学术投稿

腹水来源胃癌原代细胞的建立及鉴定

姜文静;张忠献;王尧河;石海亮;赵瑞华;宗红;曹风雨

关键词:腹水, 胃癌, 原代培养, 转化, 成瘤
摘要:目的:以胃癌患者腹水来源的胃癌细胞为研究对象,旨在探索出一种相对成熟的肿瘤细胞原代培养技术及鉴定方法。方法:对腹水来源胃癌细胞进行原代培养,通过低浓度胰蛋白酶消化法及差速贴壁法进行原代细胞纯化,获得能够稳定传代的胃癌转移瘤细胞系,并通过观察细胞形态、免疫荧光检测、绘制细胞增殖曲线、构建裸鼠皮下移植瘤模型等方法对其进行鉴定。结果:获得1例能够稳定传代的腹水来源胃腺癌细胞株(命名为 CFJ),细胞形态一致,表达上皮性生物标志物,细胞核呈现明显的异型性,能在裸鼠皮下成功构建移植瘤模型,增殖和转移能力强,可见裸鼠纵隔、腋窝等多处淋巴结转移。结论:胃癌转移性腹水可以成为建立原代肿瘤细胞的很好来源。
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • DCE-MRI 及 DWI 在鉴别乳腺良、恶性病变中的价值

    目的:探讨动态增强 MRI(DCE-MRI)及扩散加权成像(DWI)在乳腺良、恶性病变鉴别诊断中的价值。方法:对85例乳腺病变患者行乳腺 MRI 动态增强及 DWI 扫描,经后处理获得:时间-信号强度(TIC)曲线类型、达峰时间(Tmax)、早期强化率(EER)、峰值强化率(PER)、信号增强比(SER)、峰值(SImax)及表观扩散系数(ADC)。结果:良性病变62个,恶性病变34个,良性病变的 Tmax、PER、SImax、ADC 值显著高于恶性病变(P <0.05),良性病变的 SER 显著低于恶性病变(P <0.05),良、恶性病变 EER 差异无统计学意义(P =0.869);良性病变以Ⅰ型曲线为主(45/62),恶性病变以Ⅱ型和Ⅲ型曲线为主(27/34),TIC 曲线类型在良、恶性病变中差异有统计学意义(P <0.05);ADC 鉴别乳腺良、恶性病变的诊断效能高(AUC =0.898)。结论:DCE-MRI 及 DWI 对鉴别乳腺病变的良、恶性病变有重要价值。

    作者:靳雅楠;张焱;程敬亮;王莹莹 刊期: 2016年第04期

  • RP-HPLC 法同时测定酶法合成阿莫西林工艺中的原料、中间体和产物的含量

    目的:建立同时测定酶法合成阿莫西林反应体系中原料、中间体和产物含量的反相高效液相分析方法。方法:以 Gemini-NX-C18为固定相;甲醇∶0.05 mol/L、pH 5.6的磷酸盐缓冲液10∶90(V∶V)为流动相;流速1.0 mL/min;检测波长230 nm;进样量10μL;柱温30℃进行检测。结果:6-氨基青霉烷酸、D-对羟基苯甘氨酸甲酯、D-对羟基苯甘氨酸、阿莫西林在各自的线性条件内线性关系良好,低检测限分别为4.00、1.00、0.04、1.00 mg/L。结论:该方法准确灵敏,适合同时测定酶法合成阿莫西林反应体系中原料、中间体和产物的含量。

    作者:李永红;周方方;付路平;冯利菲;刘宏民 刊期: 2016年第04期

  • 低位梗阻性左半结直肠癌经肛肠梗阻导管清洗减压与术中结肠灌洗效果比较

    结直肠癌合并梗阻是临床较常见的一种急腹症,其发生率占所有结直肠癌的8%~29%[1],传统治疗方法是结肠造瘘、分期手术,严重影响患者的生活质量。1980年,Dudley 等[2]报道采用术中顺行结肠灌洗一期切除吻合可使部分患者避免二次手术的痛苦,一期切除吻合逐渐为人们接受。近年来,经肛置入肠梗阻导管清洗减压技术逐渐应用于低位梗阻性左半结直肠癌患者的治疗。2005年3月至2015年6月,作者对93例低位梗阻性左半结直肠癌患者分别采用了经肛肠梗阻导管清洗减压和术中结肠灌洗,该文回顾了其临床资料,比较两种方法的疗效。

