学术投稿

头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗多重耐药菌活性成分及其逆转细菌耐药性作用分析

刘俊;张青艳;杨斐玉;徐国波;周孟;廖尚高

关键词:头花蓼, 内生真菌, 次生代谢产物, 抗耐药菌, 逆转耐药性
摘要:目的:明确头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗菌活性成分,了解活性成分对临床耐药菌的逆转作用.方法:采用体外抗菌活性导向法及现代分离技术对头花蓼内生真菌G.intermedia的发酵物进行活性物质分离,并利用现代MS和NMR等波谱技术鉴定其化合物结构.采用96孔板法测试单体化合物对临床耐药菌的抗菌作用以筛选出活性成分,并在无抗菌作用的浓度下评估活性成分低抑菌浓度(MIC)的影响,了解其逆转耐药菌的作用.结果:从头花蓼内生真菌G.intermedia的活性组分中分离得到6个化合物,分别为镰刀菌酸(1),吲哚-3-乙酸(2),对羟基苯乙酸(3),原儿茶酸(4),邻羟基苯乙酸(5)和对羟基苯甲醛(6).化合物2~6均为从真菌G.intermedia代谢物中首次分离.化合物1对多重耐药大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和奇异变形杆菌的MIC分别为31.3,125,62.5 mg·L-1.且化合物1具有逆转其耐药性的作用,在其1/8 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对临床耐药大肠埃希菌的MIC分别降低4倍和2倍;在其1/4 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对耐药菌奇异变形杆菌的MIC分别降低了2倍和4倍,且对临床耐药金黄色葡萄球菌的MIC值均降低了2倍.结论:镰刀菌酸为头花蓼内生真菌G.intermedia抗耐药菌主要活性成分,并对多重耐药菌大肠埃希菌、奇异变形杆菌和金黄色葡萄球菌具有逆转耐药性作用.该研究为治疗多重耐药菌尿路感染和提高喹诺酮类抗生素在尿路感染中的疗效奠定了基础.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 孔雀草茎、叶化学成分的分离鉴定

    目的:孔雀草Tagetes patula是菊科Asteraceae植物,近代研究发现花中含有大量叶黄素具有抗氧化活性,根中得到的噻吩类衍生物具有抗菌活性,根部甲醇提取物中分得的柠檬酸、苹果酸具有降压活性,该文旨在研究其茎、叶化学成分,揭示其治疗疾病的物质基础.方法:采用95%乙醇,减压回收溶剂得浓缩物,将浓缩物溶于水中,用乙酸乙酯萃取.取乙酸乙酯萃取物,用硅胶柱、开放ODS柱及制备HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质,1H-NMR,13C-NMR等光谱数据进行结构鉴定.结果:从乙酸乙酯萃取部分中分离得到8个化合物,经光谱分析确定其结构分别为丁香脂素4'-O-β-D-葡萄糖苷(1),2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β-D-葡萄糖苷(2),邻苯二甲酸二丁酯(3),万寿菊素(4),β-胡萝卜苷(5),β-谷甾醇(6),4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯基葡萄糖苷(7),1-β-D-吡喃葡萄糖苷-2,6-二甲氧基-4-丙烯基苯酚(8).结论:化合物1,2,3,7,8为首次从孔雀草中分离得到,同时也是首次从万寿菊属植物中分离得到.该研究为综合开发及寻找天然植物性抗炎、抗氧化活性成分提供一定的化学依据和基础.

