顾国浩；邱骏
目的 评价以2-甲氧基-4-(2'-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MNP-NAG)为底物的全液体试剂两点终点法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性.方法 尿样中NAG作用于底物MNP-NAG水解产生游离MNP,其生成速率与酶活性在一定范围内成正比.结果 该法显色大吸收波长为505 nm,试剂1和试剂2适pH值分别为4.6和10.2,适底物浓度为16 mmol/L,线性范围达198 U/L,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.2%和3.8%.166例健康体检者尿样NAG活性参考范围为:(6.21±4.53)U/gCr((x)±1.96 s).结论 MNP-NAG底物法测定尿NAG灵敏度高,操作简便,结果可靠,适合临床应用.
作者：周午琼；王向阳 刊期： 2007年第03期
目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×103～2.9×109)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P＜0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.
作者：毛丽萍；王惠民；张子玉；吴月平；章幼奕；鞠少卿；陈育凤 刊期： 2007年第03期
目的 建立荧光定量两探针检测HCV RNA方法.方法 对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较.结果 荧光定量两探针法阳性率分别为89.5%(94/105)和2.3%(5/220).两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4%(75/105)和0.45%(1/220);69.5%(73/105)和1.8%(4/220).结论 荧光定量两探针法检测HCV RNA有较高的敏感性和特异性.
作者：崔之础；张冬雷；施健；黄竺筠 刊期： 2007年第03期
目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株(10.7%),SCCmecⅢ型70株(83.3%),SCCmecⅣ型5株(6.0%).所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异(P＞0.05),对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型(P＜0.05).结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.
作者：纪冰；马筱玲；蔡朝阳；李华；陈多炎 刊期： 2007年第03期
目的 研究模拟肺癌患者血浆DNA中APC基因甲基化低检测限,确定不同甲基化检测技术在早期肺癌诊断中的价值.方法 用普通甲基化特异性基因扩增(methylation specific PCR,MSP)方法检测肺癌细胞株NCI-H460细胞APC基因,以酚-氯仿经典方法提取NCI-H460细胞DNA,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入相同的健康人血浆200μl中去,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟血浆样本中提取血浆DNA.对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以Sybr-Green Ⅰ为染料进行实时荧光定量MSP检测,同时进行普通MSP检测.结果 NCI-H460细胞中的APC基因启动子1A区719位点存在甲基化,实时荧光定量MSP检测模拟肺癌患者血浆APC基因甲基化的低检测限为在200 μl血浆中能检测出102个肿瘤细胞的DNA,而以普通MSP检测,200 μl血浆中需投入103个以上肿瘤细胞的DNA才有弱阳性条带.实时荧光定量MSP检测技术比普通MSP检测的敏感性至少高出10倍.结论 实时荧光定量MSP比普通MSP检测灵敏度高,该技术用于肺癌患者血浆DNA甲基化检测,可能有助于肺癌早期诊断.
作者：张丽霞；潘世扬；谢而付；陈丹；高丽；黄珮珺；杨迪；张寄南 刊期： 2007年第03期
目的 探讨弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)的实用实验诊断指标.方法 收集临床确诊的DIC患者33例,早期可疑DIC后确诊为DIC的患者30例,体检健康志愿者35例进行检测.用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、激活部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),用免疫比浊法检测血浆D-二聚体(D-D),乳胶凝集半定量试验检测纤维蛋白(原)降解产物(FDP),发色底物法检测抗凝血酶活性(AT:A).结果 DIC患者组D-D和FDP显著升高,AT:A显著下降,PT、APTT、TT均显著延长;D-D和FDP的阳性率均达100%,AT:A和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3 P)的阳性率分别为88%和82%,与早期可疑DIC组及正常对照组比较有统计学意义(P＜0.05).在早期可疑DIC阶段,D-D、AT:A、FDP的阳性率分别为87%、63%和53%,而PT、APTT、TT、3P试验的异常率仅为40%、33%、23%和20%.结论 D-D、FDP、AT:A检测在DIC早期诊断中具有重要价值,敏感性高于PT、APTT、TT等.
