韩康;马珊珊;朱相展;孟楠;王欣欣;邢衢;黄团结;韩莉;石振庆;杨波;关方霞
目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白 C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以 HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分别用瑞舒伐他汀(他汀)、丹蒌片含药血清或二者联合共同培养48 h 后, Annexin V-PI 法检测细胞凋亡率,Western blot 法检测 CHOP、BIP 蛋白表达情况。以未诱导细胞作空白对照。结果:模型细胞凋亡率及 BIP、CHOP 蛋白表达水平均高于空白对照(P <0.05)。丹蒌片和他汀可明显降低模型细胞的凋亡率,二者具有协同作用(F丹蒌片=475.288,F他汀=235.248,F交互=121.377,P <0.05);丹蒌片可显著下调模型细胞BIP、CHOP 蛋白的表达水平,与他汀无协同作用(F丹蒌片=7.017,8.147,P 均<0.05;F交互=0.590,1.406,P 均>0.05)。结论:丹蒌片可通过下调 CHOP、BIP 的表达抑制血管内皮细胞凋亡。
作者:张妍;史占江;牛春玲;沈晓君 刊期: 2016年第04期
目的:研究早期生长因子 EGR1对 U87MG 细胞 Aβ40表达的影响。方法:构建 EGR1表达质粒并转染U87MG(实验组),以转染空白质粒的 U87MG 细胞作为对照。采用 qRT-PCR 法检测两组 EGR1 mRNA 的表达;收集细胞培养液用 ELISA 法检测 Aβ40的水平;提取总蛋白用蛋白印迹法检测 BACE1和 PS1蛋白的表达。结果:质粒成功构建并表达。实验组 EGR1 mRNA 表达水平较对照组明显增高(P <0.001);实验组细胞培养液中 Aβ40水平较对照组增高(P <0.001);实验组 BACE1蛋白的表达较对照组增加(P <0.001);两组 PS1蛋白的表达差异无统计学意义(P =0.367)。结论:EGR1在体外可能使 Aβ40表达增加,且可能与上调 BACE1有关。
作者:赵莘瑜;苏刚 刊期: 2016年第04期
目的:探讨基于周期分解的圆形分布法在分析我国流行性乙型脑炎(乙脑)季节特征方面应用的可行性。方法:先使用周期分解法对我国2005年至2014年乙脑发病的季节特征进行分解,再用圆形分布法验证分解出来的季节指数的季节性特征。结果:2005年至2014年我国乙脑发病数呈下降的趋势;乙脑发病呈现出明显的季节性,发病高发日在8月16日,高峰期在7月至9月,流行期在6月至10月。结论:我国乙脑发病具有明显的季节性。满足圆形分布法的应用条件时,基于周期分解的圆形分布法在了解传染病季节特征方面具有较好的应用价值。
作者:王永斌;柴峰;李向文;袁聚祥 刊期: 2016年第04期
目的:探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)联合盐酸多西环素对肺纤维化小鼠的早期治疗效果及作用机制。方法:健康成年清洁级雌性 C57BL/6小鼠40只,采用随机数字表法分为5组(n =8):对照组(气管内注入生理盐水,48 h 后尾静脉注射生理盐水)、模型组(气管内注入博来霉素,48 h 后尾静脉注射生理盐水)、盐酸多西环素组(气管内注入博来霉素,48 h 后腹腔注射盐酸多西环素,隔日注射1次,连用4次)、干细胞组(气管内注入博来霉素,48 h 后尾静脉注射 UC-MSCs)、联合组(气管内注射博来霉素,48 h 后尾静脉注射 UC-MSCs 联合腹腔注射盐酸多西环素,隔日注射1次,连用4次)。于造模第28天,取小鼠右肺组织行 HE、Masson 染色,进行肺泡炎评分及肺纤维化评分;取左肺组织测定羟脯氨酸含量。采用免疫组化法检测 MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果:与模型组相比,干细胞组和盐酸多西环素组肺泡炎及肺纤维化程度减轻,羟脯氨酸含量降低,MMP-9蛋白的表达减弱,TIMP-1蛋白的表达升高,联合组以上指标改善为显著(P <0.05)。结论:早期应用 UC-MSCs 联合盐酸多西环素能够显著减轻小鼠肺纤维化程度,其机制可能与提高 TIMP-1表达、抑制 MMP-9的表达有关。