    作者:于淼;冉小库;窦德强;蔡德成 刊期: 2018年第07期

  • 补肾化痰益智方联合丁苯酞对阿尔茨海默病患者氧化应激、血流变学及认知功能的影响

    目的:探讨补肾化痰益智方联合丁苯酞对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者氧化应激、血流变学及认知功能的影响.方法:2014年3月-2016年4月齐齐哈尔医学院附属第三医院共收治127例AD患者,以该批患者为研究对象,按随机数字表法分为治疗组(63例),对照组(64例).两组患者同时给予丁苯酞软胶囊,在此基础上,治疗组加服补肾化痰益智方,连续治疗3个月后,对两组患者临床疗效,氧化应激、血液流变学与简易智力状态检查法(mini-mental stateexamination,MMSE)量表评分进行比较.结果:治疗组患者总有效率为93.65%,对照组为81.25%,治疗组高于对照组(P<0.05);经治疗,两组AD患者全血高、低切黏度,红细胞聚集指数与红细胞压积均明显降低,且治疗组明显低于对照组(P<0.05);与治疗前比较,治疗后,两组患者超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX-3)及过氧化氢酶(catalase,CAT)均明显提高,丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)明显降低,且治疗组效果明显优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,治疗后两组MMSE评分及记忆力、注意力和计算力、定向力、语言能力、回忆能力均明显改善,且治疗组明显优于对照组(P<0.05).结论:补肾化痰益智方联合丁苯酞可以明显提高AD患者的认知功能,改善患者血液流变学,降低氧化刺激损伤,因此对AD具有积极的治疗效果.

    作者:王澍;张雪;马樱芮;赵吉波 刊期: 2018年第07期

  • 麻元通便止痛汤对慢传输型便秘大鼠肠道推进功能的影响

    目的:探究麻元通便止痛汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道功能、排便量、肠神经递质及水通道蛋白(AQP)的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、麻元通便止痛汤低、中、高剂量组(6,12,18 mg·kg-1)及莫沙必利组;模型组、麻元通便止痛汤组及莫沙必利组采用复方地芬诺酯混悬液10 mg·kg-1 ·d-1灌胃,连续给药14 d,建立STC模型;模型建立后,给药组分别给予相应药物,正常组及模型组给予等体积0.9% NaCl溶液灌胃,连续给药14 d.检测各组大鼠造模前、造模期及治疗期粪便数量及含水量;计算各组大鼠碳末推进率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠结肠组织一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织水通道蛋白1,3,4,8(AQP1,3,4,8)表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量降低(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量升高,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠NO,NOS含量升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠NO,NOS含量降低,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠AQP1,3,4,8表达升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠AQP1,3,4,8表达降低,且呈剂量依赖型(P<0.05).结论:麻元通便止痛汤可改善STC大鼠肠道功能、排便数量及粪便含水量,其机制可能与减少结肠NO,NOS含量及AQP1,3,4,8表达有关.

    作者:谢昌营;吴成成;肖慧荣 刊期: 2018年第07期

  • 桃红四物汤对人脑微血管内皮细胞OGD损伤的保护作用及机制

    目的:通过建立糖氧剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(h-BMECs)损伤模型,观察桃红四物汤对细胞的保护作用及机制.方法:体外建立人脑微血管内皮细胞糖氧剥夺损伤模型,随机分为正常组、模型组、桃红四物汤高、中、低质量浓度组(0.8,0.4,0.2 g·L-1)和阳性药尼莫地平组.噻唑蓝(MTT)比色法检测h-BMECs细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平.结果:桃红四物汤可显著提高拟缺血损伤的人脑微血管内皮细胞活性,降低LDH漏出率(P<0.05,P<0.01),改善细胞形态,降低MDA水平(P<0.05),增强SOD活性(P<0.05,P<0.01).增加内皮细胞VEGF和HIF-α蛋白的表达(P <0.05,P<0.01).结论:桃红四物汤对拟缺血损伤人脑微血管内皮细胞具有保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,通过HIF-α途径增强VEGF表达有关,显示中药组方可发挥整体调节的治疗优势.

