学术投稿

麻疹病毒的纯化及其在麻疹IgG EIA诊断试剂中的应用

詹曦菁;秦晓勇;刘丽英;孔健

关键词:L4株麻疹病毒, 酶联免疫(EIA), 包被抗原, 蔗糖密度梯度超速离心
摘要:目的:摸索纯化麻疹病毒的方法,并以其为包被抗原,制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂.方法:将L4株麻疹病毒液先后用超滤、PEG沉淀的方法进行浓缩,再分别用连续和不连续蔗糖密度梯度超速离心法进行纯化,比较不同方法纯化后的效果,终建立制备高纯度麻疹病毒包被抗原的方法,并在此基础上制备麻疹IgG酶联免疫(EIA)诊断试剂.结果:用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心纯化后的麻疹病毒的比活性为775.76 HAU/mg,SDS-PAGE及Western-blot证明纯化产物的纯度符合要求,电镜结果显示纯化物中含大量麻疹病毒.以该纯化抗原制备的EIA检测试剂与血凝抑制实验(HI)相比,该试剂的灵敏度为99.46%,特异度为81.82%,一致性为97.58%.与SIGMA麻疹IgG EIA诊断试剂盒的一致率为95.12%.结论:采用超滤、PEG沉淀及连续蔗糖密度梯度超速离心的方法可制备满足麻疹IgG EIA诊断试剂要求的包被抗原.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 12 800例食品、公共场所从业人员健康体检乙肝病毒携带情况分析

    目的:了解乙肝在文成县食品、公共场所从业人员中的感染情况及血清中HBV感染模式,为有关单位进一步管理乙肝感染人员提供依据.方法:应用ELISA法对12 800例从业人员进行血清HBV检测.结果:12 800例食品、公共场所从业人员的HBsAg总携带率为3.1%,低于全国及本县平均普通感染水平,抗-HBs总阳性率高达46.2%,不同年度HBsAg阳性率呈逐年下降趋势.HBsAg阳性血清中HBV感染模式共7种.结论:对食品、公共场所从业人员进行定期体检,检测HBV五项指标,早期发现乙肝感染人员.

    作者:赵淑雯 刊期: 2007年第04期

  • 茂名市区餐饮业食用植物油质量监测结果分析

    目的:分析了解茂名市区餐饮业的食用植物油卫生质量,为监督管理提供依据.方法:依据GB/T5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法和《食品掺伪监测方法》[1]中的冷冻试验法进行检验.结果:餐饮业食用植物油的问题较为突出,花生油和菜籽油的掺假掺杂率分别为42.86%和58.82%,特别是食堂用花生油掺假掺杂率达50.36%.棕榈油的过氧化值超标率为25.00%.结论:应加强对餐饮业,尤其是食堂食用油的监督管理力度.

    作者:梁群珍;黄土炎;覃玲 刊期: 2007年第04期

  • 市售猪肉产单核细胞李斯特菌分离及hly基因序列分析

    目的:了解市售猪肉中产单核细胞李斯特菌(Lm)的污染状况及Lm分离菌株hly基因部分序列的分析比较.方法:分离菌株鉴定应用聚合酶链反应(PCR);以PCR产物直接测序,对780 bp片段作序列分析.结果:市售猪肉产单核细胞李斯特菌的污染率为1.08%(4/370);分离菌株WLD1和FCY1与国内外14个参考菌株的同源性分别为96.4%~98.6%和95.0%~97.2%,而两分离株之间的同源性仅为95.9%.结论:合肥市市售猪肉中有一定程度产单核细胞李斯特菌的污染,且存在李斯特菌病的可能性和食物中毒的潜在危险;分离菌株WLD1和FCY1,尤其是FCY1分化程度较高,Lm hly基因核苷酸序列差异的距离与地理分布、菌株的样品来源无相关性.

    作者:李郁;焦新安;魏建忠;凌英济;王桂军 刊期: 2007年第04期

  • nm23-H1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建

    目的:制备用于nm23-H1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品.方法:通过PCR扩增出目的片断,纯化后T-A连接至pMD18-T载体,转化宿主菌E.coli DHSα,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,并进行荧光定量PCR检测分析.结果:nm23-H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性.梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示,循环阈值(Ct)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系.结论:成功构建了nm23-H1基因实时荧光定量PCR质粒标准品.

