 NF-кBp65可能通过上调VEGF-C及Survivin的表达促进鼻咽癌的发生、发展及颈部淋巴结转移;VEGF-C和Survivin在鼻咽癌的发生发展中存在着协同作用.
作者:黄方;康瑞;吴春林 刊期: 2009年第06期
目的 考察复方烟酸辛伐他汀双层片中缓释层烟酸与速释层辛伐他汀的体外释放度.方法 以国内上市的烟酸缓释片(商品名本悦)作为对照片,用UV法比较了本院自制的复方烟酸辛伐他汀双层片缓释层中烟酸在水、0.1 mol/L盐酸及pH 6.8磷酸盐缓冲液三种介质中的释放情况,同时以含0.5%十二烷基硫酸钠(SLS)的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)为溶出介质,采用眦法测定了速释层中辛伐他汀的释放情况.结果 自制复方烟酸辛伐他汀双层片中烟酸在3、9和16h的累积百分释放度在10%~30%、40%~60%和75%以上,符合规定.复方烟酸辛伐他汀双层自制片和对照片中烟酸的释放曲线均符合Higuchi方程,相关系数大于0.99,相似因子f2值在规定的50~100之内.速释层中辛伐他汀在45min内溶出80%以上.结论 自制复方烟酸辛伐他汀双层片与对照片中烟酸的释放性能相似,辛伐他汀溶出度亦符合要求.
作者:高秀蕊;臧恒昌 刊期: 2009年第06期
目的 构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用.方法 应用互为引物模板法合成两端具有Noel和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段.将所得SAC和已有HA2-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT重组质粒.PER扩增NT4-SAC-HA2-TATcDNA片段,并将其克隆到pGEM-T easy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析.结果 经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SAC cDNA片段,并将NT4-SAC-HA2-TAT亚克隆于pBV220内.结论 成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达栽体pBV220NT4-SAC-HA2-TAT.
作者:张士宝;刘庆勇;阮喜云;陈杰;张建军;李宗武;杨广笑;王全颖 刊期: 2009年第06期