聂向民;王潍;徐群;张世训
目的:利用杆状病毒表达系统在体外表达抑癌蛋白P16,为研究P16蛋白的结构与功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定基础.方法:①利用定向克隆的方法将P16全基因序列插入转移载体pSX-IVVI+X3的EcoRI、Sall位点上,经氨苄青霉素平板初筛、菌落原位杂交、PCR扩增酶切电泳鉴定后,分离含P16的重组转移载体一pSXIVVI+X3.16;②用昆虫杆状病毒TnNPV-SVI-G感染sf9细胞扩增病毒,用PEG法沉淀病毒、酚/氟仿抽提纯化病毒DNA;③CaCl2沉淀法使重组转移载体一pSXIVVI+X3-16和病毒TnNPV-SVI-G DNA共转染sf9细胞.通过多角体观察和PCR法鉴定重组病毒;④经空斑纯化法纯化重组病毒,重组病毒感染草地夜蛾细胞(sf9)使P16大量表达,经SDS-PAGE及Western Blot鉴定所表达的P16蛋白.结果:①筛选出两株含P16全基因的重组转移载体-pSXIVVI+X3-16;②构建了含P16全基因序列的重组杆状病毒TnNPV-p16;③SDS-PAGE电泳显示重组病毒TnNPV-P16感染sf9细胞的培养上清及胞体裂解物和阳性对照Hela细胞裂解物在16kD左右均有蛋白条带,而阴性对照TnNPV-SVI-G感染的sf9细胞培养上清中无此蛋白条带,经免疫印迹染色证实此蛋白为抑癌蛋白P16.结论:利用我国自己构建的昆杆状病毒表达系统成功了表达P16蛋白,分子量大小及特异性与国外报道相同.
作者:张利宁;孙汶生;朱长军;马春红;曹英林;宋静 刊期: 2001年第05期
目的:评价慢性阻塞性肺部疾病(COPD)肺部密度和体积在普通CT双相扫描下的表现.方法:对30例COPD患者与50例健康成人,使用普通CT分别进行了深吸气末和深呼气末两个时相的扫描,在全肺选上、中、下三个区域,测量、计算肺部CT值和肺野体积值,把两组结果作比较.结果:COPD组在深吸气末的CT值与正常组无明显差别,分别为(-901±34)HU和(-886±22)HU,但在深呼气末时则明显低于正常组,分别为(-870±36)HU和(-699±52)HU,呼、吸气之间的差值两组分别为(30±17)HU和(187±47)HU.在呼气CT像上,COPD组肺野体积仅减少17%,小于正常组(40%),提示COPD患者中大多数有气体贮留.结论:COPD患者较正常人有明显的气体贮留,可用普通CT对肺部作双相扫描进行诊断.
作者:刘雁飞;孙树群;陈同刚;杨明;潘纪戌;周诚;宗国军 刊期: 2001年第05期
为研究经食道超声心动图(tansesophageous echocardio-graphy,TEE)作为影像学引导射频导管消融术时大头电极导管到位的可行性,我们以5例健康杂种犬,应用HP-SONOS5500型电脑超声显像系统的经食道超声显像将大头电极导管置放到位.
作者:钟敬泉;张薇;张梅;王填;黎莉;张运 刊期: 2001年第05期
我们采用颈椎前路减压植骨融合术、用进口带锁钢板内固定治疗颈椎外伤骨折、脱位及颈椎病患者17例,现报告如下.
作者:王鲁博;周东生;张佐伦 刊期: 2001年第05期
目的:通过超细纤维支气管镜(UTBF)观察大呼气流量-容积曲线(MEFV)异常患者的外周小气道,了解UTBF直视下小气道病变与MEFV的关系.方法:根据MEFV测定结果将21例患者分为小气道功能正常组(A组)和异常组(N组),用纤维支气管镜(纤支镜)和UTBF观察其大、小气道的病变.依病变程度进行评分.结果:两组大气道病变总分相近,统计学无明显差异;小气道病变总分分别为9.6±1.8和5.5±1.6,有非常显著性差异(P<0.01);将MEFV中50%肺容量时大呼气流速(V5o)、25%肺容量时大呼气流速(V25)与小气道病变UTBF直视评分作相关性分析,r值分别为-0.6843和-0.6472(P<0.05).结论:UTBF所见小气道病变以充血、水肿、分泌物增多等炎症性改变为主,小气道炎症是MEFV异常的主要病理基础;MEFV较好地反映了小气道病变的情况,是临床判断小气道病变的可靠指标.
