学术投稿

肺炎克雷伯菌介导碳青霉烯类耐药的基因型检测

蒯守刚;邵海枫;王卫萍;史利宁;张小卫;范明;黄梅

关键词:肺炎克雷伯菌, 肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶(KPC), 质粒, 脉冲场凝胶电
摘要:目的 对临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌进行耐药基因型分析.方法 采用琼脂稀释法检测菌株低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和质粒分子杂交等技术对实验菌株进行基因组DNA同源性、介导耐药的基因型、耐药酶pI和耐药基因携带状态等研究.结果 12株肺炎克雷伯菌的亚胺培南和美罗培南MIC值分别为16~64 μg/ml和8~256 μg/ml;对其他被测的β-内酰胺类和喹诺酮类药物广泛耐药,氨基糖苷类耐药型不定.12株菌均扩增出编码碳青霉烯类抗生素耐药的bla<,KPC-2>和编码β-内酰胺酶的bla<,SHV>基因;部分菌株扩增出bla<,TEM>或/和bla<,CTX-M>基因.IEF和分子杂交揭示KPC-2的等电点为6.8,编码基因被携带在一个约56 kb大小的质粒上;PFGE结果显示12株细菌可分为2个克隆型.结论产KPC-2型碳青霉烯酶是本院肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因,垂直传播以及通过质粒传递耐药基因可能是其在本医院流行的主要方式.
临床检验杂志相关文献
  • 汶川地震伤员血常规及生化指标检测的意义

    2008年5月12日,四川汶川地区发生里氏8.0级大地震.我院在5月23日和29日共接收来自灾区的伤员48名,为了了解伤员的总体机体状态,在接诊后立即进行了血常规和生化指标的检测,现对检测结果分析如下.

    作者:杨国斌;蒋超;姚兵;易学明 刊期: 2008年第05期

  • 唾液酸:一种新的心血管疾病标志物?

    血清唾液酸(sialic acid,SA)可能是一个新的心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)潜在的危险因素.

    作者:孔令涛;张丽;汪俊军 刊期: 2008年第05期

  • 百色地区少数民族红细胞CR1基因多态性与地中海贫血及疟疾流行的调查

    百色地区地处云贵高原余脉,与越南接壤,居住着壮、汉、苗等12个少数民族.本课题组调查了本地区正常人群红细胞补体受体1(complement receptor 1,CR1)基因多态性与地中海贫血(地区)及疟疾流行状况,结果报告如下.

    作者:农乐根;潘红飞;覃志坚;何有雄;黄惊鸿;钟京梓;何印雷 刊期: 2008年第05期

  • 改良巴氏涂片法在宫颈病变筛查中的应用分析

    传统巴氏涂片法在宫颈病变筛查中具有公认的成本低廉优势,但其检出率低是一个亟待解决的问题.我们对传统的巴氏涂片法从采样、固定、染色、报告方式等各方面进行了改良,并与传统法结果比较,效果满意.

    作者:蔡虹;郭利鸿;关婷;洪寞 刊期: 2008年第05期

  • 泛耐型鲍曼不动杆菌耐药机制的探讨

    目的 了解泛耐型鲍曼不动杆菌(pan-drug resistant Adnetobacter baumannii,PDRAB)的耐药性和产耐药酶的情况,以及介导碳青霉烯酶的基因型及外膜蛋白的改变.方法 收集临床分离的PDRAB 68株,用三维试验测定菌株产耐药酶的情况;用琼脂稀释法测定低抑菌浓度(MIC);用PCR法检测OXA-23基因和IMP-1基因;用SDS-PAGE检测外膜蛋白.结果 以头孢三嗪(CRO)为底物,68株PDRAB中单产AmpC酶4株,同时产AmpC酶和ESBL酶1株,产可水解头孢三嗪但不能被克拉维酸(CA)和氯唑西林(CLO)抑制的酶的17株,不分解CRO的46株;以亚胺培南(IMP)为底物,所有PDRAB均产可水解亚胺培南的酶,但不能被EDTA、CA和CLO抑制.MIC结果示PDRAB株对包括IMP在内的常用抗菌药物均高度耐药.68株PDRAB均扩增出OXA-23基因,而IMP-1基因均为阴性.与鲍曼不动杆菌敏感株(S株)相比,PDRAB株和仅亚胺培南敏感株(M株)缺失了分子量约27 000处的蛋白质条带,但在31 000处出现一条新的蛋白质条带;与M株相比,有12株PDRAB在约33 000处出现蛋白质条带的缺失.结论我院分离的68株PDRAB携带OXA-23型碳青霉烯酶基因,大多数存在外膜蛋白的缺失或改变,这些改变可能共同介导了细菌在多重耐药前题下继发的对碳青霉烯类药物的耐药.

