学术投稿

FQ-PCR检测C-erb B2基因表达水平在乳腺癌诊断中的应用

邓君;饶绍琴;杨静;迟舒

关键词:C-erb B2, 乳腺癌, 荧光定量聚合酶链反应, RT-PCR
摘要:本研究用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR,通过扩增乳腺癌相关基因C-erb B2 mRNA,对139例不同疾病患者及40例健康志愿者外周血中C-erb B2 mRNA表达情况进行分析,探讨FQ-PCR检测在C-erb B2 mRNA乳腺癌诊断中的应用,现报道如下.
临床检验杂志相关文献
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    良、恶性胸水的鉴别诊断是临床十分常见和棘手的问题.50%的肺癌病人在疾病过程中会出现胸水[1],即使经胸水脱落细胞学检查、胸膜穿刺活检、纤维支气管镜等反复检查后,仍有20%的胸腔积液病因不明,其中大多终被确诊为癌性胸水[2].我们对92例胸水进行HER-2/neu和IFN-γ含量检测,以探索鉴别良、恶性胸腔积液的新途径.

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    作者:崔之础;张冬雷;施健;黄竺筠 刊期: 2007年第03期

  • 用β葡萄糖苷酶快速鉴定细菌和假丝酵母菌

    β葡萄糖苷酶在传统细菌学鉴定中很少应用.近年由于人工合成了此酶的色原底物,已较多地用于自动或人工细菌鉴定装置而受到重视.我们用国产底物建立了此酶的快速检测法并用于细菌和假丝酵母菌的鉴定,报告如下.

    作者:孙慧芳;路秀文 刊期: 2007年第03期

  • 以2-甲氧基-4-(2'-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷为底物测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性

    目的 评价以2-甲氧基-4-(2'-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MNP-NAG)为底物的全液体试剂两点终点法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性.方法 尿样中NAG作用于底物MNP-NAG水解产生游离MNP,其生成速率与酶活性在一定范围内成正比.结果 该法显色大吸收波长为505 nm,试剂1和试剂2适pH值分别为4.6和10.2,适底物浓度为16 mmol/L,线性范围达198 U/L,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.2%和3.8%.166例健康体检者尿样NAG活性参考范围为:(6.21±4.53)U/gCr((x)±1.96 s).结论 MNP-NAG底物法测定尿NAG灵敏度高,操作简便,结果可靠,适合临床应用.

    作者:周午琼;王向阳 刊期: 2007年第03期

  • 血清S-100 B蛋白在脑实质损伤与脑血肿中的诊断价值

    研究表明,S-100B蛋白对中枢神经系统的损伤有高度的敏感性和特异性,其含量变化与临床病理及影像学改变密切相关,是颅脑损伤较好的生物化学标志物.我们通过测定40例颅脑损伤患者血清S-100B蛋白的浓度,观察其在脑实质损伤和脑血肿的临床诊断及预后判断中的意义.

    作者:郭红梅;胡殿雷 刊期: 2007年第03期

  • 孕妇血浆纤维蛋白原、D-二聚体和AT-Ⅲ动态检测的临床意义

    妊妇常处于生理性高凝状态,超出一定范围的高凝便是病理变化,如妊娠高血压综合征(妊高征)时出现的异常高凝状态.本研究检测了133例妊妇不同时期的纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(DD)和抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)含量,以探讨妊娠期间凝血和纤溶功能动态变化,为预防和诊断妊高征提供帮助.

    作者:张一鸣;蒋雅琴;袁佩 刊期: 2007年第03期

  • 要重视血清酶学测定的标准化工作

    目前临床以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天(门)冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、γ-谷氨酰基转移酶(γCT)、碱性磷酸酶(ALP)、淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、腺苷脱氨酶(ADA)和胆碱酯酶(ChE)应用为广泛.

    作者:徐国宾;吴南;王清涛 刊期: 2007年第03期

  • 多台血液分析仪对低值血小板测定结果比较

    血液分析仪经新鲜血校准后,参考范围内测定值准确度高,随血小板降低,准确度降低.对于血液病及放、化疗低血小板患者,临床医生结合观察临床体征及其他出凝血指标,可更好理解血小板测定值.

    作者:蔡钢强;陈化禹;焦连亭;伊学军 刊期: 2007年第03期

  • 人源多肽抗生素LL-37真核表达载体的构建

    目的 构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌.方法 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,PCR鉴定及序列分析后转化毕赤酵母GS115.MM、MD平板筛选His+Mut+、His+Mut-表型,PCR扩增鉴定基因的插入.结果 PCR鉴定及序列分析表明抗菌肽LL-37基因正确插入载体pPIC9,MM、MD平板筛选及PCR鉴定获得10个His+Mut+、9个His+Mut-克隆.结论 获得含LL-37基因的工程菌.

    作者:陆建荣;王惠民;凌勇武;黄松平;常秋月 刊期: 2007年第03期

  • 2005~2006年江苏省采供血机构血液检验室间质量评价分析

    江苏省血液中心于2005年和2006年上半年3次发放室间质控品,对全省28家采供血机构(其中血液中心2家,中心血站12家,基层血站12家,中心血库2家)进行血液检验能力的室间比对,现将结果总结如下.

    作者:周静宇;唐荣才;郭东辉 刊期: 2007年第03期

  • TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血单个核细胞TRAIL-mRNA

    目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×103~2.9×109)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P<0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.

    作者:毛丽萍;王惠民;张子玉;吴月平;章幼奕;鞠少卿;陈育凤 刊期: 2007年第03期

  • 大连地区乙型肝炎病毒基因型与病毒复制水平调查

    乙型肝炎病毒(HBV)可分为8个基因型(A-H)[1],呈一定的地理区域性分布.不同基因型之间的病毒载量、生化和组织学、病情的转归,以及药物治疗的反应都有一定的差异.本文对HBV感染者的血清进行基因分型,以了解大连地区HBV基因型分布与HBV DNA复制水平,现报告如下.