    作者:张传海;刘秋英;金琳;刘格;郭朝万;张美英;王一飞 刊期: 2007年第04期

  • 376例性乱者乙型肝炎感染状况调查分析

    目的:了解大连市性乱人群乙型肝炎感染状况,为今后加强对该类人群的监督检测工作提供依据.方法:对该人群进行流行病学调查及采集血清样本进行相关检测.结果:性乱者乙肝感染率明显高于正常人群,且随着年龄的增长而增加.结论:性乱人群是乙肝的高危人群,性传播HBV是成人慢性HBV感染的潜在来源,不容忽视.

    作者:周晓中;吕作芝 刊期: 2007年第04期

  • 原子荧光法同时测定化妆品中铋和汞

    铋化合物作为漂白剂和珠光剂添加在化妆品中,亚硝酸铋是收敛剂,对皮肤有漂白作用;汞同样具有美白的作用,被一些生产者超量添加于化妆品中,汞对人体健康的危害是众所周知的.现行测定化妆品中汞的标准方法为冷原子吸收分光光度法,此法易受水蒸气的影响,使结果偏高[1];测定铋标准方法为二甲酚橙定性法、乙二胺四乙酸二钠滴定法和原子吸收分光光度法,对含量低的样品难以定量,且操作繁琐,分析时间长.而采用原子荧光光谱法[2,3],并改进其消化方法,能节省时间,提高灵敏度,使两元素在测定时采用同一消化液,节省了大量试剂,适于批量快速检测.

    作者:徐保权;郭淑英;边疆 刊期: 2007年第04期

  • 巨泌乳素测定在高泌乳素血症诊断中的临床价值

    目的:探讨巨泌乳素测定在高泌乳素血症诊断中的价值.方法:对我院门诊106例高泌乳素血症患者及正常体检者98例的血清进行泌乳素值测定,血清经聚乙二醇(PEG)沉淀后再次测定其泌乳素值,并对两结果进行比较.结果:在高泌乳素血症患者血清中,巨泌乳素的检出率为18.9%(20/106),正常对照组中巨泌乳素的检出率为1%(1/98),两者存在显著性差异(P<0.001).单体泌乳素组血清经PEG处理前后的PRL含量无显著性差异(P>0.05),而含有巨泌乳素的血清处理前后的PRL含量有显著性差异(P<0.001).结论:巨泌乳素是造成高泌乳素血症的常见原因,用PEG沉淀法筛查巨泌乳素是一种有效和实用的方法.在PRL增高的标本中,应用PEG法常规筛查巨泌乳素对提高高泌乳素血症的诊断准确性有重要的临床价值.

    作者:吴颖 刊期: 2007年第04期

  • 气相色谱法快速分析生活饮用水中三卤甲烷

    目的:研究生活饮用水中三卤甲烷定量快速分析方法.方法:水样直接进样,用毛细管柱色谱分离,电子捕获检测器检测,采用内标法定量,可同时测定水中三氯甲烷、一溴二氯甲烷、二溴一氯甲烷和溴仿.结果:三氯甲烷、一溴二氯甲烷、二溴一氯甲烷和溴仿低检出浓度<1 μg/L.准确度和精密度均符合检验要求.结论:方法快速、简便、准确.

    作者:孙润泰;孙晓红;于波 刊期: 2007年第04期

  • 一起蛋糕引起葡萄球菌肠毒素中毒的调查

    目的:对一起蛋糕引起食物中毒的发生原因进行分析.方法:通过流行病学调查、临床表现结合实验室检验结果进行判断分析.结果:经实验室检验,该批食品剩余样品的葡萄球菌肠毒素阳性,结合流调结果、临床症状,确认为一起由葡萄球菌肠毒素污染的蛋糕导致的细菌性食物中毒事件.结论:发生食物中毒的原因跟该品种蛋糕的生产工艺中由工人手工涂抹馅料、成品库室温没有有效控制、保存时间超过12 h有关.建议在以后规范修订时,强调对于手工制作、成品保存方法等的技术要求.

