学术投稿

多物种复合样品中转基因DNA成分的定量分析

杨冬燕;侯红利;杨永存;周向阳;杨小柯;郭良让;李永红;林健荣;邓平建

关键词:转基因, 定量, 复合样品, 实时荧光PCR
摘要:目的:在前期研究建立的不依赖参比内源基因定量单物种植物样品中转基因DNA的方法的基础上,定量测定多物种复合样品中转基因DNA的含量.方法:以转基因和非转基因大豆、玉米、大米按比例混合配制的多物种复合材料为研究对象,通过实时荧光PCR法测定样品DNA提取物中转基因DNA量,通过测定260 nm处的吸光值测定样品DNA提取物中总DNA量,以样品DNA提取物中各物种转基因DNA量与总DNA量之比表示多物种复合样品中各物种转基因DNA成分含量,并以各物种转基因DNA成分含量之和计算样品中转基因DNA的总含量.结果:7个大米与玉米两物种混合样品和7个大米、大豆与玉米三物种混合样品用于验证新建的定量体系的准确度和精密度.结果表明,两物种和三物种复合样品转基因成分总含量测定值与理论值的偏离度分别为2.22%~19.54%和5.24%~20.51%;其转基因成分总含量测定的变异系数分别为2.11%~13.43%和0.56%~10.74%.结论:新建的多物种复合样品中转基因DNA的含量测定方法满足转基因成分定量分析准确度和精密度要求.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 多物种复合样品中转基因DNA成分的定量分析

    目的:在前期研究建立的不依赖参比内源基因定量单物种植物样品中转基因DNA的方法的基础上,定量测定多物种复合样品中转基因DNA的含量.方法:以转基因和非转基因大豆、玉米、大米按比例混合配制的多物种复合材料为研究对象,通过实时荧光PCR法测定样品DNA提取物中转基因DNA量,通过测定260 nm处的吸光值测定样品DNA提取物中总DNA量,以样品DNA提取物中各物种转基因DNA量与总DNA量之比表示多物种复合样品中各物种转基因DNA成分含量,并以各物种转基因DNA成分含量之和计算样品中转基因DNA的总含量.结果:7个大米与玉米两物种混合样品和7个大米、大豆与玉米三物种混合样品用于验证新建的定量体系的准确度和精密度.结果表明,两物种和三物种复合样品转基因成分总含量测定值与理论值的偏离度分别为2.22%~19.54%和5.24%~20.51%;其转基因成分总含量测定的变异系数分别为2.11%~13.43%和0.56%~10.74%.结论:新建的多物种复合样品中转基因DNA的含量测定方法满足转基因成分定量分析准确度和精密度要求.

    作者:杨冬燕;侯红利;杨永存;周向阳;杨小柯;郭良让;李永红;林健荣;邓平建 刊期: 2009年第08期

  • 养殖牙鲆出血症病原菌的鉴定

    目的:对山东青岛某养殖场患出血病牙鲆分离的8株病原菌进行鉴定.方法:使用法国生物梅里埃公司的全自动微生物鉴定仪VITEK 2Compact的革兰阴性菌鉴定卡(GN test kit),结合生物梅里埃公司的API-细菌鉴定系统API20E进行生理生化反应测试,为了进一步确定8株菌的分类学地位,测定了16S rDNA基因序列,与相关细菌序列进行比对,构建了系统进化树.结果:8株菌中5株为溶藻弧菌,1株为小肠结肠炎耶尔森菌,1株为产酸克雷伯菌,1株可能为河流弧菌.结论:弧菌在分离菌中占据优势.