    作者:郑立;史朝辉 刊期: 2016年第04期

  • 基层卫生综合监督执法考评框架与指标体系构建

    目的:提升卫生综合监督执法体系工作能力,改善基层卫生综合监督执法服务工作绩效。方法:通过文献研究和专家讨论制定评估框架,利用德尔菲专家咨询法对评价指标体系进行评价和筛选。结果:构建了包括9个维度的考评框架和31项核心指标的指标体系。结论:为建立基层卫生监督考核评价长效工作机制,促进卫生综合监督执法资源有效利用提供了参考和依据。

    作者:吴建;李红星;范冠宇;秦豆豆;沈明磊;代金雷;李小芳 刊期: 2016年第04期

  • 基于周期分解的圆形分布法分析我国流行性乙型脑炎季节特征

    目的:探讨基于周期分解的圆形分布法在分析我国流行性乙型脑炎(乙脑)季节特征方面应用的可行性。方法:先使用周期分解法对我国2005年至2014年乙脑发病的季节特征进行分解,再用圆形分布法验证分解出来的季节指数的季节性特征。结果:2005年至2014年我国乙脑发病数呈下降的趋势;乙脑发病呈现出明显的季节性,发病高发日在8月16日,高峰期在7月至9月,流行期在6月至10月。结论:我国乙脑发病具有明显的季节性。满足圆形分布法的应用条件时,基于周期分解的圆形分布法在了解传染病季节特征方面具有较好的应用价值。

    作者:王永斌;柴峰;李向文;袁聚祥 刊期: 2016年第04期

  • 慢性阻塞性肺疾病模型大鼠骨骼肌中 Calpains 的表达

    目的:探讨 Calpains 在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法:40只健康雄性Wistar 大鼠随机分为 COPD 模型组及对照组,模型组采用气管内注入脂多糖加香烟烟雾染毒法建立大鼠 COPD 模型,HE 染色法观察肺组织及骨骼肌(趾长伸肌、膈肌)组织的病理学改变;分别采用免疫组化和 RT-PCR 法测定骨骼肌组织中 Calpains(μ-Calpain 和 m-Calpain)蛋白及 mRNA 的表达。结果:在 COPD 模型组大鼠观察到骨骼肌萎缩,对照组大鼠未见骨骼肌萎缩。与对照组比较,COPD 模型组大鼠趾长伸肌及膈肌中μ-Calpain 和 m-Calpain 蛋白及 m-Calpain mRNA 表达增强(P <0.05),而μ-Calpain mRNA 的表达差异无统计学意义(P >0.05)。结论:Calpains在 COPD 模型大鼠骨骼肌中表达上调,可能参与 COPD 模型大鼠骨骼肌萎缩。

    作者:刘待见;冯慧芬;刘剑波 刊期: 2016年第04期

  • 乳头状肾细胞癌的临床表现和 CT 特征对比

    乳头状肾细胞癌(papillary renal cell carcinoma, PRCC)是一种起源于肾小管上皮、具有乳头状或小管乳头状结构的肾实质恶性肿瘤[1-2]。目前,PRCC是除肾透明细胞癌外临床上常见的肾恶性肿瘤,约占恶性肾上皮性肿瘤的10%~15%[3]。据相关文献[3]报道,约73.6%的 PRCC 患者为男性,男女发病率相比约为2∶1,女性 PRCC 患者相对较为少见。以往对 PRCC 多集中于病理、临床及与其他亚型肾透明细胞癌的对比研究[3-7],有关 PRCC CT 诊断价值的文献报道较少。该研究回顾性分析37例PRCC 患者的临床表现及影像学检查资料,同时,对比分析男性与女性 PRCC 患者的临床表现、CT 特征,以期提高对该病的认识水平,提高 PRCC 术前诊断的准确性。

