黄梅；范明；施德仕；王颖；邵海枫
目的 分离培养LacZ转基因小鼠骨髓间充质干细胞(LacZ-MSC),研究其生物学特性.方法 用全骨髓贴壁法分离LacZ-MSC,体外扩增,并观察细胞生长特性,流式细胞议检测细胞周期,成骨成脂诱导试验分析LacZ-MSC转分化特性,X-gal染色法检测其LacZ基因的表达.结果 LacZ-MSC培养4d后有散在呈针尖状的贴壁细胞,5～8d后形成集落或融合呈纤维状;体外扩增每只小鼠原代可获得(1～3)×105个细胞,10代可获得(1 ～3) ×1O10个细胞总数,10代后的细胞增殖能力下降;细胞周期分析显示,G0/G1期:占78.44％,G2/M期:占5.20％,S期:占16.36％;成骨成脂诱导试验表明,LacZ-MSC细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的潜能;X-gal染色结果表明,LacZ-MSC细胞携带LacZ基因.结论 从LacZ转基因小鼠骨髓中成功地分离了携带有LacZ基因的MSC,在体外具有较好的增殖更新能力,3～ 10代的LacZ-MSC作为组织工程细胞具有广阔的应用前景.
作者：毛飞；高硕；钱晖；朱伟；严永敏；孙靖；许文荣 刊期： 2011年第07期
染色体微阵列(chromosomal microarray,CMA)技术对于临床上原因不明的发育迟缓( developmental delay,DD)、智力低下(intellectual disability,ID)、各种孤独症(autism spectrum disorders,ASD)和多发先天畸形(multiple congenital anomalies,MCA)的诊断显示了很好的应用前景.近,国际标准细胞基因组微阵列(International Standard Cytogenomic Array,ISCA)协会两次召开国际会议并形成文件,评估了2003～2008年国际上包括33组共21 698名患者的CMA结果,比较了CMA与传统G-显带技术对于DD/ID和MCA病因学诊断率的差异,结果显示CMA有很高的敏感性,对于DD/ID的病因诊断率高达15％～ 20％,而传统的G-显带核型分析诊断率却仅有3％.因此提出CMA对于原因不明的DD/ID和MCA的病因诊断是首选试验,可以替代传统的G-显带核型分析.会议提出了对染色体拷贝数变异的临床解释.
作者：崔英霞；夏欣一 刊期： 2011年第07期
数字化临床实验室(digital clinical laboratory,DCL)建设是现代医学发展的必然趋势和医疗改革的基础之一.它对于满足人民群众日益增长的医疗卫生服务需求,尤其是对于提高数字化检验、数字化管理与决策和数字化健康服务水平,促进检验医学事业快速发展等都具有重要意义.“十二五”期间,我国卫生信息化建设重点是推进建设国家级、省级和地市级3级卫生信息平台,加强公共卫生、医疗服务、新农村合作医疗、基本药物制度、综合管理5项业务应用,建设健康档案和电子病历2个基础数据库和1个专用网络,即“3521工程”,它是未来五年我国卫生信息化建设的新目标和新任务[1].数字化临床实验室建设工作者需要直面此新形势、新需求、新技术和新实践的机遇与挑战.
作者：顾国浩；邱骏 刊期： 2011年第07期
目的 评价血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC在肺癌的诊断价值及其联合检测的临床意义.方法 将肺癌患者分为鳞癌、腺癌和小细胞癌3组,测定各组和健康对照组血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC水平,比较各组差异,以及肺癌不同类型组间的差异,探讨联合检测对肺癌的诊断意义.结果 肺癌组各项标志物的水平与健康对照组比较有显著性差异(P＜ 0.05),CYFRA21-1、SCC在肺鳞癌和肺腺癌中有显著性差异(P ＜0.05);SCC、CYFRA21-1、NSE在肺鳞癌和肺小细胞癌中有显著性差异(P＜0.05);NSE在肺小细胞癌和肺腺癌中有显著性差异(P＜0.05),5项肿瘤标志物联合检测肺癌阳性率为87％,高于单项肿瘤标志物的检测.结论 5项肿瘤标志物在肺癌的诊断和病理分型中均有一定价值,其中NSE对肺小细胞癌,CYFRA21-1对肺鳞癌诊断价值较高.肿瘤标志物联合检测有利于提高肺癌的诊断率.