    作者:史利宁;张慧;邵海枫;王卫萍;张小卫;范明;王洁 刊期: 2008年第05期

  • 铜绿假单胞菌高突变株检测及耐药分析

    目的 了解铜绿假单胞菌高突变菌株的分离情况及其耐药性.方法 对分离的细菌用API 20NE系统鉴定,药敏试验用K-B法,结果按NCCLS/CLSI规定判断,采用高浓度利福平耐药生长试验检测高突变菌株.结果 在100株铜绿假单胞菌中,高突变菌株的分离率为37.0%.高突变菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的耐药率以及多重耐药率均显著高于非高突变菌株.结论高突变铜绿假单胞菌主要来源于慢性呼吸道感染,且对多种抗生素高度耐药和多重耐药,应加强监控,防止其在院内流行.

    作者:曹伟;姚冬梅;郑荣 刊期: 2008年第05期

  • 血液分析仪VCS技术用于疟原虫诊断的探讨

    贝克曼库尔特HmX血液分析仪采用VCS技术同时对单个细胞进行细胞体积(V)、高频电流传导(C)、激光散射(S)的分析,仪器根据各种白细胞在体积大小、颗粒多少及性质、核形态与核浆比等性质的差异,在接近自然状态下对三维空间的细胞进行精确的分析,并对异常细胞有提示功能[1].本文通过回顾近4年来我院534例发热待查疟原虫患者的血常规结果,探讨美国贝克曼库尔特Hmx五分类血液分析仪白细胞散点图在疟疾诊断中的应用.

    作者:王剑超;张永为;黄晨静;胡杭林 刊期: 2008年第05期

  • 慢性丙型肝炎患者外周血CD5+B细胞检测及意义

    目的 研究慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血CD5+B细胞的水平及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测CHC患者外周血B细胞表面CD5分子的表达;应用荧光定量PCR检测HCV RNA滴度,并与肝功能指标ALT进行相关性分析.结果 CHC患者外周血CD5+B细胞显著增多,达(58.4±9.8)%,显著高于慢性乙型肝炎组(39.8±8.2)%和正常对照组(22.5±5.9)%(P均小于0.01).其与ALT无显著相关性(r=0.2,P>0.05),而与HCV RNA拷贝数呈显著正相关(r=0.817,P<0.05).结论 CD5+B细胞可能参与HCV感染的慢性化过程.

    作者:尤海燕;焦志军;刁仁联;陈蕾;汪毅 刊期: 2008年第05期

  • 肝癌患者血浆apoM水平与其他脂类的相关性研究

    目的 分析肝癌患者血浆中载脂蛋白M(apoM)的水平,阐明apoM与其他脂蛋白或载脂蛋白的关系.方法 应用dot-blotting技术检测36例肝癌患者及64名健康人血浆中apoM的水平,酶法及比浊法检测肝癌患者血浆中TG、TC、apoAI、apoB、Lp(a)、HDL-C、LDL-G;比较原发性肝细胞癌患者和健康人血浆中apoM的水平,并对apoM与其他脂蛋白的关系进行相关性分析.结果 血浆apoM水平肝癌组(712.87±345.98)INT/mm2明显高于健康人组(433.70±79.53)INT/mm2(t=3.399,P<0.05),差异具有统计学意义.肝癌患者血浆中的TG、HDL-C、apoA Ⅰ和Lp(a)水平明显低于健康人,而TC、apoB和LDL-C水平与健康人差异无统计学意义(P>0.05).以Pearson相关分析法检测健康人组血浆apoM与Lp(a)呈正相关(r=0.6275,P=0.0005),与HDL-C呈负相关(r=-0.4587,P=0.0161),与其他血脂成分无明显的相关性.肝癌患者血浆apoM与血脂参数无相关性.结论肝癌患者血浆apoM水平明显高于健康人,apoM分析有可能作为判断肝癌受损程度的一种辅助指标.

