学术投稿

基于网络药理学与分子对接法预测银杏叶提取物的抗炎机制

张立虎;李冬冬;萧伟;王振中;丁岗;赵林果

关键词:分子对接, 银杏叶提取物, 靶点, 抗炎机制, 网络药理学
摘要:目的:基于分子对接及网络药理学方法研究银杏叶提取物(EGB)抗炎的潜在作用机制.方法:收集文献报道中的抗炎活性靶点,构建EGB的化合物分子数据集.EGB成分的口服利用度及类药性性质通过Canvas 2.3软件进行预测,运用Glide 6.6软件进行分子对接实验,虚拟筛选出EGB抗炎活性成分.以EGB的193种活性成分和34种抗炎靶点蛋白为网络节点构建网络,并基于ClueGO插件对34种抗炎靶点的分子生物学功能和代谢通路进行分析.结果:研究显示筛选的EGB活性分子具有较好的口服吸收利用度和类药性特征.34种抗炎靶蛋白参与了56种代谢信号通路,其中与炎症为密切为五类分子生物学功能和5条代谢通路.结论:综合网络分析结果显示EGB抗炎活性呈现多分子、多靶点和多通路特点,可为阐述EGB的抗炎作用机制研究提供科学依据.
中国实验方剂学杂志相关文献
  • 芪玉三龙汤对Wnt信号通路拮抗基因SFRP-2的影响

    目的:探讨中药复方芪玉三龙汤(Qinyu Sanlong decoction)对Wnt(Wingless,Int1的合称)信号通路拮抗基因分泌型Frizzled相关蛋白(SFRP)-2的影响.方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞培养移植法,构建小鼠移植肺癌模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组、芪玉三龙汤组(低、中、高剂量组)、化疗组、联合组、芪玉三龙汤组,小鼠分别按20.12,40.24,80.48 g·kg-1 ·d-灌胃给药,化疗组以顺铂0.4 mL腹腔注射给药(1次/周),联合组以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-1灌胃和腹腔注射顺铂联合给药,模型组以等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,连续给药21 d;称取瘤质量,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织β-链蛋白(β-catenin),SFRP-2蛋白表达.结果:与模型组相比,各用药组均可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可下调β-catenin蛋白表达(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1d-1组、联合组下调较明显(P <0.05,P<0.01).与模型组相比,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01);与芪玉三龙汤20.12 g·kg-1 ·d-1组比较,其他各用药组亦可上调SFRP-2蛋白表达水平(P<0.01);与化疗组比较,芪玉三龙汤40.24,80.48 g·kg-1 ·d-1组均可促进SFRP-2蛋白表达(P <0.05,P<0.01).用药组电镜下可见凋亡现象,以芪玉三龙汤80.48 g·kg-1 ·d-组、化疗组及联合组明显.结论:芪玉三龙汤可一定程度抑制肺癌生长,诱导其镜下凋亡,促进SFRP-2表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路.

    作者:张星星;李泽庚;曾时杰;张至强;胡健 刊期: 2018年第07期

  • 龙胆泻肝汤对PCOS模型大鼠的影响

    目的:研究龙胆泻肝汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠药效观察及机制,为龙胆泻肝汤临床PCOS的应用提供初步实验依据.方法:将SD大鼠50只,随机分为2组,即正常组10只、模型制备组40只,采用胰岛素(INS)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法复制大鼠PCOS模型,造模成功的大鼠分为模型组、达英-35(0.21 g·kg-1)及龙胆泻肝汤高、低剂量组(29.6,7.4 g·kg-1),除正常组外,其余各组连续灌胃给药15 d;动物处理后测量卵巢质量及体积大小,检测各组大鼠血清中促黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH),睾酮(T),空腹血糖,空腹胰岛素(INS)激素水平及炎症因子白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析各组卵巢组织中JAK2,STAT3,p-STAT3和IL-6蛋白的表达量.结果:与正常组比较,模型组卵巢质量及体积明显升高,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS均明显升高,IL-2,IL-6,IL-10水平明显升高,JAK2,STAT3和IL-6蛋白的表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,龙胆泻肝汤高、低剂量组明显降低卵巢质量及体积,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS,IL-2,IL-6,IL-10水平,升高JAK2,STAT3蛋白的表达量,降低p-STAT3和IL-6蛋白的表达量(P<0.05).结论:龙胆泻肝汤对PCOS大鼠具有明显疗效,主要通过降低激素水平和抑制炎症反应;且其机制可能与JAK2/STAT3通路相关.

