学术投稿

高分辨率熔解曲线技术检测耐利福平结核杆菌

李燕;邵燕;陈诚;宋红焕;李国莉;陆伟;竺丽梅

关键词:耐利福平, 结核杆菌, 荧光定量PCR-高分辨率熔解曲线技术
摘要:目的 建立1种基于荧光定量PCR扩增原理的联合高分辨率熔解曲线技术(qPCR-HRM),用于耐利福平结核杆菌(RR-TB)的快速检测.方法 选取GenBank中结核杆菌rpoB基因序列(利福平耐药决定域),分别设计2对特异性引物rpoB-1R/F、rpoB-2 R/F扩增rpoB基因的不同片段,构建荧光定量PCR反应体系,加入HRM饱和荧光染料监测扩增产物进行HRM分析.以H37Ra菌株为阴性对照,检测240株临床诊断肺结核培养菌株对利福平(RFP)的耐药性;以传统的药敏实验结果为金标准,对qPCR-HRM法检测RR-TB的灵敏度、特异度、重复性进行评估.结果 qPCR-HRM法检测RR-TB灵敏度为84.8%,特异度为96.5%,批内、批间变异系数均<1%,检测时间为2h以内.结论 qPCR-HRM法检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高、快速易操作,适合在有条件的基层医疗机构进行推广.
江苏预防医学杂志相关文献
  • 2010-2014年芜湖市梅毒和淋病疫情报告及实验室检测现况调查

    目的 了解芜湖市2010-2014年梅毒、淋病疫情变化、影响因素及实验室检测现况.方法 按照《全国性病报告疫情影响因素调查方案》要求,对2010-2014年芜湖市9家医疗机构的梅毒、淋病报告病例和实验室检测情况进行调查和分析.结果 2010-2014年芜湖市梅毒报告发病率从2010年的57.95/10万上升至2014年的77.82/10万(P<0.05),同期淋病报告发病率从2010年的17.79/10万下降至2014年的6.88/10万(P<0.05).以隐性梅毒增长为迅速,年均增幅为19.91%,80.09%的隐性梅毒病例来源于非皮肤科,96.34%的Ⅱ期梅毒来源于皮肤科.被调查机构均开展了两类梅毒血清试验,开展淋球菌涂片革兰染色镜检、淋球菌培养试验和淋球菌核酸检测试验的调查机构数分别为8、7、1个.结论 芜湖市2010-2014年梅毒报告发病率上升而淋病下降,可能与医疗机构对梅毒诊断能力高于淋病有关,淋球菌实验室检测能力有待进一步提高.

    作者:张正红;方艳姣;成国明;张敏;豆正东 刊期: 2017年第02期

  • 江苏某综合医院医务人员针刺伤情况调查

    目的 了解江苏某综合医院医务人员针刺伤发生现状,为预防控制针刺伤提供依据.方法 采用分层随机抽样方法,抽取医生、护士和检验师等3组对象,调查2015-2016年针刺伤情况及相关原因.结果 共有效调查260名医务人员,在过去1年内共发生针刺伤95人(共100例次),发生率为38.5%.护士和检验师针刺伤发生率均为55.0%,医生为19.2%;常见的致伤锐器具为输液针(31.0%)、真空采血针(30.0%)和注射器针头(23.0%),主要发生环节为拔针(26.0%)、处理针头(25.0%)和缝合(13.0%),医生、护士和检验师致伤锐器具和致伤高危环节均不相同.针刺伤后报告率为32.0%;针刺伤局部伤口处理正确率为89.0%.结论 江苏某综合医院医务人员针刺伤发生情况不容忽视.应重点针对高危人群、高危器具以及高危环节采取防范措施,以减少医务人员针刺伤的发生.

