刘彦慧；罗春丽；吴小候；蔡晓钟；蒲军；赵培；欧俐苹；唐敏
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)中外周血颗粒溶素的表达及意义.方法 用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测60例PBC患者颗粒溶素的mRNA表达,用ELISA法检测血清中颗粒溶素水平,以100例体检健康者、80例肝炎后肝硬化患者和80例SLE患者为对照组.结果 PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素mRNA的平均拷贝数(2.8±1.9)×108高于肝炎后肝硬化患者(5.6±2.9)×106、SLE患者(9.5±2.4)×106和体检健康者(2.5±1.4)×106(P＜0.01).血清中颗粒溶素的水平为(16.12±2.24)ng/ml,也显著高于体检健康者、肝炎后肝硬化患者、SLE患者.结论 FQ-PCR法检测颗粒溶素的mRNA水平及ELISA方法检测血清中颗粒溶素的浓度,有助于了解PBC患者体内免疫状态,为临床诊治和研究提供依据.
作者：陈燕；周晔；姚定康；蒋天舒；谷明莉；朱樑；仲人前；邓安梅 刊期： 2007年第03期
目的 探讨弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)的实用实验诊断指标.方法 收集临床确诊的DIC患者33例,早期可疑DIC后确诊为DIC的患者30例,体检健康志愿者35例进行检测.用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、激活部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),用免疫比浊法检测血浆D-二聚体(D-D),乳胶凝集半定量试验检测纤维蛋白(原)降解产物(FDP),发色底物法检测抗凝血酶活性(AT:A).结果 DIC患者组D-D和FDP显著升高,AT:A显著下降,PT、APTT、TT均显著延长;D-D和FDP的阳性率均达100%,AT:A和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3 P)的阳性率分别为88%和82%,与早期可疑DIC组及正常对照组比较有统计学意义(P＜0.05).在早期可疑DIC阶段,D-D、AT:A、FDP的阳性率分别为87%、63%和53%,而PT、APTT、TT、3P试验的异常率仅为40%、33%、23%和20%.结论 D-D、FDP、AT:A检测在DIC早期诊断中具有重要价值,敏感性高于PT、APTT、TT等.
作者：郦卫星；吴茅；刘建栋 刊期： 2007年第03期
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)各种基因型在不同类型乙型肝炎患者中的分布.方法 用PCR结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测56例HBV感染的肝癌、58例肝硬化、60例慢性乙型肝炎患者以及60例HBV无症状携带者血清HBV基因型.结果 无症状携带者中B基因型为46.7%(28/60),C基因型为33.3%(20/60),D基因型为20.0%(12/60);慢性乙型肝炎组B基因型为41.7%(25/60),C基因型为36.7%(22/60),D基因型为21.7%(13/60);肝癌患者中B基因型为33.9%(19/56)、C基因型为60.7%(34/56)、D基因型为5.4%(3/56);肝硬化患者中B基因型为31.0%(18/58)、C基因型为63.8%(37/58),D基因型为3.5%(2/58).结论 在慢性乙型肝炎和无症状携带者中以B基因型为优势感染毒株,而肝硬化和肝癌患者则以C基因型为优势感染毒株.
作者：林裕龙；兰萌；莫炳强；彭永正；冯桂湘；侯金林 刊期： 2007年第03期
目的 建立一种快速灵敏的尿蛋白质测定方法.方法 以Ph 4.2 B-R缓冲液为介质,在λex=λem=306 nm测定丽春红S(poncesu S,PS)与蛋白质结合产物的共振光散射(RLS)强度,用清蛋白标准液绘制工作曲线.结果 结合物RLS强度与蛋白质浓度成线性关系,直线回归方程:△I=2.24c-0.41,相关系数r=0.999,线性范围为0～1 500 mg/L,低检测限1.48mg/L.平均回收率为102.8%,批内、批间变异系数分别为2.09%、5.40%.标本测定结果与丽春红S法相比无显著差异.结论 丽春红S共振光散射法测定尿蛋白,方法简单、快速、灵敏度高.
作者：杨新玲；王恩波；刘霞；吴惠毅 刊期： 2007年第03期
目的 建立用于筛查膀胱癌的尿液细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体胶体金检测试条,并与常用方法比较.方法 用自行研制的CK20单克隆抗体,建立检测CK20的胶体金试条,对膀胱移行细胞癌(TCC)、泌尿系统良性疾病和健康人尿液进行检测,同时与尿液膀胱癌金标检测板(UBC)和膀胱肿瘤抗原(BTA)检测板的检测结果比较.结果 CK20试条法与UBC、BTA法的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比之间均无显著性差异(P＞0.05).3种方法敏感性随TCC病理分级而增高,但3法差异不显著(P＞0.05).对20例TCC患者术后监测,3法结果也一致.结论 CK20试条法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速,一般实验室可开展的特点,可用于膀胱癌快速筛查和疗效观察.