作者:杨宇;袁晓梅;赵欣;吴敏娜;高新愿;许芝山;钟根深;郭悦鹏 刊期: 2016年第04期
目的:研究大气细颗粒物(PM2.5)不同成分对人肺腺癌Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)遗传毒性的影响,探索 PM2.5暴露的细胞毒性机制及发病机制,为开展河南地区 PM2.5的健康危害评估提供实验依据。方法:于郑州市采集并处理 PM2.5非水溶性成分和水溶性成分,分为 PM2.5非水溶性和水溶性成分不同浓度(50、100、200、400、800 mg/L)染毒组和对照组,采用 CCK-8比色法测量 A549细胞在染毒后6、12、24、48和72 h 的细胞存活率,微核实验检测各个浓度染毒24 h 后细胞染色体损伤情况。结果:PM2.5非水溶性和水溶性成分均能抑制 A549细胞增殖(P <0.05)。染毒24 h 时800 mg/L 的大气 PM2.5非水溶性成分或染毒48 h 时800 mg/L 的大气 PM2.5水溶性成分作用下细胞存活率低。 PM2.5非水溶性成分和水溶性成分均能诱导 A549细胞染色体损伤,与对照组相比,实验组微核率明显升高(P <0.05),非水溶成分致细胞微核率较高(P <0.05)。结论:PM2.5能抑制 A549细胞增殖,导致 A549细胞染色体损伤。非水溶成分的影响可能更大。
作者:刘雪亚;王平;李杰;李萍;卫军华;高祎楠;张国俊 刊期: 2016年第04期
目的:了解河南省18个地级市城市社区基本公共卫生服务项目实施情况,并进行公平性分析,为河南省基本公共卫生服务建设提供数据支持。方法:通过查阅2013年《河南省卫生统计年鉴》《河南人口统计年鉴》和河南省2013年基本公共卫生服务调查报告资料,对比分析河南省2013年城市社区基本公共卫生服务项目实施情况,采用基尼系数和泰尔指数对河南省城市社区基本公共卫生服务项目实施的公平性进行分析。结果:河南省18个城市地区基本公共卫生服务项目的基尼系数大部分小于0.3,预防接种服务项目、传染病报告项目、其他慢性病患者管理项目的基尼系数处于0.3~0.4之间,卫生监督协管报告的事件或线索项目的基尼系数超过0.4。除了预防接种服务实种剂次、传染病报告卡片数、重症精神疾病患者管理人数、2型糖尿病患者管理人数4项外,其他几项城市地区基本公共卫生服务项目差异的组间差异贡献率均大于组内差异贡献率。结论:河南省城市地区基本公共卫生服务实施公平性整体较好,但一些服务项目实施情况在各地区间仍存在差异,其主要由各地区间卫生资源配置的不均衡所造成。
作者:于达;孙亮;连祎晓;杨淑敏;吴迪;李小芳 刊期: 2016年第04期
目的:研究 rhMG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默模型鼠(APP 转基因小鼠)的治疗作用。方法:40只 APP+小鼠随机分为 APP+组、hUC-MSCs 组、rhMG53组和 rhMG53联合 hUC-MSCs组(联合组),分组处理1周后采用免疫组化法检测小鼠脑内 hUC-MSCs 的迁移率,3周后采用 Morris 水迷宫测试各组小鼠的学习和记忆能力,同时检测小鼠血清中 SOD 的活性和 MDA 的含量,并采用 qRT-PCR 和 Western blot 检测小鼠脑组织中衰老相关基因(sirt2、pCNA、p16、p53)的表达。结果:APP+组和 rhMG53组未见 hUC-MSCs 迁移,hUC-MSCs 组和联合组存在 hUC-MSCs 迁移,且联合组迁移细胞更多(P <0.05)。 hUC-MSCs 移植可以使 APP+小鼠的逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加以及平台所在象限停留时间增加(P <0.05);hUC-MSCs 移植和 rhMG53均可使APP+小鼠血清 SOD 活性增加,MDA 含量下降,且二者联用对 MDA 的影响有协同作用(P <0.05);hUC-MSCs 移植和 rhMG53均可使 APP+小鼠脑组织 sirt2和 pCNA mRNA 和蛋白的相对表达量升高,且二者联用对多数衰老相关基因表达的影响有交互作用(P <0.05)。结论:外源 rhMG53蛋白可以提高小鼠脑内 hUC-MSCs 的迁移,促进 hUC-MSCs 对阿尔茨海默鼠的治疗作用。
作者:宋及时;马珊珊;孟楠;王欣欣;姚宁;朱相展;程康;杨波;关方霞 刊期: 2016年第04期