    作者:李俊波;邓芳;李霄汉;许丽绵 刊期: 2018年第07期

  • 孔雀草茎、叶化学成分的分离鉴定

    目的:孔雀草Tagetes patula是菊科Asteraceae植物,近代研究发现花中含有大量叶黄素具有抗氧化活性,根中得到的噻吩类衍生物具有抗菌活性,根部甲醇提取物中分得的柠檬酸、苹果酸具有降压活性,该文旨在研究其茎、叶化学成分,揭示其治疗疾病的物质基础.方法:采用95%乙醇,减压回收溶剂得浓缩物,将浓缩物溶于水中,用乙酸乙酯萃取.取乙酸乙酯萃取物,用硅胶柱、开放ODS柱及制备HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质,1H-NMR,13C-NMR等光谱数据进行结构鉴定.结果:从乙酸乙酯萃取部分中分离得到8个化合物,经光谱分析确定其结构分别为丁香脂素4'-O-β-D-葡萄糖苷(1),2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯基β-D-葡萄糖苷(2),邻苯二甲酸二丁酯(3),万寿菊素(4),β-胡萝卜苷(5),β-谷甾醇(6),4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯基葡萄糖苷(7),1-β-D-吡喃葡萄糖苷-2,6-二甲氧基-4-丙烯基苯酚(8).结论:化合物1,2,3,7,8为首次从孔雀草中分离得到,同时也是首次从万寿菊属植物中分离得到.该研究为综合开发及寻找天然植物性抗炎、抗氧化活性成分提供一定的化学依据和基础.

    作者:于淼;冉小库;窦德强;蔡德成 刊期: 2018年第07期

  • 头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗多重耐药菌活性成分及其逆转细菌耐药性作用分析

    目的:明确头花蓼内生真菌Gibberella intermedia抗菌活性成分,了解活性成分对临床耐药菌的逆转作用.方法:采用体外抗菌活性导向法及现代分离技术对头花蓼内生真菌G.intermedia的发酵物进行活性物质分离,并利用现代MS和NMR等波谱技术鉴定其化合物结构.采用96孔板法测试单体化合物对临床耐药菌的抗菌作用以筛选出活性成分,并在无抗菌作用的浓度下评估活性成分低抑菌浓度(MIC)的影响,了解其逆转耐药菌的作用.结果:从头花蓼内生真菌G.intermedia的活性组分中分离得到6个化合物,分别为镰刀菌酸(1),吲哚-3-乙酸(2),对羟基苯乙酸(3),原儿茶酸(4),邻羟基苯乙酸(5)和对羟基苯甲醛(6).化合物2~6均为从真菌G.intermedia代谢物中首次分离.化合物1对多重耐药大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和奇异变形杆菌的MIC分别为31.3,125,62.5 mg·L-1.且化合物1具有逆转其耐药性的作用,在其1/8 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对临床耐药大肠埃希菌的MIC分别降低4倍和2倍;在其1/4 MIC的浓度下,能使左氧氟沙星和环丙沙星对耐药菌奇异变形杆菌的MIC分别降低了2倍和4倍,且对临床耐药金黄色葡萄球菌的MIC值均降低了2倍.结论:镰刀菌酸为头花蓼内生真菌G.intermedia抗耐药菌主要活性成分,并对多重耐药菌大肠埃希菌、奇异变形杆菌和金黄色葡萄球菌具有逆转耐药性作用.该研究为治疗多重耐药菌尿路感染和提高喹诺酮类抗生素在尿路感染中的疗效奠定了基础.