    作者:季兆洁;韩岚;吴欢茹;郭栋栋;彭代银 刊期: 2018年第07期

  • 金草消毒颗粒对D-GalN/LPS致小鼠急性肝损伤保护的影响

    目的:研究金草消毒颗粒(JCG,由肿节风、金钱草、白花蛇舌草、大青叶组成)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)所致小鼠肝损伤的保护作用及机制.方法:JCG(1.7,3.4,6.8 g·kg-1)连续给药10 d后,采用腹腔注射给予D-GalN(700 mg·kg-1)和LPS(10 μg·kg-1)建立小鼠肝损伤模型.记录8h小鼠存活率,生化检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),肌酐(CREA),免疫球蛋白G(IgG),免疫球蛋白M(IgM)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织一氧化氮合酶(iNOS),环氧合酶-2(COX-2),磷酸化型核转录因子-κB p65(p-NF-κBp65)的表达,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化.结果:与模型组比较,金草消毒颗粒可提高小鼠存活率,降低血清ALT,AST,TBIL,BUN,CREA,IL-1β,IL-6,TNF-oα水平(P <0.05,P<0.01),显著升高IgG,IgM水平(P <0.05,P<0.01),下调肝组织iNOS,COX-2,p-NF-κB p65表达(P <0.05,P<0.01),肝组织病理性损伤明显减轻.结论:金草消毒颗粒有很好的护肝作用,其机制可能是通过改善肝肾功能,减少促炎症因子水平,增强机体免疫功能,抑制肝组织iNOS,COX-2,p-NF-κB p65细胞因子的表达水平,达到保护肝细胞作用.

    作者:王巍;许立拔;张卓;张宇薇;林彩霞;高玲;巫玲玲;蒋伟哲 刊期: 2018年第07期

  • 川楝素调节丙酮酸激酶M2抑制乳腺癌糖酵解

    目的:观察川楝素对乳腺癌糖酵解的干预及糖酵解相关酶的影响.方法:采用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MCF-7;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察川楝素(0,2.5,5,10,20,40,60,80 μmol·L-)对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,检测10,20,40 μmol·L-1川楝素干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗,乳酸含量,评价川楝素对乳腺癌细胞糖酵解的干预作用;检测乳腺癌细胞中三磷酸腺苷(ATP)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADH)水平,评价乳腺癌细胞能量供应水平;检测己糖激酶2及丙酮酸激酶活性,考察川楝素对糖酵解相关酶活性影响.蛋白免疫印迹法检测川楝素对乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2蛋白表达的调控作用.结果:川楝素对人乳腺癌MDA-MB-231,MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;川楝素可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量(P<0.05),并降低细胞ATP含量(P<0.05),升高NAD+/NADH含量(P<0.05),抑制肿瘤细胞糖酵解水平.此外川楝素可抑制丙酮酸激酶活性,但对己糖激酶2活性无影响,蛋白检测结果表明,川楝素可以下调丙酮酸激酶M2蛋白表达水平(P<0.05).结论:川楝素可以明显抑制乳腺癌细胞增殖,并影响乳腺癌细胞糖酵解水平,其机制与其干预乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2的表达相关.

    作者:王红磊;肖奕;武力;马大昌 刊期: 2018年第07期

  • 头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗多重耐药菌活性成分及其逆转细菌耐药性作用分析

    目的:明确头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗菌活性成分,了解活性成分对临床耐药菌的逆转作用.方法:采用体外抗菌活性导向法及现代分离技术对头花蓼内生真菌G.intermedia的发酵物进行活性物质分离,并利用现代MS和NMR等波谱技术鉴定其化合物结构.采用96孔板法测试单体化合物对临床耐药菌的抗菌作用以筛选出活性成分,并在无抗菌作用的浓度下评估活性成分低抑菌浓度(MIC)的影响,了解其逆转耐药菌的作用.结果:从头花蓼内生真菌G.intermedia的活性组分中分离得到6个化合物,分别为镰刀菌酸(1),吲哚-3-乙酸(2),对羟基苯乙酸(3),原儿茶酸(4),邻羟基苯乙酸(5)和对羟基苯甲醛(6).化合物2~6均为从真菌G.intermedia代谢物中首次分离.化合物1对多重耐药大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和奇异变形杆菌的MIC分别为31.3,125,62.5 mg·L-1.且化合物1具有逆转其耐药性的作用,在其1/8 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对临床耐药大肠埃希菌的MIC分别降低4倍和2倍;在其1/4 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对耐药菌奇异变形杆菌的MIC分别降低了2倍和4倍,且对临床耐药金黄色葡萄球菌的MIC值均降低了2倍.结论:镰刀菌酸为头花蓼内生真菌G.intermedia抗耐药菌主要活性成分,并对多重耐药菌大肠埃希菌、奇异变形杆菌和金黄色葡萄球菌具有逆转耐药性作用.该研究为治疗多重耐药菌尿路感染和提高喹诺酮类抗生素在尿路感染中的疗效奠定了基础.

