吴兴福;马建峰
目的 研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据.方法 用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型.结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4; 4a0.996 9,4b0.003 1;5a0.990 6,5b0.009 4;6a0.981 2,6b0.018 8;15a0.540 6,15b 0.459 4.HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0.经x2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则.HPA基因分布存在种族和地区差异.结论 河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率高.HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率.
作者:滑世轩;王书勤;岑东;燕备战 刊期: 2011年第07期
目的 建立测定尿蛋白的曙红Y共振散射光法.方法 在pH 3.0枸橼酸盐缓冲液(含SDS)介质中,于λex=λem=360nm测定尿蛋白与曙红Y结合后产生的共振散射光强度.结果 反应体系适条件pH为3.0,曙红Y浓度0.04 mmol/L,SDS浓度为1.5 g/L,曙红y-蛋白质共振散射光强度在蛋白质浓度0~1 600 mg/L范围内呈线性关系,直线回归方程为Y=2.89X+0.12,相关系数r=0.993,低检测限为0.1 mg/L;日内变异系数(CV) 2.32% ~3.12%,日间CV 2.98%~3.68%;平均回收率101.2%;SDS对反应体系有显著增敏作用;与邻苯三酚红法比较结果一致,差异无显著性.结论 曙红Y共振散射光法方法简单、成本低廉,结果准确可靠,为临床常规检测尿蛋白较好的方法.
作者:吴兴福;马建峰 刊期: 2011年第07期
目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白和hTERT调控相关miR-138在正常胃黏膜(NM)、肠上皮化生(IM)、异型增生(DYS)、早期胃癌(EGC)和进展期胃癌(AGC)中的表达及其意义.方法 选取经病理证实的胃黏膜病变组织96例,用免疫组化SP染色法检测hTERT表达水平,real-time PCR检测miR-138表达丰度.结果 在NM、IM、DYS、EGC和AGC 5组标本中,hTERT阳性表达率逐渐升高,分别为0.0%、26.1%、33.3%、75.0%和77.4%;miR-138表达水平呈逐步下降趋势,分别为2.93±1.24、2.12±0.98、1.90±0.58、1.27±0.89和1.68±1.02;低表达miR-138组织的百分率在低、未分化组中显著高于高、中分化组(83.3% vs 36.5%,P<0.01),而与性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分期等无关.结论 miR-138表达丰度的下降,是胃黏膜癌变过程中的早期事件;miR-138有望成为新的胃癌早期诊断指标及治疗靶标.
作者:李学成;王宗华;梁光萍;刘志鹏;王军;邹利全;熊晓峰;陈陵 刊期: 2011年第07期
常规工作中,对2份皮肤科送检的“皮疹原因待查”、梅毒抗体检测为阴性的血样用欧蒙公司间接免疫荧光试剂作抗核抗体(ANA)检测,结果ANA为阳性,核型荧光染色模式为颗粒型,抗体滴度均≥1 000.经欧蒙公司免疫斑点试剂检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体确认,结果抗SSA和抗SSB抗体阳性.随后又发现2例这类患儿和1例抗U1-RNP/Sm抗体阳性病例.抽取5名患儿母亲的血样进行ANA和抗ENA抗体谱检测,结果均为阳性.这种由母体自身抗体通过胎盘进入胎儿体内所致的新生儿红斑狼疮(neonatal lupus erythematosus,NLE)在新生儿的发生率约为1/20 000[1],国内少有报道.
作者:唐吟岫;杨苏 刊期: 2011年第07期
目的 评价M46CN Campylobacter乳胶凝集试验检测弯曲菌的性能.方法 用M46CN Campylobacter乳胶凝集试验对临床373份粪便标本及其48 h培养分离菌进行直接检测和鉴定,以API Campy生化鉴定、革兰染色、氧化酶和动力试验(简称常规鉴定)结果为标准,评价M46CN Campylobacter乳胶凝集试验对标本直接检测和分离菌鉴定结果的性能.结果 M46CNCampylobacter乳胶凝集试验对373份粪便标本进行直接检测,阳性61例,阴性312例,其检测敏感性为80.8%,特异性为99.3%,阳性预测值为96.7%,阴性预测值为95.5%,诊断效率为95.7%.与标准方法鉴定结果相比,经Kappa一致性检验,Kappa =0.854 7,u=16.596 1,P <0.01.对373份粪便标本的分离菌进行鉴定,Campylobacter阳性73例,阴性300例,其检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和诊断效率均为100%.结论 M46CN Campylobacter乳胶凝集试验直接检测粪便标本与标本培养后经标准生化反应鉴定结果具有良好一致性,对培养物中弯曲菌鉴定与标准的生化鉴定结果完全符合,其敏感性和特异性高,适合临床常规鉴定弯曲菌属细菌使用.