    作者:王宜旭;梁盼;赵松 刊期: 2016年第04期

  • 非酒精性脂肪肝患者肝组织中 Irisin 的表达

    目的:探讨 Irisin 在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝穿刺组织中的表达及其意义。方法:回顾性分析病理活检确诊的非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL,n =56)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH,n =75)患者及无脂肪变和脂肪性肝炎的正常者(n =20)的临床资料,免疫组化 SP 法检测各组肝穿刺组织中 Irisin 的表达水平。结果:3组年龄及性别构成比差异无统计学意义(P >0.05)。与正常对照组相比,NAFL 组及 NASH 组存在脂质代谢异常。 NAFL 组和 NASH 组肝组织中 Irisin 表达水平高于对照组(P <0.05),但 NAFL 组和 NASH 组间差异无统计学意义(P >0.05)。结论:Irisin 可能是一种补偿性调节肝脏脂质蓄积的因子。

    作者:马圆圆;吴雪;刘晓钢;张丽侠;李姗;王亭亭;王志芳;李冲;李静怡;韩超;李付广;郑丽丽 刊期: 2016年第04期

  • 丹蒌片对同型半胱氨酸诱导的兔主动脉内皮细胞 CHOP、BIP蛋白表达和凋亡的影响

    目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白 C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以 HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分别用瑞舒伐他汀(他汀)、丹蒌片含药血清或二者联合共同培养48 h 后, Annexin V-PI 法检测细胞凋亡率,Western blot 法检测 CHOP、BIP 蛋白表达情况。以未诱导细胞作空白对照。结果:模型细胞凋亡率及 BIP、CHOP 蛋白表达水平均高于空白对照(P <0.05)。丹蒌片和他汀可明显降低模型细胞的凋亡率,二者具有协同作用(F丹蒌片=475.288,F他汀=235.248,F交互=121.377,P <0.05);丹蒌片可显著下调模型细胞BIP、CHOP 蛋白的表达水平,与他汀无协同作用(F丹蒌片=7.017,8.147,P 均<0.05;F交互=0.590,1.406,P 均>0.05)。结论:丹蒌片可通过下调 CHOP、BIP 的表达抑制血管内皮细胞凋亡。

    作者:张妍;史占江;牛春玲;沈晓君 刊期: 2016年第04期

  • 先天性上唇多发表皮样囊肿合并皮肤瘘管一例及文献复习

    表皮样囊肿是一种较少见的良性病变,它源于胚胎发育时遗留于组织中的上皮细胞,或源于创伤植入的上皮细胞[1],囊壁病理表现为内衬的被覆复层鳞状上皮,且结缔组织中不含皮肤附属结构[2]。表皮样囊肿可发生于身体的任何部位,面颈部位发病率约为7%,而口腔发病率仅为1.6%,约占所有口腔囊肿的0.01%[1,3-4]。口底、舌、颌下、颏下为口腔颌面部表皮样囊肿常见发病部位,国内外鲜有报道其位于下颌骨[5]、硬腭[6]、悬雍垂[7]、腭扁桃体[8]、腮腺[9]及上唇[10-12]等处,且均为单发,而多发于口腔颌面部者仅见几例报道[13-14]。另外,在中外文献中,表皮样囊肿发生于口腔颌面部且合并皮肤瘘管者仅见一例报道[15]。作者收治了一例该病患者,报道如下。

