邵世清；杨少琴；黄贵；田君；张红霞；王社莲
目的：探讨中国阿尔茨海默病（ AD）患者血清促甲状腺激素（ TSH ）水平的变化。方法：利用计算机及手工检索，全面检索AD患者血清TSH变化的病例对照研究，采用Stata 12．0进行meta分析。结果：共有16篇文献纳入分析，获得样本1760例，其中病例组918例，对照组842例。 Meta分析结果显示，AD患者血清TSH水平低于对照组（Z＝1．987，P＝0．046）；失安全系数Nfs0．05为895；平均年龄为异质性因素，进一步对病例组平均年龄进行亚组分析，发现随着年龄增高，病例组和对照组之间的TSH水平差异更为明显（Z＝2．110，P＝0．003），采用随机效应模型合并分析的结果可靠。结论：中国AD患者TSH水平低于正常人群，低水平的血清TSH可能与AD发生、发展有关。
作者：张亚峰；孙桂香；王炳花 刊期： 2015年第06期
目的：探索脑动静脉畸形（CAVM）与脑血管内皮生长因子（VEGF）之间的关系。方法：对30例CAVM病变血管及病变周围血管组织标本行HE染色，观察血管的组织学改变。采用免疫组化法和Western blot法检测血管中VEGF蛋白的表达，采用荧光定量PCR法检测血管中VEGF mRNA的表达。以32例正常脑组织血管标本作对照。结果：CAVM病变血管和病变周围血管较正常脑血管发生明显改变。荧光定量PCR和Western blot 检测结果显示，CAVM病变血管和病变周围血管组织中VEGF mRNA和蛋白表达水平均高于正常脑血管（P均＜0．05）， CAVM病变血管中VEGF mRNA和蛋白表达水平高于病变周围血管（t配对＝19．095，3．216，P＜0．05）。结论：VEGF可能对CAVM的发生和发展起着重要作用。
作者：田甜；孙雅菲；于淼；张继伟；呼铁民；王维兴；王广 刊期： 2015年第06期
目的：研究不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的作用及对NF-κB通路的影响。方法：240只BALB／c小鼠随机分为方剂A组、方剂B组、模型组和空白组，每组60只。前3组采用柯萨奇B3m病毒制作实验室病毒性扩张型心肌病模型，方剂A组、方剂B组小鼠造模后分别以方剂A和方剂B灌胃治疗，模型组和空白组小鼠均灌注等量的纯水，1次／d，连续5周。比较各组小鼠的心脏质量指数。运用HE和VG染色法观察各组小鼠心肌细胞的病理学改变。采用TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡情况。采取RT-PCR法和免疫组化法检测各组小鼠心肌细胞NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果：方剂A组、方剂B组和模型组小鼠心脏质量指数、心肌胶原容积分数、凋亡心肌细胞数及NF-κB mRNA和蛋白的表达均高于空白组（P＜0．05）；方剂A组和方剂B组小鼠的上述5个指标均低于模型组（P＜0．05）；方剂A组上述5个指标均低于方剂B组（P＜0．05）。结论：不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的改善作用和对NF-κB通路的影响有差异。
作者：王鸣瑞；韩明向 刊期： 2015年第06期
目的：探讨PPARγ上调对PCOS患者卵巢颗粒细胞P450 arom mRNA表达的调控作用及对T转化效应的影响。方法：提取10例雄激素正常的PCOS 患者（ NA-PCOS组）、10例伴高雄激素血症的PCOS患者（ HA-PCOS组）及10例仅因输卵管因素不孕患者（对照组）的卵巢颗粒细胞，分别给予0、1、10 nmol／L的PPARγ激动剂罗格列酮培养48 h后，采用RT-PCR测定PPARγ、P450 arom mRNA的表达，采用 ELISA法测定培养液中E2值，计算T转化率。结果：PPARγ上调后，3组患者P450arom mRNA 的表达均降低，T转化率下降，尤其是HA-PCOS 组（P＜0．05）。 PPARγ上调（10 nmol／L罗格列酮处理）后，HA-PCOS组卵巢颗粒细胞中PPARγmRNA的表达水平和T转化率负相关，P450arom mRNA的表达水平和T转化率正相关（r＝－0．633、0．829，P＜0．05）。结论：PPARγ可能通过抑制P450 arom参与PCOS高雄激素血症的发生。
作者：王碧君；郭艺红；张慧红；李婧；杨新红 刊期： 2015年第06期
目的：探讨线粒体转录因子A（ TFAM）基因多态性与精神分裂症的关系。方法：采用PCR-RFLP及DNA序列分析技术分别对237例精神分裂症患者及246例健康对照TFAM基因rs10826178、rs4390300两多态位点进行检测及分析。结果：rs10826178与rs4390300位点等位基因与基因型频率分布在两组之间比较，差异无统计学意义（P均＞0．05）。结论：TFAM基因rs4390300、rs10826178的基因型差异可能与精神分裂症的发病无关。
作者：孙逸杰；景戈翰；杨菁；何书平；仝冬晓；王丽雯；司沛茹；金璐；程晓丽 刊期： 2015年第06期