    作者:石龙;韩博;许琳婧;张虎斌 刊期: 2007年第03期

  • 不同类型乙型肝炎患者HBV基因型的分布

    目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)各种基因型在不同类型乙型肝炎患者中的分布.方法 用PCR结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测56例HBV感染的肝癌、58例肝硬化、60例慢性乙型肝炎患者以及60例HBV无症状携带者血清HBV基因型.结果 无症状携带者中B基因型为46.7%(28/60),C基因型为33.3%(20/60),D基因型为20.0%(12/60);慢性乙型肝炎组B基因型为41.7%(25/60),C基因型为36.7%(22/60),D基因型为21.7%(13/60);肝癌患者中B基因型为33.9%(19/56)、C基因型为60.7%(34/56)、D基因型为5.4%(3/56);肝硬化患者中B基因型为31.0%(18/58)、C基因型为63.8%(37/58),D基因型为3.5%(2/58).结论 在慢性乙型肝炎和无症状携带者中以B基因型为优势感染毒株,而肝硬化和肝癌患者则以C基因型为优势感染毒株.

    作者:林裕龙;兰萌;莫炳强;彭永正;冯桂湘;侯金林 刊期: 2007年第03期

  • 不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA表达水平的研究

    目的 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,研究不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平.方法 普通RT-PCR结合胶回收制备Foxp3 mRNA-CDS标准品,利用标准品制备定量PCR标准曲线,对曲线进行灵敏度、精密度和特异性分析,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测40例胃癌和8例正常对照外周血Foxp3 mRNA.结果 获得Foxp3全长CDS标准品,标准曲线范围(2.8×102)~(2.8×108)拷贝/μl,低检测值280拷贝/μl,批内和批间变异系数(CV)<5%.Foxp3基因在胃癌患者外周血表达水平显著高于健康对照(P<0.01),表达水平与肿瘤分期显著相关(P<0.05).结论 Foxp3基因上调表达与胃癌的发生、发展和预后有关.

    作者:卢剑;袁向亮;沈立松 刊期: 2007年第03期

  • CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞TH1/TH2细胞因子的表达

    目的 观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞(PBMC)中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平.方法 取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24 h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平.结果 CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用.培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高(P<0.01),IL-2、IL-4和IL-10无明显改变(P>0.05).结论 CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答.

    作者:陈军浩;吴超;欧阳建;刘勇;顾光煜 刊期: 2007年第03期

  • 新鲜全血用于多台血液分析仪校准的效果评价

    同一实验室的多台血液分析仪,由于生产厂家、型号、使用年限、检测原理等诸多因素的影响,同一份标本在各台仪器上的检测结果差别较大.我们用新鲜全血为校准物对本室的四台血液分析仪进行了校准和评价,结果报道如下.

    作者:周远青;唐跃华;梁瑞莲;叶佩玑;梁玉全;吴建辉;林志远 刊期: 2007年第03期

  • FQ-PCR检测C-erb B2基因表达水平在乳腺癌诊断中的应用

    本研究用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR,通过扩增乳腺癌相关基因C-erb B2 mRNA,对139例不同疾病患者及40例健康志愿者外周血中C-erb B2 mRNA表达情况进行分析,探讨FQ-PCR检测在C-erb B2 mRNA乳腺癌诊断中的应用,现报道如下.

    作者:邓君;饶绍琴;杨静;迟舒 刊期: 2007年第03期

  • 实时定量逆转录PCR在白血病标志物检测中的应用

    目的 建立实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)检测各种急慢性白血病的特征性分子生物学标志物,评价其在疾病诊断和微小残留病(MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-RT-PCR法对各种融合基因转录本和ABL阳性模板进行扩增,并检测177份白血病标本的转录本含量,同时做细胞遗传学检查.结果 RQ-RT-PCR法低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但重复性较差,而(108~102)拷贝/μl的重复性良好,正常对照无扩增信号.与细胞遗传学相比,RQRT-PCR的敏感性和特异性更强,对白血病标志物的阳性检出率更高.对12例不同类型白血病患者的MRD随访监测表明:患者体内融合基因转录本的含量随病情进展逐渐升高,随病情好转逐渐下降,并且早于细胞遗传学预测疾病复发.结论 RQ-RT-PCR方法更敏感、可靠,与疾病的关系更密切,可用于白血病的诊断和MRD随访.

    作者:姚利;陈子兴;岑建农;何军;邱桥成;鲍晓晶;袁晓妮 刊期: 2007年第03期

  • STA-R全自动血凝仪检测孕妇vWF方法的改进

    用法国STA全自动血凝仪测定vWF(血管性血友病因子)活性时,血浆先进行1∶2稀释,当vWF活性>105%时仪器自动进行1∶8稀释测定得出测试结果.妊娠时vWF活性增高,尤其是妊娠高血压综合征(妊高征)患者,一般均>105%,因此本文建立一种新的孕妇vWF检测方法.

    作者:张雅青;孙拥新;邢桂芝 刊期: 2007年第03期

  • 单克隆IgM、IgG混合抗D血清在Del鉴定中的应用

    Del即D洗脱阳性,是指部分D抗原阴性者的红细胞和抗D抗体做吸收放散试验时,证实这些D阴性的红细胞上带有微弱的D抗原.如将他们的红细胞输给Rh(D)阴性者,后者可能会产生抗D抗体.

    作者:朱碎永;朱燕英;林甲进 刊期: 2007年第03期

临床检验杂志

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