作者：吴杰；骆骥才；张钧；谢鑫友 刊期： 2011年第07期
目的 用免疫蛋白质组学技术筛选烟曲霉分泌蛋白中的免疫优势抗原,用于侵袭性曲霉病(IA)的诊断标志物及疗效监测.方法 YEPG培养基培养14 d的真菌分泌蛋白质进行二维电泳(2-DE)分离,用抗曲霉抗体阳性的IA确诊患者混合血清进行免疫印迹,再用质谱分析及生物信息学方法鉴定阳性反应点.结果 2-DE、免疫印迹结果显示,确诊IA患者血清与分泌蛋白质中多种抗原反应强烈.40个蛋白质点被抗体阳性IA患者血清识别.对40个蛋白质点质谱分析,成功鉴定了39个免疫反应阳性的蛋白质点,代表17种蛋白质,包括分泌型二肽基肽酶V(DppV)、NAD-依赖型苹果酸脱氢酶、硫氧还蛋白还原酶、醛脱氢酶、果糖二磷酸醛缩酶、3-羟丁酰辅酶A脱氢酶等.在鉴定出的17种蛋白质中,有2个为已知抗原,15个首次报道为免疫原性蛋白质.有7种免疫原性蛋白质显示有多个蛋白质点.且在新发现的免疫原性蛋白质中,2号蛋白质(共13个蛋白质点)免疫反应强,鉴定结果为硫氧还蛋白还原酶.结论 免疫蛋白质组学技术是筛选病原体免疫优势抗原的一种有效方法,此次鉴定的抗原可能是潜在的疾病标志物,但还需进一步地实验加以评估.
作者：史利宁；李芳秋；孔小祥；王仕钦；黄梅；邵海枫 刊期： 2011年第07期
目的 用Data Manager 2中间件编制生化项目审核规则,实现生化检验报告智能化审核.方法 用Data Manager 2编制范围确认、历史审核和联合判断3类审核规则;分析人工审核和Data Manager2审核的差异.结果用Data Manager 2编制了3类79条审核规则;审核40 669例样本项目,Data Manager2通过率达78.96％;比较人工和Data Manager2审核100例样本项目,Data Manager2耗时＜1 min,筛选出314个应复查项目,而人工(工作经验≥3年者)审核平均需41 min,选出312个需复查项目,漏审2项.结论 用Data Manager 2中间件编制审核规则可简化工作流程,减少人工差错,实现生化报告自动化、智能化的高效审核.
作者：马丽；万海英 刊期： 2011年第07期
自动化之所以成为实验室发展的首选方案,在于它可以改善工作流程从而提高工作效率,同时减少人工介入环节,保证结果的准确性.一些研究机构对实验室流程比例进行研究发现,样品前处理占了整个实验室一半的资源,样品分析中和分析后占了实验室工作人员15％ -20％的时间和精力,样品前、后处理部分占了整个实验室2/3的人力资源.Roche公司充分考虑到目前实验室对于自动化的需求,推出了灵活式自动化解决方案,其覆盖了从样本前处理到后处理的整个流程,具体功能见图l.
作者：王菲菲 刊期： 2011年第07期
常规工作中,对2份皮肤科送检的“皮疹原因待查”、梅毒抗体检测为阴性的血样用欧蒙公司间接免疫荧光试剂作抗核抗体(ANA)检测,结果ANA为阳性,核型荧光染色模式为颗粒型,抗体滴度均≥1 000.经欧蒙公司免疫斑点试剂检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体确认,结果抗SSA和抗SSB抗体阳性.随后又发现2例这类患儿和1例抗U1-RNP/Sm抗体阳性病例.抽取5名患儿母亲的血样进行ANA和抗ENA抗体谱检测,结果均为阳性.这种由母体自身抗体通过胎盘进入胎儿体内所致的新生儿红斑狼疮(neonatal lupus erythematosus,NLE)在新生儿的发生率约为1/20 000[1],国内少有报道.
作者：唐吟岫；杨苏 刊期： 2011年第07期
目的 探讨microRNA (miRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 用实时荧光定量PCR技术检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化.结果 NSCLC患者癌组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P＜0.05),而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达(P＜0.05).随着病情进展,miR-21、miR-222表达升高,miR-126表达下降.结论 miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126、miR-223在NSCLC癌组织中表达存在差异,且miR-21、miR-222和miR-126与NSCLC病情的恶化发展相关,有助于预后判断.
