全贞玉;韩春姬;俞星
目前,用于淋巴细胞HLA-B27 表型分析的实验方法有多种,其中以流式细胞术(FCM)方法简介省时,能在短时间完成一次HLA-27分析,为临床实验室常用.
作者:贾宁人;赵水娣;高峰 刊期: 2008年第05期
目的 了解泛耐型鲍曼不动杆菌(pan-drug resistant Adnetobacter baumannii,PDRAB)的耐药性和产耐药酶的情况,以及介导碳青霉烯酶的基因型及外膜蛋白的改变.方法 收集临床分离的PDRAB 68株,用三维试验测定菌株产耐药酶的情况;用琼脂稀释法测定低抑菌浓度(MIC);用PCR法检测OXA-23基因和IMP-1基因;用SDS-PAGE检测外膜蛋白.结果 以头孢三嗪(CRO)为底物,68株PDRAB中单产AmpC酶4株,同时产AmpC酶和ESBL酶1株,产可水解头孢三嗪但不能被克拉维酸(CA)和氯唑西林(CLO)抑制的酶的17株,不分解CRO的46株;以亚胺培南(IMP)为底物,所有PDRAB均产可水解亚胺培南的酶,但不能被EDTA、CA和CLO抑制.MIC结果示PDRAB株对包括IMP在内的常用抗菌药物均高度耐药.68株PDRAB均扩增出OXA-23基因,而IMP-1基因均为阴性.与鲍曼不动杆菌敏感株(S株)相比,PDRAB株和仅亚胺培南敏感株(M株)缺失了分子量约27 000处的蛋白质条带,但在31 000处出现一条新的蛋白质条带;与M株相比,有12株PDRAB在约33 000处出现蛋白质条带的缺失.结论我院分离的68株PDRAB携带OXA-23型碳青霉烯酶基因,大多数存在外膜蛋白的缺失或改变,这些改变可能共同介导了细菌在多重耐药前题下继发的对碳青霉烯类药物的耐药.
作者:史利宁;张慧;邵海枫;王卫萍;张小卫;范明;王洁 刊期: 2008年第05期
根据对细菌的抗原性、脂肪酸、DNA杂交和气相色谱法等分析,Streptococcus milled group(米勒链球菌群)主要分为3个种:咽峡炎链球菌,中间链球菌和星座链球菌.
作者:徐涛;陈玉莲 刊期: 2008年第05期
目的 探讨孕早期绒毛膜细胞原位培养及在地中海贫血(简称地贫)产前诊断中的应用价值,评价其在产前诊断中的可行性.方法 用COOK公司的绒毛活检吸管,经宫颈吸取绒毛膜细胞(chorionic villus samplings,CVS)标本,分两组:1组直接行地贫基因诊断,另1组进行绒毛膜细胞原位培养,收获细胞后行地贫基因诊断.结果 取材手术69例,64例取材成功,63例绒毛膜细胞原位培养成功,1例培养失败,培养成功率为98.44%.64例中有6例绒毛取材量极少,无法直接提取DNA行地贫基因诊断,经培养后完成基因诊断.产前诊断结果:63例中29例正常儿,异常34例,其中:Bart's胎儿2例,HbH胎儿1例,α地贫基因携带者12例,HbCS胎儿2例,β地贫纯合子3例,β重型地贫6例,β地贫基因携带者5例,α+β复合地贫纯合子1例,α+β复合地贫杂合子2例.结论孕早期绒毛膜细胞原位培养方法简单易行,技术稳定,需标本量少,安全,结果可靠.可应用于地贫的产前诊断.
作者:黄莉;何冰;谢丹尼;陈一君;吕福通;檀大羡;莫璐 刊期: 2008年第05期
目的 探讨半乳凝素-10(galectin-10)在CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)中的表达及其与Foxp3的相关性.方法 通过流式细胞术分选健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中Treg细胞与CD4+CD25-CD127+T细胞,经微量抽提RNA后,用RT-PCR检测galectin-10和Foxp3的mRNA表达水平.结果 galectin-10和Foxp3的mRNA显著表达于Treg细胞,几乎不表达于CD4+CD25-CD127+T细胞.健康人外周血和胃癌患者癌旁淋巴结中的结果一致.结论 ga-lectin-10基因高表达于Treg细胞中,可以作为Treg细胞一项新的标志物.
作者:王剑;袁向亮;薛剑;李美星;沈立松 刊期: 2008年第05期
人埃立克体病(ehrlichiosis)和无形体病(anaplasmosis)均为人兽共患的新发传染病.病原体分别为埃立克体(ehrlichiae)和无形体(anaplasma),革兰染色阴性,专性细胞内寄生,可体外培养.主要经蜱叮咬传播.