    作者:刘俊;张青艳;杨斐玉;徐国波;周孟;廖尚高 刊期: 2018年第07期

  • 基于网络药理学与分子对接法预测银杏叶提取物的抗炎机制

    目的:基于分子对接及网络药理学方法研究银杏叶提取物(EGB)抗炎的潜在作用机制.方法:收集文献报道中的抗炎活性靶点,构建EGB的化合物分子数据集.EGB成分的口服利用度及类药性性质通过Canvas 2.3软件进行预测,运用Glide 6.6软件进行分子对接实验,虚拟筛选出EGB抗炎活性成分.以EGB的193种活性成分和34种抗炎靶点蛋白为网络节点构建网络,并基于ClueGO插件对34种抗炎靶点的分子生物学功能和代谢通路进行分析.结果:研究显示筛选的EGB活性分子具有较好的口服吸收利用度和类药性特征.34种抗炎靶蛋白参与了56种代谢信号通路,其中与炎症为密切为五类分子生物学功能和5条代谢通路.结论:综合网络分析结果显示EGB抗炎活性呈现多分子、多靶点和多通路特点,可为阐述EGB的抗炎作用机制研究提供科学依据.

    作者:张立虎;李冬冬;萧伟;王振中;丁岗;赵林果 刊期: 2018年第07期

  • 三七药材-三七二醇皂苷指纹图谱及其物质群量值传递分析

    目的:建立同时适用于三七药材及其乙醇提取液、树脂洗脱液、三七二醇皂苷(PDS)的HPLC指纹图谱方法,分析PDS制备的主要工艺环节物质群量值传递情况.方法:采用HPLC,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,建立了三七药材及其中间产物,PDS的指纹图谱检测方法;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件对制备过程各关键工艺环节多批次样品进行相似度评价,同时进行物质群的量值传递分析.结果:建立的HPLC指纹图谱方法精密度、重复性和稳定性良好,能有效分离三七药材、中间产物及PDS各组分,标定了12批三七药材的16个共有峰,指认了其中5个主要色谱峰;各批次样品与其相应的对照指纹图谱的相似度均≥0.9;工艺过程较好地去除了药材中三七三醇皂苷类成分,而三七二醇皂苷类药效成分完整传递至PDS.结论:建立的指纹图谱方法稳定可靠,能充分展示三七药材、中间产物及PDS物质群变化及其量值传递情况,为中药新药的开发与应用提供了精准工艺及质量控制研究新模式;现有PDS主要工艺流程科学合理.

    作者:余佳丽;唐晓章;周菲;林美斯;林大胜;邓义红 刊期: 2018年第07期

  • 葛根交泰丸对2型糖尿病大鼠的治疗作用

    目的:观察不同剂量葛根交泰丸对2型糖尿病(T2DM)大鼠的治疗作用.方法:采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,随机分为正常组(N组),模型组(MOD组),二甲双胍组(MET组),葛根交泰丸高(GJH),中(GJM),低(GJL)剂量(12.15,8.1,4.05 g·kg-1)组;治疗后每周测量大鼠体质量及空腹血糖(FBG),末次给药24 h后收集大鼠血清样本,比较各组大鼠血脂[总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)],血清肝酶[天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT)]活性,血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血尿酸(UA)的差异.结果:与N组比较,MOD组大鼠体质量减轻,FBG,TG,TC,LDL-C,ALT,AST,BUN,SCr,UA均升高,HDL-C降低(P<0.05);与MOD组比较,各治疗组大鼠体质量均增加,FBG,TG,TC,LDL-C下降(P<0.01),MET组,GJH组和GJM组ALT,UA明显下降(P<0.05);与MET组比较,GJH组和GJL组体质量,LDL-C下降(P<0.05),GJL组FBG,ALT,UA均升高(P<0.05),GJM组TC,LDL-C降低(P<0.01);与GJM组比较,GJH组和GJL组体质量降低,FBG,TC,LDL-C均升高(P<0.05),GJL组ALT,UA升高(P<0.01).结论:不同剂量的葛根交泰丸均能明显降低T2DM大鼠的血脂及血糖水平,增加大鼠体质量,抑制ALT表达,降低UA含量,可用于防治T2DM及其并发症.

