刘渠;廖灵灵;徐亚军;李涌
卫生检验工作是疾病预防控制中心基本职能的一部分.多年来,卫生防疫的各项工作,不论是疾病预防控制工作还是卫生监督管理工作的开展都要以卫生检验所提供的科学数据为行动指导,卫生检验不仅为疾病预防及卫生监督提供基础的数据资料,而且卫生检验技术的发展和提高更进一步促进了各项工作走向规范化与标准化.
作者:方赤光;刘思洁 刊期: 2010年第04期
痰液的细菌培养是检测呼吸道感染病原菌的主要手段,在临床广泛应用,但由于普遍采用自然咳痰法,痰液标本的质量难以保证;其次呼吸道病原菌繁多和致病机理的复杂;以及临床医生的先用药后培养的不规范操作导致细菌培养不出等等原因,使实验室承受了很大的压力.
作者:倪淑芳;周炜栋;尚智 刊期: 2010年第04期
本文讨论了近年来离子色谱在食品分析中的发展,可以看到离子色谱分析物的范围不断扩大,样品介质日益复杂,对传统分析物的研究进一步深入;分离、检测手段不断丰富;样品前处理手段的相应改进;标准分析方法的逐步建立和分析目的的进一步多样化的发展趋势.
作者:陈芳;龙军标;周金森 刊期: 2010年第04期
目的:探讨抗角质蛋白抗体(AKA)和类风湿因子(RF)检测在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的临床意义.方法:收集来自门诊及住院类风湿关节炎患者静脉血清56例,采用间接免疫荧光法检测抗角质蛋白抗体,用免疫浊度法测定类风湿因子.结果:56例类风湿性关节炎患者中,AKA、RF的阳性率分别为44%、64%,特异性分别是97.0%、82.4%,两种指标间的灵敏性和特异性均存在显著性差异(P<0.05).结论:抗角质蛋白抗体对类风湿性关节炎诊断具有较高的特异性,类风湿因子对类风湿性关节炎有较高的敏感性,二者联合检测弥补了单一检测对类风湿关节炎诊断的不足,因此两者结合对类风湿关节炎更具较高的确诊价值.
作者:王梅芳 刊期: 2010年第04期
2009年7月16日南阳市宛城区汉冢乡黄姑街发生了一起食物中毒.35人就餐,15人发病.经流行病学调查,临床表现,实验室诊断,证实本次食物中毒由蜡样芽胞杆菌感染所引起.
作者:包伟华;兰中伟 刊期: 2010年第04期
目的:降低精炼植物油核酸检测的假阴性率,提高检测准确度.方法:以来源于不同油料作物的植物油为材料,比较不同长度及不同拷贝数的扩增目标片段对精炼食用植物油PCR检测结果的影响.结果:在14个精炼食用植物油样品中,10个样品检出RBCL基因的150 bp片段,5个样品检出RBCL基因的433 bp片段,10个样品检出atpF-atpH基因的115 bp片段,所有样品都未检出atpF-atpH基因的658 bp片段.在7个大豆来源的样品中,多拷贝的叶绿体RBCL及atpF-atpH基因分别在4个和3个样品中被检出,而单拷贝的Lectin基因片段只在1个样品中被检出.对于5个玉米来源的样品,也得到类似结果.结论:对于精炼植物油,植物叶绿体RBCL及atpF-atpH基因的200 bp以下片段的扩增阳性率明显高于200bp以上长片段;多拷贝目标片段的扩增阳性率明显高于单拷贝或少拷贝目标片段的扩增阳性率,PCR抑制质控的设置可有效降低精炼植物油核酸检测的假阴性率.
作者:杨冬燕;邓汉超;杨永存;张海龙;林建荣;邓平建 刊期: 2010年第04期
目的:研究含朱砂中药制剂中可溶性汞盐,测定含量并进行安全性评价.方法:通过处方分析、提取方法及检测方法筛查,并根据可溶性汞盐的化学性质,选用微波消解-原子荧光光度法检测含朱砂中药制剂中可溶性汞盐的含量,光电倍增管负压为300 v,原子化器温度为200℃,A通道灯电流为80 mA,还原剂为0.5%氢氧化钠+0.75%硼氢化钾,载流为3%硝酸.并根据样品检测结果及朱砂的日摄取量制定合理限度,完善质量标准中的安全性检查.结果:在0.8-4.0 μg/L的范围内线性良好(r>0.999),检出限为0.1073 μg/L.平均回收率(n=6)为91.33%,RSD为3.36%.结论:本法简便、灵敏、准确,可用于含朱砂中药制剂中可溶性汞盐的测定,评价药品安全性,完善质量标准.