    作者:李正义;陈晓;应骏;刘云国;雷质文;贾俊涛 刊期: 2009年第08期

  • 海水浸泡对腹部开放伤大鼠凝血系统影响的研究

    目的:观察海水浸泡对腹部开放伤大鼠凝血系统的影响.方法:Wistar大鼠随机分为腹部开放伤合并海水浸泡组和单纯腹部开放伤组,分别检测实验动物致伤后0、0.5、1、2、3、4 h的血浆凝血酶原时间和部分凝血活酶时间,以及血浆纤维蛋白原、纤溶酶原和D-二聚体含量.结果:与单纯腹部开放伤大鼠相比,腹部开放伤合并海水浸泡大鼠血浆凝血酶原时间延长、血浆部分凝血活酶时间缩短、纤维蛋白原含量减少,提示外源性凝血途径被抑制而内源性凝血途径被激活.在海水浸泡2 h后,血浆纤溶酶原和D-二聚体含量增加,提示伴随继发性纤溶亢进.凝血酶原时间和血浆纤溶酶原含量与海水浸泡时间呈正相关(相关系数分别为0.9361和0.9875),血浆纤维蛋白原含量与海水浸泡时间呈负相关(相关系数为0.9136).结论:海水浸泡可以激活腹部开放伤大鼠凝血系统.在海水浸泡晚期,致伤大鼠具有弥漫性血管内凝血倾向.

    作者:张达矜;曲佳;熊鸣;乔媛媛;王大鹏;马聪;虞积耀;赵晓航 刊期: 2009年第08期

  • 白银市农村生活饮用水水质检测结果分析

    白银市位于甘肃省中部,全市总人口171.56万人,农业人口占全市总人口的77%,农村生活饮用水源主要是地下水和地面水,以分散式供水为主.为了解我市农村生活饮用水卫生状况,保证全市农村饮水安全,对全市农村217份生活饮用水按照国标GB/T5750-2006进行检测分析,为有效保护和利用有限的水资源和我市农村生活饮用水的改水规划、监督、检测提供科学依据.

    作者:赵振艳 刊期: 2009年第08期

  • Al-茜素红-盐酸羟胺-邻菲啰啉显色反应体系荧光法测定矿泉水中微量铝

    目的:提出Al与茜素红-盐酸羟胺-邻菲啰啉显色反应体系荧光法测定矿泉水中微量铝的方法.方法:在pH6.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中,铝与茜素红-盐酸羟胺-邻菲啰啉显色反应.结果:在所选定的佳条件下,铝的线性范围为0.00~0.15μg/ml,回归方程y=9.072x+2.522,相关系数r=0.9997,方法的检出限为0.01μg/ml.结论:该法操作简单,灵敏度高,准确度好,可用于矿泉水中微量铝的测定.

    作者:贾秀莲;刁满盈;张克俭;武永平 刊期: 2009年第08期

  • HPLC法测定猪肉中磺胺间甲氧嘧啶残留量的不确定度评估

    磺胺类兽药是抗感染药剂,具有光谱杀菌作用,是饲料中常用的添加兽药之一.高效液相色谱法已广泛用于其定量检测,用于其定量检测,为了符合中国实验室国家认可委员会(cNAL)认可规则CNAL/ARLL:2002测量不确定度政策和为了在测量数据的处理、测量结果的表达和测量结果质量评定等方面与国际接轨,本文根据JJF1059-1999<测量不确定度评定与表示>和<化学分析中不确定度的评估指南>,对高效液相色谱法测定猪肉中磺胺间甲氧嘧啶残留量测量结果不确定度进行了测量和评定,为评定测量结果质量提供了科学依据.

    作者:查玉兵;陈美;王哓芳;林玲 刊期: 2009年第08期

  • 伤寒和甲型副伤寒沙门菌PFGE分型方法研究与应用

    目的:了解宁波地区伤寒和甲型副伤寒沙门菌的脉冲场凝胶电泳(PFGE)基因型和流行优势型,为探讨传播途径和追踪传染源等提供帮助.方法:用全自动细菌鉴定仪(Vitek32)确定细菌的生物学特征;用诊断血清确定细菌的血清型;用PFGE方法对细菌的染色体进行基因分型.结果:14株伤寒沙门菌分成3个PFGE基因型,364株甲型副伤寒沙门菌分成12个PFGE基因型,其中伤寒沙门菌1型10株,占71.43%,甲型副伤寒沙门菌2型295株,占81.04%;其次为1型42株,占11.54%;其他各型相对较少,伤寒沙门菌的流行优势型是1型,甲型副伤寒沙门菌是2型.菌株的带型变化在1~3条范围内,表明宁波地区的伤寒和甲型副伤寒沙门菌变异不大,有可能是同一克隆系的伤寒和甲型副伤寒沙门菌.结论:PFGE分型对探讨伤寒、副伤寒疫情内在联系具有重要意义,宁波地区的伤寒和甲型副伤寒疫情是本地菌株反复在人群带菌,污染环境和食物所致,应引起我们的关注.研究认为PFGE分型法特异性高、重复性好、结果容易判读,是一种分子分型的可信方法,为确定菌株之间的亲缘关系,提供了可靠的检测手段.

