肖学珊;张清炯;黎仕强;贾小云;郭向明;邝志和;申惶煊
目的比较常规克隆测序与从凝胶中回收银染DNA条带进行直接测序和克隆测序的特点.方法用单链构像多态法分离杂合性突变DNA样品,然后从凝胶中回收变异的银染DNA 条带进行直接测序和克隆测序,并与常规克隆测序进行比较.结果从凝胶中回收DNA片段直接测序的正确率超过97%,回收片段克隆测序的正确率与常规克隆测序相同,达100%.结论从凝胶中回收DNA片段直接测序和克隆测序较常规克隆测序简便实用 ,在基因克隆、突变鉴定等工作中有一定实用价值.
作者:肖学珊;张清炯;黎仕强;贾小云;郭向明;邝志和;申惶煊 刊期: 2002年第01期
F.odoratum(芳香黄杆菌)属于Flavobacterium(黄杆菌属),在自然界分布广泛,为条件致病菌,从中段尿标本中分离较少见.我院于2000年2月从尿路感染患者的中段尿中分离出1株,现报道如下.
作者:吾尔古丽;艾斯卡尔;古海尔 刊期: 2002年第01期
目的建立血清总胆汁酸(TBA)测定的酶循环法.方法基于用脱氢酶-辅酶体系循环底物的原理,建立了本法.结果本法灵敏度50 μmol/L,A405 nm,1 cm>0.15;线性达180 μmol/L;批内CV<1.87%,日间C V<2.94%,总CV<3.64%;与普通酶显色法比较:Y=0.921X-1.426,r=0 .9982,n=64.胆红素<850 μmol/L、血红蛋白<5 g/L、抗坏血酸<2.84 mmol/L、乳酸<24 mmol/L、乳酸脱氢酶<10 000 U/L时,对结果无显著干扰.结论本法灵敏度高,线性、精密度好,几乎无干扰,是一种理想的TBA测定方法.
作者:许叶;杨昌国 刊期: 2002年第01期
活化蛋白C抵抗(activated protein C resistance,APCR)是目前已知的静脉血栓形成的高危因素[1],80%的APCR是因子V(FV)基因点突变(即Leiden突变)引起的遗传性APCR ,另一部分APCR则是由各种获得性原因导致的无FV基因突变的获得性APCR.APCR与动脉血栓形成的关系目前仍有争论.蛋白C(protein C,PC)、蛋白S(protein S,PS)是机体PC抗凝系统的重要组成部分,它们量或质的缺陷(包括先天性和获得性)都将导致机体抗凝功能的减退或丧失,与血栓形成密切相关[2].本研究通过检测34例脑梗死(cerebral infarction,CI)患者APCR阳性率及血浆PC、PS活性,探讨APCR与动脉血栓形成的关系,以及PC、PS活性的变化在动脉血栓形成中的作用和临床意义.
作者:黄彬;钟武平;陈茶 刊期: 2002年第01期
目的研究不同基因型HCV感染的丙型肝炎患者体内的自身抗体和其他免疫指标 .方法 24例丙肝患者为研究组,52例健康体检者为对照组.HCV感染用RT-PCR证实.H CV基因型的检测用型特异性探针核酸杂交法检测.抗核抗体和抗平滑肌抗体用免疫荧光法检测,抗Sm抗体和抗RNP抗体用对流免疫电泳法检测,类风湿因子、抗双链DNA抗体、抗心磷脂抗体、抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺微粒体抗体用ELISA检测.冷球蛋白用冷沉淀法检测. 免疫球蛋白水平用速率散射比浊法测定.循环免疫复合物用抗补体法测定.结果 (1)24例丙肝患者中,13例(54.2%)为Ⅱ型HCV(okamoto分型法)感染,7例(29.2%)为Ⅲ型,2例 (8.3%)为混和型(Ⅱ型+Ⅲ型),2例(8.3%)难以确定.(2)自身抗体检测:患者组中有10例( 41.7%)检出21项次自身抗体.Ⅱ型HCV感染的13例中有7例检出16项次,Ⅲ型HCV感染的7例中有1例检出1项次,Ⅱ型和Ⅲ型混和感染的2例中检出4项次自身抗体.检出自身抗体的患者中有7例检出类风湿因子,4例检出抗核抗体,4例检出抗心磷脂抗体,2例检出抗平滑肌抗体,2例检出抗甲状腺球蛋白抗体,1例检出抗甲状腺微粒体抗体,1例检出抗双链DNA 抗体.结论 (1)在本地区的丙肝患者中,感染Ⅱ型HCV者占多数.(2) 部分丙肝患者可检出自身抗体,感染Ⅱ型HCV和同时感染Ⅱ型、Ⅲ型HCV的患者的自身抗体检出率高于感染Ⅲ型HCV的患者.提示感染Ⅱ型HCV的患者体内自身免疫应答过程更为显著.