作者:杨燕;孙长贵;陈坚;成军;张丽君 刊期: 2011年第07期
目的 通过实施临床生物化学、免疫学、血液细胞学分析的室内质控数据的实时监控方案,为本省临床检验结果互认提供可靠的质量保证依据.方法 设计网络化的管理模式,开发专用软件对本省临床实验室的室内质控数据进行实时监控.结果 各级临床实验室用统一的软件对室内质控进行管理,室内质控数据可及时传到本省临检中心,当失控时省临检中心可通过双向联系提供技术指导,帮助其及时纠正失控.结论 新的模式提高了工作效率,并能及时获得室内质控原始数据,为临床检验结果互认提供了质量保障.
作者:牛华;王天朝;谢颖夫;肖质;陈玲;王建琼;沈云松;曹研;孙虹;苏敏;蔡全刚 刊期: 2011年第07期
急性呼吸道感染(ARI)的病原体有细菌、病毒、支原体等,其中病毒是常见的病原体.了解呼吸系统感染的病原学构成和流行病学特征可为临床及时诊断、治疗和预防呼吸道感染提供依据.本研究调查桂西地区679例急性呼吸道感染患者血清9种呼吸道感染病原微生物IgM类抗体的存在情况,报道如下.
作者:覃羽华;岑光旅;陈文成;许桂丹 刊期: 2011年第07期
临床实验室自动化(clinical laboratory automation,CLA)发展于20世纪80年代初.浙江大学医学院附属第一医院于2001年引进了包括样本处理和模块分析系统的日立全自动生化分析系统,开创了我国全实验室自动化的先河.发展至今,临床实验室自动化已不仅仅局限于临床化学的自动化,而是包括了临床化学、免疫学、血液学、尿液干化学与有形成分分析等的自动化;已不仅仅局限于分析技术的自动化,而是在分析技术自动化的基础上,整合了样本采集、样本处理、样本保存以及数据处理等分析前、分析中及分析后的全程自动化.本文就临床实验室自动化的发展、现状与展望作一综述.
作者:顾光煜 刊期: 2011年第07期
利奈唑胺属于噁唑烷酮类抗菌药,对大多数革兰阳性球菌引起的感染具有较好的治疗作用.2007年12月进入中国市场被临床应用后,对利奈唑胺耐药的肠球菌就开始出现[1].2009年12月~2010年7月我们分别分离到2株耐利奈唑胺的肠球菌,现报道如下.
作者:黄梅;范明;施德仕;王颖;邵海枫 刊期: 2011年第07期
微小RNA( microRNA,miRNA,miR)是参与基因转录后调控的非编码小分子RNA.miRNA与人类肿瘤的发生、发展密切相关.研究表明,miR-145在结肠癌中呈低表达,具有抑制结肠癌生长的潜能;miR-145可以调节多个靶基因,同时,其本身又受p53的调控.miR-145可能是肿瘤抑制基因调控网络的关键因子.本文就miR-145与结肠癌的相关研究进展作一综述.
作者:王峰 刊期: 2011年第07期
目的 研究血清黏蛋白抗原4(mucin antigen4,MUC4)对胰腺癌诊断价值.方法 用ELISA法测定胰腺癌患者血清中MUC4的含量,根据ROC曲线确定MUC4的cut off值并计算ROC曲线下面积(AUCROC),根据诊断效能评估表评价MUC4、CA19-9和CA242对胰腺癌诊断价值.结果 胰腺癌患者血清MUC4的浓度和阳性率与慢性胰腺炎组及健康对照组比较有显著性差异(P <0.01),而慢性胰腺炎组与健康对照组之间无明显差异(P >0.05);MUC4的cut off值为4.54 ng/mL,AUCROC为0.880;胰腺癌患者血清MUCA表达敏感性、特异性和准确性明显优于CA19-9和CA242 (P <0.01).结论 MUC4可单独或与其他指标联合应用诊断胰腺癌,作为鉴别胰腺癌和慢性胰腺炎的重要参考指标.
