学术投稿

数字微流控芯片在临床检测中的应用前景

刘芳芳;郑国侠;王云华

关键词:数字微流控芯片, 疾病检测, 即时诊断
摘要:临床检测是疾病诊断中的重要环节之一.传统的临床疾病检测通常依赖检验中心的大型检测设备,不仅检测时间长,还消耗大量的试剂,更因需要采集较多的血液等生物标本而饱受病垢.此外,随着对即时诊断(point-of-care testing,POCT)的需求不断增加,研发能够减少样本量、降低诊疗费用以及加快实验分析速度的仪器成为临床检测领域面临的问题之一[1].微流控芯片能够利用少量样本在短时间内提供检测结果,而且检测灵敏度高、特异性好、操作简单、周期短,成为解决目前问题的优选方案之一[2-3].
中国卫生检验杂志相关文献
  • 一种超薄切片定位捞片技术的建立与应用

    目的 建立针对目标超薄切片的精准展片、捞片方法,以提高透射电子显微镜检测超薄切片的效率.方法 以环氧树脂PON-812、丙烯酸树脂L R White 2种不同类型树脂包埋病毒感染的培养细胞及动物组织样本并进行超薄切片.用定位环套取漂浮在刀槽液面上的目标切片,以限制切片移动,以四氯甲烷气体展片,再以捞片环捞取目标切片,后对切片进行染色及透射电镜观察.结果 通过建立的定位捞片法能够对目标切片进行靶向性隔离、展片,实现超薄切片的靶向性精准捞片.结论 建立了一种针对目标超薄切片进行精准定位捞片的方法.

    作者:佟大伟;王广超;屈建国;洪涛;宋敬东 刊期: 2017年第09期

  • 安徽省首例人感染H5N6禽流感病原检测分析

    目的 对安徽省首例人感染H5 N6禽流感病例相关标本进行实验室检测,为今后禽流感疫情实验室检测和防控提供有效参照.方法 采用荧光实时定量PCR(real-time PCR)反应检测疑似病例和外环境标本以及密切接触者的咽拭子标本,对NA基因片段采用一步法普通RT-PCR技术进行扩增.将阳性外环境标本和疑似病例标本送安徽省疾病预防控制中心流感参比中心实验室复核.结果 疑似病例咽拭子标本经实验室检测为H5N6亚型流感病毒.在13份农贸市场标本中,有2份H5 N6和H9N2亚型混合标本和1份H5 N6标本,5份H9N2亚型标本,1份H7亚型标本,1份H7和H9N2混合标本.其他标本均阴性.结论 经宣城市疾病预防控制中心、安徽省疾病预防控制中心和中国疾病预防控制中心病毒所国家流感中心一致鉴定,该患者为安徽省首例人感染H5 N6高致病性禽流感病例.

    作者:陈晓龙;杨芸;黄志伟;夏志才;王辉;何军 刊期: 2017年第09期

  • β-CTx、P1NP在绝经后女性骨质疏松性骨折风险中的评价作用

    目的 探究骨转换标志物在绝经后女性骨质疏松性骨折风险中的预测价值.方法 2013年6月-2015年6月就诊的1 560例患者中选取51例绝经后骨质疏松性骨折患者为实验组,84例对应年龄段骨质疏松未发生骨折绝经后女性为对照组,分别检测2组各患者血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTx)、Ⅰ型前胶原N端前肽(P1NP)值,同时检测各受试者髋部或脊柱骨密度.通过对2组相关资料进行比较分析,并借助ROC曲线评价β-CTx、P1 NP对骨质疏松性骨折风险的作用.结果 β-CTx、P1NP在2组间比较差异有统计学意义(t值分别为4.32和3.07,P<0.01).β-CTx曲线下面积为0.815,大于P1 NP曲线下面积(0.667),当β-CTx判定阈值为472.97 pg/ml时,灵敏度和特异度相对优.结论 高浓度的β-CTx是绝经后女性患者发生骨质疏松性骨折的重要危险因素,其对骨质疏松性骨折的预测价值更高,当老年女性骨质疏松患者β-CTx达到472.97 pg/ml以上水平时预示高骨折风险.