作者：郦卫星；吴茅；刘建栋 刊期： 2007年第03期
高半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是人体内的一种含硫非必需氨基酸,是蛋氨酸的代谢物.Hcy是冠心病的独立危险因素的报道较多,与糖尿病的相关性的研究也已经开展.本文对124例不同微血管病变糖尿病(DMAP)患者Hcy水平进行检测,探讨高Hcy血症与DMAP相关性.
作者：钱娟英；吴国球；芦惠霞 刊期： 2007年第03期
目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin和重组质粒载体中人工合成DNA序列,定量检测健康成年人血浆DNA含量.结果 本法能在同一个反应管中对目的基因和内参照进行同步扩增,两者的扩增无相互干扰,特异性好;重组质粒DNA的平均扩增效率达90%,β-actin基因的平均扩增效率接近100%;本法批内变异系数(CV)11%,批间CV17%.结论 成功建立含有内参照的双重实时荧光定量PCR方法,可对血浆DNA进行定量检测.
作者：陈丹；潘世扬；张丽霞；高丽；谢而付；黄珮珺；戎国栋 刊期： 2007年第03期
同一实验室的多台血液分析仪,由于生产厂家、型号、使用年限、检测原理等诸多因素的影响,同一份标本在各台仪器上的检测结果差别较大.我们用新鲜全血为校准物对本室的四台血液分析仪进行了校准和评价,结果报道如下.
作者：周远青；唐跃华；梁瑞莲；叶佩玑；梁玉全；吴建辉；林志远 刊期： 2007年第03期
β葡萄糖苷酶在传统细菌学鉴定中很少应用.近年由于人工合成了此酶的色原底物,已较多地用于自动或人工细菌鉴定装置而受到重视.我们用国产底物建立了此酶的快速检测法并用于细菌和假丝酵母菌的鉴定,报告如下.
作者：孙慧芳；路秀文 刊期： 2007年第03期
目的 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,研究不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平.方法 普通RT-PCR结合胶回收制备Foxp3 mRNA-CDS标准品,利用标准品制备定量PCR标准曲线,对曲线进行灵敏度、精密度和特异性分析,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测40例胃癌和8例正常对照外周血Foxp3 mRNA.结果 获得Foxp3全长CDS标准品,标准曲线范围(2.8×102)～(2.8×108)拷贝/μl,低检测值280拷贝/μl,批内和批间变异系数(CV)＜5%.Foxp3基因在胃癌患者外周血表达水平显著高于健康对照(P＜0.01),表达水平与肿瘤分期显著相关(P＜0.05).结论 Foxp3基因上调表达与胃癌的发生、发展和预后有关.
作者：卢剑；袁向亮；沈立松 刊期： 2007年第03期
妊妇常处于生理性高凝状态,超出一定范围的高凝便是病理变化,如妊娠高血压综合征(妊高征)时出现的异常高凝状态.本研究检测了133例妊妇不同时期的纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(DD)和抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)含量,以探讨妊娠期间凝血和纤溶功能动态变化,为预防和诊断妊高征提供帮助.
作者：张一鸣；蒋雅琴；袁佩 刊期： 2007年第03期
目的 用猪链球菌2型经不同途径感染小鼠,研究其感染途径,建立动物模型.方法 6周龄小鼠分别经腹腔注射丝裂霉素0.2 mg/只,降低其免疫力,然后分别经皮肤创面、灌胃和腹腔注射猪链球菌2型,同时以粪肠球菌ATCC 29212作对照,进行临床观察和微生物学检查.结果 猪链球菌2型经口灌胃感染的小鼠病死率60%,病死日7～10 d.经皮肤创面感染的小鼠病死率60%,病死日2～5 d.从病死鼠的心脏穿刺液中均分离到猪链球菌2型.经腹腔注射猪链球菌2型的小鼠和对照小鼠未见死亡.结论 猪链球菌2型经消化道和皮肤创面可以感染免疫力低下的小鼠,呈现猪和人感染该菌后的部分症状,并可引起超过半数小鼠的死亡.
