张小琼；张杰；陆琳
目的 建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值.方法 以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCC Ⅱ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法.对124例RA病人和54例健康人血清抗II型胶原蛋白抗体进行检测.结果 血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20 μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630 nm)进行测定.RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01).结论 以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标.
作者：姜旭淦；陈盛霞；吴琴；汤俊民；马建芬；储青；吴亮；颜小云；刘获；姚加平；许化溪；XU Huaxi 刊期： 2008年第03期
目的 研究中国汉族人群中血管内皮生长因子VEGF+936C>T多态性与发生先天性心脏病危险的关系.方法 以PCR-RFLP技术分析105例先天性心脏病和167例非先天性心脏病患者VEGF基因+936C>T(rs3025039)多态性,比较不同基因型与先天性心脏病发生危险的关系;用ELISA法测定两组对象血浆VEGF浓度.结果 VEGF基因+936C>T 3种基因型在先天性心脏病组和非先天性心脏病对照组的分布差异不具有显著性,先天性心脏病组血浆VEGF的浓度明显高于对照组.结论 VEGF基因+936C>T多态性可能不是中国汉族人群先天性心脏病发生的危险因素,但VEGF增高可能与先天性心脏病某些并发症相关.
作者：桑永华；陈亦江；顾海勇；仇万山；陈亮 刊期： 2008年第03期
生化分析仪在自动分析过程中存在着携带污染现象[1-3],我们在实际工作中发现,肌酐(Cr)试剂(碱性苦味酸法)对测定直接胆红素(D-Bil)结果有负干扰,对测定载脂蛋白B(apoB)结果有正干扰.为此,我们用Olympus AU2700全自动生化分析仪进行了相关实验,结果报道如下.
作者：王时南；金明慧 刊期： 2008年第03期
目的 用real-time PCR和RT-PCR检测FP 248 mRNA表达,研究其在白血病和肿瘤诊断中的意义.方法 用real-timePCR和RT-PCR检测肿瘤细胞株(SGC-7901、A549、95D、SW480、U937、PC3)和白血病(ALL、CML、AML)患者骨髓或外周血以及胃癌等消化道肿瘤患者癌组织中FP248 mRNA的表达水平;用RT-PCR技术检测消化道肿瘤患者外周血单个核细胞(PB-MC)FP 248 mRNA的表达.结果 SGC-7901细胞株FP 248 mRNA强阳性,A549和95D细胞弱阳性,其他细胞株阴性;ALL、CML、AML患者骨髓及PBMC FP 248表达上调;胃癌、直肠癌、结肠癌患者癌组织中FP 248 mRnNA的表达高于癌旁组织,食道癌组织为阴性;胃癌、结肠癌和直肠癌患者PBMC未检测到FP 248 mRNA.结论 FP 248的表达可能在白血病和消化道肿瘤的发生发展中起重要作用;检测该基因的表达可能有助于白血病和消化道肿瘤的诊断.
作者：李继刚；许文荣；钱晖；朱伟；王胜；步雪峰；张蕾蕾；徐静；司煜安；陈忠；周忠海；周洪兴；施晓凤 刊期： 2008年第03期
目的 建立16S rRNA基因克隆文库分析菌群的方法,用于临床标本菌群分布的检测.方法 临床标本直接提取核酸,用16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增、纯化、连接、克隆和测序,建立16s rRNA基因克隆文库,序列与数据库进行比对分析.结果 通过16S rRNA基因克隆文库分析,腹泻标本中检出4种细菌,脆弱拟杆菌为绝对优势菌,占91%;腹泻恢复后的粪便标本中菌群呈多样性,检出12种确定种属的细菌,其中脆弱拟杆菌占14%.结论 16S rRNA基因克隆文库是一种较好地研究粪便标本菌群的方法,可直接进行粪便标本的菌群分析和研究各种细菌在腹泻中的作用.
作者：张守印；张集；叶长芸；李振军；卢金星；徐建国 刊期： 2008年第03期
目的 评价男性血清CA125增高的临床意义.方法 对蛋白芯片(C-12)法测出CA125阳性的418例男性患者的病因进行分析.结果 243例肿瘤患者血清CA125阳性率分别为肺癌(21.77%),肝、胆系统癌(11.72%),胃癌(10.29%),结、直肠癌(5.02%),胰腺癌(3.59%),食道癌(3.35%)等.175例非肿瘤患者CA125阳性率分别为肾脏疾病(13.16%),肺部感染(12.68%),消化道疾病(7.66%),肝硬化(4.55%),结核性胸膜炎(2.39%),心功能衰竭(1.44%).两组患者CA125增高水平无显著差异.非肿瘤组单项CA125阳性率显著高于肿瘤组(P<0.01),但≥2项肿瘤标志物(TM)阳性率显著低于肿瘤组(P<0.001).结论 男性患者CA125联合其他TM阳性,高度提示有肺或消化系统恶性肿瘤的可能,即使单项CA125阳性,也应做进一步检查,以排除肿瘤.