    作者:郑艳影;刘红;潘珍瑜;林萍 刊期: 2007年第04期

  • 蔬菜及水果中12种有机磷农药残留抽检结果与分析

    目的:了解本地蔬菜及水果中有机磷农药的残留情况,为有关部门加强农药生产销售及使用各个环节的管理,从而提高农产品卫生质量提供科学依据.方法:对本地市售蔬菜及水果按国家标准方法[1]进行12种常见有机磷农药残留抽检,对抽检结果按国家卫生标准[2]进行评价分析.结果:90件蔬菜及水果共检出有机磷农药10种,检出其残留超标的有机磷农药8种,有机磷农药残留检测合格样品61件,合格率67.8%.结论:本地市售蔬菜及水果的生产过程中有机磷农药的不正当使用和滥用情况严重.

    作者:罗军;向晓霞;周江;李世荣;程永红 刊期: 2007年第04期

  • Excel内置函数在基层卫生学调查中的应用

    在进行某项卫生学调查后往往有许多调查数据需要进行统计分析,计算样本的均数、频率分布、标准差、置信区间以及分析这种差别是否具有统计学意义,从中找出事物发生的原因和规律.如用计算器按照公式进行计算,往往费时费力,并且容易出错.使用Excel中的内置函数可以避免繁琐的数据处理工作,极大地提高工作效率,我们将Excel 2000中的函数功能在卫生学调查中的应用情况介绍如下.

    作者:黄永庆 刊期: 2007年第04期

  • 云南省1996~2005年化妆品理化指标分析

    目的:调查云南省10年间的化妆品卫生质量,为今后更好地进行化妆品的卫生管理提供依据.方法:对云南省1996-2005年化妆品的检测资料进行分析,检测方法依据GB7917及《化妆品卫生规范》进行.结果:共检测化妆品理化指标1 494件,合格1 461件,合格率97.8%;其中省内产品1 264件,合格1 234件,合格率97.6%;省外产品182件,合格178件,合格率97.8%;省内产品与省外产品合格率无显著性差别(Χ2=0.38,P>0.05).结论:应加强对化妆品的经常性监督,尽快建立禁用、限用物质的检测方法.

    作者:王建华;孙灿;董海燕;陶洪 刊期: 2007年第04期

  • 高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术检测猪肝中克伦特罗残留的方法研究

    目的:建立一种测定猪肝中克伦特罗残留量的高效液相色谱-电喷雾质谱联用方法.方法:使用四级串联质谱(MS/MS)的多反应监测(MRM)技术测定.结果:方法线性范围为1.0~50.0 ng/ml(r=0.9995),检出限为0.20 μg/kg,3个浓度的回收率在75.0%~100.0%.结论:该法灵敏、准确,可用于猪肝中克伦特罗残留的分析.

    作者:迟少云;杨钊 刊期: 2007年第04期

  • 宋内志贺菌污染学校水源引起菌痢暴发的病原学检测分析

    目的:对一起误判为感染性腹泻暴发疫情进行病原学检测分析.方法:采集患者的肛拭子、自备井水、管网末梢水、患者手和漱口杯涂抹样等标本共17份.按《卫生防疫细菌检验》,并参考《食品卫生微生物学检验》(GB/4789.5-2003)和《预防医学微生物学及检验技术》进行检测.结果:分别从7名未用抗菌药治疗、1名口服盐酸黄连素片3 d和1名用藿香正气水口服液治疗4 d的现症病人肛拭子,1份自备井水、1份管网末梢水、1份漱口杯和1名患者的双手涂抹样等4种13份样品中检出宋内志贺菌,检出率76.5%.13株菌的菌落形态特征、生化反应和血清学结果完全一致.结论:根据病原学检测结果和流行病学调查资料,结合临床表现,确认是一起由宋内志贺菌污染学校水源引起的菌痢暴发.