    作者:刘俊;张青艳;杨斐玉;徐国波;周孟;廖尚高 刊期: 2018年第07期

  • 骨痹方治疗膝骨关节炎肾虚络痹证临床观察

    目的:通过观察骨痹方对肾虚络痹证的膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者的临床疗效,评价其有效性及安全性.方法:本临床观察共纳入肾虚络痹证的KOA患者60例,按随机数字表法分为两组,各30例,治疗组予口服骨痹方,1剂/d,对照组予口服硫酸氨基葡萄糖,0.5g/次,3次/d,疗程均为3个月,观察治疗前和治疗后两组膝关节疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分,西安大略和麦克马斯特大学(WOMAC)骨关节炎指数,中医证候积分,血沉(ESR),C反应蛋白(CRP)等的变化,并比较两组中医证候疗效及疾病疗效差别,同时观察不良反应.结果:中医证候疗效比较,治疗组总有效率是100%,优于对照组的88.3% (P <0.01).疾病疗效比较,治疗组总有效率是100%,优于对照组的76.7% (P <0.01).与本组治疗前比较,治疗后两组患者膝部疼痛,膝部肿胀,膝关节屈伸不利,下肢乏力,腰脊酸痛,畏寒怕冷,VAS评分及WOMAC指数的关节疼痛,功能积分,僵硬积分、总积分均下降(P<0.05,P<0.01).与对照组治疗后相比,治疗组患者膝部疼痛,膝部肿胀,膝关节屈伸不利,腰脊酸痛,畏寒怕冷,VAS评分,WOMAC指数的僵硬积分明显降低(P <0.05,P<0.01),下肢乏力及WOMAC指数的总积分、疼痛、功能积分降低不明显.活动指标比较,与本组治疗前比较,两组治疗后ESR,CRP均有改善(P <0.05,P<0.01),但两组无明显差异.结论:骨痹方可有效控制膝骨关节炎,且无明显不良反应.

    作者:袁芳;何晓瑾;石俊;朱琳;周逸群 刊期: 2018年第07期

  • 龙胆泻肝汤对PCOS模型大鼠的影响

    目的:研究龙胆泻肝汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠药效观察及机制,为龙胆泻肝汤临床PCOS的应用提供初步实验依据.方法:将SD大鼠50只,随机分为2组,即正常组10只、模型制备组40只,采用胰岛素(INS)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法复制大鼠PCOS模型,造模成功的大鼠分为模型组、达英-35(0.21 g·kg-1)及龙胆泻肝汤高、低剂量组(29.6,7.4 g·kg-1),除正常组外,其余各组连续灌胃给药15 d;动物处理后测量卵巢质量及体积大小,检测各组大鼠血清中促黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH),睾酮(T),空腹血糖,空腹胰岛素(INS)激素水平及炎症因子白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析各组卵巢组织中JAK2,STAT3,p-STAT3和IL-6蛋白的表达量.结果:与正常组比较,模型组卵巢质量及体积明显升高,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS均明显升高,IL-2,IL-6,IL-10水平明显升高,JAK2,STAT3和IL-6蛋白的表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,龙胆泻肝汤高、低剂量组明显降低卵巢质量及体积,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS,IL-2,IL-6,IL-10水平,升高JAK2,STAT3蛋白的表达量,降低p-STAT3和IL-6蛋白的表达量(P<0.05).结论:龙胆泻肝汤对PCOS大鼠具有明显疗效,主要通过降低激素水平和抑制炎症反应;且其机制可能与JAK2/STAT3通路相关.