    作者:孟沙沙;韩新光 刊期: 2016年第04期

  • 表皮生长因子受体在臭氧致小鼠肺部炎症中的作用

    目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在臭氧致小鼠肺部炎症中的作用。方法:40只 SPF 级 BALB/c 小鼠随机分为4组(n =10),分别暴露于空气或0.5、1.0、2.0 mg/m3臭氧中,每天暴露3 h,连续暴露7 d。 HE 染色观察小鼠肺部炎症病理学改变,并进行评分;免疫组化法检测小鼠支气管上皮 EGFR(Y1068)磷酸化水平;双抗夹心ELISA 法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中趋化因子 CXCL1的含量。结果:0.5、1.0、2.0 mg/m 3臭氧组小鼠肺组织炎症评分均高于空气组(P 均<0.05),小鼠支气管上皮 EGFR(Y1068)磷酸化水平和 BALF 中趋化因子 CXCL1的表达水平亦均高于空气组(P 均<0.05)。相关分析结果显示,小鼠支气管上皮 EGFR(Y1068)磷酸化水平与小鼠肺组织炎症病理学变化总分(r =0.652, P =0.030)、BALF 中趋化因子 CXCL1表达水平(r =0.925, P <0.001)均呈正相关。结论:EGFR 磷酸化可能与臭氧诱导的小鼠肺部炎症有关。

    作者:晋乐飞;吴卫东;段丽菊;段书音;胡鹏;冯斐斐 刊期: 2016年第04期

  • 能谱 CT 佳单能量图像在胃周动脉显影中的应用

    目的:探讨能谱 CT 佳单能量图像在胃周动脉显影中的应用价值。方法:对64例怀疑胃部疾病的患者行宝石能谱 CT 扫描,利用佳对比信噪比(CNR)技术得到佳单能量图像,然后观察胃周动脉成像质量(观察指标包括 CT 值、CNR、噪声),同时用5分法评价图像质量,记录胃周动脉的显示率,并和混合能量图像相比较。结果:显示胃周动脉的佳单能量水平为(53±3) keV。佳单能量图像的腹腔干 CT 值、噪声、CNR 均高于混合能量图像(P 均<0.05);胃周动脉图像5分法评分均高于混合能量图像(P <0.05),但是二者胃周动脉显示率差异无统计学意义(P >0.05)。结论:能谱 CT 佳单能量图像可以提高胃周动脉成像的质量。

    作者:万娅敏;姬妮娜;高剑波 刊期: 2016年第04期

  • 风湿性二尖瓣狭窄并发肺动脉高压患者二尖瓣置换术后早期临床转归分析

    目的:分析风湿性二尖瓣狭窄患者二尖瓣置换术后的早期临床转归。方法:回顾分析128例因风湿性二尖瓣狭窄行二尖瓣置换术患者的临床资料,根据心脏彩超估测的肺动脉收缩压(SPAP)结果分为 A 组(30 mmHg≤SPAP <50 mmHg, n =70)和 B 组(SPAP≥50 mmHg,n =58),比较2组一般资料、手术相关资料、围手术期结果及早期随访结果。结果:2组间除 SPAP、肺功能及右心室内径外,其余术前指标差异均无统计学意义。围手术期死亡5例,A 组2例,B 组3例。术后机械通气时间及 ICU 治疗时间 B 组均大于 A 组(P 均<0.05)。术后2组患者SPAP 均较术前下降(P 均<0.05)。术后6个月复查心脏彩超显示2组病例人工瓣膜功能良好;A 组 SPAP 升高至术前水平或以上患者2例,B 组11例,2组相比,差异有统计学意义(χ2=7.644,P =0.006)。结论:二尖瓣狭窄患者的术前肺动脉压高增加了术后复发肺动脉高压的风险,早期临床转归也相对较差。