目的:探讨动态增强 MRI(DCE-MRI)及扩散加权成像(DWI)在乳腺良、恶性病变鉴别诊断中的价值。方法:对85例乳腺病变患者行乳腺 MRI 动态增强及 DWI 扫描,经后处理获得:时间-信号强度(TIC)曲线类型、达峰时间(Tmax)、早期强化率(EER)、峰值强化率(PER)、信号增强比(SER)、峰值(SImax)及表观扩散系数(ADC)。结果:良性病变62个,恶性病变34个,良性病变的 Tmax、PER、SImax、ADC 值显著高于恶性病变(P <0.05),良性病变的 SER 显著低于恶性病变(P <0.05),良、恶性病变 EER 差异无统计学意义(P =0.869);良性病变以Ⅰ型曲线为主(45/62),恶性病变以Ⅱ型和Ⅲ型曲线为主(27/34),TIC 曲线类型在良、恶性病变中差异有统计学意义(P <0.05);ADC 鉴别乳腺良、恶性病变的诊断效能高(AUC =0.898)。结论:DCE-MRI 及 DWI 对鉴别乳腺病变的良、恶性病变有重要价值。
作者:靳雅楠;张焱;程敬亮;王莹莹 刊期: 2016年第04期
目的:观察肌细胞增强因子2A(MEF2A)RNA 干扰对小鼠主动脉内皮细胞 MEF2A 及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法:培养小鼠主动脉内皮细胞,构建 MEF2A RNA 干扰慢病毒或者阴性对照慢病毒(NC)并转染小鼠主动脉内皮细胞。实验设对照组(不加慢病毒)、NC 组和 MEF2A RNA 干扰组3组,应用 ELISA 和 RT-PCR 法分别检测 MEF2A 及 ICAM-1、VCAM-1蛋白及 mRNA 的表达水平。结果:ICAM-1在对照组、NC 组和 MEF2A RNA 干扰组上清液中的表达量分别为(1.133±0.182)、(1.267±0.115)、(2.249±0.185)μg/L;VCAM-1在对照组、NC 组和 MEF2A RNA 干扰组上清液中的表达量分别为(2.382±0.204)、(2.253±0.281)、(5.077±0.198)μg/L。 ICAM-1、VCAM-1在上清液中的水平及 mRNA 表达水平,NC 组与对照组相比,差异无统计学意义(P >0.05);MEF2A RNA 干扰组与对照组和 NC 组相比均升高(P <0.05)。结论:慢病毒介导的 MEF2A RNA 干扰可抑制小鼠主动脉内皮细胞 MEF2A 活性及 mRNA 的表达,并可促进血管内ICAM-1、VCAM-1蛋白及 mRNA 的表达。
作者:周文平;张辉;张金盈 刊期: 2016年第04期
表皮样囊肿是一种较少见的良性病变,它源于胚胎发育时遗留于组织中的上皮细胞,或源于创伤植入的上皮细胞[1],囊壁病理表现为内衬的被覆复层鳞状上皮,且结缔组织中不含皮肤附属结构[2]。表皮样囊肿可发生于身体的任何部位,面颈部位发病率约为7%,而口腔发病率仅为1.6%,约占所有口腔囊肿的0.01%[1,3-4]。口底、舌、颌下、颏下为口腔颌面部表皮样囊肿常见发病部位,国内外鲜有报道其位于下颌骨[5]、硬腭[6]、悬雍垂[7]、腭扁桃体[8]、腮腺[9]及上唇[10-12]等处,且均为单发,而多发于口腔颌面部者仅见几例报道[13-14]。另外,在中外文献中,表皮样囊肿发生于口腔颌面部且合并皮肤瘘管者仅见一例报道[15]。作者收治了一例该病患者,报道如下。
作者:孟沙沙;韩新光 刊期: 2016年第04期
乳头状肾细胞癌(papillary renal cell carcinoma, PRCC)是一种起源于肾小管上皮、具有乳头状或小管乳头状结构的肾实质恶性肿瘤[1-2]。目前,PRCC是除肾透明细胞癌外临床上常见的肾恶性肿瘤,约占恶性肾上皮性肿瘤的10%~15%[3]。据相关文献[3]报道,约73.6%的 PRCC 患者为男性,男女发病率相比约为2∶1,女性 PRCC 患者相对较为少见。以往对 PRCC 多集中于病理、临床及与其他亚型肾透明细胞癌的对比研究[3-7],有关 PRCC CT 诊断价值的文献报道较少。该研究回顾性分析37例PRCC 患者的临床表现及影像学检查资料,同时,对比分析男性与女性 PRCC 患者的临床表现、CT 特征,以期提高对该病的认识水平,提高 PRCC 术前诊断的准确性。
作者:王宜旭;梁盼;赵松 刊期: 2016年第04期