    作者:李俊波;邓芳;李霄汉;许丽绵 刊期: 2018年第07期

  • 扶正、祛邪中药复方对骨髓增生异常综合征骨髓细胞红系转录因子水平调控的表观遗传学机制

    目的:检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs)红系转录因子(GATA-1),组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达水平,分析经HDAC抑制剂(HDACI)伏立诺他(SAHA)、扶正、祛邪中药复方对不同证型MDS患者BMMNCs干预后的HDAC1,GATA-1表达变化,探讨MDS红系转录与表观遗传学组蛋白去乙酰化的可能关联性,以及扶正、祛邪中药对其干预的作用机制.方法:收集确诊MDS患者正虚组10例,瘀毒组5例以及正常组3例BMMNCs进行体外培养.采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测扶正、祛邪药物及SAHA干预前后HDAC1和GATA-1 mRNA和蛋白水平.结果:MDS患者GATA-1 mRNA和蛋白水平均低于正常人(P<0.05),HDAC1mRNA和蛋白水平均高于正常人(P<0.05),正虚型患者与瘀毒型患者间未发现明显差异;经HDACI(SAHA)干预后HADC1水平下降,同时GATA-1水平显著上升(P<0.01),扶正、祛邪中药能上调各组GATA-1表达水平,下调HADC1表达水平(P<0.01).结论:表观遗传学组蛋白乙酰化与红系转录水平异常与MDS发病有关,扶正、祛邪中药对正虚、瘀毒型MDS患者BMMNCs的组蛋白乙酰化和GATA-1表达水平均具有调控作用.在MDS患者的BMMNCs中,HDAC1与GATA-1表达呈负相关趋势,可能存在经HDAC调控红系转录的信号通路,中药具有HDACI类似的干预作用,但扶正、祛邪中药间尚未发现明显差异.

    作者:许鸣;郭元成;任建业;徐白雪;曾庆;胡琦;陆嘉惠 刊期: 2018年第07期

  • 补肾益气化浊通络法对糖尿病肾病小鼠肾脏细胞外基质的影响

    目的:探讨补肾益气化浊通络法对2型糖尿病肾病db/db小鼠肾脏细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响.方法:以具有补肾益气化浊通络作用的科研协定方糖肾康(Tangshenkang,TSK)为研究药物,将100只12周龄SPF级雄性db/db小鼠随机分为5组,模型组,罗格列酮组,糖肾康低、中、高剂量组(4.6,13.8,41.4 g·kg-1),另将20只SPF级SD大鼠设为空白组.各组连续灌胃12周后采血,并留取肾脏组织.全自动生化仪检测甘油三酯(triglycerides,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C),血清胱抑素-C(serum cystatin-C,Cys-C),肌酐清除率(creatinine clearance rate,CCr);免疫组化法检测纤维连接蛋白(fibronectin,FN),层粘连蛋白(laminin,LN),胶原(collagen,Col),α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA),转换生长因子(transforming growth factor,TGF)-β和T细胞群集分化抗原8+(cluster of differentiation 8+,CD8+).结果:治疗后,TSK中、高剂量小鼠体质量明显降低(P<0.01);在第8周,TSK各剂量组小鼠的随机血糖均明显降低,TSK高剂量组降糖效果持续(P <0.05,P<0.01);TSK中、高剂量组TG,TC,LDL-C,Cys-C均明显下降,CCr,HDL-C上升(P<0.05,P<0.01);TSK各剂量组ECM(FN,LN,ColⅢ和ColⅣ),α-SMA,TGF-β和CD8+显著降低(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖性.结论:TSK通过减少α-SMA,TGF-β和CD8+在DN小鼠肾脏的表达,降低DN小鼠体质量,改善血脂代谢及肾功能,降低肾脏组织ECM沉积,减轻了肾小球硬化和肾间质纤维化程度,这可能是补肾益气化浊通络法治疗DN的机制之一.

    作者:史晓伟;张定华;罗向霞;刘怡;裴文丽;张东鹏;李继文;谢卓霖;马如龙 刊期: 2018年第07期

  • 参附注射液对重症急性胰腺炎大鼠心肌的保护作用

    目的:探讨参附注射液治疗重症急性胰腺炎模型大鼠心肌的保护作用.方法:选取雄性SD大鼠60只,随机分为6组,分别为假手术组、模型组、乌司他丁组(2×104 U·kg-1)和参附注射液高、中、低剂量组(3,1.5,0.75 g·kg-1).实验采用逆行胆胰管灌注5%牛磺胆酸钠溶液复制重症急性胰腺炎大鼠模型,造模后3h,分别给予尾静脉注射生理盐水、乌司他丁、不同剂量参附注射液.6h后苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠胰腺及心肌的病理变化,并检测大鼠心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达量.结果:与假手术组比较,模型组的大鼠胰腺、心肌损伤严重,病理评分明显升高(P<0.05),心肌Na+-K+-ATP酶活性明显降低(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,乌司他丁组、参附注射液组的胰腺和心脏病理评分明显降低(P<0.05),参附注射液组大鼠心肌Na*-K+-ATP酶活性明显增加(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显降低(P<0.05).结论:参附注射液可能通过改善心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,减少心肌组织中TNF-α,IL-1β的表达,对心肌起保护作用.