目的：通过构建pCAT3启动子陷阱载体筛选甲型副伤寒沙门菌噬菌体LSPA1启动子。方法：PCR无义突变去除pCAT2载体骨架上CalⅠ酶切位点，并在CAT片段的5’端引入CalⅠ的酶切位点，构建启动子陷阱载体pCAT3。 TaqⅠ酶切噬菌体LSPA1基因组，插入pCAT3载体中，转化至大肠杆菌DH5α，通过氯霉素抗性平板筛选获得噬菌体LSPA1基因文库菌；随机挑取1株提取质粒，测序及比对分析插入序列；根据分析结果设计引物，扩增可能的启动子序列，并插入验证载体p-3lysm-egfp，转化DH5α，荧光显微镜观察。结果：成功构建pCAT3启动子陷阱载体，获得约100启动子文库菌，其中1株文库菌质粒中随机插入片段可能对应噬菌体LSPA1的 ORF4启动子；插入待验证DNA片段的p-3lysm-egfp载体重组菌在荧光显微镜下能见到明显绿色荧光。结论：该启动子文库可有效筛选噬菌体LSPA1启动子，为进一步深入研究噬菌体LSPA1提供帮助。
作者：曾韦锟；毛普加；洪愉；冯梦蝶；许泽仰；宋武战；杨洪文；赵继华；王纪爱；黄芬；井申荣 刊期： 2015年第06期
目的：探讨子宫内膜腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1（ IGFBP-rP1）基因的甲基化状态及其与IGFBP-rP1 mRNA、蛋白表达之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测45例子宫内膜腺癌、30例子宫内膜单纯性增生和30例子宫内膜不典型增生组织中IGFBP-rP1基因启动子区和第一外显子区CpG岛的甲基化状态；采用实时荧光定量PCR和免疫组化SP法分别检测上述3种组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达。结果：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率高于其在第一外显子区的甲基化率（χ2＝6．429，P＝0．011）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率低于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝14．659，P＝0．001）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达均高于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝8．619、χ2＝23．611，P均＜0．05）；在启动子区发生IGFBP-rP1基因甲基化的子宫内膜腺癌组织中，其mRNA的表达水平低于未甲基化组（t＝4．758，P＝0．001），其蛋白的表达与甲基化状态呈负关联（rP ＝－0．625，P＜0．001）。结论：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因甲基化主要发生在启动子区，且呈低甲基化状态；IGFBP-rP1启动子区的低甲基化状态可能是IGFBP-rP1基因在子宫内膜腺癌组织中高表达的调控机制之一。
作者：郭瑞霞；范丽君；李艳敏 刊期： 2015年第06期
促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）是由肾脏分泌的一种活性糖蛋白，作用于骨髓中红系造血祖细胞，能促进其增殖、分化。1977年从再生障碍性贫血患者的尿液中分离提纯得到EPO后［1］，人们第一次能够用重组人EPO治疗慢性肾脏病贫血和化疗导致的非髓性恶性肿瘤相关的贫血。近年来研究［2-3］发现其不仅具有促进骨髓造血作用，还有一系列非造血作用，如抗炎、抗凋亡、抗氧化应激等。作者针对EPO研究的新进展及其在临床的应用综述如下。
作者：文建国；冯锦锦 刊期： 2015年第06期
目的：对豫医卷毛大鼠的Krt71基因进行比较生物学分析。方法：采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Krt71的cDNA序列进行克隆、测序，并与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的Krt71 cDNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果：获得了豫医卷毛大鼠Krt71基因全长1573 bp的cDNA序列（ GenBank登录号：KF303588）。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的同源性分别为99．9％、95．2％、88．5％、87．5％、88．0％、88．1％、88．1％，氨基酸序列的同源性分别为99．9％、98．9％、92．4％、91．2％、91．4％、92．3％、92．1％。结论：Krt71基因在哺乳动物进化过程中具有较高的保守性，是一个具有重要功能的“持家基因”。
作者：张明昊；章金涛 刊期： 2015年第06期