    作者:蒋敬庭;张晓膺;吴昌平;秦锡虎;罗光华;邓海峰;陆明洋;徐斌;郑璐;石亮荣;李敏;季枚;王赫;Ning XU 刊期: 2008年第05期

  • 人埃立克体病和无形体病的实验室诊断

    人埃立克体病(ehrlichiosis)和无形体病(anaplasmosis)均为人兽共患的新发传染病.病原体分别为埃立克体(ehrlichiae)和无形体(anaplasma),革兰染色阴性,专性细胞内寄生,可体外培养.主要经蜱叮咬传播.

    作者:武建国 刊期: 2008年第05期

  • 上皮钙黏着蛋白mRNA表达与肺癌的相关性研究

    目的 探讨E-cadherin(上皮钙黏着蛋白,E-cad)mRNA与肺癌及其病理类型之间的相关性.方法 用巢式RT-PCR检测50例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中的E-cad mRNA的相对表达量.结果 癌组织1.33±0.53、癌旁组织1.65±0.60、远癌组织2.01±0.46、非肺癌对照肺组织2.09±0.09,经方差分析癌、癌旁和远癌组织差异有统计学意义(F=18.810,P<0.01),但远癌组织与非肺癌对照肺组织之间的差异无统计学意义(P>0.05).肺鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌组织、癌旁组织和远癌组织中E-cad mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 E-cad mRNA表达减少或缺失与肺癌的发生和发展有相关性,与肺癌的组织类型无关.

    作者:段勇;袁育林;张林;刘华;李娅;王玉明 刊期: 2008年第05期

  • 侵袭性真菌感染的实验室诊断进展

    侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI),是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病.

    作者:夏永祥;高应东 刊期: 2008年第05期

  • 朝鲜族和汉族健康体检者血尿酸浓度调查

    目的 了解健康人血尿酸水平与性别、民族及年龄的关系.方法 用生化分析仪测定1 154名朝鲜族与汉族健康人血浆尿酸浓度.结果 血尿酸浓度各年龄段朝、汉族男性均高于女性(朝鲜族40岁以前年龄段除外),但年龄之间无差异.高尿酸血症患病率朝鲜族男性高于朝鲜族女性,汉族女性高于朝鲜族女性,但不同民族男性之间无统计学差异.结论健康人血尿酸水平存在地区和性别差别,但与年龄无明显相关.

    作者:全贞玉;韩春姬;俞星 刊期: 2008年第05期

  • 高频电磁波技术在血清抗HCV抗体检测中的应用

    ELISA通常是在37℃水浴箱或温箱内反应,操作时间较长.用高频电磁波技术加强分子运动,可加速抗原抗体的特异结合反应.我们在ELISA反应中利用高频电磁波技术,检测血清抗HCV抗体,与传统ELISA法相比,可缩短反应时间23 min,提高了工作效率.

    作者:李小华;黄一红;张芹 刊期: 2008年第05期

  • 关于临床细菌耐药性检测的几点思考

    抗菌药物的广泛和不恰当的使用,引起了耐药菌株的大量产生.在传统感染未完全控制的同时,新发传染病及其病原体又不断涌现.虽然新的抗感染药品不断问世,但随之而来的是细菌通过各种变异对新药物的新一轮耐药,这一过程所需要的时间远远短于研发新药所需要的时间.