    作者:王福斌;陈剑明 刊期: 2017年第09期

  • 固相萃取-气质联用法测定蔬菜中氟虫腈和溴虫腈残留

    目的 建立蔬菜中氟虫腈和溴虫腈残留的固相萃取-气相色谱/质谱分析方法.方法 试样经乙腈提取,硫酸镁和氯化钠盐析,通过比较PSA柱、石墨化碳/NH2柱、中性氧化铝柱、QuChERS净化管4种小柱,对蔬菜中氟虫腈和溴虫腈的吸附和净化情况,选取PSA固相萃取柱进行净化,GC-MS测定,外标法定量.结果 该方法在5μg/L ~ 100 μg/L具有良好的线性关系(相关系数均>0.999),氟虫腈和溴虫腈的回收率分别为93.1% ~99.2%和97.4% ~ 100.0%,相对标准偏差(RSD)分别为3.5% ~8.6%、2.8% ~6.1%,检出限为1.0 μg/kg ~ 2.0 μg/kg,定量限为3.0 μg/kg~6.0 μg/kg.应用该方法对90份蔬菜样品进行分析,检出2份阳性样品.结论 该方法的灵敏度、精密度和LOD均符合残留分析要求,具有简便、准确、成本低的特点,适用于蔬菜中氟虫腈和溴虫腈农药残留的检测.

    作者:覃玲;王生;蔡雅清 刊期: 2017年第09期

  • 2011年-2015年商丘市肺炎克雷伯菌临床分布及其耐药性研究

    目的 探讨本院近5年临床分离肺炎克雷伯菌的临床分布及其耐药性特点.方法 收集本院2011年-2015年临床分离的肺炎克雷伯菌,药敏试验采用K-B法,实验结果按照美国临床实验室标准协会(CLSI) 2014年M100-S24标准,数据分析采用WHONET 5.6软件.结果 5年共收集肺炎克雷伯菌非重复菌株2 082株,主要来源于呼吸道、伤口、泌尿系感染患者标本.肺炎克雷伯菌耐药机制复杂,常常多种耐药机制同时存在.产ESBLS是肺炎克雷伯菌耐药的主要机制,5年间检出率为47.8%~ 58.0%;产酶菌株耐药性明显高于非产酶菌株.碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星和左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌仍然保持较好的抗菌活性.结论 肺炎克雷伯菌耐药机制复杂,主要引起呼吸道、伤口和尿路感染;要高度重视重症患者耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的感染,加强其实验室监测和感染控制,严防其在医疗环境中感染的播散.

    作者:张爱荣;许青霞 刊期: 2017年第09期

  • 基于铅诱导核酸适体133DNA链构象转变的铅和氡累积辐射非标记荧光传感检测新方法

    目的 应用核酸适体133DNA和N-甲基中卟啉IX (NMM),建立铅离子和放射性惰性气体氡的非标记荧光传感分析新方法.方法 以核酸适体133DNA为识别探针,以N-甲基中卟啉IX(NMM)为荧光信使,采集氡辐射稳定的子体铅;用Pb“离子诱导单链133DNA发生构象转变,形成稳定的G-四链体.G-四链体与NMM键合,导致体系荧光信号敏锐变化,灵敏检测铅和氡.结果 Pb2离子浓度cPb为5.0 nmol/L~90 nmol/L时,荧光强度改变量(△F)与Pb2离子浓度之间呈现良好的线性关系,△F=1.80cPb (nmol/L)-2.07,r =0.990 9;氡累积浓度cRn为2.O×104 Bq·h/m3~12.0×104 Bq ·h/m3时,△F值与氡累积浓度之间的数学定量模型为△F=7.71cRn+3.00,r =0.996 5.新方法对铅的检出限为1.67 nmol/L,对氡的检出限为1.19×103 Bq·h/m3,低于中国国家标准方法中氡的累积测量的检出限(2.1×103Bq ·h/m3).结论 本方法可以灵敏检测铅和氡,K+离子等干扰小.在氡的采样和检测过程中,避免了辐射危害;氡样品可直接测定,操作简单,成本低廉,拓展了核酸适体对放射性物质和气体的核酸适体荧光传感检测新领域.

    作者:宋春丽;田刚;刘红文;李诗雅;杨桂英;吕昌银 刊期: 2017年第09期

  • 妊娠晚期孕妇无乳链球菌感染与耐药性变迁分析

    目的 对妊娠晚期孕妇生殖道分离的无乳链球菌常用抗菌药物耐药趋势做回顾性分析,为临床预防和治疗感染提供依据.方法 2011年1月-2016年11月待产孕妇生殖道标本分离出的细菌用VITEK 2 Compact分析仪进行鉴定和药敏试验,对红霉素耐药、克林霉素敏感或中介的菌株做D试验.结果 检出586株无乳链球菌,无万古霉素、头孢曲松、利奈唑胺和替加环素耐药菌株;对青霉素、氨苄西林和奎奴普汀/达福普汀高度敏感;对左氧氟沙星、红霉素、克林霉素及四环素平均耐药率分别为38.6%、75.3%、75.9%及85.5%,红霉素和克林霉素耐药率在2012年开始上升较快以后相对平稳,四环素耐药率呈逐年下降趋势;呋喃妥因敏感性较高,耐药率缓慢上升.D试验阳性率为20.4%.结论 青霉素、氨苄西林可作为治疗无乳链球菌感染的首选药物,对青霉素过敏要根据药敏结果选用红霉素和克林霉素,头孢菌素类抗生素可作为二线选择药物,重度感染可选用利奈唑胺、替加环素.