作者：刘彦慧；罗春丽；吴小候；蔡晓钟；蒲军；赵培；欧俐苹；唐敏 刊期： 2007年第03期
同一实验室的多台血液分析仪,由于生产厂家、型号、使用年限、检测原理等诸多因素的影响,同一份标本在各台仪器上的检测结果差别较大.我们用新鲜全血为校准物对本室的四台血液分析仪进行了校准和评价,结果报道如下.
作者：周远青；唐跃华；梁瑞莲；叶佩玑；梁玉全；吴建辉；林志远 刊期： 2007年第03期
β葡萄糖苷酶在传统细菌学鉴定中很少应用.近年由于人工合成了此酶的色原底物,已较多地用于自动或人工细菌鉴定装置而受到重视.我们用国产底物建立了此酶的快速检测法并用于细菌和假丝酵母菌的鉴定,报告如下.
作者：孙慧芳；路秀文 刊期： 2007年第03期
目的 对高效液相色谱法(HPLC)定量分析血红蛋白A2(HbA2)用于筛查β珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血,地贫)基因携带者做出方法学评价.方法 地贫筛查中随机选择的75对夫妇及140对地贫高危夫妇,以地贫基因分析结果为金标准,通过比较样品内和样品间HbA2的HPLC测定值的变异系数评价该法的精密度和稳定性;通过分析阳性样品的基因型评价HPLC检测地贫的准确性.结果 用HPLC分析当地健康成人的HbA2的95%频数分布范围为2.28%～3.42%,HPLC诊断β地贫杂合子的HbA2临界值(cut off value)为≥4.35%.在基因分析确诊的65例β地贫杂合子、19例αβ复合地贫、2例HbE病及8例HbH病中,HPLC仅1例漏诊,无误诊.结论 高效液相色谱法是一种快速、稳定性强、精密度好的HbA2测定方法,可用于β地贫杂合子的筛查.
作者：张新华；李平萍；罗瑞贵；黄蒙莎；兰小英；吴志奎；王荣新 刊期： 2007年第03期
目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×103～2.9×109)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P＜0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.
作者：毛丽萍；王惠民；张子玉；吴月平；章幼奕；鞠少卿；陈育凤 刊期： 2007年第03期
直接抗球蛋白试验(DAT)阳性患者,由于红细胞上存在致敏自身抗体和/或血清中存在游离的自身抗体,干扰血型鉴定、抗体筛查及交叉配血[1].本文探讨DHA阳性对ABO及Rh血型定型的干扰.
作者：庞桂芝；冯园；姜燕娟；张趁利；胡利亚；兰炯采 刊期： 2007年第03期
目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin和重组质粒载体中人工合成DNA序列,定量检测健康成年人血浆DNA含量.结果 本法能在同一个反应管中对目的基因和内参照进行同步扩增,两者的扩增无相互干扰,特异性好;重组质粒DNA的平均扩增效率达90%,β-actin基因的平均扩增效率接近100%;本法批内变异系数(CV)11%,批间CV17%.结论 成功建立含有内参照的双重实时荧光定量PCR方法,可对血浆DNA进行定量检测.
作者：陈丹；潘世扬；张丽霞；高丽；谢而付；黄珮珺；戎国栋 刊期： 2007年第03期
1 密码验证在实验室信息系统(LIS)中应用的局限性LIS首先要考虑的是安全性问题.在病历、医疗纠纷和药物验证中,检验数据是有法律作用的证据,在LIS中正确辨认人员的身份是极其重要的.
作者：顾国浩；邱骏 刊期： 2007年第03期
江苏省血液中心于2005年和2006年上半年3次发放室间质控品,对全省28家采供血机构(其中血液中心2家,中心血站12家,基层血站12家,中心血库2家)进行血液检验能力的室间比对,现将结果总结如下.
