学术投稿

外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中的作用

刘洋;李方去;蒋伟燕;杨爱平;杨锦红;王金文;张颖;赵飞;李向阳

关键词:多重耐药铜绿假单胞菌, 外排泵MexAB-OprM, 氨基糖苷类, 喹诺酮类, 碳酰氰化物间-氯苯基腙, RT-PCR
摘要:目的:探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)的耐药机制及其耐药性与外排泵表达水平关系.方法:PCR法对30株铜绿假单胞菌进行MexB基因检测;采用实时荧光定量PCR的方法检测MexAB-OprM的mRNA相对表达水平;对多重耐药铜绿假单胞菌采用琼脂对倍稀释法进行外排泵抑制剂的抑制试验,观察抗菌药物的MIC变化.结果:联合外排泵抑制剂后,庆大霉素(GEN)和环丙沙星(CIP)MIC值与之前相比大部分有2个折点的变化,有4株Mea的MIC值有4个折点以上的变化,但总体耐药率差异无统计学意义(P>0.05);30株多重耐药Pa株中,均存在外排泵MexAB-OprM的高表达,多重耐药菌组外排泵表达量达敏感组的36.5倍.当外排泵抑制剂CCCP浓度为7.5 μg/ml时,庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)、四环素(TET)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间有着显著性的差异(P<0.05),而头孢噻肟(CTX)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间无显著性的差异(P>0.05).结论:外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株中起着十分莺要的作用,MexAB-OprM的高表达与多重耐药Pa菌庆大霉素、环丙沙星的耐药性有着密切关系,可能起着基础性耐药作用,但其对头孢噻肟的耐药性影响较小.其高表达还与庆大霉素、环丙沙星、四环素的耐药有着直接的量的关系,具体机制有待进一步的研究.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 胰岛素对多囊卵巢综合征患者雄激素产生的影响

    目的:探讨胰岛素水平在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的变化及其对PCOS患者雄激素产生的影响.方法:用化学发光酶免疫分析法、放射免疫分析法对32例PCOS患者和30例正常对照(排卵正常,无怀孕妇女)血清中胰岛素(In)、血糖(Glu)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、睾酮(T)进行检测.结果:根据胰岛素抵抗指数(IR),将32例PCOS患者分成胰岛素抵抗组(PCOS-IR)和非胰岛素抵抗组(PCOS-NIR).PCOS-IR组血清中胰岛素水平高于PCOS-NIR组(P<0.05),且PCOS-IR组的胰岛素水平与睾酮呈正相关(r=0.87,P<0.05).结论:胰岛素对PCOS-IR患者雄激素的产生具有一定影响.

    作者:王彩虹;丁鸿燕 刊期: 2010年第04期

  • 外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中的作用

    目的:探讨铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)的耐药机制及其耐药性与外排泵表达水平关系.方法:PCR法对30株铜绿假单胞菌进行MexB基因检测;采用实时荧光定量PCR的方法检测MexAB-OprM的mRNA相对表达水平;对多重耐药铜绿假单胞菌采用琼脂对倍稀释法进行外排泵抑制剂的抑制试验,观察抗菌药物的MIC变化.结果:联合外排泵抑制剂后,庆大霉素(GEN)和环丙沙星(CIP)MIC值与之前相比大部分有2个折点的变化,有4株Mea的MIC值有4个折点以上的变化,但总体耐药率差异无统计学意义(P>0.05);30株多重耐药Pa株中,均存在外排泵MexAB-OprM的高表达,多重耐药菌组外排泵表达量达敏感组的36.5倍.当外排泵抑制剂CCCP浓度为7.5 μg/ml时,庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)、四环素(TET)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间有着显著性的差异(P<0.05),而头孢噻肟(CTX)MIC值不变或增加的菌株(≥1MIC组)与MIC值减小的菌株(≤1/2MIC组)的外排泵相对表达量之间无显著性的差异(P>0.05).结论:外排泵MexAB-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株中起着十分莺要的作用,MexAB-OprM的高表达与多重耐药Pa菌庆大霉素、环丙沙星的耐药性有着密切关系,可能起着基础性耐药作用,但其对头孢噻肟的耐药性影响较小.其高表达还与庆大霉素、环丙沙星、四环素的耐药有着直接的量的关系,具体机制有待进一步的研究.

