张伟宏；蒋莉莉；汪晓凯；赵秋民；杨东斌；黄贯峰；张焕云；杨阳；梁芳；韩雷；吴细丕
目的：探讨中国阿尔茨海默病（ AD）患者血清促甲状腺激素（ TSH ）水平的变化。方法：利用计算机及手工检索，全面检索AD患者血清TSH变化的病例对照研究，采用Stata 12．0进行meta分析。结果：共有16篇文献纳入分析，获得样本1760例，其中病例组918例，对照组842例。 Meta分析结果显示，AD患者血清TSH水平低于对照组（Z＝1．987，P＝0．046）；失安全系数Nfs0．05为895；平均年龄为异质性因素，进一步对病例组平均年龄进行亚组分析，发现随着年龄增高，病例组和对照组之间的TSH水平差异更为明显（Z＝2．110，P＝0．003），采用随机效应模型合并分析的结果可靠。结论：中国AD患者TSH水平低于正常人群，低水平的血清TSH可能与AD发生、发展有关。
作者：张亚峰；孙桂香；王炳花 刊期： 2015年第06期
目的：观察LBH589对上皮性卵巢癌OVCAR-3细胞增殖、侵袭和VEGF表达的影响。方法：采用MTT法和Transwell实验分别检测1、5、10μmol／L的LBH589对OVCAR-3细胞活性和侵袭细胞数的影响，采用Western blot法检测Ki67、MMP-2、VEGF、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平。采用MTT和Western blot法分别检测PI3K抑制剂LY294002对细胞活性以及MMP-2、VEGF表达水平的影响。结果：LBH589降低OVCAR-3细胞活性（ F＝5．324， P＜0．001），减少穿过Transwell基质膜的细胞数量（F＝84．325，P＜0．001），Ki67、MMP-2、VEGF、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平亦降低（F＝9．191、7．623、6．340、6．221、4．690，P均＜0．001）。与对照组相比，LY294002抑制MMP-2和VEGF蛋白的表达，并降低OVCAR-3细胞活性（ P均＜0．05）。结论：LBH589可能通过调控PI3K／Akt信号通路下调MMP-2和VEGF表达水平，继而抑制上皮性卵巢癌OVCAR-3细胞增殖、侵袭和血管生成。
作者：晁宏图；李晓凤；寇馨歆；李雷；杨晓霞；王莉英；王莉 刊期： 2015年第06期
目的：探讨CK19、Galectin-3及CD56在良恶性卵巢甲状腺肿鉴别诊断中的应用价值。方法：采用免疫组化法检测6例卵巢甲状腺癌和10例卵巢甲状腺肿组织中CK19、Galectin-3及CD56蛋白表达情况。结果：卵巢甲状腺癌组织中CK19、Galectin-3蛋白的表达高于卵巢甲状腺肿组织（t＝4．807，3．835，P均＜0．05），CD56蛋白的表达低于卵巢甲状腺肿组织（t＝3．105，P均＜0．05）。分别利用CK19、Galectin-3及CD56蛋白表达水平绘制ROC曲线，曲线下面积（AUC）分别为0．983、0．933和0．867；以其中1个指标恶性即判定为恶性，则3者联合检测对良恶性卵巢甲状腺肿鉴别诊断的灵敏度可达100％。结论：CK19、Galectin-3及CD56对卵巢甲状腺肿良恶性的鉴别有很好的应用价值。
作者：邵世清；杨少琴；黄贵；田君；张红霞；王社莲 刊期： 2015年第06期
目的：对豫医卷毛大鼠的Krt71基因进行比较生物学分析。方法：采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Krt71的cDNA序列进行克隆、测序，并与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的Krt71 cDNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果：获得了豫医卷毛大鼠Krt71基因全长1573 bp的cDNA序列（ GenBank登录号：KF303588）。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的同源性分别为99．9％、95．2％、88．5％、87．5％、88．0％、88．1％、88．1％，氨基酸序列的同源性分别为99．9％、98．9％、92．4％、91．2％、91．4％、92．3％、92．1％。结论：Krt71基因在哺乳动物进化过程中具有较高的保守性，是一个具有重要功能的“持家基因”。
作者：张明昊；章金涛 刊期： 2015年第06期