作者:龚道元;伏红霞;彭艳;游永强;易正山;李子萍 刊期: 2011年第07期
洁芙柔消毒凝胶(简称洁芙柔)已广泛用于医护人员的手部消毒.我们发现,个别新生儿末梢血样本的血常规WBC假性增高,散点图异常,报警提示“血小板聚集”,血涂片镜检可见大小不一的红色团块,疑为消毒凝胶污染标本所致.因此,观察了洁芙柔消毒凝胶对血液分析结果的干扰.
作者:曹波;郁飞;陈红兵 刊期: 2011年第07期
1981年,被誉为“自动化之父”的佐佐木匡秀在日本高知医院建成了全球第一条全实验室自动化( total laboratory automation,TLA)系统.随着TLA的发展,日本各大学附属医院迅速建成或大或小的TLA系统.日立(Hitachi)公司在第1代临床实验室自动化系统(clinical laboratory automatic system 1,CLASl)运行10年后,推出了CLAS2—模块组合式全自动化系统.近年来,CLAS3的概念在此基础上产生:以将标本进样、条码识别、离心、母管分注成子管等功能集于一身的全自动标本前处理模块(pre-analytical modular,PAM)连接日立全自动生化分析仪为基本,开放性地容纳其他厂家的分析系统,同时支持非在线分析仪的样本分析,共同组成分析工作岛群.现就日立TLA系统作一简单介绍.
作者:吴皓 刊期: 2011年第07期
参考区间又称参考范围.临床实验室应为各检验项目提供适合的参考区间,才能使临床医生对患者或健康普查者的检验结果做出准确判断.美国临床实验室标准化协会(clinical laboratory standard institute,CLSI)C28-A3[1]就如何定义、建立和验证临床实验室参考区间作了详尽的论述,但在临床实际操作中会遇到诸多的问题.因此,了解相关的知识,制定完善的实施方案显得十分重要.
作者:王洪亚;张捷 刊期: 2011年第07期
自动化之所以成为实验室发展的首选方案,在于它可以改善工作流程从而提高工作效率,同时减少人工介入环节,保证结果的准确性.一些研究机构对实验室流程比例进行研究发现,样品前处理占了整个实验室一半的资源,样品分析中和分析后占了实验室工作人员15% -20%的时间和精力,样品前、后处理部分占了整个实验室2/3的人力资源.Roche公司充分考虑到目前实验室对于自动化的需求,推出了灵活式自动化解决方案,其覆盖了从样本前处理到后处理的整个流程,具体功能见图l.
作者:王菲菲 刊期: 2011年第07期
MicroRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度为18~24个核苷酸的非编码单链RNA分子.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括细胞增殖、分化和凋亡,个体发育,机体代谢及免疫调节.目前已发现的人类miRNA(约50%)在基因组上定位于肿瘤相关基因的脆性位点[1].根据miRNA与靶基因的配对程度,将miRNA与靶基因的作用方式主要分为两种:完全配对和不完全配对.Wakiyama等[2]发现miRNA还可使靶mRNA脱腺苷化,使得mRNA的polyA尾巴缩短,阻止polyA与多聚腺苷酸结合蛋白(PABPs)的结合从而抑制了翻译的起始.然而,miRNA的异常表达及与靶mRNA结合的改变可促使肿瘤的发生.miRNA在肿瘤中发挥抑癌基因和致癌基因的作用,通过与信号分子结合干预信号传导途径,调节细胞的生存和凋亡[3].多发性骨髓瘤( multiple myeloma,MM)是浆细胞异常增殖、导致免疫球蛋白异常增高的一种进行性的恶性肿瘤.不明意义的单克隆丙种球蛋白病(monoclonal gammopathy of undetermined significance,MGUS)是骨髓中正常的浆细胞增多,无任何临床症状的免疫球蛋白增多症,25%的MGUS患者在长久发病后可进展为MM或B细胞恶性肿瘤.研究证实,miRNA的表达异常参与了MM的发生和发展,在MGUS向MM转化中起重要的作用[4-5].miRNA的表达异常与MM的发生有着密切关系,因此,miRNA与MM的关系值得我们进一步研究和探讨.本文就miRNA与MM的研究进展作一综述.