作者：曹照明；曹兴建；曹季军；陈相；王朔 刊期： 2007年第03期
目的 建立用于筛查膀胱癌的尿液细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体胶体金检测试条,并与常用方法比较.方法 用自行研制的CK20单克隆抗体,建立检测CK20的胶体金试条,对膀胱移行细胞癌(TCC)、泌尿系统良性疾病和健康人尿液进行检测,同时与尿液膀胱癌金标检测板(UBC)和膀胱肿瘤抗原(BTA)检测板的检测结果比较.结果 CK20试条法与UBC、BTA法的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比之间均无显著性差异(P＞0.05).3种方法敏感性随TCC病理分级而增高,但3法差异不显著(P＞0.05).对20例TCC患者术后监测,3法结果也一致.结论 CK20试条法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速,一般实验室可开展的特点,可用于膀胱癌快速筛查和疗效观察.
作者：刘彦慧；罗春丽；吴小候；蔡晓钟；蒲军；赵培；欧俐苹；唐敏 刊期： 2007年第03期
目的 对高效液相色谱法(HPLC)定量分析血红蛋白A2(HbA2)用于筛查β珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血,地贫)基因携带者做出方法学评价.方法 地贫筛查中随机选择的75对夫妇及140对地贫高危夫妇,以地贫基因分析结果为金标准,通过比较样品内和样品间HbA2的HPLC测定值的变异系数评价该法的精密度和稳定性;通过分析阳性样品的基因型评价HPLC检测地贫的准确性.结果 用HPLC分析当地健康成人的HbA2的95%频数分布范围为2.28%～3.42%,HPLC诊断β地贫杂合子的HbA2临界值(cut off value)为≥4.35%.在基因分析确诊的65例β地贫杂合子、19例αβ复合地贫、2例HbE病及8例HbH病中,HPLC仅1例漏诊,无误诊.结论 高效液相色谱法是一种快速、稳定性强、精密度好的HbA2测定方法,可用于β地贫杂合子的筛查.
作者：张新华；李平萍；罗瑞贵；黄蒙莎；兰小英；吴志奎；王荣新 刊期： 2007年第03期
FE复合酶是一种新型抗菌剂,为溶葡萄球菌酶和多种辅酶复配而成,为了解其对临床常见微生物的抗菌效果,对临床分离的100株微生物进行了药物敏感试验并与其他抗生素作对比分析,结果如下.
作者：陈亚宝；刘玲；陆婉英 刊期： 2007年第03期
Del即D洗脱阳性,是指部分D抗原阴性者的红细胞和抗D抗体做吸收放散试验时,证实这些D阴性的红细胞上带有微弱的D抗原.如将他们的红细胞输给Rh(D)阴性者,后者可能会产生抗D抗体.
作者：朱碎永；朱燕英；林甲进 刊期： 2007年第03期
良、恶性胸水的鉴别诊断是临床十分常见和棘手的问题.50%的肺癌病人在疾病过程中会出现胸水[1],即使经胸水脱落细胞学检查、胸膜穿刺活检、纤维支气管镜等反复检查后,仍有20%的胸腔积液病因不明,其中大多终被确诊为癌性胸水[2].我们对92例胸水进行HER-2/neu和IFN-γ含量检测,以探索鉴别良、恶性胸腔积液的新途径.
作者：丘世飏；易斌；林桦；黄大毛 刊期： 2007年第03期
本研究用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR,通过扩增乳腺癌相关基因C-erb B2 mRNA,对139例不同疾病患者及40例健康志愿者外周血中C-erb B2 mRNA表达情况进行分析,探讨FQ-PCR检测在C-erb B2 mRNA乳腺癌诊断中的应用,现报道如下.
作者：邓君；饶绍琴；杨静；迟舒 刊期： 2007年第03期
江苏省血液中心于2005年和2006年上半年3次发放室间质控品,对全省28家采供血机构(其中血液中心2家,中心血站12家,基层血站12家,中心血库2家)进行血液检验能力的室间比对,现将结果总结如下.
作者：周静宇；唐荣才；郭东辉 刊期： 2007年第03期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