    作者:杨伟钦;李培武;米红;赵迪克;向长勤;陈昫;刘凤斌 刊期: 2018年第07期

  • 不同途径吸入脂多糖致大鼠急性肺炎模型的优选

    目的:平行比较气管滴入、口咽吸入、经鼻滴入与雾化吸入脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺炎模型的病理变化,筛选佳诱导大鼠急性肺炎的造模方法,并对其进行多指标验证.方法:气管滴入LPS组、口咽吸入LPS组、经鼻滴入LPS组、雾化吸入LPS组大鼠造模24 h后,通过病理学观察各组肺组织炎症程度;雾化吸入LPS-1组,LPS-2组,LPS-3组依次造模24,16,8h后,采用无创气道动力学研究系统检测大鼠的肺功能,全自动血液分析仪对支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞进行分类和计数;通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测BALF及肺组织中的白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;病理学观察各组大鼠肺组织的炎症程度.结果:与气管滴入、口咽吸入、经鼻滴入相比,雾化吸入LPS组大鼠肺部损伤程度一致,病理变化表现稳定,组内差异小.雾化吸入LPS多指标检测显示,与阴性组比较,造模后大鼠的呼吸频率(F),潮气量(TV),特殊气道阻力(sRaw)发生显著变化(P<0.01,P<0.05);大鼠雾化LPS后8h时白细胞计数(WBC)增加;16 h时WBC明显增加(P<0.05),嗜中性粒细胞比例也开始增加(P<0.01);24 h时WBC数目显著升高(P<0.01),淋巴细胞所占比例开始显著升高(P<0.05);雾化吸入LPS后8h开始,BALF和组织中炎症因子TNF-α及IL-6的含量均显著升高(P<0.05,P<0.01).结论:雾化吸入LPS所致的大鼠肺部损伤程度一致,病理变化表现稳定,接近于临床急性肺炎的发展情况,有利于筛选治疗急性肺炎的药物.

    作者:张亚平;张广平;苏萍;杨依霏;马梦;马丽娜;侯红平;张钟秀;李晗;高云航;宋玲;宫平;叶祖光 刊期: 2018年第07期

  • 化瘀祛痰方对AS家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响

    目的:探究化瘀祛痰方对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:健康SPF级雄性新西兰白兔90只,随机分为正常组、模型组、化瘀祛痰方高、中、低剂量组(4,8,16 g·kg-1),辛伐他汀组(1.4 mg·kg-1),每组15只.正常组给予基础饲料喂养,其他组采用高脂饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型,造模8周后,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组给予相应药物溶液,正常组和模型组给予等量生理盐水,4周后,全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TC),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝组织形态学改变;分光光度计法检测家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性;Blue-Native-Page技术检测线粒体呼吸链酶复合物含量.结果:与正常组比较,模型组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著升高,HDL-C显著降低;与模型组比较,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著降低,HDL-C显著升高(P <0.05,P<0.01),其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.HE及油红0染色结果显示模型组较正常组比较家兔肝组织肿胀明显、脂肪空泡清晰可见,胞浆内脂滴蓄积明显;与模型组比较,化瘀祛痰高、中、低剂量组及辛伐他丁组脂肪空泡明显减少或消失,肝组织形态恢复或部分恢复正常,其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.与正常组比较,模型组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性及含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性和含量明显升高(P <0.05,P<0.01).结论:化瘀祛痰方可能是通过影响线粒体呼吸链酶复合物的活性及含量减少脂质沉积,防治动脉粥样硬化.