作者:吴大玮;薛玉文;李玉;刘宝义;王玲;许仁和 刊期: 2001年第05期
目的:探讨E-cadherin(E-cad)、血管内皮生长因子(VEGF)与胃癌临床病理因素的关系.方法:应用免疫组织化学(SP)方法测定胃癌及胃良性病变中E-cad、VEGF表达.结果:胃癌E-cad阳性率10%,低于胃良性病变100%(P<0.001);溃疡型胃癌E-cad阳性率为3.28%,肿块型胃癌为33.33%(P<0.05);淋巴结转移组E-cad阳性率为3.45%,淋巴结阴性组为27.27%(P<0.025);浸润粘膜层组E-cad阳性率为71.43%与浸润肌层组(3.45%)和浸润浆膜层组(4.55%)差别具有统计意义(P<0.001);pTNM分期Ⅰ+Ⅱ期阳性率为21.88%,Ⅲ+Ⅳ期为2.08%(P<0.05);E-cad表达与分化程度、远处转移与否无关.VEGF阳性率胃癌组为75.00%,胃良性病变组为10%(P<0.001);浸润不超过粘膜下层组为42.86%,浸润肌层组为51.72%,浸润浆膜层组为95.45%(P<0.001);有淋巴结转移组为82.76%,无淋巴结转移组为54.56%(P<0.05);伴有远处转移组为100%,不伴有远处转移组为71.10%(P<0.05);pTNM分期I+Ⅱ期为53.13%,Ⅲ+Ⅳ期为89.56%(P<0.001);溃疡型组为81.97%,浸润型组为40.00%(P<0.05).E-cad(-)与VEGF(+)具有显著相关性(P<0.001).E-cad(-)/VEGF(+)联合表达率胃癌组为72.5%,胃良性病变组为0(P<0.001).结论:胃癌中存在E-cad下调与VEGF上调且二者具有相关性,E-cad、VEGF表达与胃癌临床病理因素相关,二者联合测定有利于判断病期及预后.
作者:王天宝;高鹏;曲延刚;陈咸增;李兆亭 刊期: 2001年第05期
目的:通过对乳腺良恶性增生中Cyclin D1蛋白表达的观察,研究Cyclin D1在乳腺良恶性增生中的表达状况及其在早期乳腺癌和良恶性乳腺肿瘤鉴别诊断中的价值.方法:免疫组化LSAB法检测乳腺增生症、乳腺良性肿瘤、早期乳腺癌、乳腺浸润性导管癌中Cyclin D1蛋白表达.结果:Cyclin D1蛋白在乳腺增生症中不表达;在乳腺良性肿瘤中表达率为7.5%;在乳腺恶性增生中表达阳性率为54.0%,其中早期乳腺癌为52.4%,浸润性导管癌为55.0%.Cyclin D1在早期乳腺癌,浸润性导管癌原发灶,腋窝淋巴结转移灶中表达阳性率无显著差异,三者阳性率分别为52.4%,55.0%,53.3%.结论:Cyclin D1的蛋白表达在乳腺的良恶性增生之间的表达差异有显著性,可以应用于早期乳腺癌的辅助诊断.
作者:高鹏;王美清;徐艳峰;李红 刊期: 2001年第05期
目的:从大肠杆菌中获得高活性重组人肿瘤坏死α因子(rhTNF-α),并探索TNF-α与其它细胞因子临床治疗肝癌的合理配伍方案.方法:CaCl2法转化大肠杆菌JM109,温度诱导rhTNF-α收获菌体,裂解后,Western bbt检测表达产物的特异性,薄层分析rhTNF-α表达量,MTT-短程法测定rhTNF-α对L929杀伤作用.以表达的rhTNF-α作用于肝癌细胞株BEL7402和荷瘤鼠(肝癌腹水瘤),验证其对肝癌细胞的体内外抑制作用.采用嵌套设计,MTT-短程法测定rhTNF-α与变异型IL-2对BEL7402的协同抑制作用.结果:Western blot证实pAW711转化JM109后筛得的重组菌表达产物特异性良好,薄层分析表明rhTNF-α表达量可达菌体蛋白的17.8%,MTT-短程法证实表达产物具有良好生物活性,并可在体外明显杀伤肝癌细胞,其杀瘤活性优于标准对照.体内实验证实rhTNF-α可使人肝癌腹水瘤荷瘤鼠生命延长率达31.5%.rhTNF-α与变异型IL-2具有协同抑癌作用,其协同作用具有特殊的剂量依赖性.结论:在大肠杆菌中可获得高活性rhTNF-α,rhTNF-α在体内外均可明显抑制肝癌细胞,变异型IL-2对此有协同作用.