    作者:严至文;林冠成;陈诗娴;尤华;唐少文 刊期: 2017年第02期

  • 南京市江宁区公共场所控烟及监管干预分析

    目的 了解江宁区公共场所控烟环境和消费者吸烟现状及控烟态度,为制定控烟措施,开展控烟工作提供依据.方法 抽取各类公共场所进行控烟环境调查,并随机抽取消费者人群进行吸烟现状及控烟态度调查,同时进行为期1个月的控烟监管干预.结果 公共场所禁烟和警示标识率为86.40%,消费者吸烟率为27.66%,对公共场所开展控烟满意的占93.19%,支持公共场所全面禁烟的占72.77%,94.26%的受访者愿意去禁烟或部分禁烟的公共场所消费.干预后各项指标均有明显改善.结论 江宁区消费者控烟态度积极,应进一步开展对未成年人控烟和吸烟危害性的宣传工作.

    作者:杨叶新;张敬圣;陶世龙 刊期: 2017年第02期

  • 成都市PM2.5水平与人群呼吸系统疾病死亡的时间序列研究

    目的 探讨成都市空气PM2.5对人群呼吸系统疾病死亡的影响.方法 收集成都市2013-2015年空气污染物日平均浓度、呼吸系统疾病每日死亡人数及气象因素,采用时间序列的广义相加模型(generalized additive models,GAM),在控制时间的长期趋势、气象因素等混杂因素的基础上,分析PM2.5浓度对人群呼吸系统疾病死亡的影响.结果 单污染物模型中,PM2.5浓度对呼吸系统疾病死亡的效应在滞后1 d(lag1)时大,PM2.5浓度每升高10 μg/m3呼吸系统疾病死亡超额危险度增加0.31%(95%CI:0.10%~0.52%).多污染物模型中,纳入SO2、NO2后,PM2.5浓度对呼吸系统疾病死亡影响消失;纳入O3后,PM2.5浓度升高对呼吸系统疾病死亡影响有所降低,超额危险度为0.27%(95%CI:0.02%~0.47%).结论 成都市PM2.5浓度升高可能与人群呼吸系统疾病死亡增加有关.

    作者:曾婕;刘睿聪;陈剑宇;金立坚;蒋先雁;周亮;张丽 刊期: 2017年第02期

  • 思密达对急性百草枯中毒大鼠肾损伤的保护作用

    目的 研究思密达对急性百草枯中毒大鼠肾损伤的保护作用.方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组,给予50mg/kg百草枯灌胃,制备百草枯中毒模型.分别用200 mg/kg和400 mg/kg思密达进行干预处理,检测肾脏细胞凋亡、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、p53、Bax、Bcl-2和半胱氨酸天冬酶9、3(Caspase 9、3)的变化.结果 与对照组相比,百草枯可使大鼠肾脏MDA含量升高,提高p53和Bax蛋白表达,增强Caspase9,3酶活性,降低SOD酶活性,减少了Bcl-2蛋白表达,使肾脏细胞发生凋亡.进行思密达干预处理后,可显著降低百草枯对肾脏的氧化损伤及凋亡蛋白的表达,降低肾脏细胞凋亡率.结论 思密达可降低百草枯对肾脏的损伤,本研究结果为其临床应用治疗百草枯中毒提供了一定的实验基础.

    作者:王黎明;姚岩;李洲 刊期: 2017年第02期

  • 田鼠巴贝西虫截短型分泌抗原1的原核表达与抗原性鉴定

    目的 对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microti secreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定.方法 通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21 (DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组tBmSA1,使用AKTA进行镍亲和层析纯化,并对纯化的重组tBmSA1进行质谱分析,通过Western Blot和ELISA鉴定重组tBmSA1的抗原性.结果 成功构建了重组质粒pET-30a(+)-tBmSA1,重组tBmSA1得到高效表达和纯化,质谱分析验证了其正确性,Western Blot和ELISA结果显示其具有较好的抗原性.结论 实现了田鼠巴贝西虫tBmSA1的原核高效表达,并验证了其诊断价值,为田鼠巴贝西虫感染诊断奠定了基础.