作者：周静宇；唐荣才；郭东辉 刊期： 2007年第03期
目的 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,研究不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平.方法 普通RT-PCR结合胶回收制备Foxp3 mRNA-CDS标准品,利用标准品制备定量PCR标准曲线,对曲线进行灵敏度、精密度和特异性分析,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测40例胃癌和8例正常对照外周血Foxp3 mRNA.结果 获得Foxp3全长CDS标准品,标准曲线范围(2.8×102)～(2.8×108)拷贝/μl,低检测值280拷贝/μl,批内和批间变异系数(CV)＜5%.Foxp3基因在胃癌患者外周血表达水平显著高于健康对照(P＜0.01),表达水平与肿瘤分期显著相关(P＜0.05).结论 Foxp3基因上调表达与胃癌的发生、发展和预后有关.
作者：卢剑；袁向亮；沈立松 刊期： 2007年第03期
研究表明,S-100B蛋白对中枢神经系统的损伤有高度的敏感性和特异性,其含量变化与临床病理及影像学改变密切相关,是颅脑损伤较好的生物化学标志物.我们通过测定40例颅脑损伤患者血清S-100B蛋白的浓度,观察其在脑实质损伤和脑血肿的临床诊断及预后判断中的意义.
作者：郭红梅；胡殿雷 刊期： 2007年第03期
目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株(10.7%),SCCmecⅢ型70株(83.3%),SCCmecⅣ型5株(6.0%).所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异(P＞0.05),对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型(P＜0.05).结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.
作者：纪冰；马筱玲；蔡朝阳；李华；陈多炎 刊期： 2007年第03期
目的 建立并评价一种检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的新方法.方法 采用改良的纸片表型筛选法,以头孢西丁三维试验和多重PCR法作为对照,对临床分离的耐第三代头孢菌素的164株大肠埃希菌和40株肺炎克雷伯菌进行AmpC酶的检测.结果 164株大肠埃希菌中,改良的纸片表型筛选法检出8株产AmpC酶的阳性菌株(8/164,4.88%),其中有2株同时产ESBLs酶;40株肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶菌株,但检出2株(2/40,5.00%)诱导产AmpC酶菌株.头孢西丁三维试验在大肠埃希菌中检出AmpC酶阳性菌株8株(8/164,4.88%),在肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶株.多重PCR法检出大肠埃希菌AmpC酶耐药基因阳性9株(9/164,5.49%),肺炎克雷伯菌阳性2株(2/40,5.00%).结论 改良的纸片表型筛选法可用于检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和诱导产酶株,并可同时检测产ESBLs酶菌株,该法操作简便、结果可靠、无需特殊仪器,可在普通临床实验室应用.
作者：陈岩勤；顾国浩；张险锋；黄瑞 刊期： 2007年第03期
1 病历摘要1.1 临床资料 杜某,女性,52岁,于2006年10月初受凉后出现低热,高37.5℃,伴有咳嗽,全身乏力不适,无鼻塞流涕,无咳痰,外院予以抗生素治疗,体温降至正常,但咳嗽未见好转,逐渐加重,咳少量白痰,夜间明显.
作者：张立平；陈六生；葛才保；周道银；张力 刊期： 2007年第03期
目的 用聚合酶链反应(PCR)技术鉴定拟杆菌.方法 以该属细菌的标准16S Rrna基因序列为靶基因设计通用引物,对该属标准菌株及不同来源的临床株进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因测序验证引物的特异性和敏感性.结果 设计的引物能扩增13株拟杆菌,而40株肠杆菌科细菌、本实验室分离和保存的其他非拟杆菌不能被扩增;13株拟杆菌所得的PCR产物经基因测序、比对相应标准菌的16S Rrna,同源性在81%～100%.结论 建立的方法可特异的鉴定拟杆菌,敏感性为100个细菌的基因组.
作者：王国戗；罗予 刊期： 2007年第03期
目的 建立实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)检测各种急慢性白血病的特征性分子生物学标志物,评价其在疾病诊断和微小残留病(MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-RT-PCR法对各种融合基因转录本和ABL阳性模板进行扩增,并检测177份白血病标本的转录本含量,同时做细胞遗传学检查.结果 RQ-RT-PCR法低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但重复性较差,而(108～102)拷贝/μl的重复性良好,正常对照无扩增信号.与细胞遗传学相比,RQRT-PCR的敏感性和特异性更强,对白血病标志物的阳性检出率更高.对12例不同类型白血病患者的MRD随访监测表明:患者体内融合基因转录本的含量随病情进展逐渐升高,随病情好转逐渐下降,并且早于细胞遗传学预测疾病复发.结论 RQ-RT-PCR方法更敏感、可靠,与疾病的关系更密切,可用于白血病的诊断和MRD随访.
作者：姚利；陈子兴；岑建农；何军；邱桥成；鲍晓晶；袁晓妮 刊期： 2007年第03期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