目的：探讨线粒体转录因子A（ TFAM）基因多态性与精神分裂症的关系。方法：采用PCR-RFLP及DNA序列分析技术分别对237例精神分裂症患者及246例健康对照TFAM基因rs10826178、rs4390300两多态位点进行检测及分析。结果：rs10826178与rs4390300位点等位基因与基因型频率分布在两组之间比较，差异无统计学意义（P均＞0．05）。结论：TFAM基因rs4390300、rs10826178的基因型差异可能与精神分裂症的发病无关。
作者：孙逸杰；景戈翰；杨菁；何书平；仝冬晓；王丽雯；司沛茹；金璐；程晓丽 刊期： 2015年第06期
目的：提高郑州市校外青少年艾滋病相关知识知晓水平。方法：采用整群抽样的方法于2014年5月至6月抽取郑州市校外青少年372人为研究对象。先对其艾滋病知识进行基线调查，之后在该人群中开展艾滋病知识健康教育、发放艾滋病宣传材料和提供咨询服务等干预活动，干预活动结束后对该部分人群再次进行艾滋病知识调查。结果：干预前的艾滋病知识知晓率为39．2％，干预后提高到98．9％，差异有统计学意义（χ2配对＝222．001，P＜0．001）。结论：郑州市校外青少年艾滋病知识知晓率干预后得以明显提高。
作者：楚子君 刊期： 2015年第06期
目的：探讨河南省青少年吸烟行为的影响因素，为有针对性地预防和控制青少年吸烟提供科学依据。方法：采用多阶段分层整群随机抽样方法，全省抽取16个调查点48所初中共7789名学生进行问卷调查。结果：河南省青少年尝试吸烟率和现在吸烟率分别为20．87％和5．87％。单因素分析结果显示青少年的尝试吸烟率和现在吸烟率均为男生高于女生，且随着年龄的增长，每周零花钱的增多，烟草广告暴露程度、父母吸烟和好朋友吸烟比例、看到老师吸烟频率的增高而增高（P＜0．001）。多因素logistic回归分析显示青少年尝试吸烟和现在吸烟行为的危险因素均包括男生、每周零花钱21～元组和＞40元组、好朋友吸烟、看到老师在学校吸烟及认为在社交场合吸烟使人更舒服，好朋友吸烟是重要的影响因素；保护因素包括认为吸烟能使年轻人减少吸引力及在社交场合吸烟使人更不舒服[OR（95％CI）＝0．762（0．651～0．900）、0．661（0．552～0．798）和0．710（0．527～0．953）、0．421（0．321～0．560）]。结论：青少年吸烟受多方面因素的影响，好朋友吸烟是重要的影响因素，在开展青少年吸烟防控工作时尤其应注重同伴控烟教育。
作者：孙盼盼；王卫峰；周刚；李建彬 刊期： 2015年第06期
目的：探讨Wnt／β-连环蛋白（β-catenin ）通路对大鼠脑出血的保护作用机制。方法：96只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑出血组、脑出血假干预组、siDkk-1干预组4组，采用Real-time PCR方法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中Wnt-1和糖原合成酶激酶3β（ GSK-3β） mRNA表达的变化，采用Western blot法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中β-catenin表达的变化，各组大鼠处死前均进行行为学检测。结果：大鼠脑出血后24和72 h，Wnt-1 mRNA水平与假手术组相比均降低，经siDkk-1干预后，Wnt-1 mRNA水平较脑出血假干预组升高（F＝9．040和26．400， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，GSK-3βmRNA 水平与假手术组相比均升高，经siDkk-1干预后，GSK-3βmRNA水平较脑出血假干预组下降（F＝41．100和17．800， P均＜0．001）。大鼠脑出血后24和72 h，β-catenin蛋白的表达较假手术组均升高，经siDkk-1干预后，其表达较脑出血假干预组进一步升高（ F＝15．100和14．000， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，刺激触须前肢上抬比例较假手术组降低，经siDkk-1干预后，前肢上抬比例较脑出血假干预组升高（F＝2450．000和2230．000，P均＜0．001）。结论：Wnt／β-catenin通路对脑出血大鼠有保护作用，可能是通过活化Wnt-1、抑制GSK-3β，进而导致β-catenin 在胞浆中聚集、移位入核后启动Wnt下游靶基因的转录所致。
作者：李治华；陈曦；臧卫东；郭付有 刊期： 2015年第06期