    作者:陈楠;朱耀斌;张伟华;罗鸿;马宁;刘东海;张新;乔晨晖 刊期: 2016年第04期

  • 河南省城市社区基本公共卫生服务实施现状及公平性分析

    目的:了解河南省18个地级市城市社区基本公共卫生服务项目实施情况,并进行公平性分析,为河南省基本公共卫生服务建设提供数据支持。方法:通过查阅2013年《河南省卫生统计年鉴》《河南人口统计年鉴》和河南省2013年基本公共卫生服务调查报告资料,对比分析河南省2013年城市社区基本公共卫生服务项目实施情况,采用基尼系数和泰尔指数对河南省城市社区基本公共卫生服务项目实施的公平性进行分析。结果:河南省18个城市地区基本公共卫生服务项目的基尼系数大部分小于0.3,预防接种服务项目、传染病报告项目、其他慢性病患者管理项目的基尼系数处于0.3~0.4之间,卫生监督协管报告的事件或线索项目的基尼系数超过0.4。除了预防接种服务实种剂次、传染病报告卡片数、重症精神疾病患者管理人数、2型糖尿病患者管理人数4项外,其他几项城市地区基本公共卫生服务项目差异的组间差异贡献率均大于组内差异贡献率。结论:河南省城市地区基本公共卫生服务实施公平性整体较好,但一些服务项目实施情况在各地区间仍存在差异,其主要由各地区间卫生资源配置的不均衡所造成。

    作者:于达;孙亮;连祎晓;杨淑敏;吴迪;李小芳 刊期: 2016年第04期

  • 合并脑积水的巨大垂体腺瘤的临床特点及治疗

    巨大垂体腺瘤有很强的侵袭性,常侵袭鞍上、海绵窦等重要结构,向鞍上生长压迫侧脑室及室间孔,引起幕上脑积水,临床上出现视力视野障碍、意识障碍、行走不稳及大小便失禁等症状[1]。作者共搜集42例行手术治疗的合并脑积水的巨大垂体腺瘤患者的临床资料,对其临床特点和治疗探讨总结如下。

    作者:曹玉魁;宋来君;郭付有 刊期: 2016年第04期

  • 鱼腥草挥发油对 Raji 细胞增殖和凋亡的影响

    目的:研究鱼腥草挥发油对 Raji 细胞增殖与凋亡的影响。方法:采用 MTT 法观察不同体积分数的鱼腥草挥发油体外诱导 Raji 细胞24、48和72 h 对细胞增殖的影响;分别采用 Annexin V-FITC/PI 双染法及 PI 单染法检测不同体积分数的鱼腥草挥发油处理 Raji 细胞48 h 后细胞凋亡及细胞周期的改变。结果:鱼腥草挥发油诱导 Raji细胞24、48和72 h 的 IC50(V/V)分别为0.12580×10-3、0.09958×10-3和0.10522×10-3,且随鱼腥草挥发油体积分数的增加,细胞增殖抑制率及凋亡率均呈升高的趋势(P <0.05);细胞周期检测结果表明鱼腥草挥发油将细胞阻滞于 G0/G1期。结论:鱼腥草挥发油能够显著抑制 Raji 细胞的增殖,诱导细胞凋亡;其作用机制可能与阻滞细胞G1/M 转化有关。

    作者:张壮丽;赵宁;王亚飞;邹敏;赵志鸿;张小俊;王桂芳 刊期: 2016年第04期

  • 慢病毒介导的 RNA 干扰下调 p16的表达对 hUC-MSCs 衰老的影响

    目的:利用慢病毒(LV)介导的 RNA 干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)中 p16基因的表达,研究 p16表达下调与 hUC-MSCs 衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)hUC-MSCs 组(P3组)、P15 hUC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染 P15 hUC-MSCs 组(LV-sip16组)和 LV-NC 感染 P15 hUC-MSCs 组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR 检测衰老相关基因 p16、p21、p53、pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 的表达。结果:LV-sip16感染能促进 P15 hUC-MSCs 增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入 S 期,抑制 hUC-MSCs 的早期凋亡(P 均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中 p16、p21、p53 mRNA 表达量较 P15组降低,而 pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 表达量升高(P 均<0.05)。结论:下调 P15 hUC-MSCs 中 p16基因的表达能够延缓和改善 hUC-MSCs 的衰老。