作者:曹英林;马春红;宋静;张利宁;孙汶生 刊期: 2001年第05期
获得性凝血因子Ⅷ(factorⅧ,FⅧ)缺乏导致患者止血、凝血及纤维蛋白溶解等机制的缺陷或异常而引起患者自发性出血或轻微损伤后出血不止,治疗需针对病因治疗并补充足够的凝血因子Ⅷ制剂.现将我中心1989~2000年收治的10例获得性FⅧ报告如下.
作者:丁培芳;王潍;申法奎;张心声;滕彬;张雪芹;张梅红;宋玮 刊期: 2001年第05期
目的:研究蚕蛹油多烯脂肪酸对大鼠体内脂质代谢及多烯脂肪酸代谢的影响.方法:用高脂膳食喂养大鼠建立高脂模型,观察蚕蛹油(富含α-亚麻酸)对大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、HDL-C/TC、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和肝脏中MDA含量的影响.结果:蚕蛹油可以降低大鼠血清中TC及MDA含量,升高HDL-C/TC比值,降低肝组织中MDA含量,并增加大鼠体内EPA和DHA合成.结论:蚕蛹油可增加大鼠体内EPA和DHA的生成,并具有调整血脂、抗脂质过氧化作用.
作者:丁华;张岫美;魏欣冰;祝清芬;邓树海;吴葆杰 刊期: 2001年第05期
目的:观察半导体激光经巩膜睫状体光凝治疗晚期难治性青光眼的效果.方法:对43例(46只眼)晚期难治性青光眼施行半导体激光经巩膜睫状体光凝术.术前眼压4.57~14.53kPa,平均(8.41±2.12)kPa.10~80岁,平均53.4岁.术前视力:30只眼为无光感,另16只眼为光感~0.04.激光参数:功率1.5~2.0W,时间2s,在360°范围击射20~49点,术后追踪随访,记录症状、眼压、视力及并发症.结果:手术性眼痛反应轻,持续2~3h.术后第1天眼压降低26%~80%,平均52%,术后14~30d达低值,14d以后有70%以上的眼压在0.67~2.80kPa.有6只眼因术后眼压仍高于5.33kPa需重复治疗,其中5只眼是新生血管性青光眼.术后眼痛缓解率为100%.并发症主要有虹膜睫状体炎和前房积血.结论:半导体激光睫状体光凝降眼压效果快,眼压控制率和眼痛缓解率高,可作为晚期难治性青光眼的首选治疗方法,但对尚存一定视功能的患者应慎用.
作者:乔智;李维宁;李淑卿;胡萍 刊期: 2001年第05期
目的:探讨格林巴利综合征(GBS)是否存在中枢神经系统脱髓鞘现象.方法:应用酸提法从胎儿大脑白质中提取髓磷脂碱性蛋白(MBP),经Sephdex-G150柱层析纯化和SDS-PAGE圆盘电泳分析,以纯化的MBP为抗原,用EUSA法测了44例GBS患者、38例其他神经疾病(OND)患者和33例正常人.结果:经酸提后的碱蛋白,共有3个洗脱峰;SDS-PAGE证实第三峰中含1.7kD和2.1kD两条区带;GSF-MBP-EgG检测,GBS组阳性率为38.6%(17/44),OND组阳性率为34%(13/38),对照组阳性率为9%(3/33).结论:MBP作为髓鞘的主要蛋白在GBS的自身免疫性脱髓鞘的过程中起重要作用.
作者:黄海南;孟明慧;吴围屏;宋长征;庞海燕;李宝林 刊期: 2001年第05期
醋氯芬酸(Aceclofenac)是一种新的非甾体抗炎药,化学名[邻(2,6-二氯苯胺)苯]乙酰乙酸,临床上用于治疗类风湿性关节炎和术后镇痛等,本文报告我们建立的人血浆中醋氯芬酸的反相高效液相色谱法(HPLC)测定方法[1].
作者:刘岩;刘拥军 刊期: 2001年第05期
目的:评价对老年高度近视并发白内障实施超声乳化及人工晶体植入术的临床疗效.方法:38例(47眼)老年人高度近视并发白内障(60~76岁),施行白内障超声乳化及人工晶体植入术.其中Ⅰ级核5只眼,Ⅱ级核17只眼,Ⅲ级核25只眼.平均眼轴长度27.4mm(26.12~29.4mm),平均人工晶体屈光度(8.47±3.75)D(+2~+15D).结果:术后30d裸眼及矫正视力≥0.3者42只眼(89.4%),并发后囊破裂2只眼(4.3%),轻度角膜水肿11只眼(23.4%).结论:超声乳化及人工晶体植入术适合老年人高度近视并发白内障患者.