    作者:徐景野;许国章;金春光;章丹阳;沈玄艺 刊期: 2009年第08期

  • 体重指数与血糖、脂类代谢的相关性分析

    目的:探讨体重指数(BMI)与血糖、脂类代谢的相关性.方法:采用回顾性分析的方法对2008年5月至12月在我院体检中心健康体检人员1284例的体重指数、血糖和血脂等检测结果进行分析.结果:高血糖和高血脂的总检出率为21.8%,超重和肥胖的总检出率为41.1%.体重指数正常组748例,高血糖和高血脂检出96例,占12.8%;超重组400例,高血糖和高血脂检出128例,占32.0%;肥胖组136例,高血糖和高血脂检出56例,占41.2%.结论:体重指数与高血糖、高血脂的高检出率密切相关,建议通过加强改变不良生活方式、减轻精神压力、控制体重来有效地预防超重和肥胖,减少各种慢性病的发病率.

    作者:张云;马骢;刘敏;郭建巍;钱扬会;齐永志 刊期: 2009年第08期

  • 4种常见型人乳头瘤病毒检测的临床应用

    目的:探讨4种常见型人乳头瘤病毒检测临床意义.方法:采用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测HPV感染分型.结果:男性患者200例,检出阳性111例(55.5%),分型结果以HPV6/11型为主(46.0%);女性患者标本404例,检出阳性98例(24.3%),分型结果以HPV16/18型多(12.4%),其次是HPV6/11型(8.9%).结论:4种常见型人乳头瘤病毒在男女性别患者的检出率及分布是不同的.

    作者:李伟;陈军;楼德利 刊期: 2009年第08期

  • 质控菌液菌落总数检测结果不确定度评定的探讨

    目的:探讨和建立菌落总数检测结果的不确定度评定方法.方法:分析质控纯菌种液中菌落总数不确定度的来源,逐一进行评定,然后采用合成的方法来计算和评定菌落总数的不确定度.结果:本次实验中的扩展不确定度为8.6%,采用此方法适合于类似检测条件下菌落总数不确定度的评定.结论:重复性检测和平行计数是检测菌落总数不确定度的主要来源,B类不确定度对合成不确定度贡献较小,实践中可以忽略不计;检测结果的报告应用不确定度合理地表征.

    作者:李振龙;何天有;屈艳霞 刊期: 2009年第08期

  • 老年2型糖尿病骨密度、骨转换生化指标的变化及相关性研究

    目的:探讨老年2型糖尿病患者骨密度变化及其与各种骨转换因子的相关关系.方法:采用单能定量CT(QCT)对53例2型糖尿病患者及40例健康老年人进行脊柱骨密度(BMD)测定,并分析受试者的骨密度与骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、性激素等指标间的关系.结果:(1)老年2型糖尿病患者腰椎BMD均值显著低于对照组[(74.75±22.70)mg/cm3vs(88.04±28.29)mg/cm3,P<0.05];老年2型糖尿病组B-AIJP及TRACP-5b均显著低于对照组[(21.59±5.31)ng/ml vs(23.98±4.61)ng/ml;(2.89±0.75)u/L vs(3.30±0.79)u/L,P<0.05];(2)受试者BMD与骨转换生化指标间无显著相关性.结论:老年2型糖尿病患者存在不同程度骨密度下降,且骨形成与骨吸收功能均降低.骨转换生化指标和骨密度是两个相互独立的检测指标.