    作者:姬艺洪;刘静娴;史智扬;宋小凯;李祥瑞;周金林;焦永军 刊期: 2017年第02期

  • 洛阳市某医院2015年收治手足口病病例分析

    目的 了解洛阳市某院2015年收治的手足口病病例特征.方法 采用描述性流行病学方法进行统计分析.结果2015年共收治831例手足口病病例,居该年全院报告法定传染病数首位.重症患者11例,占1.32%,无死亡病例.4-6月为发病高峰期(占70.76%),有明显季节性;男女比为1.29∶1,<5岁组占92.30%;散居儿童占61.01%,幼托儿童占35.50%,学生占3.01%.采集粪便和咽试子标本271份,病毒阳性率为89.30%,其中肠道病毒EV71型阳性率为29.15%,柯萨奇病毒A16型阳性率为9.23%,其他肠道病毒阳性率为50.18%,EV71和Cox A16混合感染2例.结论 在手足口病流行季节,应针对高发人群及早采取控制措施,重点防控.

    作者:李志芳;李华;臧金玲;姚兰兰 刊期: 2017年第02期

  • 急性早幼粒白血病的细胞形态学与免疫表型研究

    目的 研究急性早幼粒白血病细胞(Acute promyelocytic leukemia,APL)形态学和免疫表型的相关性,为进一步提高APL患者诊断率和优化分型提供依据.方法 选取201 5年8月至2016年8月某医院收治的首次确诊为APL的80例患者为研究对象.采用骨髓细胞涂片镜检进行FAB分型,以及流式细胞术(Flow cytometery,FCM)对患者骨髓细胞进行免疫表型分析.结果 80例APL患者经FAB分型,确诊为M3a型47例,M3b型33例.两种亚型患者的Hb、RBC均值均低于正常;M3a型患者的Hb、RBC、BPC、WBC均显著低于M3b型,早幼粒细胞占比显著高于M3b型,差异均有统计学意义(P值均<0.05).CD13、CD33、CD117、CD9、CD34抗原在APL患者中表型均为阳性高表达,M3a型患者中CD9阳性率(68.08%)明显低于M3b型患者(90.09%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 APL患者骨髓细胞免疫表型有一定的特征性,值得进一步深入研究.其中CD9与APL患者FAB分型相关.

    作者:张关亭;王保蜂 刊期: 2017年第02期

  • 一起奇异变形杆菌食物中毒的流行病学调查

    目的 查明一起食物中毒的发生原因,为提出合理建议及防控措施提供参考依据.方法 制定病例定义,进行病例搜索.开展描述性流行病学调查和现场卫生学调查,采集剩余食物等样本进行实验室检测.结果 根据流行病学调查结果和病人临床表现以及实验室检验结果,对照GB14938-1994《食物中毒诊断标准及技术处理总则》、WS/T9-1996《变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则》,判定为一起由奇异变形杆菌污染食品引起的食物中毒事件.结论 建议结合各地实际,出台农村自办家宴食品安全相关制度和管理办法,加强农村食物中毒预防知识的宣传,避免发生类似事件.

    作者:朱蕾 刊期: 2017年第02期

  • 2013-2015年商丘市无偿献血人群健康状况评估

    目的 评估商丘市内无偿献血人群健康状况.方法 收集2013-2015年血液检测结果记录完整的自愿无偿献血者资料,对其ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体(抗-TP)检测结果进行统计分析;从中随机选取献血者3 000人进行问卷调查.结果 2013-2015年商丘市献血人次数逐年减少,不合格率1.61%~1.71%,不同年份差异无统计学意义(P=0.37).其中,ALT不合格率2015年(0.47%)较2013年(0.58%)及2014年(0.56%)下降明显(P=0.04),抗-HIV不合格率2014年(0.18%)及2015年(0.17%)较2013年(0.08%)升高明显(P=0.02);HBsAg和抗-TP不合格率无显著变化;调查的2 966名献血者中,女性献血人数逐年增加,以20~30岁年龄段占比高,<20岁的献血人数逐年增加;教育背景以高中及中专为主,占50%左右;学生、工人、农民在献血人群中比例较高,献血学生逐年增多;献血人群中以多次献血者为主,且比例相对稳定.结论 商丘市无偿献血人群血样合格率较高,献血人群健康状况总体良好,但献血人数持续走低,需加强无偿献血宣传力度.