目的:观察β-胡萝卜素对食管鳞癌 EC1细胞增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响。方法:用不同浓度(1、5、10、20、30、50μmol/L)β-胡萝卜素分别处理 EC1细胞12、24、36、48、60、72 h 后,CCK-8法检测β-胡萝卜素对EC1细胞增殖率的影响,筛选β-胡萝卜素的佳处理时间及浓度;随后,在此条件下将 EC1细胞分为3组(阴性对照组、空白对照组和实验组),采用 Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的变化,Tr-answell 迁移实验检测细胞迁移能力的变化, Western blot 检测小窝蛋白1(Cav-1)、p-Akt、p-NF-κB、Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin 蛋白表达水平的变化。结果:经筛选,选用50μmol/L β-胡萝卜素作用 EC1细胞48 h 进行后续实验。与阴性对照组和空白对照组相比,实验组 EC1细胞凋亡率显著提高(P <0.001),G0/G1期细胞比例增加(P <0.001),而 S 期细胞比例降低(P <0.001),发生迁移的细胞数量减少(P <0.001),且细胞黏附因子 E-cadherin 的表达显著增加(P <0.001),Cav-1及 AKT信号通路关键蛋白 p-Akt、p-NF-κB、Bcl-2表达量明显下调,而 Caspase-3的表达被激活(P <0.001)。结论:β-胡萝卜素能够有效促进 EC1细胞的凋亡,推测可能是通过抑制 Cav-1介导的AKT/NF-κB 信号通路发挥作用。
作者:朱相展;张彦婷;杨露;张楠楠;李庆华;马珊珊;张琨;薛乐勋;关方霞 刊期: 2016年第04期
目的:探讨 Irisin 在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者肝穿刺组织中的表达及其意义。方法:回顾性分析病理活检确诊的非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL,n =56)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH,n =75)患者及无脂肪变和脂肪性肝炎的正常者(n =20)的临床资料,免疫组化 SP 法检测各组肝穿刺组织中 Irisin 的表达水平。结果:3组年龄及性别构成比差异无统计学意义(P >0.05)。与正常对照组相比,NAFL 组及 NASH 组存在脂质代谢异常。 NAFL 组和 NASH 组肝组织中 Irisin 表达水平高于对照组(P <0.05),但 NAFL 组和 NASH 组间差异无统计学意义(P >0.05)。结论:Irisin 可能是一种补偿性调节肝脏脂质蓄积的因子。
作者:马圆圆;吴雪;刘晓钢;张丽侠;李姗;王亭亭;王志芳;李冲;李静怡;韩超;李付广;郑丽丽 刊期: 2016年第04期
结直肠癌合并梗阻是临床较常见的一种急腹症,其发生率占所有结直肠癌的8%~29%[1],传统治疗方法是结肠造瘘、分期手术,严重影响患者的生活质量。1980年,Dudley 等[2]报道采用术中顺行结肠灌洗一期切除吻合可使部分患者避免二次手术的痛苦,一期切除吻合逐渐为人们接受。近年来,经肛置入肠梗阻导管清洗减压技术逐渐应用于低位梗阻性左半结直肠癌患者的治疗。2005年3月至2015年6月,作者对93例低位梗阻性左半结直肠癌患者分别采用了经肛肠梗阻导管清洗减压和术中结肠灌洗,该文回顾了其临床资料,比较两种方法的疗效。
作者:郑立;史朝辉 刊期: 2016年第04期
巨大垂体腺瘤有很强的侵袭性,常侵袭鞍上、海绵窦等重要结构,向鞍上生长压迫侧脑室及室间孔,引起幕上脑积水,临床上出现视力视野障碍、意识障碍、行走不稳及大小便失禁等症状[1]。作者共搜集42例行手术治疗的合并脑积水的巨大垂体腺瘤患者的临床资料,对其临床特点和治疗探讨总结如下。
作者:曹玉魁;宋来君;郭付有 刊期: 2016年第04期