    作者:曾绍凡;吴艳;朱晓荣;刘阳;喻荷淋;李仁哲 刊期: 2009年第08期

  • 云亭牌阿胶口服液改善大鼠营养性贫血的效果评价

    目的:以缺铁大鼠为模型研究了云亭牌阿胶口服液改善营养性贫血的效果.方法:选择体重60~80 gⅡ级雌性断乳Wistar大鼠,给予低铁基础饲料耗空6周后,经尾静脉取血,测定血红蛋白含量,按尾血血红蛋白含量和体重,把动物随机分为低铁对照组和3个实验组.根据该样品的人体日推荐用量,实验组设2.5、5.0、10.0 ml/kg BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍)低、中、高3个剂量组;低铁对照组给予相应溶剂.实验期为45 d,测定动物营养性贫血相关指标.结果:云亭牌阿胶口服液改善大鼠生长,各剂量实验组的终体重和净增重高于低铁对照组;服用云亭牌阿胶口服液显著升高贫血大鼠的血红蛋白水平;而红细胞内游离原卟啉水平显著降低.结论:云亭牌阿胶口服液有改善营养性贫血的作用.

    作者:韩彦彬;彭亮;赵鹏;李彬;张洁宏;覃辉艳;姚思宇;李凤文;黄超培 刊期: 2009年第08期

  • 结核分枝杆菌katG、rpoB、rpsL耐药基因快速检测方法的建立

    目的:建立一套应用multi-PCR-SSCP(multiple-Polymerase Chain Reaction-Single Strand Cinformation Polymorphism)快速检测结核分枝杆菌耐药基因突变的方法,评价该方法的临床应用价值.方法:分别用常规PCR和multi-PCR-SSCP检测58株结核分枝杆菌临床分离株katG、rpoB、rpsL基因突变并与常规药敏试验检测结果进行对比.结果:经常规药敏试验检测,58株结核分枝杆菌临床分离株中有41株耐药,其中,耐异烟肼(INH)35株;耐利福平(RFP)31株;耐链霉素(SM)31株.单基因PCR-SSCP与multi-PCR-SSCP分析结果一致,检出katG,rpoB、rpsL基因的突变率分别为65.7%(23/35)、84%(26/31)、71%(22/31),17株药物敏感株中有1株rpoB基因SSCP电泳条带与结核杆菌标准株结果有差异. 结论:multi-PCR-SSCP方法敏感、特异,可快速检测结核分枝杆菌katG、rpoB、rpsL耐药基因的突变,将该方法与药敏试验联合应用可互相弥补,成为临床指导用药的好方法.

    作者:杨柳;苏明权;程晓东;岳乔红;马越云;刘家云;郝晓柯 刊期: 2009年第08期

  • 浙江省医疗卫生实验室压力蒸汽灭菌器现状调查分析

    目的:了解浙江省医疗卫生实验室压力蒸汽灭菌器的使用现状,提高实验室灭菌质量,确保实验室生物安全.方法:采用资料调查和现场检测的方法对省内部分医疗卫生实验室使用中的压力蒸汽灭菌器进行了调查.结果:共调查25家单位47台实验用压力蒸汽灭菌器,其中预真空式压力蒸汽灭菌器4台,下排气式压力蒸汽灭菌器43台.这些压力蒸汽灭菌器内室温度检测合格率为59.57%;时间控制检测合格率为91.49%.灭菌包化学指示物检测合格率为100%;生物检测合格率亦为100%.结论:所检测的实验室内压力蒸汽灭菌器的灭菌过程监测全部合格,部分灭菌器质控监测[1]不合格,灭菌设备管理和操作人员的灭菌知识存在问题,存在灭菌质量隐患.

    作者:虞晓珍;陆烨;陆龙喜 刊期: 2009年第08期

  • 2005~2007年深圳市松岗镇生活饮用水检测结果分析

    目的:了解深圳市松岗镇桶(瓶)装饮用水(纯净水、矿泉水)、直饮水、自来水和井水四种水的卫生质量,为卫生监督管理提供科学依据.方法:对2005~2007年间深圳松岗镇生产和销售的桶(瓶)装饮用水(纯净水、矿泉水)、直饮水、井水和自来水送检和抽检的样本进行检测和分析.结果:共检测水样599份,合格524份,总合格率87.5%;其中瓶(桶)装水合格率为93.6%,直饮水为91.2%,自来水为89.9%,井水为61.1%.结论:深圳市松岗镇生活饮用水卫生总体状况较好.