    作者:李梦秋;马海燕;李玉兰 刊期: 2017年第02期

  • 北京市昌平区2012-2016年肠集聚性黏附大肠埃希氏菌耐药性、毒力基因及分子特征

    目的 了解昌平区肠集聚性黏附大肠埃希氏菌(EAEC)耐药性、毒力基因携带情况及分子特征.方法 对2012-2016年北京市昌平区分离的15株EAEC毒株进行复核;以药敏实验检测菌株对16种抗菌药物的耐药性;以PCR法检测8种毒力的携带情况;采用多位点序列分型(MLST)及脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)进行分子分型分析.结果 15株EAEC耐药率为100.0%,耐多药率为80.0%.每株携带2~5个毒力基因,共有10种毒力基因谱;8个毒力基因阳性率由高到低分别为aap(100.0%)、CVD432(93.3%)、aggA(60.0%)、agg3A(40.0%)、astA(33.3%)、pic(20.0%)、aafA(13.3%),未检出pet阳性.MLST分型分析将15株EAEC菌分为9个ST型,其中有4个新ST型(STcpEC1、STcpEC2、STcpEC3、STcpEC4),以STcpEC1为优势ST型(占33.3%).PFGE分析得到13种PFGE带型,相同ST型菌株PFGE带型、毒力基因相似系数均较高.结论 北京市昌平区近5年EAEC菌耐药率、多重耐药率较高,毒力基因aap、CVD432、aggA检出率高,STcpEC1为优势ST型,PFGE带型具有高度多态性.

    作者:舒高林;李东迅;闻艳红;彭华;徐代庆;吴杨 刊期: 2017年第02期

  • 2013-2015年石家庄市HIV确证结果分析

    目的 分析石家庄市艾滋病确证实验室HIV抗体初筛阳性样本复检和确证实验结果,提高实验室HIV抗体检测能力.方法 对石家庄市2013-2015年HIV抗体初筛阳性的样品,采用ELISA试剂和快诊试剂进行复检,任一复检试验阳性的样本,再用免疫印迹法(WB)进行确证实验.结果 共收集2 684份初筛阳性样本,复检阳性率为65.76%,WB确证阳性率为71.16%.确证HIV-1抗体阳性病例1 256例,以男性为主(占89.49%),主要集中在26~ 45岁(占50.08%),性传播是主要的传播途径(占93.71%),以同性性接触为主(占67.71%).WB带形图多为9条带(占55.33%),全带型和次全带型占96.02%.不确定样本中完成追踪检测51人,有28人转阳,占54.90%.49.97%的复检阳性样品来自医疗机构,35.58%来自疾控中心.送检机构的确证阳性率,由高到低分别为疾控中心(81.69%)、医疗机构(74.72%)、出入境检验机构(34.85%)、采供血机构(32.28%),差异有统计学意义(P<0.05);确证病例来源,主要为术前检测和自愿咨询检测者,分别占37.73%和29.91%.结论 石家庄市HIV确证检阳性率相对稳定,医疗机构主动提供艾滋病检测咨询(PITC)和艾滋病自愿检测(VCT)已逐步成为发现HIV感染者的重要方式.

    作者:王险峰;李峰;刘晓松;刘盼宁;周红;刘丽花;刘淑君 刊期: 2017年第02期

  • 高分辨率熔解曲线技术检测耐利福平结核杆菌

    目的 建立1种基于荧光定量PCR扩增原理的联合高分辨率熔解曲线技术(qPCR-HRM),用于耐利福平结核杆菌(RR-TB)的快速检测.方法 选取GenBank中结核杆菌rpoB基因序列(利福平耐药决定域),分别设计2对特异性引物rpoB-1R/F、rpoB-2 R/F扩增rpoB基因的不同片段,构建荧光定量PCR反应体系,加入HRM饱和荧光染料监测扩增产物进行HRM分析.以H37Ra菌株为阴性对照,检测240株临床诊断肺结核培养菌株对利福平(RFP)的耐药性;以传统的药敏实验结果为金标准,对qPCR-HRM法检测RR-TB的灵敏度、特异度、重复性进行评估.结果 qPCR-HRM法检测RR-TB灵敏度为84.8%,特异度为96.5%,批内、批间变异系数均<1%,检测时间为2h以内.结论 qPCR-HRM法检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高、快速易操作,适合在有条件的基层医疗机构进行推广.