    作者:刘洋;李方去;蒋伟燕;杨爱平;杨锦红;王金文;张颖;赵飞;李向阳 刊期: 2010年第04期

  • 嵊泗列岛县5814份市售食品卫生抽检结果分析

    目的:为了追踪观察嵊泗县市售食品卫生质量,了解生产加工食品与销售食品的质量差异.方法:运用统计学χ2显著性检验方法[1],对嵊泗县2004~2008年间17类食品卫生质量的随机抽检结果进行分析.结果:共监测食品样品17类5814件,检验合格5127件,抽样总合格率为88.18%;其中销售食品17类2888件,合格率为91.90%;生产加工食品12类2926件,合格率为84.52%.12类销售类食品质量显著高于同类生产加工类食品(χ2=42.92,P<0.01);其中销售类的冷冻饮品、饮料和糕点质量高于生产加工类(χ2=11.98,59.46,9.06;P<0.01);生产加工类水产品质量显著高于销售类水产品质量(χ2=28.17,P<0.001).结论:要进一步提高食品卫生质量,卫生执法部门有必要进一步加大卫生监督执法力度和深度.

    作者:倪惠君 刊期: 2010年第04期

  • 一起亚硝酸盐食物中毒的调查与思考

    2009年7月21日,宁波市江北区宁波大学双桥一川菜馆发生一起食物中毒事件,报告后,我们立即组织人员分赴急诊科和现场进行调查.根据现场流行病学调查,病人临床表现及实验室检查,证实是因食用亚硝酸盐含量超标的牛肉引起食物中毒,现将调查结果报告如下:

    作者:乌杰 刊期: 2010年第04期

  • 从食物中毒的剩余食物中检出伤寒沙门菌

    目的:为快速查找食物中毒原因,并预防类似食物性疾病的再次发生.方法:分别对13份剩余食物样品进行食源性致病菌检测.结果:在糯米糖饭和凉拌胡豆中分离出的可疑菌株为伤寒沙门菌.结论:根据临床症状及实验室分析,本次食物中毒是食用受到伤寒沙门菌污染的食物而引起的细菌性食物中毒.

    作者:刘惠虹 刊期: 2010年第04期

  • 荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A方法研究

    目的:建立快速、灵敏、特异地检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.方法:以SEA基因作为肠毒素A的检测靶序列,设计荧光定量PCR引物和Taqman探针,优化反应体系的主要成分浓度和循环条件,评价方法的灵敏度、特异性和重复性,并对22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌进行肠毒素A的检测.结果:建立金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.25 μl荧光定量PCR反应体系主要成分浓度分别为Mg2+7.0 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.4 μmol/L,探针0.7 μmol/L,TaqDNA聚合酶2.5U.方法可检出低45个拷贝的细菌DNA,特异性和重复性良好.从22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌中检出肠毒素A阳性菌株6株.结论:荧光定量PCR可快速、准确的检出金黄色葡萄球菌的肠毒索A,能为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据.