目的：研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法：组织学水平研究中，配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本；细胞学水平研究中，选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系hFOB1．19；采用免疫组化法检测组织学水平Notch1及HES1蛋白的表达，采用Western blot及Real-time PCR法检测组织学及细胞学水平Notch1、HES1蛋白及mRNA的表达。用Notch1-siRNA沉默U2OS细胞中Notch1基因后，应用Western blot及Real-time PCR法检测U2OS细胞中Notch1及HES1的表达，Transwell法检测U2OS侵袭能力的变化。结果：相比于正常组织，骨肉瘤组织中Notch1、HES1 mRNA和蛋白呈高表达（t配对＝22．567，14．830和8．439，7．100，P＜0．001）。 U2OS细胞中Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达强于hFOB1．19细胞（t＝11．053，20．482和28．845，34．681，P＜0．001）。沉默Notch1基因后，U2OS细胞Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达下降（t＝6．294，9．209和9．151，13．953，P＜0．05），侵袭能力下降（t＝71．387，P＜0．001）。结论：Notch1和HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达，沉默Notch1基因可降低U2OS细胞侵袭能力。
作者：王勇；赵伟；马骥 刊期： 2015年第06期
目的：构建长QT综合征（ LQTS ）2型hERG 基因G604 S突变的真核表达载体G604 S-hERG-pcDNA3、G604S-hERG-pEGFP。方法：采用重叠延伸PCR 法在pEGM-hERG基础上构建G604S突变体PGEM-hERG-G604S，通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pcDNA3和pEGFP-C2中并测序验证，用脂质体转染法将G604 S-hERG-pEGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果：构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证hERG基因1810位点碱基G突变为A，构建的G604 S-hERG-pEGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论：成功构建hERG基因G604 S h-ERG-pcDNA3和G604 S-hERG-pEGFP表达载体。
作者：韩稳琦；霍建华；李国良；蒋永荣；武金娥；孙超峰 刊期： 2015年第06期
目的：探讨Wnt／β-连环蛋白（β-catenin ）通路对大鼠脑出血的保护作用机制。方法：96只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑出血组、脑出血假干预组、siDkk-1干预组4组，采用Real-time PCR方法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中Wnt-1和糖原合成酶激酶3β（ GSK-3β） mRNA表达的变化，采用Western blot法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中β-catenin表达的变化，各组大鼠处死前均进行行为学检测。结果：大鼠脑出血后24和72 h，Wnt-1 mRNA水平与假手术组相比均降低，经siDkk-1干预后，Wnt-1 mRNA水平较脑出血假干预组升高（F＝9．040和26．400， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，GSK-3βmRNA 水平与假手术组相比均升高，经siDkk-1干预后，GSK-3βmRNA水平较脑出血假干预组下降（F＝41．100和17．800， P均＜0．001）。大鼠脑出血后24和72 h，β-catenin蛋白的表达较假手术组均升高，经siDkk-1干预后，其表达较脑出血假干预组进一步升高（ F＝15．100和14．000， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，刺激触须前肢上抬比例较假手术组降低，经siDkk-1干预后，前肢上抬比例较脑出血假干预组升高（F＝2450．000和2230．000，P均＜0．001）。结论：Wnt／β-catenin通路对脑出血大鼠有保护作用，可能是通过活化Wnt-1、抑制GSK-3β，进而导致β-catenin 在胞浆中聚集、移位入核后启动Wnt下游靶基因的转录所致。
作者：李治华；陈曦；臧卫东；郭付有 刊期： 2015年第06期