作者:武建国 刊期: 2008年第05期
ELISA通常是在37℃水浴箱或温箱内反应,操作时间较长.用高频电磁波技术加强分子运动,可加速抗原抗体的特异结合反应.我们在ELISA反应中利用高频电磁波技术,检测血清抗HCV抗体,与传统ELISA法相比,可缩短反应时间23 min,提高了工作效率.
作者:李小华;黄一红;张芹 刊期: 2008年第05期
目的 对临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌进行耐药基因型分析.方法 采用琼脂稀释法检测菌株低抑菌浓度(MIC),用聚合酶链反应(PCR)、DNA测序、脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和质粒分子杂交等技术对实验菌株进行基因组DNA同源性、介导耐药的基因型、耐药酶pI和耐药基因携带状态等研究.结果 12株肺炎克雷伯菌的亚胺培南和美罗培南MIC值分别为16~64 μg/ml和8~256 μg/ml;对其他被测的β-内酰胺类和喹诺酮类药物广泛耐药,氨基糖苷类耐药型不定.12株菌均扩增出编码碳青霉烯类抗生素耐药的bla<,KPC-2>和编码β-内酰胺酶的bla<,SHV>基因;部分菌株扩增出bla<,TEM>或/和bla<,CTX-M>基因.IEF和分子杂交揭示KPC-2的等电点为6.8,编码基因被携带在一个约56 kb大小的质粒上;PFGE结果显示12株细菌可分为2个克隆型.结论产KPC-2型碳青霉烯酶是本院肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因,垂直传播以及通过质粒传递耐药基因可能是其在本医院流行的主要方式.
作者:蒯守刚;邵海枫;王卫萍;史利宁;张小卫;范明;黄梅 刊期: 2008年第05期
目的 建立一种特异性好的检测抗双链DNA抗体的ELISA.方法 先用鱼精蛋白再用DNA依次包被反应板,建立鱼精蛋白包被ELISA(P-ELISA);再用肝素封闭未与DNA结合的鱼精蛋白位点,建立肝素封闭P-ELISA.用P-ELISA、肝素封闭P-ELISA和生物薄片免疫荧光法(BC-IF)对照检测了53例活动性SLE,44例非活动性SLE和27例其他AID患者的抗dsDNA抗体.结果 在P-ELISA检出的57例抗dsDNA抗体阳性中,有11例(活动性SLE 5例,非活动性SLE 6例)在肝素封闭P-ELISA检测为阴性,这11例经BC-IF验证全部为阴性;而在肝素封闭P-ELISA检出的46例阳性中,仅1例(非活动性SLE)与BC-IF不符.结论肝素封闭P-ELISA可降低P-ELISA检测抗dsDNA抗体的假阳性率.
作者:徐兵;陈怡;黄毅;马晓宁;潘晨;伍严安 刊期: 2008年第05期
目的 分析肝癌患者血浆中载脂蛋白M(apoM)的水平,阐明apoM与其他脂蛋白或载脂蛋白的关系.方法 应用dot-blotting技术检测36例肝癌患者及64名健康人血浆中apoM的水平,酶法及比浊法检测肝癌患者血浆中TG、TC、apoAI、apoB、Lp(a)、HDL-C、LDL-G;比较原发性肝细胞癌患者和健康人血浆中apoM的水平,并对apoM与其他脂蛋白的关系进行相关性分析.结果 血浆apoM水平肝癌组(712.87±345.98)INT/mm2明显高于健康人组(433.70±79.53)INT/mm2(t=3.399,P<0.05),差异具有统计学意义.肝癌患者血浆中的TG、HDL-C、apoA Ⅰ和Lp(a)水平明显低于健康人,而TC、apoB和LDL-C水平与健康人差异无统计学意义(P>0.05).以Pearson相关分析法检测健康人组血浆apoM与Lp(a)呈正相关(r=0.6275,P=0.0005),与HDL-C呈负相关(r=-0.4587,P=0.0161),与其他血脂成分无明显的相关性.肝癌患者血浆apoM与血脂参数无相关性.结论肝癌患者血浆apoM水平明显高于健康人,apoM分析有可能作为判断肝癌受损程度的一种辅助指标.
作者:蒋敬庭;张晓膺;吴昌平;秦锡虎;罗光华;邓海峰;陆明洋;徐斌;郑璐;石亮荣;李敏;季枚;王赫;Ning XU 刊期: 2008年第05期
目的 验证罗氏COBAS E601电化学发光检测系统检测β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的分析测量范围(AMR)和临床可报告范围(ERR).方法 按照NCCLS EP6-A文件要求,对本实验室Roche公司COBAS E601电化学发光检测系统检测β-HCG进行AMR和CRR的验证实验.结果 β-HCG的功能灵敏度为0.117 mIU/ml;AMR在0.14~9763.0 mIU/ml;CRR在0.117~1 952 600 mIU/ml之间.结论 COBAS E601电化学发光检测系统测定β-HCG的AMR和CRR能满足临床要求,但各实验室不可盲目采信厂家提供的参数.