目的:利用慢病毒(LV)介导的 RNA 干扰下调老龄人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)中 p16基因的表达,研究 p16表达下调与 hUC-MSCs 衰老的关系。方法:实验分为第3代(P3)hUC-MSCs 组(P3组)、P15 hUC-MSCs组(P15组)、LV-sip16感染 P15 hUC-MSCs 组(LV-sip16组)和 LV-NC 感染 P15 hUC-MSCs 组(空病毒组)。采用CCK-8法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,qRT-PCR 检测衰老相关基因 p16、p21、p53、pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 的表达。结果:LV-sip16感染能促进 P15 hUC-MSCs 增殖,降低衰老细胞率,促使细胞周期进入 S 期,抑制 hUC-MSCs 的早期凋亡(P 均<0.05);同时,LV-sip16组细胞中 p16、p21、p53 mRNA 表达量较 P15组降低,而 pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 表达量升高(P 均<0.05)。结论:下调 P15 hUC-MSCs 中 p16基因的表达能够延缓和改善 hUC-MSCs 的衰老。
作者:韩康;马珊珊;朱相展;孟楠;王欣欣;邢衢;黄团结;韩莉;石振庆;杨波;关方霞 刊期: 2016年第04期
目的:以胃癌患者腹水来源的胃癌细胞为研究对象,旨在探索出一种相对成熟的肿瘤细胞原代培养技术及鉴定方法。方法:对腹水来源胃癌细胞进行原代培养,通过低浓度胰蛋白酶消化法及差速贴壁法进行原代细胞纯化,获得能够稳定传代的胃癌转移瘤细胞系,并通过观察细胞形态、免疫荧光检测、绘制细胞增殖曲线、构建裸鼠皮下移植瘤模型等方法对其进行鉴定。结果:获得1例能够稳定传代的腹水来源胃腺癌细胞株(命名为 CFJ),细胞形态一致,表达上皮性生物标志物,细胞核呈现明显的异型性,能在裸鼠皮下成功构建移植瘤模型,增殖和转移能力强,可见裸鼠纵隔、腋窝等多处淋巴结转移。结论:胃癌转移性腹水可以成为建立原代肿瘤细胞的很好来源。
作者:姜文静;张忠献;王尧河;石海亮;赵瑞华;宗红;曹风雨 刊期: 2016年第04期
青光眼是全球第二大致盲眼病,有报道[1]称至2020年,全球的青光眼患者将增至7800万人。我国也是青光眼高发国家,且目前的发病类型仍以原发性闭角型青光眼(primary angle closure glaucoma , PACG)为主。手术是治疗 PACG 的主要方法,其中小梁切除术和青白联合术在临床上的应用为广泛;这两种术式均属于滤过泡依赖型,因此滤过泡瘢痕化、包裹、渗漏等问题均可导致手术失败。该研究针对滤过泡瘢痕等导致手术失败的问题,在两种手术中均联合应用生物羊膜和丝裂霉素 C(mitomycin C, MMC),并比较两种术式的疗效及并发症,报道如下。
作者:高佳;郝燕燕;杨鑫;孟佳 刊期: 2016年第04期
系统性淀粉样变是指以细胞外异常折叠(β折叠)蛋白为主的淀粉样物质在器官组织细胞外沉积所引起的一组疾病,可累及机体任何器官,常累及肾脏、皮肤、胃肠道、肝脏和神经系统,但累及胸膜并以顽固性胸腔积液为主要表现的淀粉样变则少见[1-2]。现将郑州大学第一附属医院收治的一例原发性系统性淀粉样变的资料结合国内外相关文献总结论述如下。
作者:周璐;李芳;王焕勤;黄亚辉;田文娴;王静 刊期: 2016年第04期
目的:构建分泌表达幽门螺杆菌 lpp20基因的重组乳酸乳球菌菌株,并鉴定其免疫活性,为研究安全高效的幽门螺杆菌口服疫苗奠定基础。方法:采用 PCR 法从幽门螺杆菌基因组 DNA 中扩增 lpp20基因,将 lpp20先与 T 载体(pMD19-T)连接,进而经双酶切与表达载体 pNZ8149-SPusp45连接,用电穿孔法将重组质粒转入食品级乳酸乳球菌菌株 NZ3900中,并用 Nisin 诱导 Lpp20表达,表达产物通过 Western blot 法鉴定免疫活性。结果:lpp20基因的 PCR 扩增产物大小约为540 bp,重组质粒的酶切、PCR 和测序鉴定结果符合预期;在菌体和培养基中均检出表达的 Lpp20蛋白,重组表达的 Lpp20蛋白相对分子质量约为20000,且具有与小鼠抗幽门螺杆菌血清反应的免疫活性。结论:成功构建了能够分泌表达幽门螺杆菌 Lpp20抗原的乳酸乳球菌菌株,该重组菌株在口服疫苗研究中具有应用潜力。
作者:孙楠;张荣光;段广才;陈帅印;彭晓燕;范清堂;郗园林 刊期: 2016年第04期