    作者:李秋霞;吴凝;聂闪闪;姜序吉;王东生 刊期: 2018年第07期

  • 补肾化痰益智方联合丁苯酞对阿尔茨海默病患者氧化应激、血流变学及认知功能的影响

    目的:探讨补肾化痰益智方联合丁苯酞对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者氧化应激、血流变学及认知功能的影响.方法:2014年3月-2016年4月齐齐哈尔医学院附属第三医院共收治127例AD患者,以该批患者为研究对象,按随机数字表法分为治疗组(63例),对照组(64例).两组患者同时给予丁苯酞软胶囊,在此基础上,治疗组加服补肾化痰益智方,连续治疗3个月后,对两组患者临床疗效,氧化应激、血液流变学与简易智力状态检查法(mini-mental stateexamination,MMSE)量表评分进行比较.结果:治疗组患者总有效率为93.65%,对照组为81.25%,治疗组高于对照组(P<0.05);经治疗,两组AD患者全血高、低切黏度,红细胞聚集指数与红细胞压积均明显降低,且治疗组明显低于对照组(P<0.05);与治疗前比较,治疗后,两组患者超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX-3)及过氧化氢酶(catalase,CAT)均明显提高,丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)明显降低,且治疗组效果明显优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,治疗后两组MMSE评分及记忆力、注意力和计算力、定向力、语言能力、回忆能力均明显改善,且治疗组明显优于对照组(P<0.05).结论:补肾化痰益智方联合丁苯酞可以明显提高AD患者的认知功能,改善患者血液流变学,降低氧化刺激损伤,因此对AD具有积极的治疗效果.

    作者:王澍;张雪;马樱芮;赵吉波 刊期: 2018年第07期

  • 十补丸加味治疗脾肾阳虚型卵巢功能早衰的疗效及作用机制

    目的:探讨十补丸加味治疗脾肾阳虚型卵巢功能早衰(POF)的疗效及对Th17和Treg平衡及其相关细胞因子水平的调整作用.方法:将就诊的POF患者122例,采用区组随机按数字表法分为对照组和观察组各61例.对照组采用雌孕激素序贯疗法,口服戊酸雌二醇片,1 g/次,qd,连续治疗21 d,后10d加黄体酮胶丸,200 mg/次,1次/d.观察组在对照组治疗的基础上内服十补丸加味治疗,1剂/d.两组连续治疗6周.比较两组脾肾阳虚证症状,Kupperman评分、血清中卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E2),黄体生成素(LH)水平及临床疗效.检测两组外周血中Treg和Th17及血清中白细胞介素(IL)-6,IL-21,干扰素(IFN)-γ和转化生长因子(TGF)-β1水平.结果:观察组脾肾阳虚证症状各指标评分均明显低于对照组(P<0.01).治疗后3周和6周,观察组Kupperman评分均明显低于对照组(P<0.01).观察组患者血清FSH和LH水平均低于对照组,E2水平高于对照组(P<0.01).观察组患者临床总有效率为88.33%,高于对照组71.19% (P <0.05).治疗后,观察组外周血Treg水平显著高于对照组,Th17低于对照组(P<0.01).观察组治疗后血清中IL-6,IL-21,IFN-γ水平均明显低于对照组,TGF-β1多于对照组(P<0.01).结论:十补丸加味治疗脾肾阳虚型POF可调整患者激素水平,改善临床症状,可能与调整Treg和Th17平衡及其相关细胞因子水平有关.

    作者:熊晓莉;王巧英;曾晓霞;李兆艾 刊期: 2018年第07期

  • 川楝素调节丙酮酸激酶M2抑制乳腺癌糖酵解

    目的:观察川楝素对乳腺癌糖酵解的干预及糖酵解相关酶的影响.方法:采用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MCF-7;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察川楝素(0,2.5,5,10,20,40,60,80 μmol·L-)对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,检测10,20,40 μmol·L-1川楝素干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗,乳酸含量,评价川楝素对乳腺癌细胞糖酵解的干预作用;检测乳腺癌细胞中三磷酸腺苷(ATP)及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADH)水平,评价乳腺癌细胞能量供应水平;检测己糖激酶2及丙酮酸激酶活性,考察川楝素对糖酵解相关酶活性影响.蛋白免疫印迹法检测川楝素对乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2蛋白表达的调控作用.结果:川楝素对人乳腺癌MDA-MB-231,MCF-7细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性;川楝素可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量(P<0.05),并降低细胞ATP含量(P<0.05),升高NAD+/NADH含量(P<0.05),抑制肿瘤细胞糖酵解水平.此外川楝素可抑制丙酮酸激酶活性,但对己糖激酶2活性无影响,蛋白检测结果表明,川楝素可以下调丙酮酸激酶M2蛋白表达水平(P<0.05).结论:川楝素可以明显抑制乳腺癌细胞增殖,并影响乳腺癌细胞糖酵解水平,其机制与其干预乳腺癌细胞中丙酮酸激酶M2的表达相关.