作者:邱方;张世忠;冯涛 刊期: 2008年第05期
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在生物体细胞内,外源性或内源性的双链RNA(double stranded RNA,dsR-NA)引起的序列特异性基因沉默(post-transcriptional gene si-lencing,PTGS).
作者:徐建华;张秀明;黄宪章;庄俊华 刊期: 2008年第05期
传统巴氏涂片法在宫颈病变筛查中具有公认的成本低廉优势,但其检出率低是一个亟待解决的问题.我们对传统的巴氏涂片法从采样、固定、染色、报告方式等各方面进行了改良,并与传统法结果比较,效果满意.
作者:蔡虹;郭利鸿;关婷;洪寞 刊期: 2008年第05期
目的 了解铜绿假单胞菌高突变菌株的分离情况及其耐药性.方法 对分离的细菌用API 20NE系统鉴定,药敏试验用K-B法,结果按NCCLS/CLSI规定判断,采用高浓度利福平耐药生长试验检测高突变菌株.结果 在100株铜绿假单胞菌中,高突变菌株的分离率为37.0%.高突变菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的耐药率以及多重耐药率均显著高于非高突变菌株.结论高突变铜绿假单胞菌主要来源于慢性呼吸道感染,且对多种抗生素高度耐药和多重耐药,应加强监控,防止其在院内流行.
作者:曹伟;姚冬梅;郑荣 刊期: 2008年第05期
百色地区地处云贵高原余脉,与越南接壤,居住着壮、汉、苗等12个少数民族.本课题组调查了本地区正常人群红细胞补体受体1(complement receptor 1,CR1)基因多态性与地中海贫血(地区)及疟疾流行状况,结果报告如下.
作者:农乐根;潘红飞;覃志坚;何有雄;黄惊鸿;钟京梓;何印雷 刊期: 2008年第05期
2007年12月我们从1例肺炎儿童痰中分离出1株蕈状芽胞杆菌(Bacillus mycoides),报道如下.
作者:苏燕;胡琼 刊期: 2008年第05期
目的 探讨一种新型纳米荧光染料C-dots作为细胞标记物的应用.方法 不同直径的C-dots和B16小鼠黑色素瘤细胞共同培养,用激光共聚焦荧光显微镜观察C-dots被摄取及在细胞内分布情况.利用MTT比色法测定C-dots标记的细胞及未标记细胞的增殖情况;用台盼蓝染色法检查标记细胞活性.结果 直径10 nm和5 nm C-dots可用于标记细胞.在共聚焦显微镜下,可见C-dots标记细胞的细胞膜带有近红外荧光.利用MTT比色法测定标记及未标记细胞的A值无显著差异,C-dots标记细胞的活性与对照组相比也无显著差异.结论 C-dots可作为细胞内的标记物,用于细胞示踪、增殖试验等研究.
作者:周涛;符伟国;王玉琦 刊期: 2008年第05期
衡量乙型肝炎病毒(HBV)传染性指标,荧光定量PCR检测HBV DNA敏感度高,特异性好,在临床上应用越来越多,而传统血清标志物(HBVM)用ELISA法检测灵敏度较低,不能很好地反映出HBV的体内复制与传染情况,存在不足.本文对3 247例标本同时检测HBVM和HBV DNA,以探讨其关系,为临床正确选用实验室指标防治乙型肝炎提供依据.
作者:陆俊忠 刊期: 2008年第05期
贝克曼库尔特HmX血液分析仪采用VCS技术同时对单个细胞进行细胞体积(V)、高频电流传导(C)、激光散射(S)的分析,仪器根据各种白细胞在体积大小、颗粒多少及性质、核形态与核浆比等性质的差异,在接近自然状态下对三维空间的细胞进行精确的分析,并对异常细胞有提示功能[1].本文通过回顾近4年来我院534例发热待查疟原虫患者的血常规结果,探讨美国贝克曼库尔特Hmx五分类血液分析仪白细胞散点图在疟疾诊断中的应用.
作者:王剑超;张永为;黄晨静;胡杭林 刊期: 2008年第05期
天然杀伤细胞(NK细胞)能直接杀伤靶细胞、介导AD-CC作用及参与免疫调节.杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)是一种主要表达在NK细胞和部分T细胞表面的受体,其基因位于人染色体19q13.4,呈现高度多态性.KIR能特异性地识别细胞表面MHC Ⅰ类分子并与之结合,从而发挥免疫调节功能.KIR在HIV感染、HCV感染、自身免疫性疾病等多种疾病及移植中发挥重要作用.
作者:何成涛;李丽 刊期: 2008年第05期