马丽;万海英
microRNA (miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA,通过和靶mRNA的3’端非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)互补结合诱导靶mRNA的翻译抑制或剪切降解.miRNA表达量的变化和人类多种肿瘤的发生密切相关.肿瘤相关miRNA一般分为肿瘤抑制因子样的miRNA( tumorsuppressive miRNA)和原癌miRNA(oncogenic miRNA).这些miRNA不仅在肿瘤发生和转移中发挥重要作用,而且也有可能成为癌症预防和治疗的关键生物分子[1].
作者:粱宏伟;陈熹;曾科;张辰宇 刊期: 2011年第07期
目的 建立测定尿蛋白的曙红Y共振散射光法.方法 在pH 3.0枸橼酸盐缓冲液(含SDS)介质中,于λex=λem=360nm测定尿蛋白与曙红Y结合后产生的共振散射光强度.结果 反应体系适条件pH为3.0,曙红Y浓度0.04 mmol/L,SDS浓度为1.5 g/L,曙红y-蛋白质共振散射光强度在蛋白质浓度0~1 600 mg/L范围内呈线性关系,直线回归方程为Y=2.89X+0.12,相关系数r=0.993,低检测限为0.1 mg/L;日内变异系数(CV) 2.32% ~3.12%,日间CV 2.98%~3.68%;平均回收率101.2%;SDS对反应体系有显著增敏作用;与邻苯三酚红法比较结果一致,差异无显著性.结论 曙红Y共振散射光法方法简单、成本低廉,结果准确可靠,为临床常规检测尿蛋白较好的方法.
作者:吴兴福;马建峰 刊期: 2011年第07期
临床实验室自动化(clinical laboratory automation,CLA)发展于20世纪80年代初.浙江大学医学院附属第一医院于2001年引进了包括样本处理和模块分析系统的日立全自动生化分析系统,开创了我国全实验室自动化的先河.发展至今,临床实验室自动化已不仅仅局限于临床化学的自动化,而是包括了临床化学、免疫学、血液学、尿液干化学与有形成分分析等的自动化;已不仅仅局限于分析技术的自动化,而是在分析技术自动化的基础上,整合了样本采集、样本处理、样本保存以及数据处理等分析前、分析中及分析后的全程自动化.本文就临床实验室自动化的发展、现状与展望作一综述.
作者:顾光煜 刊期: 2011年第07期
目的 通过实施临床生物化学、免疫学、血液细胞学分析的室内质控数据的实时监控方案,为本省临床检验结果互认提供可靠的质量保证依据.方法 设计网络化的管理模式,开发专用软件对本省临床实验室的室内质控数据进行实时监控.结果 各级临床实验室用统一的软件对室内质控进行管理,室内质控数据可及时传到本省临检中心,当失控时省临检中心可通过双向联系提供技术指导,帮助其及时纠正失控.结论 新的模式提高了工作效率,并能及时获得室内质控原始数据,为临床检验结果互认提供了质量保障.
作者:牛华;王天朝;谢颖夫;肖质;陈玲;王建琼;沈云松;曹研;孙虹;苏敏;蔡全刚 刊期: 2011年第07期
目的 探讨microRNA (miRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 用实时荧光定量PCR技术检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化.结果 NSCLC患者癌组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P<0.05),而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达(P<0.05).随着病情进展,miR-21、miR-222表达升高,miR-126表达下降.结论 miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126、miR-223在NSCLC癌组织中表达存在差异,且miR-21、miR-222和miR-126与NSCLC病情的恶化发展相关,有助于预后判断.
作者:王亚南;史进方;吴元健;徐卫东;蒋敏;顾国浩 刊期: 2011年第07期
目的 研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据.方法 用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型.结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4; 4a0.996 9,4b0.003 1;5a0.990 6,5b0.009 4;6a0.981 2,6b0.018 8;15a0.540 6,15b 0.459 4.HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0.经x2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则.HPA基因分布存在种族和地区差异.结论 河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率高.HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率.