    作者:刘红旗 刊期: 2007年第04期

  • 荧光定量-聚合酶链反应法快速检测麻疹病毒核酸

    目的:采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测麻疹病毒核酸,用以建立和推广一种敏感、特异、快速的麻疹检测新技术.方法:TaqMan特异性荧光标记探针法,进行特异性、敏感性和麻疹疑似患者临床标本的检测.结果:FQ-PCR法检测麻疹病毒核酸具有高度的特异性和敏感性,本次试验检测灵敏度达0.1 TCID50.在14份麻疹患者咽拭子标本中,有13份标本检出麻疹病毒核酸,从核酸提取至完成检测仅需3 h.结论:FQ-PCR法为麻疹病毒核酸检测提供了一种可靠的方法.

    作者:姜明杰;甘云;梁勇;张振国;卢国际;王翠华;李彩云;王蒋丽 刊期: 2007年第04期

  • 面制食品中Al的荧光光度法测定

    目的:应用荧光技术建立测定面制食品中铝的方法.方法:采用微波消解对食品进行前处理,用荧光光度计检测消解液的荧光强度和透射光强度测定铝的含量.结果:方法检出限为0.034μg/ml;在0.01~1.00 mg/L范围内呈线性关系,相关系数r=0.999;回收率在95.0%~106.4%之间;测定结果相对偏差RSD均在0.72%~1.72%.结论:本方法操作简便、快速、准确、干扰少、检出限低,试剂用量少,适用于面制食品中铝的测定.

    作者:梅立荣;苏亚娟;吴文广 刊期: 2007年第04期

  • 从进口原料奶粉中检出坂崎肠杆菌

    目的:检测进口原料奶粉中是否污染坂崎肠杆菌.方法:参照GB/T4789.6-2003致泻性大肠埃希氏菌检验和美国FDA《婴幼儿奶粉中坂崎肠杆菌检测方法》部分.结果:5份进口原料奶粉样品中有2份检出坂崎肠杆菌.结论:本文提示对进口原料奶粉检测坂崎肠杆菌的重要性.

    作者:刘铁雁;麻郁峰;李俊华;刘军 刊期: 2007年第04期

  • 几种常见酒类中防腐剂的检测

    防腐剂是在食品生产、加工、储存等过程中,能够抑制微生物的繁殖,以达到延长食品保质期目的的化学合成物.我国对一些防腐剂的使用量和残留量有严格的规定[1].在我国,使用多的防腐剂是苯甲酸和苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾、脱氢乙酸以及对羟基苯甲酸酯类.这些防腐剂如果过量使用,对人体是十分有害的.因此,一种能够方便、快捷、准确地测定食品中防腐剂含量的方法也就十分重要.

    作者:牟冠文;李光浩;海华;姜伟 刊期: 2007年第04期

  • 啤酒中微量甲醛的光谱法测定

    目的:建立测定啤酒中微量甲醛的新方法.方法:在酸性条件下将溶解于啤酒中的游离甲醛随水蒸出,与乙酰丙酮作用,生成稳定的黄色化合物2,5-二乙酰基-1,4-二氢卢剔啶,在414 nm处测吸光度,即可得到啤酒中甲醛含量.结果:测定微量甲醛的线性范围为0.0~2.4 μg/ml,样品加标回收率98.4%~100.9%.结论:该法简便,灵敏度高,重现性好,适合啤酒中甲醛的测定.

    作者:熊小莉;陈尚伟 刊期: 2007年第04期

  • 回流消化技术在测定食品蛋白质含量中的应用

    目的:了解回流消化技术在食品蛋白质含量测定中的应用效果.方法:采用自动回流消化仪替代国标法蛋白质测定中使用凯氏定氮烧瓶进行消化的方法.由于样品与试剂的反应是在相对密闭的容器内进行,所以在消化过程中分解产生的大量酸雾、硫的氧化物等刺激性气体溶于冷凝水中排出,对环境的污染和对分析人员毒害大大减小.结果:实档验结果表明,回流消化法与国标法比较,测定结果基本一致,t检验无显著性差异(P>0.05),测定样品蛋白质含量在1.59%~23.55%之间的相对标准偏差(RSD)为0.64%~1.96%(n=5),平均回收率为98.3%.结论:自动回流消化法仪器价格便宜,不需要消毒通风柜,可节约经费开支,消化时间较为缩短,减轻了分析人员的劳动强度,相对提高了工作效率.对基层卫生检验实验室具有一定的推广应用价值.

    作者:舒向俊 刊期: 2007年第04期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会