作者:齐名;熊华;刘新钰;吴引伟;李鹤林;李保仝;宗永兰;邵海枫 刊期: 2002年第01期
Enterobacter cloacae(阴沟肠杆菌)是一种重要的条件致病菌.2000年7月,我院从肾结石患者的血液及尿中同时分离出1株多重耐药的阴沟肠杆菌,报道如下.
作者:涂伟仁;张国雄;杨桂珍 刊期: 2002年第01期
Arcanobacterium haemolyticum(溶血棒状杆菌),属棒状杆菌属,是一种机会致病菌, 当机体免疫力下降时,可以引起咽炎和皮肤溃疡,也可引起肺部感染和脑脓肿.我们从1例Ⅱ型糖尿病患者的膝关节渗出液中2次分离出此菌,报告如下.
作者:赵家莲;李珍大;张小卫;邵海枫 刊期: 2002年第01期
一般认为,血小板输注能有效地预防和治疗因血小板减少所引起的出血,近年来临床上的作用日益普及,但是随着血小板输注次数的增加和输注量的增多,部分患者出血倾向又重复出现,甚至更加严重,而出现血小板输注无效(PRT).
作者:李琛;谢朝阳;麦奇;李静 刊期: 2002年第01期
目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和视黄醇对正常组、真性红细胞增多症(PV) 、慢性粒细胞白血病(CML)中碱性磷酸酶同工酶(ALP)基因表达的诱导作用,并寻找何种同工酶的基因表达占主导地位.方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-P CR),并以β-actin 作内对照,检测了20例正常对照者、11例PV初治患者和23例CML初治患者ALP基因的表达,以及G-CSF和视黄醇对其表达的诱导.结果诱导前,骨型ALP(BALP)基因表达在正常对照组和 PV组占主导地位,PV组的ALP基因表达显著高于正常对照组,未检测到CML组ALP基因表达;G -CSF诱导后,CML组出现ALP基因表达,仍以BALP为主,显著高于正常对照组,用G-CSF和视黄醇共同诱导后,CML组BALP基因表达明显增强,显著高于单独用G-CSF诱导;正常对照组和 PV组在诱导前后均无变化.结论人类粒细胞主要以BALP基因表达为主;G -CSF和视黄醇对CML粒细胞中的ALP基因表达具有诱导作用.
作者:邓君;饶绍琴;杜琼;杨明清 刊期: 2002年第01期
近年来,随着血液成份分离技术的进步,浓缩血小板在临床上得到广泛的应用,特别是在白血病、出血性疾病、肿瘤及心脏外科手术等领域.笔者对2000年12月~2001年3月四个月间在我院所用机采血小板进行监测,包括浓缩血小板总数,红细胞混入数及白细胞混入数,并对部分病例输注疗效跟踪调查.现报告如下.
作者:王雪明;邱骏;卢艳;陈忠 刊期: 2002年第01期
目的了解Haemophilus(嗜血杆菌)鉴定中X、V因子测定的各种影响因素.方法用5种不同的琼脂平板,比较不同培养时间和8%CO2环境对嗜血杆菌X、V因子需求试验及溶血试验结果的影响.结果 X、V因子需求试验结果表明,脑心琼脂效果好,其次为营养琼脂,MH琼脂与脑心琼脂结果比较有显著差异(P<0.01);CO2对试验结果有影响; 培养4 8 h较24 h的菌落大易辩认.结论用脑心琼脂平板测试嗜血杆菌对X 、V因子的需求及在CO2环境中检测嗜血杆菌的溶血性结果较好.
作者:陈东科;李娟;孙艳;张秀珍 刊期: 2002年第01期
目的用非放射性的异羟基洋地黄毒甙(地高辛,Dig)标记探针与靶DNA杂交,结合化学发光检测系统检测乙肝患者血清中HBV DNA.方法应用宝灵曼公司生产的Dig DNA标记检测试剂盒.将Dig标记的HBV DNA探针与点印迹在尼龙膜或硝酸纤维素膜上的靶DNA杂交,杂交后的膜与Dig-AP抗体保温,然后用化学发光底物CSPD与之作用,导致在波长477 nm处发光 , 感光于X光底片上.结果待检的129份血清标本,用此法检测HBV DNA阳性率达58.4%,敏感性2.0 pg~0.5 pg.为了比较,329份血清标本用显色法测定,阳性率45.0%,敏感性5 .0 pg~1.0 pg.对照组呈阴性结果.结论 Dig标记探针分子杂交化学发光法具有较高特异性、敏感性和简便等优点,可用于血清中HBV DNA的检测.
