纪冰；马筱玲；蔡朝阳；李华；陈多炎
高半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是人体内的一种含硫非必需氨基酸,是蛋氨酸的代谢物.Hcy是冠心病的独立危险因素的报道较多,与糖尿病的相关性的研究也已经开展.本文对124例不同微血管病变糖尿病(DMAP)患者Hcy水平进行检测,探讨高Hcy血症与DMAP相关性.
作者：钱娟英；吴国球；芦惠霞 刊期： 2007年第03期
1 密码验证在实验室信息系统(LIS)中应用的局限性LIS首先要考虑的是安全性问题.在病历、医疗纠纷和药物验证中,检验数据是有法律作用的证据,在LIS中正确辨认人员的身份是极其重要的.
作者：顾国浩；邱骏 刊期： 2007年第03期
乙型肝炎病毒(HBV)可分为8个基因型(A-H)[1],呈一定的地理区域性分布.不同基因型之间的病毒载量、生化和组织学、病情的转归,以及药物治疗的反应都有一定的差异.本文对HBV感染者的血清进行基因分型,以了解大连地区HBV基因型分布与HBV DNA复制水平,现报告如下.
作者：石龙；韩博；许琳婧；张虎斌 刊期： 2007年第03期
目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株(10.7%),SCCmecⅢ型70株(83.3%),SCCmecⅣ型5株(6.0%).所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异(P＞0.05),对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型(P＜0.05).结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.
作者：纪冰；马筱玲；蔡朝阳；李华；陈多炎 刊期： 2007年第03期
研究表明,S-100B蛋白对中枢神经系统的损伤有高度的敏感性和特异性,其含量变化与临床病理及影像学改变密切相关,是颅脑损伤较好的生物化学标志物.我们通过测定40例颅脑损伤患者血清S-100B蛋白的浓度,观察其在脑实质损伤和脑血肿的临床诊断及预后判断中的意义.
作者：郭红梅；胡殿雷 刊期： 2007年第03期
目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×103～2.9×109)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P＜0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.
作者：毛丽萍；王惠民；张子玉；吴月平；章幼奕；鞠少卿；陈育凤 刊期： 2007年第03期
目的 对高效液相色谱法(HPLC)定量分析血红蛋白A2(HbA2)用于筛查β珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血,地贫)基因携带者做出方法学评价.方法 地贫筛查中随机选择的75对夫妇及140对地贫高危夫妇,以地贫基因分析结果为金标准,通过比较样品内和样品间HbA2的HPLC测定值的变异系数评价该法的精密度和稳定性;通过分析阳性样品的基因型评价HPLC检测地贫的准确性.结果 用HPLC分析当地健康成人的HbA2的95%频数分布范围为2.28%～3.42%,HPLC诊断β地贫杂合子的HbA2临界值(cut off value)为≥4.35%.在基因分析确诊的65例β地贫杂合子、19例αβ复合地贫、2例HbE病及8例HbH病中,HPLC仅1例漏诊,无误诊.结论 高效液相色谱法是一种快速、稳定性强、精密度好的HbA2测定方法,可用于β地贫杂合子的筛查.
作者：张新华；李平萍；罗瑞贵；黄蒙莎；兰小英；吴志奎；王荣新 刊期： 2007年第03期
目的 探讨弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)的实用实验诊断指标.方法 收集临床确诊的DIC患者33例,早期可疑DIC后确诊为DIC的患者30例,体检健康志愿者35例进行检测.用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、激活部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),用免疫比浊法检测血浆D-二聚体(D-D),乳胶凝集半定量试验检测纤维蛋白(原)降解产物(FDP),发色底物法检测抗凝血酶活性(AT:A).结果 DIC患者组D-D和FDP显著升高,AT:A显著下降,PT、APTT、TT均显著延长;D-D和FDP的阳性率均达100%,AT:A和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3 P)的阳性率分别为88%和82%,与早期可疑DIC组及正常对照组比较有统计学意义(P＜0.05).在早期可疑DIC阶段,D-D、AT:A、FDP的阳性率分别为87%、63%和53%,而PT、APTT、TT、3P试验的异常率仅为40%、33%、23%和20%.结论 D-D、FDP、AT:A检测在DIC早期诊断中具有重要价值,敏感性高于PT、APTT、TT等.