作者:滑世轩;王书勤;岑东;燕备战 刊期: 2011年第07期
染色体微阵列(chromosomal microarray,CMA)技术对于临床上原因不明的发育迟缓( developmental delay,DD)、智力低下(intellectual disability,ID)、各种孤独症(autism spectrum disorders,ASD)和多发先天畸形(multiple congenital anomalies,MCA)的诊断显示了很好的应用前景.近,国际标准细胞基因组微阵列(International Standard Cytogenomic Array,ISCA)协会两次召开国际会议并形成文件,评估了2003~2008年国际上包括33组共21 698名患者的CMA结果,比较了CMA与传统G-显带技术对于DD/ID和MCA病因学诊断率的差异,结果显示CMA有很高的敏感性,对于DD/ID的病因诊断率高达15%~ 20%,而传统的G-显带核型分析诊断率却仅有3%.因此提出CMA对于原因不明的DD/ID和MCA的病因诊断是首选试验,可以替代传统的G-显带核型分析.会议提出了对染色体拷贝数变异的临床解释.
作者:崔英霞;夏欣一 刊期: 2011年第07期
数字化临床实验室(digital clinical laboratory,DCL)建设是现代医学发展的必然趋势和医疗改革的基础之一.它对于满足人民群众日益增长的医疗卫生服务需求,尤其是对于提高数字化检验、数字化管理与决策和数字化健康服务水平,促进检验医学事业快速发展等都具有重要意义.“十二五”期间,我国卫生信息化建设重点是推进建设国家级、省级和地市级3级卫生信息平台,加强公共卫生、医疗服务、新农村合作医疗、基本药物制度、综合管理5项业务应用,建设健康档案和电子病历2个基础数据库和1个专用网络,即“3521工程”,它是未来五年我国卫生信息化建设的新目标和新任务[1].数字化临床实验室建设工作者需要直面此新形势、新需求、新技术和新实践的机遇与挑战.
作者:顾国浩;邱骏 刊期: 2011年第07期
目的 评价M46CN Campylobacter乳胶凝集试验检测弯曲菌的性能.方法 用M46CN Campylobacter乳胶凝集试验对临床373份粪便标本及其48 h培养分离菌进行直接检测和鉴定,以API Campy生化鉴定、革兰染色、氧化酶和动力试验(简称常规鉴定)结果为标准,评价M46CN Campylobacter乳胶凝集试验对标本直接检测和分离菌鉴定结果的性能.结果 M46CNCampylobacter乳胶凝集试验对373份粪便标本进行直接检测,阳性61例,阴性312例,其检测敏感性为80.8%,特异性为99.3%,阳性预测值为96.7%,阴性预测值为95.5%,诊断效率为95.7%.与标准方法鉴定结果相比,经Kappa一致性检验,Kappa =0.854 7,u=16.596 1,P <0.01.对373份粪便标本的分离菌进行鉴定,Campylobacter阳性73例,阴性300例,其检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和诊断效率均为100%.结论 M46CN Campylobacter乳胶凝集试验直接检测粪便标本与标本培养后经标准生化反应鉴定结果具有良好一致性,对培养物中弯曲菌鉴定与标准的生化鉴定结果完全符合,其敏感性和特异性高,适合临床常规鉴定弯曲菌属细菌使用.
作者:杨燕;孙长贵;陈坚;成军;张丽君 刊期: 2011年第07期
近期我们在用Sysmex XS 800i血液分析仪检测血常规的工作中,因仪器的报警提示和WBC分类散点图异常而涂片染色镜检,检出疟原虫感染3例.患者经抗疟治疗1周后,症状消失,血常规正常,痊愈出院.现报道如下.