    作者:李燕;邵燕;陈诚;宋红焕;李国莉;陆伟;竺丽梅 刊期: 2017年第02期

  • 2015年宜兴市居民主要死因及期望寿命

    目的 了解宜兴市居民的死亡水平和死因,为制定慢性疾病预防控制措施提供依据.方法 利用死亡率、构成比、期望寿命、去死因期望寿命等指标,对网络直报的全死因监测资料进行分析.结果 2015年,全市粗死亡率为760.18/10万,标化死亡率为357.68/10万,其中男性粗死亡率为845.58/10万,女性粗死亡率为679.90/10万,差异有统计学意义(x2=94.752,P<0.01).期望寿命,全市平均82.21岁,男性80.25岁,女性84.29岁.居民前5位死因分别为肿瘤、循环系统疾病、呼吸系统疾病、损伤和中毒、内分泌营养和代谢疾病.结论 肿瘤、循环系统疾病、呼吸系统疾病、损伤和中毒是危害宜兴市居民健康的主要慢性疾病.

    作者:孙艳;尹立红;杨亚明;徐波;胡静 刊期: 2017年第02期

  • 儿童麻疹和成人麻疹流行病学特点比较

    目的 探究儿童和成人麻疹临床流行病学特点的异同.方法 选取2010年1月至2015年1月经实验室确诊的儿童麻疹和成人麻疹病例为调查对象,对儿童和成人两组麻疹患者的分布、疫苗接种史以及接触史、临床发热、皮疹发生情况等进行比较.结果 发病年龄,儿童麻疹主要集中在0~2岁(占79.4%),成人麻疹较为分散,25~ 35岁占比较大(45.2%);儿童麻疹和成人麻疹患者,男女性别比均为男高于女(分别为1.83∶1和1.93∶1),季节分布均以春夏季为主,城乡差别均城市高于农村;麻疹疫苗接种史,儿童麻疹未接种的占72.5%,成年麻疹未接种的占57.1%;麻疹接触史,儿童麻疹有接触史者的占12.7%,成人麻疹有接触史的占29.3%;均有不同程度发热、皮疹、咳嗽、麻疹黏膜斑、结膜充血等,发生肺炎的比例儿童麻疹远高于成人麻疹.结论 儿童和成人麻疹的发病季节和临床症状基本类似,但在疫苗接种史与接触史及某些并发症上两者存在差异,应结合其特点,采取针对性措施.

    作者:孙冬;张梅光;孙龙;杨跃进 刊期: 2017年第02期

  • 2013-2015年进贤县农村生活饮用水监测结果

    目的 评价进贤县农村生活饮用水卫生状况.方法 按照《生活饮用水卫生标准检验方法》(GB/T5750-2006),持续监测农村生活饮用水水样;按《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)进行水质评价.结果 2013-2015年进贤县水样不合格率分别为31.43%、30.00%、30.00%.微生物学指标不合格是主要因素.结论 进贤县农村生活饮用水水质卫生状况不容乐观,应进行集中供水,提高农村饮水工程运行质量.