作者:邬光惠;范公忍;张桂霞;黄耀煊 刊期: 2002年第01期
1 淋巴细胞亚群1.1 T淋巴细胞与B淋巴细胞1.2 T细胞亚群1.2.1 T细胞分布(%) 胸腺 100,淋巴结 75,胸导管 95,脾脏 35~50,外周血 70~80,肠道集合淋巴 30.
作者:武建国 刊期: 2002年第01期
Enteropathogenic E.coli(致病性大肠埃希菌,EPEC)是引起夏、秋季腹泻的重要病原菌之一,尤其婴幼儿为易感人群.2000年我室从腹泻患者的粪便培养物中,分离到31株致病性大肠埃希菌,包括7个血清型,并对其做了药敏试验,结果报告如下.
作者:储从家 刊期: 2002年第01期
目的建立一种检测血清中可溶性CD137(sCD137)的方法,探讨sC D137对类风湿性关节炎(RA)的意义.方法建立链霉亲合素-酶联免疫吸附实验(SA-ELISA) 以检测RA活动期患者(30例)、RA缓解期患者(30例)、正常对照者(30例)的血清sCD137水平,并用免疫速率散射比浊法检测血清CRP、RF水平.结果 SA-ELISA有较好的线性、灵敏度、特异性、重复性和准确性;RA活动期组的血清sCD137阳性率和水平显著高于RA缓解期组和正常对照组(P< 0.01),且与CRP、RF水平间存在明显正相关(P<0.01).结论 SA-E LISA能可靠检测sCD137;sCD137可能成为反映RA活动性的指标之一.
作者:黄毅;伍严安;叶庆林;林德馨 刊期: 2002年第01期
利用从白眉蝮蛇毒(agkistrodon halys brevicaudus stejnegeri venom)中分离出的类凝血酶(thrombin like enzyme,TLE)[1]具有对纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)水解的高度专一性、不被肝素抑制及活性稳定的特点,以TLE作试剂建立了测定Fg的方法,并对实验条件进行了探讨.
作者:乐宏元;许卫国;宋小兴 刊期: 2002年第01期
我们对成都市4家综合医院临床分离的150株肠球菌进行分析,现报告如下.
作者:颜英俊;刘华;喻华;周忠华;杨明清 刊期: 2002年第01期
Hitach 7060全自动分析仪的工作方式是先测试一个标本的所有实验项目,再测试下一个标本;在同一个标本内哪个实验项目先做,哪个后做,可自行安排.我们在检测血清铜的过程中偶尔发现离群值,根据拉依达(PaИTa)检验法,确定此离群值属异常值.通过查找发现测定总蛋白的双缩脲试剂中含有18 mmol/L硫酸铜,双缩脲试剂对铜试剂存在试剂针携带污染 ,当改变仪器的分析顺序,先测铜再测总蛋白,可避免双缩脲试剂对铜测定的携带污染.
作者:陶玉年;郭立新 刊期: 2002年第01期
目的建立一种同时检测沙眼衣原体、解脲支原体、淋病奈瑟菌三种病原体D NA的方法并用于临床标本检测.方法采用多重PCR-核酸探针杂交技术,结果与常规PCR法比较.结果本法特异性良好,敏感度达到0.1 fg.经过对166例性传播疾病门诊患者标本测定证实 ,沙眼衣原体、解脲支原体、淋病奈瑟菌检出率分别为22.9%,54.8%和34.3%,并有22. 2 %的双重复合感染和4.8%的三重复合感染.并与常规PCR法具有很好的一致性.结论本法快速、简便、特异性好、能指示多重感染.
作者:杨国翠;李智涛;李振勇;冯艳铭;邵大晓;赵大鹏;崔天星;范家明;刘兆江;蔡铁华 刊期: 2002年第01期
采用免疫组化法测定细胞膜上某些基因的表达产物对白血病的诊断和预后判断有重要的参考价值,常用的方法是先分离出骨髓单个核细胞,再用其滴片或涂片进行组化染色,该方法除较为繁琐外,主要的缺陷是阳性率受骨髓中白血病细胞的百分比高低的影响,不能客观地反映患者体内白血病细胞中有关基因蛋白表达阳性的白血病细胞百分比.本文直接用骨髓涂片进行组化染色,可克服上述两个缺点.现介绍如下.
作者:郑绍同;崔建和;宣恒报;李玉峰 刊期: 2002年第01期