作者:黄爱军;夏永泉;张葵 刊期: 2011年第07期
目的 研究血清黏蛋白抗原4(mucin antigen4,MUC4)对胰腺癌诊断价值.方法 用ELISA法测定胰腺癌患者血清中MUC4的含量,根据ROC曲线确定MUC4的cut off值并计算ROC曲线下面积(AUCROC),根据诊断效能评估表评价MUC4、CA19-9和CA242对胰腺癌诊断价值.结果 胰腺癌患者血清MUC4的浓度和阳性率与慢性胰腺炎组及健康对照组比较有显著性差异(P <0.01),而慢性胰腺炎组与健康对照组之间无明显差异(P >0.05);MUC4的cut off值为4.54 ng/mL,AUCROC为0.880;胰腺癌患者血清MUCA表达敏感性、特异性和准确性明显优于CA19-9和CA242 (P <0.01).结论 MUC4可单独或与其他指标联合应用诊断胰腺癌,作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎的重要参考指标.
作者:龚道元;伏红霞;彭艳;游永强;易正山;李子萍 刊期: 2011年第07期
目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白和hTERT调控相关miR-138在正常胃黏膜(NM)、肠上皮化生(IM)、异型增生(DYS)、早期胃癌(EGC)和进展期胃癌(AGC)中的表达及其意义.方法 选取经病理证实的胃黏膜病变组织96例,用免疫组化SP染色法检测hTERT表达水平,real-time PCR检测miR-138表达丰度.结果 在NM、IM、DYS、EGC和AGC 5组标本中,hTERT阳性表达率逐渐升高,分别为0.0%、26.1%、33.3%、75.0%和77.4%;miR-138表达水平呈逐步下降趋势,分别为2.93±1.24、2.12±0.98、1.90±0.58、1.27±0.89和1.68±1.02;低表达miR-138组织的百分率在低、未分化组中显著高于高、中分化组(83.3% vs 36.5%,P<0.01),而与性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分期等无关.结论 miR-138表达丰度的下降,是胃黏膜癌变过程中的早期事件;miR-138有望成为新的胃癌早期诊断指标及治疗靶标.
作者:李学成;王宗华;梁光萍;刘志鹏;王军;邹利全;熊晓峰;陈陵 刊期: 2011年第07期
全实验室自动化(total laboratory automation,TLA)又称全程自动化(front to end automation),包括:(1)实验室信息系统(laboratory information system,LIS);(2)标本前处理系统;(3)标本传送系统或传送带;(4)自动化分析仪;(5)分析后处理系统.我院于2007年安装了生化(日立公司)、免疫(Roche、雅培公司)检验自动化系统,全面实现了该系统与医院信息系统(hospital information system,HIS)、LIS的数据交换和系统整合.
作者:钱娜;刘琳娟;刘娟;张青云 刊期: 2011年第07期
自动化之所以成为实验室发展的首选方案,在于它可以改善工作流程从而提高工作效率,同时减少人工介入环节,保证结果的准确性.一些研究机构对实验室流程比例进行研究发现,样品前处理占了整个实验室一半的资源,样品分析中和分析后占了实验室工作人员15% -20%的时间和精力,样品前、后处理部分占了整个实验室2/3的人力资源.Roche公司充分考虑到目前实验室对于自动化的需求,推出了灵活式自动化解决方案,其覆盖了从样本前处理到后处理的整个流程,具体功能见图l.
作者:王菲菲 刊期: 2011年第07期
微小RNA( microRNA,miRNA,miR)是参与基因转录后调控的非编码小分子RNA.miRNA与人类肿瘤的发生、发展密切相关.研究表明,miR-145在结肠癌中呈低表达,具有抑制结肠癌生长的潜能;miR-145可以调节多个靶基因,同时,其本身又受p53的调控.miR-145可能是肿瘤抑制基因调控网络的关键因子.本文就miR-145与结肠癌的相关研究进展作一综述.