作者：王亚南；史进方；吴元健；徐卫东；蒋敏；顾国浩 刊期： 2011年第07期
参考区间又称参考范围.临床实验室应为各检验项目提供适合的参考区间,才能使临床医生对患者或健康普查者的检验结果做出准确判断.美国临床实验室标准化协会(clinical laboratory standard institute,CLSI)C28-A3[1]就如何定义、建立和验证临床实验室参考区间作了详尽的论述,但在临床实际操作中会遇到诸多的问题.因此,了解相关的知识,制定完善的实施方案显得十分重要.
作者：王洪亚；张捷 刊期： 2011年第07期
利奈唑胺属于噁唑烷酮类抗菌药,对大多数革兰阳性球菌引起的感染具有较好的治疗作用.2007年12月进入中国市场被临床应用后,对利奈唑胺耐药的肠球菌就开始出现[1].2009年12月～2010年7月我们分别分离到2株耐利奈唑胺的肠球菌,现报道如下.
作者：黄梅；范明；施德仕；王颖；邵海枫 刊期： 2011年第07期
随着临床检验实验室信息化与数字化的发展,医院信息管理系统(hospital information management system,HIS)、实验室信息管理系统(laboratory information management system,LIS)等软件的产生,初步实现了实验室检测的自动化,完善了实验室管理.我科自2009年引进Roche公司RSA Pro样本前处理系统,在3年的实践过程中,有一些关于实验室自动化的流程优化与持续改进的体会,现报道如下.
作者：徐晓萍 刊期： 2011年第07期
目的 了解广东地区男性性病患者人乳头瘤病毒(HPV)感染及其基因型.方法 用导流反向斑点杂交法对357例性病门诊男性患者进行HPV检测与基因分型,评价HPV及其基因型与临床症状及疾病类型的相关性.结果 357位受检者中,HPV总阳性率为43.7％ (156/357),包皮、龟头和阴茎标本的HPV阳性率为44.9％ (136/303).赘生物、丘疹、红斑和无症状样本的HPV感染率分别为81.0％(94/116)、53.1％ (17/32)、40.0％ (4/10)和20.5％( 38/185).赘生物的HPV检出率与丘疹、红斑和无症状样本的HPV检出率差异有统计学意义(P＜0.05).基因型分析发现,5例鲍温样的丘疹病患者均有高危型HPV感染,而78例尖锐湿疣患者中低危型HPV感染病例占93.6％( 73/78).21种HPV基因型均被检出,以6(22.1％)、11(21.7％)、16(11.2％)、52(5.6％)、l8(4.8％)和58(4.0％)型感染常见.结论 HPV无症状感染在性病门诊男性就诊者中较常见,HPV基因型分布与疾病类型密切相关.
作者：薛耀华；江汉宁；郑和平；黄进梅；曾维英；吴兴中 刊期： 2011年第07期
实验室自动化系统(laboratory automation system,LAS)于20世纪80年代起源于日本.近年来,人们一直在探索适合自己实验室的工作模式,以加快全实验室自动化的进程.我院于2008年10月引进了贝克曼库尔特(Beckman Coulter)公司的LAS,现将应用体会报告如下.
作者：王开森；牛爱军；丁春梅；孙晓；胡成进 刊期： 2011年第07期
洁芙柔消毒凝胶(简称洁芙柔)已广泛用于医护人员的手部消毒.我们发现,个别新生儿末梢血样本的血常规WBC假性增高,散点图异常,报警提示“血小板聚集”,血涂片镜检可见大小不一的红色团块,疑为消毒凝胶污染标本所致.因此,观察了洁芙柔消毒凝胶对血液分析结果的干扰.