脊髓小脑共济失调（ spinocerebellar ataxia ，SCA）是一组具有临床和遗传异质性的神经系统遗传疾病［1-2］，多呈常染色体显性遗传，主要表现为慢性进行性加重的肢体共济失调、构音障碍及眼球运动障碍，影像学研究［1-4］表明病变主要累及大脑、小脑、脑干及脊髓。目前报道［1，5-6］的SCA亚型多达40种，其发病年龄及临床症状多数相互重叠，因此仅仅依据临床表型特征及影像学评估对患者诊断分型较为困难，而基因检测则有助于明确诊断。该研究主要对临床诊断为SCA的一家系9例患者及有血缘关系、临床表现正常的27例家系成员进行基因检测，以确定基因型，同时对患者的临床特点进行总结分析，为临床诊断提供相关资料。
作者：夏明荣；黄月；张杰文；李书剑 刊期： 2015年第06期
目的：研究枸杞多糖及其硫酸酯体外免疫和抗肿瘤活性。方法：分别采用水提一步醇沉法和分步醇沉法提取不同的多糖LBPS30、LBPS70和LBPSt，纯化后用氯磺酸-吡啶法修饰得到3种硫酸化枸杞多糖sLBPS30、sLB-PS70和sLBPSt。采用MTT法检测多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖和食管癌EC109细胞抑制的影响，ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-2、IFN-γ和IL-24的含量，划痕法检测细胞迁移情况。结果：sLBPSt和 sLBPS30的淋巴细胞增殖率和不同时间点对EC109细胞的抑制率都较高； sLBPSt组细胞上清液中4种淋巴细胞因子含量均显著高于细胞对照组（P＜0．05）；sLBPSt组细胞迁移数显著低于其余各组（P＜0．05）。结论：硫酸化修饰能显著增强体外脾淋巴细胞增殖，促进淋巴细胞四种细胞因子的分泌，并能抑制EC109细胞生长，降低EC109细胞迁移速率，且与硫酸基含量有一定的关系。 sLBPSt和sLBPS30总体效果较好。
作者：王君敏；薛敬礼；葛蓓蕾；庄玉伟；杜春燕；薛昆 刊期： 2015年第06期
目的：探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法：设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段（外显子10与内含子10交界处287和181 bp），构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体，与内参质粒pRL-TK共转染HepG2细胞，通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果：与CYP3 A4启动子相比较， G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达（F＝795．575，P＜0．001），且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与CYP3A4启动子相比较，G 与A 等位基因在181 bp DNA 片段中均降低了荧光素酶表达（F＝23．218，P＜0．001），而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件，该抑制元件对CYP3 A4*1 G增强CYP3 A4基因表达起负调控作用。
作者：杨卫红；闫良；刘利娥；赵登职；张卫；张莉蓉 刊期： 2015年第06期
目的：探讨血清肿瘤标志物检测结合决策树模型在肝癌诊断中的价值。方法：运用肿瘤标志物定量检测试剂盒对119例肝部良性疾病及98例肝癌患者血清中9项肿瘤标志[甲胎蛋白（ AFP）、癌胚抗原（ CEA）、CA125、CA242、CA199、神经元特异性烯醇化酶（ NSE）、铁蛋白（ Ferritin）、人生长激素（ HGH）和CA153]水平进行检测，应用logistic回归筛选肿瘤标志物，并于筛选前后建立决策树模型和Fisher判别分析模型。结果：肝癌组9项血清肿瘤标志物水平均高于肝良性疾病组（P＜0．05）。筛选前基于9项肿瘤标志物、筛选后基于3项肿瘤标志物分别建立Fisher判别分析模型、决策树模型，其预测准确度分别为76．5％、91．2％、74．4％、90．8％。筛选前后决策树模型ROC曲线的AUC分别为0．912和0．908，高于Fisher判别分析的0．745和0．727（Z＝4．512和4．589，P均＜0．05）；但决策树模型和Fisher判别分析筛选前后自身相比，差异均无统计学意义（Z＝1．855和1．122，P均＞0．05）。结论：基于3项血清肿瘤标志物建立的决策树模型诊断肝癌的效果优于 Fisher 判别分析。
作者：张永；李晓勇；宋瑜；周百中；崔卫东；赵甦；陈艳军；杨战锋；郜宇；杨华 刊期： 2015年第06期