    作者:王红磊;肖奕;武力;马大昌 刊期: 2018年第07期

  • 水解珍珠蜂蜜液活性成分的网络药理学分析

    目的:采用网络药理学思路和方法研究水解珍珠蜂蜜溶液,通过梳理“药材-化合物靶点-基因-疾病”的互相作用关系,探索其成分-靶点、成分-疾病和疾病-基因的关联性.方法:针对水解液中的有效成分珍珠和蜂蜜的化学活性成分,依据PubMed,TCMSP,STITCH数据库、国家人口健康科学数据共享平台,Gopubmed知识挖掘工具所获得的文献数据知识,试构建出多成分-多靶点网络、多成分-多疾病和疾病-基因网络,运用OMIM,CTD数据库中的呼吸系统相关疾病的基因和靶点数据进行富集分析,采用Cytoscape软件中Bisogenet插件建立疾病基因-蛋白质PPI关联网络模型.结果:对各种网络药理图的分析可以看出,这些化学活性成分可以作用560个靶点,224种不同类型的靶点中包含参与机体的肿瘤新生、血压调节和炎症反应等多种生理和病理过程的PTGS1和PTGS2两种异构酶,组织蛋白酶D(cathepsin D),凝血因子Ⅶ链(coagulation factorⅦ chain),重组人蛋白酪氨酸磷酸酶非受体1(PTPN1),细胞色素P450酶(cytochrome P450-cam,CYPs),氨基丁酸受体亚基-1(gamma-aminobutyric acid receptor subunit alpha-1,GABRA1).结论:水解珍珠蜂蜜溶液有一定的抗炎作用,调节内分泌,收敛生肌作用,可用于治疗反复呼吸道感染,具有良好的应用前景;涉及到192种疾病,根据作者的临床基础,选取呼吸系统疾病的相关基因139个做通路富集分析,得到包含97个通路的通路集,为后续进行药效实验研究提供基础.

    作者:张婷;林江;林湧;李军洋 刊期: 2018年第07期

  • 金草消毒颗粒对D-GalN/LPS致小鼠急性肝损伤保护的影响

    目的:研究金草消毒颗粒(JCG,由肿节风、金钱草、白花蛇舌草、大青叶组成)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)所致小鼠肝损伤的保护作用及机制.方法:JCG(1.7,3.4,6.8 g·kg-1)连续给药10 d后,采用腹腔注射给予D-GalN(700 mg·kg-1)和LPS(10 μg·kg-1)建立小鼠肝损伤模型.记录8h小鼠存活率,生化检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),肌酐(CREA),免疫球蛋白G(IgG),免疫球蛋白M(IgM)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织一氧化氮合酶(iNOS),环氧合酶-2(COX-2),磷酸化型核转录因子-κB p65(p-NF-κBp65)的表达,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化.结果:与模型组比较,金草消毒颗粒可提高小鼠存活率,降低血清ALT,AST,TBIL,BUN,CREA,IL-1β,IL-6,TNF-oα水平(P <0.05,P<0.01),显著升高IgG,IgM水平(P <0.05,P<0.01),下调肝组织iNOS,COX-2,p-NF-κB p65表达(P <0.05,P<0.01),肝组织病理性损伤明显减轻.结论:金草消毒颗粒有很好的护肝作用,其机制可能是通过改善肝肾功能,减少促炎症因子水平,增强机体免疫功能,抑制肝组织iNOS,COX-2,p-NF-κB p65细胞因子的表达水平,达到保护肝细胞作用.