    作者:付祥勇 刊期: 2017年第02期

  • 老年2型糖尿病患者认知功能与自我管理行为、自我效能的关系

    目的 探索老年2型糖尿病患者认知功能与自我管理行为、自我效能的关系,为制订延缓糖尿病性认知功能障碍措施提供依据.方法 以社区卫生服务机构管理的老年2型糖尿病患者(年龄>65岁)81例为研究对象,分为干预组(46例)和常规组(35例),使用中国疾病预防控制中心设计问卷进行自我管理行为和自我效能调查,用修订的长谷川智能筛查量表评估患者的认知状况,并进行比较分析.结果 基线时,干预组和常规组在认知功能障碍比例、自我管理行为和自我效能方面的差异均无统计学意义(P值均>0.05).干预后,两组出现认知功能障碍的比例分别是13.0%和42.9%,差异有统计学意义(P=0.002);干预组的患者遵循糖尿病饮食持续天数[(5.9±1.6)d]高于常规组[(4.9±1.9)d],差异有统计学意义(P=0.011);干预组自我效能得分[(107.3±15.1)分]高于常规组[(98.1±18.3)分],差异有统计学意义(P=0.016).以认知功能变化为应变量进行logistic回归分析显示,增加遵循糖尿病饮食天数和增强自我效能可使患者认知功能改善的能力是保持认知功能不变的1.31倍(95%CI:1.02~ 1.68)和1.04倍(95%CI:1.01~1.07).结论 在社区开展老年2型糖尿病人自我管理活动,可防止患者进一步出现认知功能障碍,遵循糖尿病饮食和提高自我效能是保护患者认知功能的有效措施.

    作者:吴雪霁;陈雄飞;吴家刚;刘览;潘冰莹 刊期: 2017年第02期

  • 无锡市惠山区2014-2015年食源性疾病哨点医院主动监测分析

    目的 了解无锡市惠山区食源性疾病流行病学特征.方法 对无锡市惠山区2014-2015年哨点医院收集的疑似食物中毒病例粪便标本,参照《江苏省食源性疾病监测工作手册》(2014版)第七部分“生物样本检验标准操作程序”进行病原分离和鉴定,采用描述性流行病学方法进行分析.结果 306份粪便标本中,总体阳性检出率34.6%,以7-8月为病原阳性检出率高峰(55.7%),3-4月(37.9%)为次高峰,1-2月、11-12月均无阳性病原检出.病原以致泻性大肠埃希菌、副溶血性弧菌、诺如病毒为主;中毒场所主要为家庭(占67.4%)、食物多为果蔬类及肉类制品(占30.4%),病人抗菌药物使用率较高(90.6%).结论 在发病高发季节,应加强病例的主动监测,完善预警平台,规范食源性疾病的诊治和报告程序,以提高其准确性和及时性.

    作者:代传焕;曹军;吴国强 刊期: 2017年第02期

  • 常州市2009-2013年出生儿童b型流感嗜血杆菌疫苗接种情况

    目的 了解常州市b型流感嗜血杆菌(Hib)疫苗接种情况,为疫苗接种策略提供参考.方法 收集常州市2009-2013年出生儿童Hib疫苗接种数据,采用描述流行病学方法进行分析.结果 2009-2013年出生儿童187 300名,Hib疫苗全程(接种≥3剂次)接种率为22.77%,呈逐年下降趋势(P<0.01).不同性别、户籍类型、地区儿童全程接种率差异均有统计学意义(P值均<0.01).结论 常州市Hib疫苗接种率较低,应进一步分析其影响因素,提高Hib疫苗接种率.

    作者:韩长磊 刊期: 2017年第02期

  • 昆山开发区儿保门诊量变动趋势分析及模型预测

    目的 建立儿保门诊量的预测方法和模型.方法 采用SPSS 18.0软件,对辖区内所有社区卫生服务中心2010-2014年的门诊量进行ARIMA模型的建模拟合,对2015年1-7月门诊量进行预测,并与实际值进行比较验证.结果 昆山经济技术开发区门诊量序列图示2010-2014年门诊量随着时间推移,呈现波动上升的趋势;近两年季节分布的规律相似,均以3、4季度门诊量较高.选择ARIMA(1,0,0)模型得到固定R2为0.916,平均绝对误差百分比(MAPE)为16.199,BIC为11.820,残差自相关统计量(Ljung-Box Q)为8.12(df=17,P=0.964),且模型参数具有统计学意义,模型拟合优良.结论 该地儿童保健门诊量变动有一定规律,ARIMA(1,0,0)模型能较好地拟合以往的门诊量序列,可应用此模型进行预测.

    作者:周婧炜;邢星;闵捷 刊期: 2017年第02期

江苏预防医学杂志

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主管:江苏省卫生厅

主办:江苏省疾病预防控制中心 江苏省预防医学会