    作者:刘渠;廖灵灵;徐亚军;李涌 刊期: 2010年第04期

  • 云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶基因进化及分子结构特征分析

    目的:禽流感病毒神经氨酸酶(NA)是病毒粒子重要表面抗原之一,其抗原性差异决定病毒神经氨酸酶亚型(N1-N9)的划分.NA介导病毒对敏感细胞的侵染及协助子代病毒粒子的成熟和释放,与病毒的宿主嗜性及毒力有关.方法:对2003~2009年期间采集自云南境外家禽的H5N1亚型阳性样品中病毒NA基因进行测序,并与国内外已知代表毒株进行序列比对及系统发育分析.认识云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶(NA)基因分子结构特征.结果:21份代表性病毒样品NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于94.3%~99.3%、93.1%~99.3%.系统发育分析表明可划分为6个不同进化(亚)分支(1、7、9、2.4、2.3.2、2.3.4).其中进化亚分支2.3.4毒株已成为当前云南境外流行的优势毒株;所有云南境外毒株NA蛋白的49-68位氨基酸均存在缺失.结论:糖基化位点存在特有变异;云南境外毒株对Oseltamivir(达菲)类抗病毒药物可能无耐药性.

    作者:董波;张文东;宋建领;赵焕云;叶丛华;田建国;吕粤;岳亮;邱薇;冯子良;张思东;苑述友;范泉水;张应国;张富强 刊期: 2010年第04期

  • 广州白云国际机场首例输入性甲型H1N1流感病例的实验室检测

    目的:检测广州白云国际机场口岸输入性甲型H1N1流感病例.方法:采集机场口岸发热患者的咽拭子样本,使用美国CDC公布和实验室自研的荧光RT-PCR以及RT-PCR方法进行检测.结果:InfA、SWInfA、SWH1以及MP、NP、NA和HA的荧光RT-PCR结果均为阳性.咽拭子样本的RT-PCR扩增显示,7对引物均有预期大小的扩增条带产生.结论:该病例经实验室检测,为广州机场口岸首例输入性甲型H1N1流感病例.

    作者:师永霞;洪烨;幸芦琴;郑夔;李小波;黄吉城;相大鹏;郭波旋 刊期: 2010年第04期

  • 广西北部湾海域产牡蛎中创伤弧菌污染监测调查

    目的:了解广西北部湾海域产牡蛎中创伤弧菌污染状况.方法:采用3%氯化钠碱性蛋白胨水增菌,纤维二糖-多粘菌素E(CC)琼脂分离牡蛎中的创伤弧菌,可疑菌落的鉴定采用生化试验或PCR法.采用可能数(MPN)法检测牡蛎中创伤弧菌污染水平.结果:广西北部湾海域产牡蛎中创伤弧菌的检出率为32.50%(13/40),平均菌浓度为75.06 MPN/g,低于低检出限3 MPN/g的牡蛎样品占67.50%(27/40).牡蛎中创伤弧菌的污染水平存在季节性差异.结论:应加强对广西北部湾海域产牡蛎中创伤弧菌污染状况的监测,尤其是夏秋季节.

    作者:李秀桂;蒋震羚;黄彦;王红;吕素玲;程国强 刊期: 2010年第04期

  • 吹扫捕集-气相色谱法测定水中苯系物研究

    目的:建立水中苯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、乙苯、苯乙烯8种苯系物的吹扫捕集-气相色谱测定方法.方法:用氮气将水中苯系物吹出,并捕集在吸附管内,加热吸附管,解析出的组分进入气相色谱仪分离测定,外标法定量.结果:8种苯系物在相应的试验浓度范围内均具有良好的线性关系,其相关系数均大于0.9990,低检出限为0.0002 mg/L,平均回收率在90.2%~105.6%之间,RSD均小于5.0%.结论:该法具有简单、快速、准确、灵敏、无污染等优点,适合水中苯系物含量的检测.

    作者:姚浔平;李继革;姚珊珊 刊期: 2010年第04期

  • 171对不育症夫妇支原体检测结果分析

    目的:探讨支原体在夫妻间通过性接触的传染性、致病性以及对男性生精功能的影响.方法:对不育症的夫妇双方进行阴道分泌物检验、精液分析及支原体培养.结果:双方均检出支原体24.6%,均未检出40.3%,男或女单方检出35.1%;男女双方支原体阳性组与阴性组的精液WBC异常、白带清洁度异常检出率无统计学意义(P>0.05);支原体阳性组与阴性组的各项精液分析指标无显著性差异(P>0.05).结论:支原体在夫妻间通过性接触的传染性较低,与生殖或泌尿道感染无相关性,通常不引起精液质量的降低.