作者：王艾丽；栾正云；李梅；罗冰；刘国瑞；黄梅 刊期： 2008年第03期
目的 建立实时荧光PCR进行apoE单核苷酸多态性(SNP)分析法,快速检测人栽脂蛋白E(apoE)等位基因.方法 以人apoE基因中的Cys112Arg为研究对象,用荧光染料SYBR Green Ⅰ标记PCR产物,通过熔解曲线分析结果,并进行SNP分型.用高保真DNA聚合酶提高SNP测定的特异性;通过DNA测序验证荧光定量PCR对apoE基因Cys112Arg分型结果的准确性.结果 每个样品设立2个检测管,利用下游引物P2和SNP检测引物P33、P44进行定量PCR反应,30份样品各自获得2种等位基因扩增产物的熔解曲线,通过熔解曲线的Tm值判读,在30份样本中,apoE基因型3/3、3/4分别有27例和3例,与PCR-RFLP及DNA测序结果一致.结论 建立的apoE等位基因分型法操作简便,结果准确,适合人外周血apoE等位基因的定性检测.
作者：严冰冰；虞涛；方华红；覃瑞；游上游 刊期： 2008年第03期
目的 探讨转录因子FoxP3在外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)内的表达特性.方法 取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3.以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术分别检测FoxP3 mRNA及蛋白质表达水平.结果 FoxP3主要表达于CD4+ T细胞,尤其是CD25高表达的CD4+T细胞,达97%左右;中等程度表达CD25的细胞中也含有少量FoxP3阳性细胞.T细胞活化后,表达FoxP3的CD4+ CD25+T细胞比例显著增高,FCM检测结果与定量PCR结果一致.结论 FoxP3不仅参与维持Treg细胞的功能,也与T细胞的活化有关.FCM检测细胞核内表达的FoxP3分子为研究Treg细胞提供了一种快速、简便的方法.
作者：焦志军；尤海燕；陈蕾；汪毅；王文红；邵启祥 刊期： 2008年第03期
1 在固定时间内作管道冲洗由于使用时间较长,管路存在一定程度的老化现象,容易附着一些结晶物之类的物质,造成堵塞、负压减低等一系列问题,必须在固定时间内作管道冲洗.
作者：贾方增 刊期： 2008年第03期
目的 建立凝胶层析联合电化学发光法检测巨分子促乳素血症方法.方法 通过对层析条件的选择与优化,建立凝胶层析联合电化学发光法优条件,评价方法的精密度及准确度,应用此法区别巨分子促乳素血症与真性高促乳素血症.结果 选用Sephacryl S-200及流速0.75 ml/min为分离不同分子大小促乳素的佳条件,精密度与准确度在临床可接受范围.巨分子促乳素血症与真性高促素血症患者的促乳素层析谱不同,两者LH、E2浓度有显著性差异.结论 凝胶层析法结合电化学发光法能对巨分子促乳素血症与真性高促乳素血症进行鉴别诊断.
作者：丁杰锋；丁丁；张荣富；屠凤娟；夏舟岚 刊期： 2008年第03期
目的 系统评估本室临床化学33项指标的检测试剂对抗坏血酸、乳糜、血红蛋白、结合胆红素、游离胆红素的抗干扰性能.方法 以待评估试剂对上述各干扰物的6个不同水平样品检测,计算各水平检测均值与0点检测均值的比值,规定实验结果在90%～110%区间之内为无干扰区间.结果 抗坏血酸对UA、DBil产生负干扰;游离胆红素对CK-MB、DBil产生正干扰.对GGT产生负干扰;结合胆红素对P产生正干扰,对UA产生负干扰;血红蛋白对ALT、AST、LDH、HBDH、CK、CK-MB、TBil、DBil、Fe、UIBC(铁不饱和结合力)、TIBC(总铁结合力)、UA产生正干扰,对TBA、Amy、ALP、GGT产生负干扰;乳糜对DBil、TP产生负干扰,对Mg、GGT产生正干扰.结论 临床化学抗干扰性能的评估为临床实验室检验结果的解释和检验试剂的选择提供参考.