作者:王峰 刊期: 2011年第07期
目的 评价血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC在肺癌的诊断价值及其联合检测的临床意义.方法 将肺癌患者分为鳞癌、腺癌和小细胞癌3组,测定各组和健康对照组血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC水平,比较各组差异,以及肺癌不同类型组间的差异,探讨联合检测对肺癌的诊断意义.结果 肺癌组各项标志物的水平与健康对照组比较有显著性差异(P< 0.05),CYFRA21-1、SCC在肺鳞癌和肺腺癌中有显著性差异(P <0.05);SCC、CYFRA21-1、NSE在肺鳞癌和肺小细胞癌中有显著性差异(P<0.05);NSE在肺小细胞癌和肺腺癌中有显著性差异(P<0.05),5项肿瘤标志物联合检测肺癌阳性率为87%,高于单项肿瘤标志物的检测.结论 5项肿瘤标志物在肺癌的诊断和病理分型中均有一定价值,其中NSE对肺小细胞癌,CYFRA21-1对肺鳞癌诊断价值较高.肿瘤标志物联合检测有利于提高肺癌的诊断率.
作者:吴杰;骆骥才;张钧;谢鑫友 刊期: 2011年第07期
常规工作中,对2份皮肤科送检的“皮疹原因待查”、梅毒抗体检测为阴性的血样用欧蒙公司间接免疫荧光试剂作抗核抗体(ANA)检测,结果ANA为阳性,核型荧光染色模式为颗粒型,抗体滴度均≥1 000.经欧蒙公司免疫斑点试剂检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体确认,结果抗SSA和抗SSB抗体阳性.随后又发现2例这类患儿和1例抗U1-RNP/Sm抗体阳性病例.抽取5名患儿母亲的血样进行ANA和抗ENA抗体谱检测,结果均为阳性.这种由母体自身抗体通过胎盘进入胎儿体内所致的新生儿红斑狼疮(neonatal lupus erythematosus,NLE)在新生儿的发生率约为1/20 000[1],国内少有报道.
作者:唐吟岫;杨苏 刊期: 2011年第07期
目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素等15种抗菌药物的耐药性.方法 常规培养和分离菌株,经Vitek-32全自动微生物分析仪及配套GNI+和GNS药敏卡进行菌株鉴定和药敏试验,替加环素、头孢哌酮/舒巴坦的药敏试验采用K-B法.结果 100株多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为95.0%,其中70株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为97.1% (68/70);对其余14种抗菌药物100%耐药的有5种;除对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低(20.0%)外,对其余药物耐药率都在70%以上.结论 替加环素对多重耐药的鲍曼不动杆菌有较强的敏感性.
作者:章白苓;桂炳东;胡晓彦;胡龙华;贾坤如 刊期: 2011年第07期
对肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的研究可追溯到100多年前.1875年,Cohnheim首次提出“肿瘤是胚胎发育过程中干细胞异位所导致”的假说,当时还没有真正形成“肿瘤干细胞”这个概念,研究还处于空白状态.在随后的100多年间,“肿瘤干细胞”一直都是一个备受争议的话题,虽然至今仍未得到完全共识,但是通过科学家的不断努力,其研究得到了很大发展,使得“肿瘤干细胞”假说不断完善.microRNAs( miRNAs)是一类小分子RNA,近几年才被认识,其强大的生物学作用使得人们对它产生了浓厚的兴趣.miRNAs与CSCs的联系在肿瘤的发生、发展与治疗方面具有重大意义.本文就CSCs、miRNAs以及它们之间的联系和在肿瘤的发生、发展、治疗方面的意义作一综述.
作者:冯娟;于风燕;宋尔卫 刊期: 2011年第07期
贝克曼库尔特( Beckman Coulter)公司的实验室自动化系统(laboratory automation system,LAS)包括实验室信息系统,标本运输,分析前、分析中、分析后处理等子系统/模块.我院于2010年12月引进该系统,且是亚太地区第一条配置Olympus AU5421全自动生化分析仪的贝克曼库尔特公司的LAS系统.
作者:姜宇海 刊期: 2011年第07期