    作者:陶红;朱卫中 刊期: 2010年第04期

  • 从哨点流感样病例监测咽拭子中检出甲型H1N1病毒核酸

    目的:进行流感病毒核酸检测以发现不同型别的流感患者,为临床治疗和预防控制提供依据.方法:哨点医院患者的咽拭子标本,先采用RT-PCR方法检测流感病毒核酸A、B及季节性H1、H3,A未分型的采用real-time RTPCR方法检测甲型H1N1病毒核酸.结果:从哨点医院的流感样病例14份咽拭子标本中的5份A未分型的标本中用real-time RT-PCR方法检测出甲型H1N1病毒核酸特异性扩增曲线.结论:检出甲型H1N1病毒核酸确诊一例甲型H1N1流感病例.应加大监测检测力度,防止疫情扩散.

    作者:张清杰 刊期: 2010年第04期

  • 生化检验质量控制

    随着现代医学的飞速发展,检验科的地位显得越来越重要,特别是生化检验.如何进一步提高生化检验质量,保证生化检验结果的准确性,并将其纳入标准化、科学化的统一管理轨道,已成为检验工作者急需思考和解决的主要课题之一.

    作者:刘凤春;齐春华 刊期: 2010年第04期

  • Leifson细菌鞭毛染色法的改良

    目的:探索对Leifson细菌鞭毛染色方法的改进.方法:对染液、菌液、涂片、固定、染色、冲洗等操作进行改进.结果:菌体呈深红色,鞭毛呈浅红色,镜检涂片视野背景清晰,染色效果好.结论:改进方法简便、操作性好、实用性强.

    作者:万滋衡;梁莹 刊期: 2010年第04期

  • 52株肺炎链球菌临床分离株耐药情况分析

    目的:调查临床分离肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药状态,为临床用药提供依据.方法:2007~2008年间52株临床分离肺炎链球菌经VITKE-AMS-60全自动细菌鉴定仪GPI卡鉴定后,采用琼脂稀释法测定低抑菌浓度.结果:52株肺炎链球菌中,青霉素不敏感菌株32株,占61.5%,对头孢噻肟、头孢曲松有较好的敏感性,耐药率仅为21.2%和5.8%,而对头孢呋辛的耐药率则达50.0%.对红霉素、阿奇霉素、克林霉素高度耐药,均达92.3%,氯霉素的耐药率为15.4%,而对万古霉素和左氧氟沙星呈现高敏感性,敏感率分别达100%和98.1%.并且青霉素耐药菌株呈现多重耐药性比青霉素敏感株明显.结论:临床分离肺炎链球菌对万古霉素、左氧氟沙星敏感性高,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛以及氯霉素比较敏感,对青霉素耐药率比较严重,而对红霉素、阿奇霉素和克林霉素普遍耐药.

    作者:徐丽慧;王贤军;王敏敏;董晓勤 刊期: 2010年第04期

  • HBsAg阴性出国劳务人员血清HBV-DNA检测结果分析

    目的:探讨HBsAg阴性出国劳务人员血清HBV-DNA存在情况.方法:回顾性分析2009年1月~2009年6月590例经检测HBsAg阴性出国劳务人员的血清HBV-DNA检查资料.结果:590例HBsAg阴性出国劳务人员中,血清标本HBV-DNA阳性率4.9%(29/590);以HBeAb、HBcAb阳性模式人群血清HBV-DNA阳性率高,达20.3%,HBV全阴性的出国劳务人员血清中HBV-DNA阳性率为2.5%.结论:HBsAg阴性人群有相当大的一部分人血液中存在乙型肝炎病毒(HBV),HBV-DNA检测对减少漏诊,正确评价HBV感染尤为重要.