作者:张映娜;李旸华;曾丽玲;林秋凤;雷柳冰 刊期: 2010年第04期
目的:建立乳制品中合成色素胭脂红、柠檬黄、日落黄、亮蓝的高效液相色谱测定方法.方法:使用冰乙酸作沉淀剂,溶液过盛有聚酰胺粉的G3垂融漏斗抽滤,吸附合成色素,后用乙醇-氨水解吸色素,收集全部解吸液,经蒸发、定容、过滤后进行高效液相色谱(HPLC)分析.结果:各合成色素含量在5.0~100.0 μg/ml范围内线性良好,方法相对标准偏差为2.6%~6.1%;加标回收率为96.7%~105.3%.结论:方法准确可靠、精密度好、简便快速,便于推广.
作者:刁晓霞 刊期: 2010年第04期
目的:调查了解洛阳市2008年重点食品卫生质量状况,掌握今后食品安全监管重点方向,为相关部门对食品卫生安全监管提供可靠依据.方法:对群众日常消费的重点食品,分县、乡、村三个层面分别随机抽样,按照国家食品卫生标准检验方法进行检测.结果:共抽检样品328份,合格296份,合格率为90.24%.其中,豆制品合格率低,为58.54%.结论:部分品种食品质量低劣,存在较严重安全隐患,应加强对这类食品的监督执法力度,以保障食品的食用安全.
作者:张雪茹 刊期: 2010年第04期
目的:研究肝硬化患者院内感染的主要病原菌及药敏情况.方法:对解放军第302医院2005年12月到2008年12月有关肝硬化患者院内感染的临床资料进行回顾性分析.结果:1686例次院内感染革兰阴性菌为主,发生率高为大肠埃希菌,约占所有菌株的31.8%,对多种抗生素耐药,其次为肺炎克雷伯菌,占12.3%;革兰阳性菌中表皮葡萄球菌占4.9%,金黄色葡萄球菌占4.0%;真菌中白色念珠菌常见,占9.9%.结论:大肠埃希菌是肝硬化患者院内感染的主要病原菌,且对多种抗生素耐药.
作者:孔华丽;庄英杰;杨静;文萃荣;聂为民;姜天俊;张秀;赫兢 刊期: 2010年第04期
目的:对国内8个沿海城市大型水产批发市场内零售贝类产品中的副溶血弧菌状况进行定量监测,为进一步的风险评估提供科学数据.方法:利用针对tlh、tdh基因的PCR方法进行副溶血弧菌的快速检测,根据阳性结果进行MPN判定.结果:525份样品中有329份样品中的副溶血弧菌呈tlh阳性,只有一个青岛市九月份缢蛏样品中的副溶血性弧菌同时具备tlh、tdh基因.总的副溶血弧菌(tlh阳性)检出率为62.67%,阳性样品的平均浓度为244.23 MPN/g.贝类样品中以缢蛏中副溶血弧菌的检出率与平均浓度高分别为80%(48/60)和481.11 MPN/g;夏季(6月至9月)检出率及副溶血弧菌浓度高,冬季(11月至次年2月)低.结论:对所得数据用SPSS软件进行分析,结果显示副溶血弧菌在不同城市贝类样品中的分布不存在显著差异(χ2=11.107,P>0.05);除缢蛏外,其它贝类中副溶血弧菌的检出率与平均浓度不存在显著差异(P>0.05);副溶血弧菌在贝类样品中的分布呈现季节性差异(χ2=24.207,P<0.05).
作者:曹慧慧;赵峰;于维森;周德庆 刊期: 2010年第04期
目的:用PER产物直接测序法和反向斑点杂交方法检测肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)23S rRNA V区2063基因,结果进行比较分析.方法:19例自临床咽拭子标本分离培养的MP,用自行设计的反向斑点杂交法检测23SrRNA V区2063基因型,同时对相应序列测序分析.结果:19例分离培养的MP,经反向斑点杂交法检测15株有23SrRNA V区基因A2063G位点突变;4株为2063A,与测序结果一致(Kappa一致性检验,P>0.05).结论:反向斑点杂交方法能快速、准确检测临床MP 23S rRNA V区2063基因型.