作者：曹波；郁飞；陈红兵 刊期： 2011年第07期
目的 建立测定尿蛋白的曙红Y共振散射光法.方法 在pH 3.0枸橼酸盐缓冲液(含SDS)介质中,于λex=λem=360nm测定尿蛋白与曙红Y结合后产生的共振散射光强度.结果 反应体系适条件pH为3.0,曙红Y浓度0.04 mmol/L,SDS浓度为1.5 g/L,曙红y-蛋白质共振散射光强度在蛋白质浓度0～1 600 mg/L范围内呈线性关系,直线回归方程为Y=2.89X+0.12,相关系数r=0.993,低检测限为0.1 mg/L;日内变异系数(CV) 2.32％ ～3.12％,日间CV 2.98％～3.68％;平均回收率101.2％;SDS对反应体系有显著增敏作用;与邻苯三酚红法比较结果一致,差异无显著性.结论 曙红Y共振散射光法方法简单、成本低廉,结果准确可靠,为临床常规检测尿蛋白较好的方法.
作者：吴兴福；马建峰 刊期： 2011年第07期
近期我们在用Sysmex XS 800i血液分析仪检测血常规的工作中,因仪器的报警提示和WBC分类散点图异常而涂片染色镜检,检出疟原虫感染3例.患者经抗疟治疗1周后,症状消失,血常规正常,痊愈出院.现报道如下.
作者：黄爱军；夏永泉；张葵 刊期： 2011年第07期
MicroRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度为18～24个核苷酸的非编码单链RNA分子.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括细胞增殖、分化和凋亡,个体发育,机体代谢及免疫调节.目前已发现的人类miRNA(约50％)在基因组上定位于肿瘤相关基因的脆性位点[1].根据miRNA与靶基因的配对程度,将miRNA与靶基因的作用方式主要分为两种:完全配对和不完全配对.Wakiyama等[2]发现miRNA还可使靶mRNA脱腺苷化,使得mRNA的polyA尾巴缩短,阻止polyA与多聚腺苷酸结合蛋白(PABPs)的结合从而抑制了翻译的起始.然而,miRNA的异常表达及与靶mRNA结合的改变可促使肿瘤的发生.miRNA在肿瘤中发挥抑癌基因和致癌基因的作用,通过与信号分子结合干预信号传导途径,调节细胞的生存和凋亡[3].多发性骨髓瘤( multiple myeloma,MM)是浆细胞异常增殖、导致免疫球蛋白异常增高的一种进行性的恶性肿瘤.不明意义的单克隆丙种球蛋白病(monoclonal gammopathy of undetermined significance,MGUS)是骨髓中正常的浆细胞增多,无任何临床症状的免疫球蛋白增多症,25％的MGUS患者在长久发病后可进展为MM或B细胞恶性肿瘤.研究证实,miRNA的表达异常参与了MM的发生和发展,在MGUS向MM转化中起重要的作用[4-5].miRNA的表达异常与MM的发生有着密切关系,因此,miRNA与MM的关系值得我们进一步研究和探讨.本文就miRNA与MM的研究进展作一综述.
作者：张霞 刊期： 2011年第07期
贝克曼库尔特( Beckman Coulter)公司的实验室自动化系统(laboratory automation system,LAS)包括实验室信息系统,标本运输,分析前、分析中、分析后处理等子系统/模块.我院于2010年12月引进该系统,且是亚太地区第一条配置Olympus AU5421全自动生化分析仪的贝克曼库尔特公司的LAS系统.
作者：姜宇海 刊期： 2011年第07期
目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白和hTERT调控相关miR-138在正常胃黏膜(NM)、肠上皮化生(IM)、异型增生(DYS)、早期胃癌(EGC)和进展期胃癌(AGC)中的表达及其意义.方法 选取经病理证实的胃黏膜病变组织96例,用免疫组化SP染色法检测hTERT表达水平,real-time PCR检测miR-138表达丰度.结果 在NM、IM、DYS、EGC和AGC 5组标本中,hTERT阳性表达率逐渐升高,分别为0.0％、26.1％、33.3％、75.0％和77.4％;miR-138表达水平呈逐步下降趋势,分别为2.93±1.24、2.12±0.98、1.90±0.58、1.27±0.89和1.68±1.02;低表达miR-138组织的百分率在低、未分化组中显著高于高、中分化组(83.3％ vs 36.5％,P＜0.01),而与性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分期等无关.结论 miR-138表达丰度的下降,是胃黏膜癌变过程中的早期事件;miR-138有望成为新的胃癌早期诊断指标及治疗靶标.
作者：李学成；王宗华；梁光萍；刘志鹏；王军；邹利全；熊晓峰；陈陵 刊期： 2011年第07期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