    作者:王巍;许立拔;张卓;张宇薇;林彩霞;高玲;巫玲玲;蒋伟哲 刊期: 2018年第07期

  • 中医药干预冠心病不稳定性心绞痛患者的队列研究

    目的:探讨中医药干预冠心病不稳定性心绞痛患者的临床疗效及其影响因素.方法:采用队列研究设计,住院期间以应用中药注射剂≥7 d为暴露组.随访期间以应用中成药或中药汤剂≥28 d为暴露组.采用病历调查收集患者住院期间的一般资料、中药使用情况及终点事件发生情况.电话随访患者出院至2015年12月31日中药使用情况以及终点事件发生情况.单因素分析采用卡方检验.多因素分析采用多元Logistic回归分析法.结果:住院期间终点事件发生前3位为血运重建(30.93%),心肌梗死(25.77%),脑卒中(18.56%).中医药治疗(OR=2.651),年龄(OR =1.881),抗栓治疗(OR=1.088),抗心肌缺血治疗(OR=1.150),降脂治疗(OR=1.241)是心肌梗死的相关因素.中医药治疗(OR=2.972)是脑卒中的相关因素.随访期间终点事件发生前3位为心血管再入院(11.66%),血运重建(7.13%),脑卒中(3.89%).中医药治疗(OR=1.515),年龄(OR=1.892)是心源性死亡的相关因素.结论:中医药治疗、年龄和性别等是冠心病不稳定性心绞痛患者终点事件发生的相关因素,其中中医药治疗能够减少冠心病不稳定性心绞痛患者住院期间心肌梗死、脑卒中和随访期间心源性死亡的发生.

    作者:高武霖;戴国华;史晓静;赵芳;袁琛皓;毕冬雪 刊期: 2018年第07期

  • 化瘀祛痰方对AS家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响

    目的:探究化瘀祛痰方对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:健康SPF级雄性新西兰白兔90只,随机分为正常组、模型组、化瘀祛痰方高、中、低剂量组(4,8,16 g·kg-1),辛伐他汀组(1.4 mg·kg-1),每组15只.正常组给予基础饲料喂养,其他组采用高脂饲料喂养,建立动脉粥样硬化模型,造模8周后,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组给予相应药物溶液,正常组和模型组给予等量生理盐水,4周后,全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TC),胆固醇(cholesterol,TC),高密度脂蛋白(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C),低密度脂蛋白(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝组织形态学改变;分光光度计法检测家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性;Blue-Native-Page技术检测线粒体呼吸链酶复合物含量.结果:与正常组比较,模型组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著升高,HDL-C显著降低;与模型组比较,化瘀祛痰方高、中、低剂量组与辛伐他汀组家兔血清中TC,TG,LDL-C显著降低,HDL-C显著升高(P <0.05,P<0.01),其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.HE及油红0染色结果显示模型组较正常组比较家兔肝组织肿胀明显、脂肪空泡清晰可见,胞浆内脂滴蓄积明显;与模型组比较,化瘀祛痰高、中、低剂量组及辛伐他丁组脂肪空泡明显减少或消失,肝组织形态恢复或部分恢复正常,其中化瘀祛痰方中以高剂量效果为显著.与正常组比较,模型组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性及含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ活性和含量明显升高(P <0.05,P<0.01).结论:化瘀祛痰方可能是通过影响线粒体呼吸链酶复合物的活性及含量减少脂质沉积,防治动脉粥样硬化.

    作者:陈宁;宋囡;贾连群;陈丝;王健;王群;杨关林 刊期: 2018年第07期

  • 参附注射液对重症急性胰腺炎大鼠心肌的保护作用

    目的:探讨参附注射液治疗重症急性胰腺炎模型大鼠心肌的保护作用.方法:选取雄性SD大鼠60只,随机分为6组,分别为假手术组、模型组、乌司他丁组(2×104 U·kg-1)和参附注射液高、中、低剂量组(3,1.5,0.75 g·kg-1).实验采用逆行胆胰管灌注5%牛磺胆酸钠溶液复制重症急性胰腺炎大鼠模型,造模后3h,分别给予尾静脉注射生理盐水、乌司他丁、不同剂量参附注射液.6h后苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠胰腺及心肌的病理变化,并检测大鼠心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达量.结果:与假手术组比较,模型组的大鼠胰腺、心肌损伤严重,病理评分明显升高(P<0.05),心肌Na+-K+-ATP酶活性明显降低(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,乌司他丁组、参附注射液组的胰腺和心脏病理评分明显降低(P<0.05),参附注射液组大鼠心肌Na*-K+-ATP酶活性明显增加(P<0.05),TNF-α,IL-1β mRNA表达量明显降低(P<0.05).结论:参附注射液可能通过改善心肌细胞Na+-K+-ATP酶活性,减少心肌组织中TNF-α,IL-1β的表达,对心肌起保护作用.