    作者:宋小华;应群华;楼秀敏 刊期: 2017年第09期

  • 不同来源熟肉制品肠杆菌科细菌污染情况分析

    目的 对不同来源熟肉制品肠杆菌科细菌污染情况进行调查分析,为预防和控制食源性疾病暴发和流行提供科学依据.方法 依据GB 4789.4-2010、GB 4789.38-2012和SN/T 0738-1997标准检测不同来源熟肉制品肠杆菌科细菌.结果 检测样品160份,合格69份,合格率为43.1%,共检出肠杆菌科细菌133株,居前2位的分别为肺炎克雷伯菌肺炎亚种和大肠埃希菌.定型包装合格率高于散装,网络食品和超市合格率高于农贸市场和零售店,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 本市熟肉制品被肠杆菌科细菌污染的程度较为严重,监督部门应加强熟肉制品在各个环节的监管力度,规范熟肉制品加工制作卫生行为,减少食源性疾病的发生,从而保障本市人民的饮食卫生和生命安全.

    作者:李毅;胡玉琴;洪程基;谢爱蓉;上官智慧 刊期: 2017年第09期

  • 中性粒细胞/淋巴细胞比率和血小板/淋巴细胞比率对急性肺栓塞患者短期死亡率预测作用研究

    目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞比率(NLR)和血小板/淋巴细胞比率(PLR),对急性肺栓塞患者短期死亡率的预测作用.方法 收集188例上海闵行区中心医院2013年1月-2015年12月的急性肺栓塞患者诊断记录,采用多元风险模型检测NLR、PLR对急性肺栓塞死亡率的预测作用,并使用受试者工作特征曲线(ROC曲线)进行评估.结果 共有144例患者符合本研究标准,其中13例在入院30 d内死亡.死亡患者存在4周以上的制动史,有较低的收缩压、舒张压,血氧饱和度较低,伴随着高心率、高呼吸频率、lgBNP和C-反应蛋白显著升高,同时NLR以及PLR比例也升高明显.PLR、NLR以及二者结合(PLR-NLR)3个指标的AUC值分别为0.752、0.758、0.750.结论 NLR、PLR对肺栓塞患者短期死亡率具有独立预测作用,NLR、PLR可以指导肺栓塞严重程度分级并进一步指导肺栓塞临床治疗.

    作者:凌美蓉;刘梅;朱旻婕;潘飞;孙克玉 刊期: 2017年第09期

  • 杭州地区育龄妇女和新生儿TORCH的检测结果分析

    目的 探讨TORCH抗体检测的临床意义.方法 用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)检测血清中的特异性抗弓形虫IgM/IgG抗体(TOX-IgM/IgG)、抗风疹病毒IgM/IgG抗体(RV-IgM/IgG)、抗巨细胞病毒IgM/IgG抗体(CMV-IgM/IgG),检测抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型IgM/IgG抗体(HSV Ⅰ/Ⅱ-IgM/IgG),分析感染率.结果 与育龄妇女相比,新生儿的TOX、RV、CMV的IgM抗体阳性率均降低,差异有统计学意义(P<0.05),其余2项差异无统计学意义.新生儿的RV-IgG阳性率低于育龄妇女,差异有统计学意义(P<0.01),其余4项差异无统计学意义(P>0.05).结论 TORCH的筛查对做好优生优育工作、提高出生人口素质具有重要意义.

    作者:梁宇;马琳娜 刊期: 2017年第09期

  • 果蔬样品中诺如病毒快速检测方法的研究

    目的 建立果蔬样品表面诺如病毒快速有效的检测方法,评价酸吸附-碱洗脱-PEG沉淀法对果蔬样品表面诺如病毒分离富集的适用性,为诺如病毒疫情的控制和食源性疾病的溯源提供可靠的实验室依据.方法 在北京地区采集草莓样品,采用酸吸附-碱洗脱-PEG方法分离富集样品表面病毒颗粒,设计GⅠ和GⅡ的特异性引物和探针,以实时定量RT-PCR法检测病毒核酸.同时优化病毒提取方法,以Mengo病毒做为过程控制对照,制作不同浓度的标准曲线,计算病毒回收率.结果 酸吸附-碱洗脱-PEG法病毒回收率为2.36%,符合病毒检测回收率的要求,与其他食源性病毒没有交叉反应,能够应用于日常检测.结论 酸吸附-碱洗脱-PEG方法病毒回收率较高,灵敏度和重复性较好,进一步优化后可以应用于果蔬样品的日常检测.