目的：通过构建pCAT3启动子陷阱载体筛选甲型副伤寒沙门菌噬菌体LSPA1启动子。方法：PCR无义突变去除pCAT2载体骨架上CalⅠ酶切位点，并在CAT片段的5’端引入CalⅠ的酶切位点，构建启动子陷阱载体pCAT3。 TaqⅠ酶切噬菌体LSPA1基因组，插入pCAT3载体中，转化至大肠杆菌DH5α，通过氯霉素抗性平板筛选获得噬菌体LSPA1基因文库菌；随机挑取1株提取质粒，测序及比对分析插入序列；根据分析结果设计引物，扩增可能的启动子序列，并插入验证载体p-3lysm-egfp，转化DH5α，荧光显微镜观察。结果：成功构建pCAT3启动子陷阱载体，获得约100启动子文库菌，其中1株文库菌质粒中随机插入片段可能对应噬菌体LSPA1的 ORF4启动子；插入待验证DNA片段的p-3lysm-egfp载体重组菌在荧光显微镜下能见到明显绿色荧光。结论：该启动子文库可有效筛选噬菌体LSPA1启动子，为进一步深入研究噬菌体LSPA1提供帮助。
作者：曾韦锟；毛普加；洪愉；冯梦蝶；许泽仰；宋武战；杨洪文；赵继华；王纪爱；黄芬；井申荣 刊期： 2015年第06期
目的：通过RNA干扰抑制食管癌细胞Eca-109 survivin基因的表达，观察survivin基因沉默对Eca -109细胞增殖与凋亡的影响。方法：构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染Eca -109细胞（干扰组），同时设转染无关干扰质粒的Eca-109细胞为阴性对照，未转染细胞为空白对照。采用Western blot 检测sur-vivin基因沉默效果，MTT、平板克隆形成实验及流式细胞术分析干扰前后Eca-109细胞增殖与凋亡的变化。结果：与两对照组相比，干扰组Survivin蛋白的表达降低（F＝79．397，P＜0．001）；MTT检测结果显示，干扰组抑制细胞增殖效果优于两对照组，而平板克隆形成实验显示干扰组克隆形成率低于两对照组（F＝1620．26， P＜0．001）；流式细胞术分析显示，干扰组凋亡指数高于两对照组（F＝2284．205，P＜0．001）。结论：RNA干扰可特异性沉默survivin基因的表达，抑制Eca-109细胞的增殖，诱导细胞凋亡。
作者：牛朝霞；李宁宁；陈洁；李宜培；彭蕤蕤；秦紫芳 刊期： 2015年第06期
目的：研究不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的作用及对NF-κB通路的影响。方法：240只BALB／c小鼠随机分为方剂A组、方剂B组、模型组和空白组，每组60只。前3组采用柯萨奇B3m病毒制作实验室病毒性扩张型心肌病模型，方剂A组、方剂B组小鼠造模后分别以方剂A和方剂B灌胃治疗，模型组和空白组小鼠均灌注等量的纯水，1次／d，连续5周。比较各组小鼠的心脏质量指数。运用HE和VG染色法观察各组小鼠心肌细胞的病理学改变。采用TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡情况。采取RT-PCR法和免疫组化法检测各组小鼠心肌细胞NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果：方剂A组、方剂B组和模型组小鼠心脏质量指数、心肌胶原容积分数、凋亡心肌细胞数及NF-κB mRNA和蛋白的表达均高于空白组（P＜0．05）；方剂A组和方剂B组小鼠的上述5个指标均低于模型组（P＜0．05）；方剂A组上述5个指标均低于方剂B组（P＜0．05）。结论：不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的改善作用和对NF-κB通路的影响有差异。
作者：王鸣瑞；韩明向 刊期： 2015年第06期
目的：获取结核分枝杆菌mpt59和esxA基因编码的原核表达融合蛋白，并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法：PCR扩增含有柔性链接肽段的esxA核苷酸序列，并将其连接至原核表达载体pET28a上，再将mpt59连接至pET28a-esxA上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后，用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白，并用于结核患者的诊断。结果：成功构建了原核表达载体pET28a-esxA-mpt59，转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测，结果表明其诊断结核的灵敏度为97．8％，特异度为100％。结论：构建了含mpt59和esxA融合抗原基因的原核表达载体，并诱导表达了融合蛋白，为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。