作者：文江平；郭拥军；鲁辛辛；刘向祎 刊期： 2008年第03期
洋葱伯克霍尔德菌复合体(Burkholderia cepacia complex,BCC)是一组关系相近的非发酵革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界和临床环境.BCC是机会致病菌,常定植于囊性纤维化(cystic fibrosis,CF)、慢性肉芽肿(chronic granulomatous)患者的肺部,是CF患者的高毒力、高致命性病原菌,也是引起抵抗力低下患者医院感染的重要病原菌.
作者：李金钟 刊期： 2008年第03期
本院采用UF-50型尿沉渣分析仪检测随机尿液标本439份尿沉渣并与显微镜检查对照,结果(表1)报告如下.
作者：翁厚光 刊期： 2008年第03期
为了消除可能的携带污染,日立全自动生化分析仪使用清洗液清洗比色杯、管道,但原装清洗液价格昂贵.为了降低成本,我们自制了碱性清洗液,应用效果较好.介绍如下.
作者：蒙雨明；程红革；刘文雄；谭玉慈；周格琛；王贵生；韦维；戴盛明 刊期： 2008年第03期
呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原.我们用直接免疫荧光技术对2001～2006年苏州地区因急性呼吸道感染就诊的门诊及住院患儿13 793例进行鼻咽分泌物的RSV抗原检测,探讨其感染特点,报道如下.
作者：张润；张学兰；季正华；丁云芳；朱宏 刊期： 2008年第03期
目的 探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义.方法 用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况.结果 Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核.结论 在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致.
作者：陆建明；陆建新；沈爱国；张冬梅；王燏婵；何松；程纯 刊期： 2008年第03期
患者,女,25岁,乡镇医院护士,自述10个月前曾给一婴儿打针,扎伤自己手指,婴儿的母亲是HBV携带者.护士于当日注射了乙肝疫苗(30 μg/支).半年后在当地医院查HBVM 5项指标,结果为HBsAg阴性,HBeAg和抗HBc阳性.
作者：李甲芬；李炳法；綦跃花；王加芬；杨柳；王雯 刊期： 2008年第03期
目的 探讨颗粒溶素对U937细胞分泌MCP-1、RANTES与TNF-α功能的影响.方法 ①在U937细胞中加入终浓度为100 ng/ml的乙酰肉豆蔻佛波酯(phorbol mynstate acetate,PMA),刺激2 d后,再加入不同组合的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、葡萄球菌的脂膜酸(lipoteichoic acid,ETA)、颗粒溶素(granulysin,GNLY),刺激培养4 h后收集细胞上清,用ELISA检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的含量.②在U937细胞或原代单核细胞中加入GNLY后,在37℃条件下,刺激4 h,收集上清,以ELISA分析MCP-1(monocyte chemoattractant protein-1,单核细胞趋化因子-1)和RANTES(reduced upon acti-vation normal T expression and secreted,正常T细胞活化时表达和分泌减少因子)的含量;收集细胞并抽提总RNA后,以实时荧光定量RT-PCR方法检测部分基因表达水平的改变.结果 加入GNLY后,LPS诱导U937细胞分泌的TNF-α水平显著增加(P<0.05);U937细胞或单核细胞的MCP-1、RANTES的mRNA水平显著增加(P<0.05),上清液中MCP-1和RANTES水平也增加(P<0.05).结论 GNLY可促进LPS诱导单核细胞分泌TNF-α,本身可刺激单核细胞表达MCP-1、RANTES增高,这为以后进一步研究颗粒溶素的作用机制打下了基础.
作者：黄东标；胡晓燕；钱(王争)；陈燕；周晔；陈波；邓安梅；仲人前 刊期： 2008年第03期
人类基因组测序完成为通过分析蛋白质来诊断疾病提供了前所未有的机会.作为研究蛋白质全貌的蛋白质组学技术也因此得到了空前的发展.人们对采用蛋白质组学技术寻找新的生物标志物并应用于临床寄予了很高期望.既往,主要是通过双向凝胶电泳比较差异蛋白质寻找蛋白质生物标志物,虽然该技术分离蛋白质有很好的效果,但由于操作繁琐、敏感性低,特别是在分析小分子量蛋白时更是显得力不从心,限制了该技术用于临床标本的大规模筛查分析,使其一直局限于基础研究,难以进入临床研究及应用.
作者：胡朝军；李永哲 刊期： 2008年第03期
我们发现应用7060全自动生化分析仪检测血清三酰甘油(TG)时,若设置CO2位于TG之前检测时,可使血清TG测定结果明显升高.为进一步探讨CO2试剂对TG检测的影响,我们进行了如下实验.
作者：张会芬；袁宝军 刊期： 2008年第03期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