    作者:杨伟钦;李培武;米红;赵迪克;向长勤;陈昫;刘凤斌 刊期: 2018年第07期

  • 腰痛六合散熨疗联合针刺治疗血瘀型腰椎间盘突出症

    目的:观察探讨腰痛六合散熨疗联合针刺治疗腰椎间盘突出症(LDH)血瘀证的疗效,并探讨其可能作用机制.方法:筛选120例收治的血瘀型LDH患者,按数字表法随机分为对照组和治疗组各60例.对照组采用电动牵引床牵引,30 min/次,1次/d;和口服依托考昔片,1片/次,1次/d.治疗组在对照组治疗的基础上给予腰痛六合散熨疗联合针刺疗法.两组疗程均为连续治疗4周.比较两组患者中医血瘀证症状评分,LDH功能障碍,改良日本骨科学会下腰痛评分法(M-JOA)及功能障碍指数问卷表(Oswestry)评分及临床疗效.检测两组患者外周血中Th17水平及血清中白细胞介素(IL)-17,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α,IL-1β,血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平.检测两组治疗前后血液流变学水平.结果:治疗后,治疗组血瘀证症状积分,M-JOA及Oswestry评分与对照组比较,下降均为明显(P<0.01).治疗组临床总有效率为95%,显著高于对照组80% (P <0.05).治疗组治疗后2周和4周,与对照组比较,外周血Th17下降明显(P<0.01).治疗组治疗后,患者血清中IL-17,IL-6,IL-1β,TNF-α,VEGF水平均下降明显(P<0.01).与对照组相比较,治疗组血液流变学指标水平降低更明显(P<0.01).结论:在常规西医治疗的基础上加用腰痛六合散熨疗联合针刺疗法,血瘀型LDH临床疗效优于单纯西医干预,调节体内Th17,从而减少相关细胞因子水平,改善血液局部血液循环,促进患者康复.

    作者:温泽发;牛淑芳;曾令友;潘广华 刊期: 2018年第07期

  • 扶正、祛邪中药复方对骨髓增生异常综合征骨髓细胞红系转录因子水平调控的表观遗传学机制

    目的:检测骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs)红系转录因子(GATA-1),组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达水平,分析经HDAC抑制剂(HDACI)伏立诺他(SAHA)、扶正、祛邪中药复方对不同证型MDS患者BMMNCs干预后的HDAC1,GATA-1表达变化,探讨MDS红系转录与表观遗传学组蛋白去乙酰化的可能关联性,以及扶正、祛邪中药对其干预的作用机制.方法:收集确诊MDS患者正虚组10例,瘀毒组5例以及正常组3例BMMNCs进行体外培养.采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测扶正、祛邪药物及SAHA干预前后HDAC1和GATA-1 mRNA和蛋白水平.结果:MDS患者GATA-1 mRNA和蛋白水平均低于正常人(P<0.05),HDAC1mRNA和蛋白水平均高于正常人(P<0.05),正虚型患者与瘀毒型患者间未发现明显差异;经HDACI(SAHA)干预后HADC1水平下降,同时GATA-1水平显著上升(P<0.01),扶正、祛邪中药能上调各组GATA-1表达水平,下调HADC1表达水平(P<0.01).结论:表观遗传学组蛋白乙酰化与红系转录水平异常与MDS发病有关,扶正、祛邪中药对正虚、瘀毒型MDS患者BMMNCs的组蛋白乙酰化和GATA-1表达水平均具有调控作用.在MDS患者的BMMNCs中,HDAC1与GATA-1表达呈负相关趋势,可能存在经HDAC调控红系转录的信号通路,中药具有HDACI类似的干预作用,但扶正、祛邪中药间尚未发现明显差异.