作者:张霞 刊期: 2011年第07期
2011年7月卫生部发文《全国医疗卫生系统“三好一满意”活动2011年工作任务分解量化指标》明确规定血液常规标本要求30 min内发报告,使检验科的压力逐渐增大.提高血液分析仪的检测效率,保证血细胞计数的准确性并降低复检率,实现血液分析的全实验室自动化,是血液分析面临的机遇和挑战.
作者:沈怡敏;顾国浩;毛菊珍;徐杰;周志英 刊期: 2011年第07期
目的 用免疫蛋白质组学技术筛选烟曲霉分泌蛋白中的免疫优势抗原,用于侵袭性曲霉病(IA)的诊断标志物及疗效监测.方法 YEPG培养基培养14 d的真菌分泌蛋白质进行二维电泳(2-DE)分离,用抗曲霉抗体阳性的IA确诊患者混合血清进行免疫印迹,再用质谱分析及生物信息学方法鉴定阳性反应点.结果 2-DE、免疫印迹结果显示,确诊IA患者血清与分泌蛋白质中多种抗原反应强烈.40个蛋白质点被抗体阳性IA患者血清识别.对40个蛋白质点质谱分析,成功鉴定了39个免疫反应阳性的蛋白质点,代表17种蛋白质,包括分泌型二肽基肽酶V(DppV)、NAD-依赖型苹果酸脱氢酶、硫氧还蛋白还原酶、醛脱氢酶、果糖二磷酸醛缩酶、3-羟丁酰辅酶A脱氢酶等.在鉴定出的17种蛋白质中,有2个为已知抗原,15个首次报道为免疫原性蛋白质.有7种免疫原性蛋白质显示有多个蛋白质点.且在新发现的免疫原性蛋白质中,2号蛋白质(共13个蛋白质点)免疫反应强,鉴定结果为硫氧还蛋白还原酶.结论 免疫蛋白质组学技术是筛选病原体免疫优势抗原的一种有效方法,此次鉴定的抗原可能是潜在的疾病标志物,但还需进一步地实验加以评估.
作者:史利宁;李芳秋;孔小祥;王仕钦;黄梅;邵海枫 刊期: 2011年第07期
目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素等15种抗菌药物的耐药性.方法 常规培养和分离菌株,经Vitek-32全自动微生物分析仪及配套GNI+和GNS药敏卡进行菌株鉴定和药敏试验,替加环素、头孢哌酮/舒巴坦的药敏试验采用K-B法.结果 100株多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为95.0%,其中70株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为97.1% (68/70);对其余14种抗菌药物100%耐药的有5种;除对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低(20.0%)外,对其余药物耐药率都在70%以上.结论 替加环素对多重耐药的鲍曼不动杆菌有较强的敏感性.
作者:章白苓;桂炳东;胡晓彦;胡龙华;贾坤如 刊期: 2011年第07期
全自动酶免疫系统存在进板后降温再升温的过程,使ELISA检测板在37℃条件下实际温育时间缩短,可导致弱阳性样本漏检[1].为此,我们记录了温育塔内温度变化情况,并改变温育时间,观察不同温育时间下检测结果.1 材料及方法1.1 样本来源HBsAg质控品(1 IU/mL)、抗-HCV质控品(2 NCU/mL)、抗-HIV质控品(2 NCU/mL)、抗-TP质控品(1NCU/mL)均购自北京康彻思坦公司,HBsAg质控品批号为201003001,其他3项质控品批号均为200905002;阴性样本为本中心无偿献血者筛检阴性标本.
作者:何成涛;赵静;张立波;姚慧兰;费荣;赵轶伦;马贵明 刊期: 2011年第07期