作者：郦卫星；吴茅；刘建栋 刊期： 2007年第03期
目的 了解慢性髓细胞白血病(CML)基因表达谱规律,对在CML中高表达的PCNA基因进行分析鉴定.方法 应用基因表达谱芯片技术,对CML患者和正常人的外周血单个核细胞(PBMC)基因表达差异进行分析.对于其中表达显著上调的增殖细胞核抗原(PCNA)基因,根据其核苷酸序列设计并合成该基因序列特异性引物,以CML PBMC的总RNA为模板,RTPCR技术扩增PCNA基因;用蛋白印迹法分析PCNA蛋白的表达.结果 从4 096个基因中筛选出差异表达基因共591奈,其中288条基因表达增强,303条基因表达降低.在表达增高的基因中,PCNA表达增高8.725倍.在病人的标本中扩增出PCNA基因,蛋白印迹证明CML病人PCNA蛋白表达增高.结论 基因表达谱芯片检测发现CML中PCNA基因高表达,并在mRNA转录水平及蛋白表达水平证明其异常表达,提示PCNA的表达增高与CML的发病存在一定的关系.
作者：李绵洋；曾媛；丛玉隆；达万明 刊期： 2007年第03期
目的 对临床标本中分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,试图建立一种简便的鉴定黏滑口腔球菌的方法,并了解其对临床常用的7种抗生素的耐药特性.方法 常规方法分离菌株,对分离株进行系统的生化鉴定,同时采用K-B法对分离菌株的耐药性进行检测,参考CLIS标准(2006年)中葡萄球菌的药敏判断标准进行判断.结果 从临床标本中分离出246株黏滑口腔球菌,该菌菌落大多牢固黏附于血琼脂平板上,灰白色、不溶血,镜下多呈四联状排列,革兰阳性,也可见成双排列者,触酶阴性,在50 g/L NaCl琼脂上不生长,杆菌肽、呋喃唑酮均敏感,据此可予以简单、快速鉴定.黏滑口腔球菌对β-内酰胺类抗生素敏感,β-内酰胺酶阴性.结论 通过对分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,总结出可以利用菌落黏性、镜下形态、触酶试验等简便的鉴定试验对临床标本中的黏滑口腔球菌进行快速鉴定.
作者：魏莲花；张俭；邹凤梅；刘刚 刊期： 2007年第03期
目的 观察维生素K3(VK3)对人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响及其survivin基因表达的变化.方法 CCK 8试剂检测VK3对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33342荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察凋亡细胞核的形态,用流式细胞仪检测细胞凋亡率(Annexin V/PI法),RT-PCR法检测SMMC-7721细胞survivin mRNA的表达水平.结果 (2、5、10、20、25μmol/L)VK3作用SMMC-7721细胞48 h后,生长抑制率分别为33.8%、50.1%、63.9%、78.5%、84.7%;细胞的凋亡率分别是33.28%、63.97%、77.69%、87.30%、92.40%;survivin mRNA在凋亡的SMMC-7721细胞内的表达明显下降.结论 VK3能抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导其发生凋亡,survivin表达水平的下降可能与VK3诱导的SMMC-7721细胞凋亡有关.
作者：石亮；林向阳；陈晓东；陶志华 刊期： 2007年第03期
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)中外周血颗粒溶素的表达及意义.方法 用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测60例PBC患者颗粒溶素的mRNA表达,用ELISA法检测血清中颗粒溶素水平,以100例体检健康者、80例肝炎后肝硬化患者和80例SLE患者为对照组.结果 PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素mRNA的平均拷贝数(2.8±1.9)×108高于肝炎后肝硬化患者(5.6±2.9)×106、SLE患者(9.5±2.4)×106和体检健康者(2.5±1.4)×106(P＜0.01).血清中颗粒溶素的水平为(16.12±2.24)ng/ml,也显著高于体检健康者、肝炎后肝硬化患者、SLE患者.结论 FQ-PCR法检测颗粒溶素的mRNA水平及ELISA方法检测血清中颗粒溶素的浓度,有助于了解PBC患者体内免疫状态,为临床诊治和研究提供依据.
作者：陈燕；周晔；姚定康；蒋天舒；谷明莉；朱樑；仲人前；邓安梅 刊期： 2007年第03期
江苏省血液中心于2005年和2006年上半年3次发放室间质控品,对全省28家采供血机构(其中血液中心2家,中心血站12家,基层血站12家,中心血库2家)进行血液检验能力的室间比对,现将结果总结如下.