作者:许孝义;毛蔚;崔冬梅;李运;肖瑛 刊期: 2001年第05期
视网膜静脉阻塞为常见的眼底血管疾病,眼底荧光血管造影(FFA)能有效检查眼底微循环动态改变,为眼底血管病的诊断、治疗及预后推断提供有价值的资料.今将视网膜静脉阻塞190眼的眼底荧光血管造影总结报告如下.
作者:刘真;郭威;王荣 刊期: 2001年第05期
为探索近年来我国脑血管病的变化趋势,对我科脑血管病住院病人进行了回顾性研究.1 资料和方法山东大学齐鲁医院神经内科1991~1999年脑血管病(CVD)住院患者共3017人.按照时间顺序,对每一年脑卒中患者的年龄、性别、CVD种类、发病因素、影象学检查等资料进行登记和统计学处理,然后分析其变化趋势.所有患者均经CT或MRI检查,保证了诊断的准确性,较真实地反应了CVD的变化趋势.
作者:韩恩吉;陈瑞冬;董衍军 刊期: 2001年第05期
目的:探讨MRI化学位移成像对肾上腺腺瘤的定性诊断价值.方法:对23例肾上腺腺瘤和35例肾上腺其他占位性病变的患者行SE序列T1W、TSE序列T2W和化学位移成像(CSI)序列扫描.肿块直径8~92mm.对手术标本进行病理对照研究和组织成分测定,从肿瘤的微观结构对腺瘤在磁共振化学位移成像上的表现进行了探讨和验证.结果:腺瘤组有20/23(87%)肿物-脾脏信号比(ASR)<0.60,而其他占位性病变ASR均大于0.73.MRCSI序列诊断肾上腺腺瘤的敏感性为87%,特异性为100%.结论:MR化学位移成像对肾上腺腺瘤的定性诊断具有重要价值.
作者:李毅;李传福 刊期: 2001年第05期
目的:探讨ras及c-erbB-2基因在涎腺多形性腺瘤发生发展及恶性转化中的作用.方法:应用免疫组织化学SABC法,观察ras、c-erbB-2在良、恶性涎腺多形性腺瘤及对照组中的表达情况.结果:正常组织的阳性率为0;ras在良性多形性腺瘤(BPA)的阳性率为50.0%,在恶性多形性腺瘤(MPA)为61.5%,均较正常组织显著增加(P<0.0005);c-erbB-2在BPA阳性率为19.2%,在MPA为53.9%,均较正常组织显著升高(P<0.0005),且MPA阳性率较BPA显著升高(P<0.005),复发组阳性率也明显升高.结论:ras过表达对多形性腺瘤的发生起始动作用,c-erbB-2过表达则可促使其进一步发展及恶性转化,并可能是其复发的潜在因素.
作者:郭小玲;孙善珍;魏奉才 刊期: 2001年第05期
周围神经病变是糖尿病常见的并发症之一,其机制为高血糖所致的细胞代谢异常,其中与多元醇代谢途径的激活为密切.为探讨改善糖尿病周围神经病变的治疗方法,我们观察了自制糖神散对糖尿病大鼠空腹血糖(FBG),红细胞中山梨醇(RBCS),运动神经传导速度(MNCV),甩尾反射潜伏期(TFL),胰腺、坐骨神经光镜下的结构影响,报告如下.
作者:杨竞;魏欣冰;丁华;杨进;侯建新;祝清芬;张斌 刊期: 2001年第05期
目的:探讨癌基因与抑癌基因表达与膀胱癌生物学行为的关系.方法:应用免疫组化方法对48例膀胱移行细胞癌中P21、P53、nm23蛋白进行检测.结果:P21、P53、nm23蛋白表达的阳性率分别是58.3%、47.9%、41.7%.P21、P53蛋白表达阳性率与肿瘤分级、分期及复发呈正相关.nm23蛋白表达阳性率与分级呈正相关,与分期及复发呈负相关.77.1%膀胱癌有上述蛋白异常表达,其中47.9%膀胱癌同时有两个或两个以上蛋白表达.结论:癌基因及抑癌基因的异常表达及协同作用,在膀胱癌发生、发展中起重要作用.
作者:刘海南;傅强;张建平 刊期: 2001年第05期