作者：石洁；朱岩昆；郑丹薇；马晓光；王少华；李辉；邢进；吴彩霞 刊期： 2015年第06期
作者： 刊期： 2015年第06期
目的：建立黄曲霉菌感染小鼠角膜动物模型，并观察病变后不同时期角膜组织病理学变化。方法：用培养接种棒对40只C57 BL／6小鼠进行仿真临床角膜划痕导致真菌感染。在第1、3、5、7和14天行裂隙灯显微镜检查评分，随后处死小鼠制作角膜铺片，免疫荧光染色后进行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果：术后第1、3和5天，接种眼临床评分升高迅速，在第5天达到峰值，随后第7和14天临床评分逐渐降低；术后第1天接种眼角膜缘组织已有中性粒细胞浸润、角膜巩膜缘血管扩张充血等明显急性炎症变化，第3天角膜巩膜缘出现新生血管芽，中性粒细胞向角膜中央溃疡灶浸润、聚集，第5天中性粒细胞浸润进一步加重，见侵入角膜基质层放射状生长的新生血管，第7天中性粒细胞浸润仍较严重，新生血管向角膜中央溃疡灶生长明显，管腔增粗，第14天中性粒细胞明显减少，新生血管萎缩、减少。结论：成功建立黄曲霉菌角膜炎小鼠动物模型；感染第5天可能是角膜炎症过程中的关键时间窗。
作者：张伟宏；蒋莉莉；汪晓凯；赵秋民；杨东斌；黄贯峰；张焕云；杨阳；梁芳；韩雷；吴细丕 刊期： 2015年第06期
目的：探讨口腔扁平苔藓（OLP）患者情绪障碍与唾液皮质醇和脱氢表雄酮（DHEA）水平的相关性。方法：采用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评定非糜烂型OLP组（40例）、糜烂型OLP组（31例）和对照组（31例）的焦虑、抑郁状况，并在早晨采集唾液，通过放射免疫法对受试者的唾液皮质醇和DHEA水平进行测定，分析量表得分与唾液皮质醇和DHEA水平的相关性。结果：3组受试者的HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平差异均有统计学意义（F＝15．892、4．876和14．375，P＜0．05），糜烂型OLP组HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平均高于对照组和非糜烂型OLP组（P＜0．05）。糜烂型OLP组唾液皮质醇水平与HAMA得分和HAMD得分（r＝0．965、0．923，P ＜0．001）呈正相关，而唾液 DHEA 水平与 HAMA 得分和 HAMD 得分（r ＝－0．948、－0．966，P＜0．001）呈负相关。非糜烂型 OLP组唾液皮质醇水平与 HAMA 得分和HAMD 得分（r ＝0．963、0．957，P＜0．001）呈正相关，而唾液DHEA水平与HAMA得分和HAMD得分（ r＝－0．962、－0．971，P＜0．001）呈负相关。结论：糜烂型OLP的发生、发展与焦虑、抑郁等情绪障碍有关，其作用机制可能是通过应激反应导致糜烂型OLP患者的唾液皮质醇水平升高，但是否与唾液DHEA水平的降低相关还有待进一步的研究。
作者：莫珩；高承志；王少杰；曲姗 刊期： 2015年第06期
目的：构建长QT综合征（ LQTS ）2型hERG 基因G604 S突变的真核表达载体G604 S-hERG-pcDNA3、G604S-hERG-pEGFP。方法：采用重叠延伸PCR 法在pEGM-hERG基础上构建G604S突变体PGEM-hERG-G604S，通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pcDNA3和pEGFP-C2中并测序验证，用脂质体转染法将G604 S-hERG-pEGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果：构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证hERG基因1810位点碱基G突变为A，构建的G604 S-hERG-pEGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论：成功构建hERG基因G604 S h-ERG-pcDNA3和G604 S-hERG-pEGFP表达载体。
作者：韩稳琦；霍建华；李国良；蒋永荣；武金娥；孙超峰 刊期： 2015年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