作者：周静宇；唐荣才；郭东辉 刊期： 2007年第03期
血液分析仪经新鲜血校准后,参考范围内测定值准确度高,随血小板降低,准确度降低.对于血液病及放、化疗低血小板患者,临床医生结合观察临床体征及其他出凝血指标,可更好理解血小板测定值.
作者：蔡钢强；陈化禹；焦连亭；伊学军 刊期： 2007年第03期
良、恶性胸水的鉴别诊断是临床十分常见和棘手的问题.50%的肺癌病人在疾病过程中会出现胸水[1],即使经胸水脱落细胞学检查、胸膜穿刺活检、纤维支气管镜等反复检查后,仍有20%的胸腔积液病因不明,其中大多终被确诊为癌性胸水[2].我们对92例胸水进行HER-2/neu和IFN-γ含量检测,以探索鉴别良、恶性胸腔积液的新途径.
作者：丘世飏；易斌；林桦；黄大毛 刊期： 2007年第03期
目的 制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA.方法 制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率.在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察.结果 制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520 nm有Au特征性的大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其大吸收峰改变为524 nm.Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的大覆盖数目为(132±10)条,大杂交效率为(22±3)%.在液相中与HBVDNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体.结论 成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测.
作者：习东；宁琴；卢强华；姚凯伦；刘祖黎；罗小平 刊期： 2007年第03期
目的 评价以2-甲氧基-4-(2'-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MNP-NAG)为底物的全液体试剂两点终点法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性.方法 尿样中NAG作用于底物MNP-NAG水解产生游离MNP,其生成速率与酶活性在一定范围内成正比.结果 该法显色大吸收波长为505 nm,试剂1和试剂2适pH值分别为4.6和10.2,适底物浓度为16 mmol/L,线性范围达198 U/L,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.2%和3.8%.166例健康体检者尿样NAG活性参考范围为:(6.21±4.53)U/gCr((x)±1.96 s).结论 MNP-NAG底物法测定尿NAG灵敏度高,操作简便,结果可靠,适合临床应用.
作者：周午琼；王向阳 刊期： 2007年第03期
目的 用聚合酶链反应(PCR)技术鉴定拟杆菌.方法 以该属细菌的标准16S Rrna基因序列为靶基因设计通用引物,对该属标准菌株及不同来源的临床株进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因测序验证引物的特异性和敏感性.结果 设计的引物能扩增13株拟杆菌,而40株肠杆菌科细菌、本实验室分离和保存的其他非拟杆菌不能被扩增;13株拟杆菌所得的PCR产物经基因测序、比对相应标准菌的16S Rrna,同源性在81%～100%.结论 建立的方法可特异的鉴定拟杆菌,敏感性为100个细菌的基因组.
作者：王国戗；罗予 刊期： 2007年第03期
目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin和重组质粒载体中人工合成DNA序列,定量检测健康成年人血浆DNA含量.结果 本法能在同一个反应管中对目的基因和内参照进行同步扩增,两者的扩增无相互干扰,特异性好;重组质粒DNA的平均扩增效率达90%,β-actin基因的平均扩增效率接近100%;本法批内变异系数(CV)11%,批间CV17%.结论 成功建立含有内参照的双重实时荧光定量PCR方法,可对血浆DNA进行定量检测.
作者：陈丹；潘世扬；张丽霞；高丽；谢而付；黄珮珺；戎国栋 刊期： 2007年第03期
目的 研究和评估PCR扩增阻断联合荧光探针检测乙型肝炎病毒(HBV)基因前C区1896位点突变的新方法.方法 根据HBV DNA前C区1896位点的突变设计一系列引物,引物3'末端位于1896位,并与突变模板1896位碱基互补.在引物的倒数第2及第3位碱基设计为错配碱基,以增加反应的特异性.结果 以2个错配碱基的突变型引物对野生型质粒进行PCR扩增,具有显著的阻断作用,对1896位突变型质粒无阻断作用,而且对其检测的低拷贝数可达5×103拷贝/ml.选用该引物对95例随机采集的HBv阳性标本进行HBV前C区G1896A位碱基突变的检测,8例为阳性,其突变率为8.4%.结论 本法在临床标本检测中是一种有效的和简便的方法.
作者：刘晓明；徐志学；糜克永；黄山；甄燕 刊期： 2007年第03期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
