章白苓;桂炳东;胡晓彦;胡龙华;贾坤如
目的 建立测定尿蛋白的曙红Y共振散射光法.方法 在pH 3.0枸橼酸盐缓冲液(含SDS)介质中,于λex=λem=360nm测定尿蛋白与曙红Y结合后产生的共振散射光强度.结果 反应体系适条件pH为3.0,曙红Y浓度0.04 mmol/L,SDS浓度为1.5 g/L,曙红y-蛋白质共振散射光强度在蛋白质浓度0~1 600 mg/L范围内呈线性关系,直线回归方程为Y=2.89X+0.12,相关系数r=0.993,低检测限为0.1 mg/L;日内变异系数(CV) 2.32% ~3.12%,日间CV 2.98%~3.68%;平均回收率101.2%;SDS对反应体系有显著增敏作用;与邻苯三酚红法比较结果一致,差异无显著性.结论 曙红Y共振散射光法方法简单、成本低廉,结果准确可靠,为临床常规检测尿蛋白较好的方法.
作者:吴兴福;马建峰 刊期: 2011年第07期
2011年7月卫生部发文《全国医疗卫生系统“三好一满意”活动2011年工作任务分解量化指标》明确规定血液常规标本要求30 min内发报告,使检验科的压力逐渐增大.提高血液分析仪的检测效率,保证血细胞计数的准确性并降低复检率,实现血液分析的全实验室自动化,是血液分析面临的机遇和挑战.
作者:沈怡敏;顾国浩;毛菊珍;徐杰;周志英 刊期: 2011年第07期
MicroRNA (miRNA)是一类由内源基因编码的长度为18~24个核苷酸的非编码单链RNA分子.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括细胞增殖、分化和凋亡,个体发育,机体代谢及免疫调节.目前已发现的人类miRNA(约50%)在基因组上定位于肿瘤相关基因的脆性位点[1].根据miRNA与靶基因的配对程度,将miRNA与靶基因的作用方式主要分为两种:完全配对和不完全配对.Wakiyama等[2]发现miRNA还可使靶mRNA脱腺苷化,使得mRNA的polyA尾巴缩短,阻止polyA与多聚腺苷酸结合蛋白(PABPs)的结合从而抑制了翻译的起始.然而,miRNA的异常表达及与靶mRNA结合的改变可促使肿瘤的发生.miRNA在肿瘤中发挥抑癌基因和致癌基因的作用,通过与信号分子结合干预信号传导途径,调节细胞的生存和凋亡[3].多发性骨髓瘤( multiple myeloma,MM)是浆细胞异常增殖、导致免疫球蛋白异常增高的一种进行性的恶性肿瘤.不明意义的单克隆丙种球蛋白病(monoclonal gammopathy of undetermined significance,MGUS)是骨髓中正常的浆细胞增多,无任何临床症状的免疫球蛋白增多症,25%的MGUS患者在长久发病后可进展为MM或B细胞恶性肿瘤.研究证实,miRNA的表达异常参与了MM的发生和发展,在MGUS向MM转化中起重要的作用[4-5].miRNA的表达异常与MM的发生有着密切关系,因此,miRNA与MM的关系值得我们进一步研究和探讨.本文就miRNA与MM的研究进展作一综述.
作者:张霞 刊期: 2011年第07期
microRNA (miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA,通过和靶mRNA的3’端非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)互补结合诱导靶mRNA的翻译抑制或剪切降解.miRNA表达量的变化和人类多种肿瘤的发生密切相关.肿瘤相关miRNA一般分为肿瘤抑制因子样的miRNA( tumorsuppressive miRNA)和原癌miRNA(oncogenic miRNA).这些miRNA不仅在肿瘤发生和转移中发挥重要作用,而且也有可能成为癌症预防和治疗的关键生物分子[1].
作者:粱宏伟;陈熹;曾科;张辰宇 刊期: 2011年第07期
目的 分离培养LacZ转基因小鼠骨髓间充质干细胞(LacZ-MSC),研究其生物学特性.方法 用全骨髓贴壁法分离LacZ-MSC,体外扩增,并观察细胞生长特性,流式细胞议检测细胞周期,成骨成脂诱导试验分析LacZ-MSC转分化特性,X-gal染色法检测其LacZ基因的表达.结果 LacZ-MSC培养4d后有散在呈针尖状的贴壁细胞,5~8d后形成集落或融合呈纤维状;体外扩增每只小鼠原代可获得(1~3)×105个细胞,10代可获得(1 ~3) ×1O10个细胞总数,10代后的细胞增殖能力下降;细胞周期分析显示,G0/G1期:占78.44%,G2/M期:占5.20%,S期:占16.36%;成骨成脂诱导试验表明,LacZ-MSC细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的潜能;X-gal染色结果表明,LacZ-MSC细胞携带LacZ基因.结论 从LacZ转基因小鼠骨髓中成功地分离了携带有LacZ基因的MSC,在体外具有较好的增殖更新能力,3~ 10代的LacZ-MSC作为组织工程细胞具有广阔的应用前景.