    作者:许鸣;郭元成;任建业;徐白雪;曾庆;胡琦;陆嘉惠 刊期: 2018年第07期

  • 麻元通便止痛汤对慢传输型便秘大鼠肠道推进功能的影响

    目的:探究麻元通便止痛汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道功能、排便量、肠神经递质及水通道蛋白(AQP)的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、麻元通便止痛汤低、中、高剂量组(6,12,18 mg·kg-1)及莫沙必利组;模型组、麻元通便止痛汤组及莫沙必利组采用复方地芬诺酯混悬液10 mg·kg-1 ·d-1灌胃,连续给药14 d,建立STC模型;模型建立后,给药组分别给予相应药物,正常组及模型组给予等体积0.9% NaCl溶液灌胃,连续给药14 d.检测各组大鼠造模前、造模期及治疗期粪便数量及含水量;计算各组大鼠碳末推进率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠结肠组织一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织水通道蛋白1,3,4,8(AQP1,3,4,8)表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量降低(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量升高,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠NO,NOS含量升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠NO,NOS含量降低,且呈剂量依赖型(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠AQP1,3,4,8表达升高(P<0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠AQP1,3,4,8表达降低,且呈剂量依赖型(P<0.05).结论:麻元通便止痛汤可改善STC大鼠肠道功能、排便数量及粪便含水量,其机制可能与减少结肠NO,NOS含量及AQP1,3,4,8表达有关.

    作者:谢昌营;吴成成;肖慧荣 刊期: 2018年第07期

  • 连翘标准汤剂质量评价体系的建立

    目的:制备连翘标准汤剂并进行其质量标准研究.方法:根据标准汤剂的制备要求,制备16批连翘标准汤剂,以连翘苷、连翘酯苷A作为定量检测指标,计算指标成分转移率与出膏率,建立其HPLC指纹图谱分析方法.结果:通过对16批连翘标准汤剂进行测定,建议连翘标准汤剂出膏率范围13.61% ~25.27%;连翘苷转移率范围58.61% ~100.00%;连翘酯苷A转移率范围27.88% ~51.78%.利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)软件进行指纹图谱分析,标定了共有峰10个,分析确认了6个色谱峰,分别为forsythenside F(3号峰),连翘酯苷Ⅰ(4号峰),(+)松脂醇4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5号峰),连翘酯苷A(6号峰),连翘苷(7号峰)和连翘脂素(10号峰).采用特征峰评价模式,以峰7作为S峰,规定上述6个特征峰与S峰的相对保留时间分别为0.47,0.52,0.67,0.71,1.00,1.27.结论:本研究成功建立了连翘标准汤剂的质量评价方法,该方法准确、重复性好、特征性强,可为连翘配方颗粒的质量控制提供参考.

    作者:曹静亚;李晓;宋梦娇;魏悦;张丽先;李智宁;李自红;陈玲 刊期: 2018年第07期

  • 2015年版《中国药典》中王不留行黄酮苷化学结构修正

    目的:对2015年版《中国药典》收载的中药王不留行的对照品王不留行黄酮苷的化学结构进行修正.方法:采用大孔吸附树脂及硅胶柱色谱对王不留行药材进行化学成分分离,得到化合物1,运用化学方法、高效液相色谱法及紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱等波谱方法进行结构鉴定.并且将该化合物与王不留行黄酮苷对照品(购于中国食品药品检定研究院)进行薄层、高效液相、核磁(一维及二维)和红外等方法进行数据比对分析,结果两者均一致.结果:原王不留行黄酮苷的黄酮母核4'位上连接的葡萄糖,正确连接位置应该在7位上,王不留行黄酮苷的化学结构应该是芹菜素-6-C-[α-L-阿拉伯糖-(1'''→2'')--β-D-葡萄糖]-7-O-β-D-葡萄糖苷.结论:王不留行黄酮苷的化学结构应修改为芹菜素-6-C-[α-L-阿拉伯糖-(1'''→2'')β-D-葡萄糖]-7-O-β-D-葡萄糖苷.该化合物鉴定的关键是4'-OH的信号,在核磁共振氢谱和HMBC谱中是较难得到的,如果要得到明显信号,需要在实验中选择较低的样品浓度,并且以DMSO-d6为溶剂.根据2015年版《中国药典》,王不留行黄酮苷是王不留行药材质量标准的定量成分,所以它的化学结构准确性对于国家法典的权威性而言有较大意义.

    作者:周国洪;许梦莹;张晓;郭日新;于现阔;唐力英;王祝举 刊期: 2018年第07期

中国实验方剂学杂志

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主管:国家中医药管理局

主办:中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会