    作者:邓红莲;李攀;曾雁玲;任燕 刊期: 2009年第08期

  • 卫生检验分析前质量控制探讨

    分析前质量控制的目的是为了获取一份合格的检验标本以保证检验结果的准确有效,与分析中、分析后质量控制构成医学检验质量控制的三个环节[1],但实际工作中强调更多的是分析中质量控制,对分析前、分析后质量控制往往重视不够,特别是分析前质量控制,是目前国内卫生检验普遍存在的薄弱环节,现就分析前质量控制作如下探讨.

    作者:杨献青;徐校平 刊期: 2009年第08期

  • 食源性和病原性金黄色葡萄球菌的分离培养及调查

    目的:从食品标本、食物中毒标本和感染病人标本分离培养金黄色葡萄球菌,分析金黄色葡萄球菌分离株在食品污染和病人感染中的分布状况.方法:采集生食品、食物中毒标本和医院感染病人标本,用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,生化验证,DNA探针杂交确认菌株.结果:散装熟肉制品、生奶、蔬菜沙拉和生制速冻米面的污染率超过20%,超过20%的食物中毒事件是由金黄色葡萄球菌引起的,79.6%的医院分离株来自呼吸道标本.结论:在食品污染、食物中毒和呼吸道感染中,金黄色葡萄球菌都有较大的危害.

    作者:张严峻;朱敏;张俊彦;潘军航 刊期: 2009年第08期

  • 下城区饮食和公共场所从业人员肠道沙门菌携带状况调查分析

    目的:了解和分析杭州市下城区饮食、公共场所从业人员肠道沙门菌携带情况及菌型分布特点、耐药状况.方法:按沙门菌分离鉴定方法进行检测,WHO推荐的K-B法进行药敏试验.结果:73601名饮食和公共场所从业人员中检出沙门菌217株,检出率0.30%,分布于7个血清群,29个血清型,其中B群占比例高,依次为B群、E1群、E4群、C1群、D群、C2群、E2群,有5个血清型为我区首次检出.217株沙门菌对阿莫西林/克拉维拉、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢哌酮、环丙沙星、氧氟沙星的敏感度较高,均在94%以上,妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素的敏感度略低,而复方新诺明、氨苄青霉素耐药率高为16.59%.结论:本文实验结果可为研究我区饮食、公共场所从业人员沙门菌健康带菌者菌型分布规律及其对抗生素的敏感性提供参考.

    作者:商晓春;帅慧群;赵雪琴;张睿;胡薇薇 刊期: 2009年第08期

  • 痰片结核杆菌的检查与质量控制

    痰涂片检查是国家控制结核病患者的主要手段[1],是发现肺结核传染源、确定诊断、制订化疗方案、考核疗效以及评价防治效果的重要方式.其质量控制是国家结核病防治规程(NTP)的重要组成部分.痰检工作的好坏,在一定程度上可直接反映整个结核病控制项目基础工作水平和质量的好坏.直接厚涂片法简单,易行,经济和快速而普遍被采用,检出率可达20%~40%[2].

    作者:殷华美 刊期: 2009年第08期

  • 纸片法与发酵法检测食具大肠菌群结果对比分析

    目的:探讨改进纸片法检测大肠菌群的判断标准.方法:对纸片法检测大肠菌群的纸片反应结果情况进行详细记录后,将纸片以无菌操作转入单料乳糖胆盐发酵管中,用发酵法来证实其大肠菌群的阴阳性结果,再将两种检测方法所得结果进行对比分析.结果:按GB14934-94纸片法判定大肠菌群的阴阳性,其灵敏度为79.2%,特异度为97.7%;若按作者提出的标准进行判定,其灵敏度为97.1%,特异度为78.2%.二者比较灵敏度有显著性差异(P<0.001).结论:根据本实验结果分析,建议改进和完善GB14934-94纸片法大肠菌群的判定标准,更准确地反映大肠菌群检出的真实情况.

    作者:王晓松 刊期: 2009年第08期

中国卫生检验杂志

中国卫生检验杂志

主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会