作者:毛飞;高硕;钱晖;朱伟;严永敏;孙靖;许文荣 刊期: 2011年第07期
目的 研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据.方法 用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型.结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4; 4a0.996 9,4b0.003 1;5a0.990 6,5b0.009 4;6a0.981 2,6b0.018 8;15a0.540 6,15b 0.459 4.HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0.经x2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则.HPA基因分布存在种族和地区差异.结论 河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率高.HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率.
作者:滑世轩;王书勤;岑东;燕备战 刊期: 2011年第07期
参考区间又称参考范围.临床实验室应为各检验项目提供适合的参考区间,才能使临床医生对患者或健康普查者的检验结果做出准确判断.美国临床实验室标准化协会(clinical laboratory standard institute,CLSI)C28-A3[1]就如何定义、建立和验证临床实验室参考区间作了详尽的论述,但在临床实际操作中会遇到诸多的问题.因此,了解相关的知识,制定完善的实施方案显得十分重要.
作者:王洪亚;张捷 刊期: 2011年第07期
数字化临床实验室(digital clinical laboratory,DCL)建设是现代医学发展的必然趋势和医疗改革的基础之一.它对于满足人民群众日益增长的医疗卫生服务需求,尤其是对于提高数字化检验、数字化管理与决策和数字化健康服务水平,促进检验医学事业快速发展等都具有重要意义.“十二五”期间,我国卫生信息化建设重点是推进建设国家级、省级和地市级3级卫生信息平台,加强公共卫生、医疗服务、新农村合作医疗、基本药物制度、综合管理5项业务应用,建设健康档案和电子病历2个基础数据库和1个专用网络,即“3521工程”,它是未来五年我国卫生信息化建设的新目标和新任务[1].数字化临床实验室建设工作者需要直面此新形势、新需求、新技术和新实践的机遇与挑战.
作者:顾国浩;邱骏 刊期: 2011年第07期
实验室自动化系统(laboratory automation system,LAS)于20世纪80年代起源于日本.近年来,人们一直在探索适合自己实验室的工作模式,以加快全实验室自动化的进程.我院于2008年10月引进了贝克曼库尔特(Beckman Coulter)公司的LAS,现将应用体会报告如下.
作者:王开森;牛爱军;丁春梅;孙晓;胡成进 刊期: 2011年第07期
贝克曼库尔特( Beckman Coulter)公司的实验室自动化系统(laboratory automation system,LAS)包括实验室信息系统,标本运输,分析前、分析中、分析后处理等子系统/模块.我院于2010年12月引进该系统,且是亚太地区第一条配置Olympus AU5421全自动生化分析仪的贝克曼库尔特公司的LAS系统.
作者:姜宇海 刊期: 2011年第07期
目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素等15种抗菌药物的耐药性.方法 常规培养和分离菌株,经Vitek-32全自动微生物分析仪及配套GNI+和GNS药敏卡进行菌株鉴定和药敏试验,替加环素、头孢哌酮/舒巴坦的药敏试验采用K-B法.结果 100株多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为95.0%,其中70株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为97.1% (68/70);对其余14种抗菌药物100%耐药的有5种;除对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低(20.0%)外,对其余药物耐药率都在70%以上.结论 替加环素对多重耐药的鲍曼不动杆菌有较强的敏感性.
作者:章白苓;桂炳东;胡晓彦;胡龙华;贾坤如 刊期: 2011年第07期
微小RNA( microRNA,miRNA,miR)是参与基因转录后调控的非编码小分子RNA.miRNA与人类肿瘤的发生、发展密切相关.研究表明,miR-145在结肠癌中呈低表达,具有抑制结肠癌生长的潜能;miR-145可以调节多个靶基因,同时,其本身又受p53的调控.miR-145可能是肿瘤抑制基因调控网络的关键因子.本文就miR-145与结肠癌的相关研究进展作一综述.
作者:王峰 刊期: 2011年第07期
目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白和hTERT调控相关miR-138在正常胃黏膜(NM)、肠上皮化生(IM)、异型增生(DYS)、早期胃癌(EGC)和进展期胃癌(AGC)中的表达及其意义.方法 选取经病理证实的胃黏膜病变组织96例,用免疫组化SP染色法检测hTERT表达水平,real-time PCR检测miR-138表达丰度.结果 在NM、IM、DYS、EGC和AGC 5组标本中,hTERT阳性表达率逐渐升高,分别为0.0%、26.1%、33.3%、75.0%和77.4%;miR-138表达水平呈逐步下降趋势,分别为2.93±1.24、2.12±0.98、1.90±0.58、1.27±0.89和1.68±1.02;低表达miR-138组织的百分率在低、未分化组中显著高于高、中分化组(83.3% vs 36.5%,P<0.01),而与性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分期等无关.结论 miR-138表达丰度的下降,是胃黏膜癌变过程中的早期事件;miR-138有望成为新的胃癌早期诊断指标及治疗靶标.