    作者:陈峰;吴尔翔;何学明;邵亚平 刊期: 2010年第04期

  • 胶体金法检测甲型流感病毒抗原中的迟缓反应

    二○○九年由于甲型流感疫情的发生,我们在甲型流感疫情防控工作中,用贵州省黔南州疾病预防控制中心配发的甲型流感病毒检测试剂盒(胶体金法)对流感病例进行采样检测,该胶体金法因其快速、简便、结果直观而被广泛应用.

    作者:王国洪;王红梅;彭金红;李平;奚启帅 刊期: 2010年第04期

  • 气相色谱法测定番茄酱中啶虫脒残留量

    目的:建立气相色谱法测定番茄酱中啶虫脒残留量的分析方法.方法:样品经乙腈提取,盐析,弗罗里硅土固相萃取柱净化,气相色谱测定,基质匹配外标法定量.结果:在0.05~2 mg/kg的范围内线性良好(r>0.99),在0.1~0.5 mg/kg的添加水平范围内,平均回收率为90%~104%,相对标准偏差(RSD)为5.2%~9.2%,检出限(LOD)为0.02 mg/kg,测定低限(LOQ)为0.05 mg/kg.结论:结果表明:该方法快速、灵敏、准确、耐用,适合番茄酱中啶虫脒残留量的测定.

    作者:李锋格;姚伟琴;朱慧萍;李欣;李炎;胡建民;沈梦圆 刊期: 2010年第04期

  • 一起副溶血性弧菌引起的食物中毒病原学分析

    目的:通过流行病学调查和实验室病原学检测,进一步了解本次食物中毒的原因.方法:参照GB/T 4789-2008,WS 271-2007,WS287-2008,WS/T 9-1996方法[1],分别对剩余食物,食物加工环节涂抹物及粪便肛拭进行病原学检测.结果:采集26份标本,其中4份剩余食物标本中检出副溶血性弧菌2株,20份粪便肛拭标本中检出副溶血性弧菌5株,2份食物加工环节涂抹物未检出副溶血性弧菌,检出率为29%.

    作者:高克勇;何剑锋;叶金奶 刊期: 2010年第04期

  • 维生素E有效改善实验性慢性胰腺炎的病理形态

    目的:观察维生素E对实验性慢性胰腺炎的生化和病理形态影响.方法:SD大鼠共分6组,即模型组、维生素E组和各种对照组(乙醇对照组,含10%乙醇PBS胰管内注射;NS对照组,等体积Ns胰管内注射;假手术组,假手术,胰管内没有注射;正常对照组,没有手术的正常大鼠);维生素E组每日400 mg/kg体重灌胃,其余各组等体积生理盐水灌胃,治疗4周.处死大鼠后检测血浆维生素E和过氧化脂质水平、HE和胶原纤维染色观察胰腺病理改变.结果:血浆维生素E浓度在维生素E组明显高于模型组和各对照组(P<0.05),模型组与各对照组的差异没有统计学意义(P>0.05).血浆过氧化脂质在维生素E组明显低于模型组和各对照组(P<0.05),而各对照组又明显低于模型组(P<0.05).模型组大鼠胰腺腺泡细胞坏死、局灶萎缩、小叶内和小叶间广泛纤维化、伴炎症细胞浸润,符合人类慢性胰腺炎的病理特征.大鼠胰腺纤维化、腺泡萎缩和炎症细胞浸润在维生素E组明显减轻(P<0.05).结论:维生素E可以有效改善慢性胰腺炎大鼠的病理形态,缓解胰腺纤维化程度,提高血维生素E水平,降低过氧化脂质.

    作者:宋燕华;夏勇;傅剑云;董向毅;杜勤;陆新良 刊期: 2010年第04期

中国卫生检验杂志

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