    作者:张寻;陈倩 刊期: 2017年第09期

  • 化妆品中香料的安全性及检验技术研究进展

    香料,包括天然香料和合成香料,是指从带香物质中提取或以人工合成方法得到的致香物质的总称[1].因具有使产品清新自然、气味芬芳的功能,广泛存在于日常生活用品中,包括香精、清洁剂、调味品等,更成为化妆品中极其重要的组成部分.然而随着香料的广泛应用,其带来的安全问题也逐渐显现.本研究从含香料化妆品在使用过程中可能引发的安全性问题出发,同时介绍了香料相关评价机构和法规,并对化妆品、香精和其他呈香物质中常用的香料检验方法进行了总结.

    作者:刘思然;朱英 刊期: 2017年第09期

  • 胎膜早破孕妇阴道病原菌感染与耐药性探讨

    目的 通过对胎膜早破孕妇患者阴道病原菌感染以及耐药性分析,为临床上合理性用药以及控制感染提供理论依据.方法 回顾性分析5 138例胎膜早破孕妇患者的所有临床资料,进行常规性菌群与支原体培养以及衣原体的分析.结果 5 138例胎膜早破孕妇患者中检出阳性1 734例(易感率为33.7%);病原学阳性结果支原体培养为1 283例(占25.0%),衣原体测定为143例(占2.8%),细菌为941株(占18.3%),常见病原菌主要是革兰阴性菌329株(占35.0%),以大肠埃希菌为主;革兰阳性菌358株(占38.0%),以β-溶血性链球菌、肠球菌、溶血性葡萄球菌等为主;真菌254株(占27.0%),以白色念珠菌为主.常见的支原体、病原菌耐药性均较高.结论 因胎膜早破孕妇患者常见的病原菌耐药性均较高,临床应依据药敏试验结果合理性用药.

    作者:李刚;王振勇;杨胜 刊期: 2017年第09期

  • 一种复方醋酸氯已定-乙醇消毒剂性能的研究

    目的 研究一种以醋酸氯己定和乙醇复配的消毒剂的消毒性能.方法 用理化测定方法、消毒性能检测方法,对该复方消毒剂的性能进行检测.结果 含醋酸氯己定600 mg/L、乙醇11.23%的复方消毒液作用2 min;含醋酸氯己定450 mg/L、乙醇8.43%的复方消毒液作用2 min;含醋酸氯己定780 mg/L、乙醇14.60%的复方消毒液作用2 min,分别对悬液内金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的杀灭对数值>5.00;含醋酸氯己定780 mg/L、乙醇14.60%的复方消毒液作用1 min,对悬液内白色念珠菌的杀灭对数值>4.00.消毒剂原液作用1 min对手和皮肤的自然菌杀灭对数值> 1.00.结论 该复方消毒剂储存性能稳定,原液和一定浓度的稀释液均对指标菌的细菌繁殖体和真菌有较好的杀菌作用,对皮肤和手上自然菌的杀菌效果均可以达到标准的要求.

    作者:王嵬;孙巍;王玲;吴晓松;王晓蕾;张伟 刊期: 2017年第09期

  • 2013年-2015年广州市水体及水产品霍乱弧菌监测分析

    目的 了解广州市2013年-2015年霍乱弧菌在外环境水体及水产品中的污染状况,为制定防控策略提供科学依据.方法 2013年-2015年每月均采集广州市水体和水产品样本进行霍乱弧菌培养,对分离得到的阳性菌株进行血清分型、荧光定量PCR检测毒力基因、K-B法药敏试验.结果 2013年-2015年共检测样品l 440份,分离出霍乱弧菌37株,总阳性检出率为2.57%.其中外环境水体监测阳性率为3.61%,水产品监测阳性率为1.53%,蛙类阳性率高为21.05%.阳性菌株的优势血清型为O1群稻叶型,从水体中检出1株肠毒素阳性.药敏结果显示,对环丙沙星、诺氟沙星、头孢曲松、头孢噻肟未产生耐药.结论 广州市水体及水产品存在霍乱弧菌,应加强监测力度,及时了解其污染状况,以便采取有针对性措施预防和控制霍乱的发生和流行.