作者:沈俊娅;陈岳明;卢忠 刊期: 2010年第04期
目的:为及时掌握碘缺乏病高危人群碘营养现状,评价防治效果.方法:抽取有历史地克病病例的3个乡,每个乡2所小学,每所小学40名8~10岁学生,采集尿样和家中食盐;并用触诊法检查甲状腺.每个乡抽取2个村(居委会),每个村(居委会)采集18~40岁育龄妇女尿样30份、家庭盐样10份.结果:触诊法检查8~10岁儿童247人,甲状腺肿大率为5.6%,尿碘中位数263.81 μg/L.孕妇、哺乳期妇女、育龄妇女尿碘中位数分别为227.81、177.70、218.96 μg/L.非碘盐率为1.29%,合格碘盐食用率97.74%.结论:尿碘中位数及盐碘指标均符合国家标准,儿童触诊甲肿率接近国家标准,说明清水河县重点人群处于适宜碘营养状态.
作者:张秋霞;王来生;赵妙珍;云秀玲;李晨阳;周振荣 刊期: 2010年第04期
目的:分析沈阳市流感病毒的流行特点及其优势株的情况.方法:采集2005年~2009年冬春流行季哨点医院的流感样病例咽拭子,以MDCK细胞进行流感病毒的分离,根据CPE和HA方法鉴定流感病毒的存在,阳性毒株以HI和RT-PCR方法进行分型鉴定.结果:2005~2009年四个监测周期共采集流感样病例咽拭子样本783份,分离到流感病毒161株,总分离率为20.6%.其中A1型(H1N1)62株(38.5%)、A3型(H3N2)71株(44.1%)、B型(Yamagata系和victoria系)28株(17.4%).3种型别的毒株在5~岁和15~岁年龄组分离率高(34.9%,31.7%),但A3亚型在0~组所占比例高(46.5%).11月~次年1月为我市流感流行的冬高峰.结论:近年沈阳地区同时存在3种型别流感毒株流行,每年优势株明显不同,前一年监测周期的优势株在下一个周期中可被其他型别抑制甚至取代,2009~2010年监测周期中应密切关注A3(H3N2)亚型和SWH1N1亚型流感毒株的活动情况,加强学校人群的监测,及时发现流感病毒新变异株.
作者:王冰;陈建平;王迎春;刘建敏;刘娜;侯元;李继耀;李欣 刊期: 2010年第04期
目的:进行流感病毒核酸检测以发现不同型别的流感患者,为临床治疗和预防控制提供依据.方法:哨点医院患者的咽拭子标本,先采用RT-PCR方法检测流感病毒核酸A、B及季节性H1、H3,A未分型的采用real-time RTPCR方法检测甲型H1N1病毒核酸.结果:从哨点医院的流感样病例14份咽拭子标本中的5份A未分型的标本中用real-time RT-PCR方法检测出甲型H1N1病毒核酸特异性扩增曲线.结论:检出甲型H1N1病毒核酸确诊一例甲型H1N1流感病例.应加大监测检测力度,防止疫情扩散.
作者:张清杰 刊期: 2010年第04期
目的:建立快速、灵敏、特异地检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.方法:以SEA基因作为肠毒素A的检测靶序列,设计荧光定量PCR引物和Taqman探针,优化反应体系的主要成分浓度和循环条件,评价方法的灵敏度、特异性和重复性,并对22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌进行肠毒素A的检测.结果:建立金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.25 μl荧光定量PCR反应体系主要成分浓度分别为Mg2+7.0 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.4 μmol/L,探针0.7 μmol/L,TaqDNA聚合酶2.5U.方法可检出低45个拷贝的细菌DNA,特异性和重复性良好.从22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌中检出肠毒素A阳性菌株6株.结论:荧光定量PCR可快速、准确的检出金黄色葡萄球菌的肠毒索A,能为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据.