    作者:陈宁;宋囡;贾连群;陈丝;王健;王群;杨关林 刊期: 2018年第07期

  • 三七药材-三七二醇皂苷指纹图谱及其物质群量值传递分析

    目的:建立同时适用于三七药材及其乙醇提取液、树脂洗脱液、三七二醇皂苷(PDS)的HPLC指纹图谱方法,分析PDS制备的主要工艺环节物质群量值传递情况.方法:采用HPLC,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,建立了三七药材及其中间产物,PDS的指纹图谱检测方法;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件对制备过程各关键工艺环节多批次样品进行相似度评价,同时进行物质群的量值传递分析.结果:建立的HPLC指纹图谱方法精密度、重复性和稳定性良好,能有效分离三七药材、中间产物及PDS各组分,标定了12批三七药材的16个共有峰,指认了其中5个主要色谱峰;各批次样品与其相应的对照指纹图谱的相似度均≥0.9;工艺过程较好地去除了药材中三七三醇皂苷类成分,而三七二醇皂苷类药效成分完整传递至PDS.结论:建立的指纹图谱方法稳定可靠,能充分展示三七药材、中间产物及PDS物质群变化及其量值传递情况,为中药新药的开发与应用提供了精准工艺及质量控制研究新模式;现有PDS主要工艺流程科学合理.

    作者:余佳丽;唐晓章;周菲;林美斯;林大胜;邓义红 刊期: 2018年第07期

  • 基于网络药理学与分子对接法预测银杏叶提取物的抗炎机制

    目的:基于分子对接及网络药理学方法研究银杏叶提取物(EGB)抗炎的潜在作用机制.方法:收集文献报道中的抗炎活性靶点,构建EGB的化合物分子数据集.EGB成分的口服利用度及类药性性质通过Canvas 2.3软件进行预测,运用Glide 6.6软件进行分子对接实验,虚拟筛选出EGB抗炎活性成分.以EGB的193种活性成分和34种抗炎靶点蛋白为网络节点构建网络,并基于ClueGO插件对34种抗炎靶点的分子生物学功能和代谢通路进行分析.结果:研究显示筛选的EGB活性分子具有较好的口服吸收利用度和类药性特征.34种抗炎靶蛋白参与了56种代谢信号通路,其中与炎症为密切为五类分子生物学功能和5条代谢通路.结论:综合网络分析结果显示EGB抗炎活性呈现多分子、多靶点和多通路特点,可为阐述EGB的抗炎作用机制研究提供科学依据.

    作者:张立虎;李冬冬;萧伟;王振中;丁岗;赵林果 刊期: 2018年第07期

  • 葛根交泰丸对2型糖尿病大鼠的治疗作用

    目的:观察不同剂量葛根交泰丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠的治疗作用.方法:采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,随机分为正常组(N组),模型组(MOD组),二甲双胍组(MET组),葛根交泰丸高(GJH),中(GJM),低(GJL)剂量(12.15,8.1,4.05 g·kg-1)组;治疗后每周测量大鼠体质量及空腹血糖(FBG),末次给药24 h后收集大鼠血清样本,比较各组大鼠血脂[总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)],血清肝酶[天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT)]活性,血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血尿酸(UA)的差异.结果:与N组比较,MOD组大鼠体质量减轻,FBG,TG,TC,LDL-C,ALT,AST,BUN,SCr,UA均升高,HDL-C降低(P<0.05);与MOD组比较,各治疗组大鼠体质量均增加,FBG,TG,TC,LDL-C下降(P<0.01),MET组,GJH组和GJM组ALT,UA明显下降(P<0.05);与MET组比较,GJH组和GJL组体质量,LDL-C下降(P<0.05),GJL组FBG,ALT,UA均升高(P<0.05),GJM组TC,LDL-C降低(P<0.01);与GJM组比较,GJH组和GJL组体质量降低,FBG,TC,LDL-C均升高(P<0.05),GJL组ALT,UA升高(P<0.01).结论:不同剂量的葛根交泰丸均能明显降低T2DM大鼠的血脂及血糖水平,增加大鼠体质量,抑制ALT表达,降低UA含量,可用于防治T2DM及其并发症.