作者:李学成;王宗华;梁光萍;刘志鹏;王军;邹利全;熊晓峰;陈陵 刊期: 2011年第07期
目的 探讨microRNA (miRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 用实时荧光定量PCR技术检测40例NSCLC患者癌组织与癌旁组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-223、miR-145、miR-126的表达变化.结果 NSCLC患者癌组织中miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222较癌旁组织呈高表达(P<0.05),而miR-223、miR-145、miR-126呈低表达(P<0.05).随着病情进展,miR-21、miR-222表达升高,miR-126表达下降.结论 miR-21、miR-20a、miR-31、miR-222、miR-145、miR-126、miR-223在NSCLC癌组织中表达存在差异,且miR-21、miR-222和miR-126与NSCLC病情的恶化发展相关,有助于预后判断.
作者:王亚南;史进方;吴元健;徐卫东;蒋敏;顾国浩 刊期: 2011年第07期
近期我们在用Sysmex XS 800i血液分析仪检测血常规的工作中,因仪器的报警提示和WBC分类散点图异常而涂片染色镜检,检出疟原虫感染3例.患者经抗疟治疗1周后,症状消失,血常规正常,痊愈出院.现报道如下.
作者:黄爱军;夏永泉;张葵 刊期: 2011年第07期
利奈唑胺属于噁唑烷酮类抗菌药,对大多数革兰阳性球菌引起的感染具有较好的治疗作用.2007年12月进入中国市场被临床应用后,对利奈唑胺耐药的肠球菌就开始出现[1].2009年12月~2010年7月我们分别分离到2株耐利奈唑胺的肠球菌,现报道如下.
作者:黄梅;范明;施德仕;王颖;邵海枫 刊期: 2011年第07期
染色体微阵列(chromosomal microarray,CMA)技术对于临床上原因不明的发育迟缓( developmental delay,DD)、智力低下(intellectual disability,ID)、各种孤独症(autism spectrum disorders,ASD)和多发先天畸形(multiple congenital anomalies,MCA)的诊断显示了很好的应用前景.近,国际标准细胞基因组微阵列(International Standard Cytogenomic Array,ISCA)协会两次召开国际会议并形成文件,评估了2003~2008年国际上包括33组共21 698名患者的CMA结果,比较了CMA与传统G-显带技术对于DD/ID和MCA病因学诊断率的差异,结果显示CMA有很高的敏感性,对于DD/ID的病因诊断率高达15%~ 20%,而传统的G-显带核型分析诊断率却仅有3%.因此提出CMA对于原因不明的DD/ID和MCA的病因诊断是首选试验,可以替代传统的G-显带核型分析.会议提出了对染色体拷贝数变异的临床解释.
作者:崔英霞;夏欣一 刊期: 2011年第07期
洁芙柔消毒凝胶(简称洁芙柔)已广泛用于医护人员的手部消毒.我们发现,个别新生儿末梢血样本的血常规WBC假性增高,散点图异常,报警提示“血小板聚集”,血涂片镜检可见大小不一的红色团块,疑为消毒凝胶污染标本所致.因此,观察了洁芙柔消毒凝胶对血液分析结果的干扰.
作者:曹波;郁飞;陈红兵 刊期: 2011年第07期
常熟市医学检验所整合了市卫生局3家直属医院的检验资源,采用“分类存储、统一备份、异地双重保护”的数据资源集中管理模式,实现了人、财、物和信息的全程管理,从而实现集约化管理模式.为满足检测需求,达到流程优化,效率大化的目的,本所历经1年实现了全实验室自动化,引进了相应实验室设备,包括西门子(Siemens)公司ADVIAWorkcell自动化系统以及Sysmex公司全自动血液分析系统,从而打破了传统的流程,提高了实验室的工作效率.经过1年的使用,现就该全实验室自动化(total laboratory automation,TLA)系统的使用体会报告如下.
作者:熊怀民 刊期: 2011年第07期
目的 评价血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC在肺癌的诊断价值及其联合检测的临床意义.方法 将肺癌患者分为鳞癌、腺癌和小细胞癌3组,测定各组和健康对照组血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC水平,比较各组差异,以及肺癌不同类型组间的差异,探讨联合检测对肺癌的诊断意义.结果 肺癌组各项标志物的水平与健康对照组比较有显著性差异(P< 0.05),CYFRA21-1、SCC在肺鳞癌和肺腺癌中有显著性差异(P <0.05);SCC、CYFRA21-1、NSE在肺鳞癌和肺小细胞癌中有显著性差异(P<0.05);NSE在肺小细胞癌和肺腺癌中有显著性差异(P<0.05),5项肿瘤标志物联合检测肺癌阳性率为87%,高于单项肿瘤标志物的检测.结论 5项肿瘤标志物在肺癌的诊断和病理分型中均有一定价值,其中NSE对肺小细胞癌,CYFRA21-1对肺鳞癌诊断价值较高.肿瘤标志物联合检测有利于提高肺癌的诊断率.
作者:吴杰;骆骥才;张钧;谢鑫友 刊期: 2011年第07期