    作者:邵海枫;赵旺胜 刊期: 2008年第05期

  • 老年甲状腺功能异常者高半胱氨酸测定的临床意义

    目的 了解老年甲状腺功能异常患者血清总高半胱氨酸(homocysteine,HCY)水平,探讨其与甲状腺功能及在心血管疾病中的相关性.方法 收集30例甲状腺功能亢进(甲亢)、29例甲状腺功能减退(甲减)老年患者及36例体检健康人员的血清,用ELISA法测定血清HCY,酶法测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C,电化学发光法测定甲状腺功能指标FT3、FT4.结果 老年甲减组HCY高于对照组(P<0.01),甲亢组HCY低于时照组(P<0.01);甲减组HCY与TG水平呈正相关且甲减组、甲亢组HCY与FT3、FT4均呈负相关.结论老年患者血清总HCY水平与甲状腺功能存在相关性,可作为甲减患者并发冠心痛的危险因素的监测指标.

    作者:朱建一 刊期: 2008年第05期

  • 孕早期绒毛膜细胞原位培养法用于地中海贫血的产前诊断

    目的 探讨孕早期绒毛膜细胞原位培养及在地中海贫血(简称地贫)产前诊断中的应用价值,评价其在产前诊断中的可行性.方法 用COOK公司的绒毛活检吸管,经宫颈吸取绒毛膜细胞(chorionic villus samplings,CVS)标本,分两组:1组直接行地贫基因诊断,另1组进行绒毛膜细胞原位培养,收获细胞后行地贫基因诊断.结果 取材手术69例,64例取材成功,63例绒毛膜细胞原位培养成功,1例培养失败,培养成功率为98.44%.64例中有6例绒毛取材量极少,无法直接提取DNA行地贫基因诊断,经培养后完成基因诊断.产前诊断结果:63例中29例正常儿,异常34例,其中:Bart's胎儿2例,HbH胎儿1例,α地贫基因携带者12例,HbCS胎儿2例,β地贫纯合子3例,β重型地贫6例,β地贫基因携带者5例,α+β复合地贫纯合子1例,α+β复合地贫杂合子2例.结论孕早期绒毛膜细胞原位培养方法简单易行,技术稳定,需标本量少,安全,结果可靠.可应用于地贫的产前诊断.

    作者:黄莉;何冰;谢丹尼;陈一君;吕福通;檀大羡;莫璐 刊期: 2008年第05期

  • 连云港地区儿童微量营养素缺乏的状况分析

    1992年的<世界营养宣言>(世界营养会议,罗马)指出,有20亿以上的人口(主要是妇女和儿童)患有一种或多种微量营养素缺乏症.我国是锌、铁等多种微量营养元素不足十分普遍的国家[1].为了解连云港地区婴幼儿(0.6~6岁)的微量营养素缺乏(或超标)现状,我们进行了调查分析,报告如下.

    作者:王刚;宋继成;王艳娟;宋传涛;钱俊楠;范永桥 刊期: 2008年第05期

  • 半乳凝素-10在CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞中的表达与意义

    目的 探讨半乳凝素-10(galectin-10)在CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)中的表达及其与Foxp3的相关性.方法 通过流式细胞术分选健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中Treg细胞与CD4+CD25-CD127+T细胞,经微量抽提RNA后,用RT-PCR检测galectin-10和Foxp3的mRNA表达水平.结果 galectin-10和Foxp3的mRNA显著表达于Treg细胞,几乎不表达于CD4+CD25-CD127+T细胞.健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中的结果一致.结论 ga-lectin-10基因高表达于Treg细胞中,可以作为Treg细胞一项新的标志物.

    作者:王剑;袁向亮;薛剑;李美星;沈立松 刊期: 2008年第05期

  • 血浆因素对淋巴细胞HLA-B27流式细胞术表型分析的影响

    目前,用于淋巴细胞HLA-B27 表型分析的实验方法有多种,其中以流式细胞术(FCM)方法简介省时,能在短时间完成一次HLA-27分析,为临床实验室常用.

    作者:贾宁人;赵水娣;高峰 刊期: 2008年第05期

临床检验杂志

临床检验杂志

主管:江苏省卫生厅

主办:江苏省医学会