    作者:韩康;马珊珊;朱相展;孟楠;王欣欣;邢衢;黄团结;韩莉;石振庆;杨波;关方霞 刊期: 2016年第04期

  • 腹水来源胃癌原代细胞的建立及鉴定

    目的:以胃癌患者腹水来源的胃癌细胞为研究对象,旨在探索出一种相对成熟的肿瘤细胞原代培养技术及鉴定方法。方法:对腹水来源胃癌细胞进行原代培养,通过低浓度胰蛋白酶消化法及差速贴壁法进行原代细胞纯化,获得能够稳定传代的胃癌转移瘤细胞系,并通过观察细胞形态、免疫荧光检测、绘制细胞增殖曲线、构建裸鼠皮下移植瘤模型等方法对其进行鉴定。结果:获得1例能够稳定传代的腹水来源胃腺癌细胞株(命名为 CFJ),细胞形态一致,表达上皮性生物标志物,细胞核呈现明显的异型性,能在裸鼠皮下成功构建移植瘤模型,增殖和转移能力强,可见裸鼠纵隔、腋窝等多处淋巴结转移。结论:胃癌转移性腹水可以成为建立原代肿瘤细胞的很好来源。

    作者:姜文静;张忠献;王尧河;石海亮;赵瑞华;宗红;曹风雨 刊期: 2016年第04期

  • rhMG53蛋白联合 hUC-MSCs 移植对阿尔茨海默鼠的治疗作用

    目的:研究 rhMG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默模型鼠(APP 转基因小鼠)的治疗作用。方法:40只 APP+小鼠随机分为 APP+组、hUC-MSCs 组、rhMG53组和 rhMG53联合 hUC-MSCs组(联合组),分组处理1周后采用免疫组化法检测小鼠脑内 hUC-MSCs 的迁移率,3周后采用 Morris 水迷宫测试各组小鼠的学习和记忆能力,同时检测小鼠血清中 SOD 的活性和 MDA 的含量,并采用 qRT-PCR 和 Western blot 检测小鼠脑组织中衰老相关基因(sirt2、pCNA、p16、p53)的表达。结果:APP+组和 rhMG53组未见 hUC-MSCs 迁移,hUC-MSCs 组和联合组存在 hUC-MSCs 迁移,且联合组迁移细胞更多(P <0.05)。 hUC-MSCs 移植可以使 APP+小鼠的逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加以及平台所在象限停留时间增加(P <0.05);hUC-MSCs 移植和 rhMG53均可使APP+小鼠血清 SOD 活性增加,MDA 含量下降,且二者联用对 MDA 的影响有协同作用(P <0.05);hUC-MSCs 移植和 rhMG53均可使 APP+小鼠脑组织 sirt2和 pCNA mRNA 和蛋白的相对表达量升高,且二者联用对多数衰老相关基因表达的影响有交互作用(P <0.05)。结论:外源 rhMG53蛋白可以提高小鼠脑内 hUC-MSCs 的迁移,促进 hUC-MSCs 对阿尔茨海默鼠的治疗作用。

    作者:宋及时;马珊珊;孟楠;王欣欣;姚宁;朱相展;程康;杨波;关方霞 刊期: 2016年第04期

  • 郑州市1994名健康体检妇女 HPV 感染状况及亚型分析

    宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,在发展中国家其发病率居妇科恶性肿瘤之首[1]。人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一种 DNA 病毒。大量的研究[2]表明,HPV 的持续感染是宫颈癌发病的必要因素。目前已发现超过160种 HPV 亚型,根据其致癌危险性的大小分为高危型 HPV(high-risk hu-man papillomavirus,HR-HPV)和低危型 HPV ( low-risk human papillomavirus,LR-HPV)。作者对郑州市1994名健康体检者 HPV 感染现状及亚型进行分析,为郑州市 HPV 感染的流行病学研究以及临床有效预防和治疗提供参考。

    作者:邢玉荣;张晓雪;杨静;谢珊珊;韩丽萍 刊期: 2016年第04期

郑州大学学报(医学版)杂志

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