    作者:伍业健;张欣强;和鹏;张晶;吴新伟;白志军 刊期: 2017年第09期

  • 呼吸道感染儿童肺炎支原体抗体检测结果分析

    目的 了解呼吸道感染儿童中肺炎支原体(MP)感染情况,为临床早期诊断和治疗提供可靠依据.方法 采用胶体金法检测2 428例患儿血清中MP-IgM抗体,同时做其他相关实验室检查.结果 2 428例儿童的血清标本中检出MP-IgM抗体阳性535例,阳性率为22.03%,其中男童阳性率为21.05%,女童阳性率为23.19%,男女患儿之间阳性率差异无统计学意义(x2=3.84,P >0.05).四季均可检出呼吸道感染患儿MP-IgM抗体,其中冬季阳性率高(28.07%),秋季次之(24.92%).随着年龄的增长阳性率呈逐渐上升趋势,7岁~14岁儿童阳性率高(36.96%).结论 胶体金法检测血清MP-IgM抗体操作简单,具有较高的敏感性和特异性,与血常规等联合检测有利于MP的早期诊断,本地区学龄前及学龄儿童为高危人群,临床应加强对MP的监控.

    作者:石月萍 刊期: 2017年第09期

  • 医院血流感染主要细菌谱的分析

    血流感染是一种严重的全身感染性疾病,血流感染的发病率较高,常导致患者死亡.据报道,美国每年有65万~75万人死于脓毒症.有学者通过对美国400家急诊中心的调查显示,约2.8%的急诊患者因怀疑存在血流感染而需要做血培养[1],血培养仍是目前诊断细菌性血流感染的金标准.

    作者:肖美英;王亚玲;王社梁 刊期: 2017年第09期

  • 肺癌患者化疗后肺部感染病原菌及耐药分析

    目的 探讨肺癌患者化疗后肺部感染病原菌的分布和耐药性情况.方法 回顾性分析2014年1月-2016年6月,焦作市第二人民医院161例肺癌化疗后肺部感染患者的临床资料和微生物检查报告,利用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 肺癌化疗后肺部感染患者分离出病原菌211株.其中革兰阴性杆菌共118株,占比55.93%,以肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌为主;真菌共48株,占比22.75%,以白色念珠菌和热带念珠菌为主;革兰阳性菌共45株,占比21.32%,以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主.结论 肺癌患者化疗后肺部感染病原菌以革兰阴性菌和真菌为主,病原菌对临床常用抗菌药物耐药率较高,临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物.

    作者:杨桂强;刘文超;刘滋润 刊期: 2017年第09期

  • 2013年-2016年湖州市禽流感外环境监测结果分析

    目的 了解2013年-2016年湖州市禽类环境中禽流感病毒污染情况,评估人感染禽流感风险.方法 采集禽类饮用水等环境标本,采用荧光RT-PCR对标本进行甲型流感病毒核酸检测,阳性标本再检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸.结果 2013年-2016年共采集并检测各类环境标本5 867份,甲型流感病毒总阳性率为38.5%,检出的禽流感病毒型别以H7亚型为主(占23.6%).流感病毒检测阳性率高峰呈现于冬春季节;且阳性率较高的分别为城乡活禽市场(77.8%)、家禽屠宰厂(69.5%)、清洗禽类污水(67.9%)和禽肉案板表面拭物(57.1%).结论 湖州市禽类环境中禽流感病毒污染较为严重,且型别多样,存在人感染禽流感病毒的风险,应加强禽类环境中禽流感病毒实时监测.

    作者:徐德顺;严伟;查赘峰 刊期: 2017年第09期

  • 嗜肺军团菌微滴式数字PCR检测方法的建立

    目的 建立嗜肺军团菌微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,qPCR)技术进行比较.方法 针对嗜肺军团菌mip基因设计引物和探针,验证其特异性后,用于ddPCR和qPCR.优化ddPCR的退火温度、引物、探针浓度后,比较ddPCR和qPCR灵敏度和重复性,并对模拟样品进行检测.结果 用5株非嗜肺军团菌测试特异性,结果表明具有良好的特异性.ddPCR与qPCR对DNA模板的检测限一致(42.6 fg),模拟样品检出限为300 cfu/ml,ddPCR的线性相关系数(0.999)略优于qPCR(0.982),ddPCR检测的RSD(0.78% ~ 14.06%)均高于qPCR(0.30%~1.98%).结论 微滴式数字PCR方法灵敏度高、特异性强,可用于嗜肺军团菌检测,且可以对基因进行绝对定量.

    作者:于纪棉;李如松;倪健波;魏姣姣;高峰;王建峰 刊期: 2017年第09期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会