作者:刘渠;廖灵灵;徐亚军;李涌 刊期: 2010年第04期
目的:了解汉族人群瘦素受体Gln223Arg基因型分布;探讨该基因多态性与胃癌的关系.方法:运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定无亲缘关系的221例汉族人群的瘦素受体基因Gln223Arg多态性(正常对照组104例,胃癌117例).结果:胃癌组瘦素受体基因Gln223Arg的GG、GA和AA基因型表达频率分别为0.650、0.325和0.026,等位基因G和A频率分别为0.812和0.188;正常对照组基因型表达频率分别为0.798、0.192和0.010,G和A等位基因频率分别为0.894和0.106;Gin223Arg位点多态性的分布频率在对照组和病例组间差异有统计学意义(χ2=5.867,P<0.05).结论:瘦素受体基因Gln223Arg多态性与汉族人群胃癌相关.
作者:任晓华;蒋波湧 刊期: 2010年第04期
目的:采用细胞核酸释放剂(Cell nucleic releaser,CNR),建立在同一PCR扩增管内同时进行细胞核酸提取和荧光PCR扩增的白细胞HBV DNA检测技术.方法:白细胞的处理:新鲜抗凝(EI)TA-Na2)全血0.2 ml,破碎红细胞,用生理盐水洗涤四次,弃净残液,加20 μl白细胞温化剂制备成白细胞悬液.白细胞HBV DNA核酸提取与扩增:取3 μl的CNR和等量的白细胞悬液在PCR扩增管底轻轻吹打混匀,覆盖30 μl无菌石蜡油,37℃,60 s→99℃,7 min→37℃,30 s,直接加入已配制荧光PCR反应液,3000 g/min离心1 min,进行实时荧光定量PCR扩增.采用QiaGen的核酸提取方法作为对照.选择144例血清HBV DNA检测结果大于104IU/ml和131例血清无HBV DNA检出的乙肝患者标本为研究对象,20例非乙肝患者全白细胞作为特异性研究标本.结果:采用融红细胞的方法分离白细胞和CNR分离核酸,无白细胞和核酸丢失之嫌,可对全白细胞内的HBV DNA进行准确定量,该方法具有较好的灵敏性和重复性.与QiaGen核酸提取方法相关性良好(r=0.96),144例血清HBV DNA大于104IU/ml的乙肝患者其白细胞全部大于100 IU/ml,131例血清HBV DNA阴性的乙肝患者有56例(42.7%)白细胞HBV DNA大于100 IU/ml.结论:基于CNR核酸提取方法的全白细胞HBV DNA定量技术,操作简单、且具有较好的敏感性和重复性,可作为研究白细胞内HBV DNA临床意义的检测手段.
作者:李永利;廖华芳;王雪飞;刘立明;王海滨 刊期: 2010年第04期
目的:探索对Leifson细菌鞭毛染色方法的改进.方法:对染液、菌液、涂片、固定、染色、冲洗等操作进行改进.结果:菌体呈深红色,鞭毛呈浅红色,镜检涂片视野背景清晰,染色效果好.结论:改进方法简便、操作性好、实用性强.
作者:万滋衡;梁莹 刊期: 2010年第04期
目的:禽流感病毒神经氨酸酶(NA)是病毒粒子重要表面抗原之一,其抗原性差异决定病毒神经氨酸酶亚型(N1-N9)的划分.NA介导病毒对敏感细胞的侵染及协助子代病毒粒子的成熟和释放,与病毒的宿主嗜性及毒力有关.方法:对2003~2009年期间采集自云南境外家禽的H5N1亚型阳性样品中病毒NA基因进行测序,并与国内外已知代表毒株进行序列比对及系统发育分析.认识云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶(NA)基因分子结构特征.结果:21份代表性病毒样品NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于94.3%~99.3%、93.1%~99.3%.系统发育分析表明可划分为6个不同进化(亚)分支(1、7、9、2.4、2.3.2、2.3.4).其中进化亚分支2.3.4毒株已成为当前云南境外流行的优势毒株;所有云南境外毒株NA蛋白的49-68位氨基酸均存在缺失.结论:糖基化位点存在特有变异;云南境外毒株对Oseltamivir(达菲)类抗病毒药物可能无耐药性.
作者:董波;张文东;宋建领;赵焕云;叶丛华;田建国;吕粤;岳亮;邱薇;冯子良;张思东;苑述友;范泉水;张应国;张富强 刊期: 2010年第04期