    作者:李秋霞;吴凝;聂闪闪;姜序吉;王东生 刊期: 2018年第07期

  • 芪玉三龙汤对Wnt信号通路拮抗基因SFRP-2的影响

    目的:探讨中药复方芪玉三龙汤(Qinyu Sanlong decoction)对Wnt(Wingless,Int1的合称)信号通路拮抗基因分泌型Frizzled相关蛋白(SFRP)-2的影响.方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞培养移植法,构建小鼠移植肺癌模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组、芪玉三龙汤组(低、中、高剂量组)、化疗组、联合组、芪玉三龙汤组,小鼠分别按20.12,40.24,80.48 g·kg-1 ·d-灌胃给药,化疗组以顺铂0.4 mL腹腔注射给药(1次/周),联合组以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-1灌胃和腹腔注射顺铂联合给药,模型组以等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,连续给药21 d;称取瘤质量,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织β-链蛋白(β-catenin),SFRP-2蛋白表达.结果:与模型组相比,各用药组均可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1d-1组、联合组下调较明显(P <0.05,P<0.01).与模型组相比,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可上调SFRP-2蛋白表达水平(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01).用药组电镜下可见凋亡现象,以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-组、化疗组及联合组明显.结论:芪玉三龙汤可一定程度抑制肺癌生长,诱导其镜下凋亡,促进SFRP-2表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路.

    作者:张星星;李泽庚;曾时杰;张至强;胡健 刊期: 2018年第07期

  • 近红外光谱技术快速测定醋香附中α-香附酮的含量

    目的:醋香附的含量测定采用挥发油测定法,检测耗时长、操作复杂,且未规定具体有效成分及其含量评价指标.为解决此问题,探索采用先进的检测技术测定醋香附中具体有效成分的含量,结合近红外光谱技术,建立快速、准确的定量分析模型.方法:采用HPLC检测α-香附酮的含量,流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ~ 10 min,30% ~73%A;10~40 min,73% ~76% A;40 ~50 min,76% ~ 30%A),检测波长252 nm;采用近红外光谱仪采集醋香附的近红外光谱图,以醋香附中α-香附酮的HPLC测量值为参考,建立偏小二乘法(PLS)定量分析模型.结果:建立了α-香附酮定量模型,模型的内部交叉验证系数(R2),校正均方差(RMSEC),预测均方差(RMSEP)分别为0.987 5,0.006 2,0.007 2,交叉验证均方差(RMSECV)为0.020 4,经验证模型平均回收率101.33%.结论:该方法检测速度快、预测结果准确,可用于快速测定醋香附中α-香附酮的含量.

    作者:曹庆玺;贾灿潮;黄柳芳;刘喜乐;王东 刊期: 2018年第07期

  • 延胡索干物质累积及氮、磷、钾养分吸收规律

    目的:研究不同产量水平下延胡索干物质累积及其氮、磷、钾养分吸收特点,旨在揭示延胡索养分吸收规律,为延胡索高产栽培和科学施肥提供理论依据.方法:以城固延胡索为试验材料,连续2年在延胡索各生育时期对陕西省城固县8个乡镇106个种植户的样品进行采样分析,测定各器官干物质累积量及氮、磷、钾吸收量.结果:延胡索地上部表现为先增加后降低的趋势,而延胡索地下部则呈直线增加趋势.幼苗期至花期末是地上部旺盛生长阶段,干物质累积较快,占全生育期26.7% ~44.1%.花期末地上部累积量达到高,进入膨大期地上部茎叶开始枯萎及养分转移,干物质累积量有所降低.初花期至膨大期是地下部迅速膨大阶段,其累计量占全生育期50.3%~87.5%;至收获期地下部干物质达到高值,占全株78.5% ~79.8%.延胡索不同生育时期对氮、磷、钾养分吸收量有差异,幼苗期至花期末是地上部养分吸收迅速阶段,于花期末达到峰值,以钾吸收多,氮次之,磷少.初花期至膨大期是地下部对养分吸收高峰期,以吸氮量高,钾次之,磷低.结论:综合延胡索各器官和全株需肥规律及肥料特性,建议该地区栽培延胡索时,应在前期将全部有机肥和磷肥投入土壤中;氮肥和钾肥可以在前期投入总量40% ~ 50%,其余的后期追肥,以保证延胡索正常生长,从而达到延胡索高产.

    作者:王梦苒;王朝辉;郑险峰;黄冬琳 刊期: 2018年第07期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会