目的：观察LBH589对上皮性卵巢癌OVCAR-3细胞增殖、侵袭和VEGF表达的影响。方法：采用MTT法和Transwell实验分别检测1、5、10μmol／L的LBH589对OVCAR-3细胞活性和侵袭细胞数的影响，采用Western blot法检测Ki67、MMP-2、VEGF、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平。采用MTT和Western blot法分别检测PI3K抑制剂LY294002对细胞活性以及MMP-2、VEGF表达水平的影响。结果：LBH589降低OVCAR-3细胞活性（ F＝5．324， P＜0．001），减少穿过Transwell基质膜的细胞数量（F＝84．325，P＜0．001），Ki67、MMP-2、VEGF、p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平亦降低（F＝9．191、7．623、6．340、6．221、4．690，P均＜0．001）。与对照组相比，LY294002抑制MMP-2和VEGF蛋白的表达，并降低OVCAR-3细胞活性（ P均＜0．05）。结论：LBH589可能通过调控PI3K／Akt信号通路下调MMP-2和VEGF表达水平，继而抑制上皮性卵巢癌OVCAR-3细胞增殖、侵袭和血管生成。
作者：晁宏图；李晓凤；寇馨歆；李雷；杨晓霞；王莉英；王莉 刊期： 2015年第06期
目的：探讨CYP3A4*1G增强CYP3A4基因表达的负调控作用。方法：设计合成包含CYP3A4*1G G或A等位基因的一系列基因片段（外显子10与内含子10交界处287和181 bp），构建CYP3A4*1G正向位于CYP3A4启动子上游的荧光素酶报告基因载体，与内参质粒pRL-TK共转染HepG2细胞，通过双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果：与CYP3 A4启动子相比较， G与A等位基因在287 bp DNA片段中均降低了荧光素酶表达（F＝795．575，P＜0．001），且G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与CYP3A4启动子相比较，G 与A 等位基因在181 bp DNA 片段中均降低了荧光素酶表达（F＝23．218，P＜0．001），而G与A等位基因对CYP3A4启动子活性的抑制程度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：在CYP3A4内含子10与外显子10交界处CYP3A4*1G存在与CYP3A4*1G变异无关的CYP3A4启动子的抑制元件，该抑制元件对CYP3 A4*1 G增强CYP3 A4基因表达起负调控作用。
作者：杨卫红；闫良；刘利娥；赵登职；张卫；张莉蓉 刊期： 2015年第06期
脊髓小脑共济失调（ spinocerebellar ataxia ，SCA）是一组具有临床和遗传异质性的神经系统遗传疾病［1-2］，多呈常染色体显性遗传，主要表现为慢性进行性加重的肢体共济失调、构音障碍及眼球运动障碍，影像学研究［1-4］表明病变主要累及大脑、小脑、脑干及脊髓。目前报道［1，5-6］的SCA亚型多达40种，其发病年龄及临床症状多数相互重叠，因此仅仅依据临床表型特征及影像学评估对患者诊断分型较为困难，而基因检测则有助于明确诊断。该研究主要对临床诊断为SCA的一家系9例患者及有血缘关系、临床表现正常的27例家系成员进行基因检测，以确定基因型，同时对患者的临床特点进行总结分析，为临床诊断提供相关资料。
作者：夏明荣；黄月；张杰文；李书剑 刊期： 2015年第06期
目的：获取结核分枝杆菌mpt59和esxA基因编码的原核表达融合蛋白，并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法：PCR扩增含有柔性链接肽段的esxA核苷酸序列，并将其连接至原核表达载体pET28a上，再将mpt59连接至pET28a-esxA上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后，用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白，并用于结核患者的诊断。结果：成功构建了原核表达载体pET28a-esxA-mpt59，转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测，结果表明其诊断结核的灵敏度为97．8％，特异度为100％。结论：构建了含mpt59和esxA融合抗原基因的原核表达载体，并诱导表达了融合蛋白，为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。
作者：石洁；朱岩昆；郑丹薇；马晓光；王少华；李辉；邢进；吴彩霞 刊期： 2015年第06期
目的：探讨睾酮受体（ AR）蛋白表达水平的改变对高血压大鼠血管重构（ VR）的影响及其信号转导机制。方法：将30只大鼠随机分为对照组、假手术组、高血压组3组（每组10只）。采用“两肾一夹”法制备肾血管性高血压大鼠模型。 HE染色观察主动脉组织形态结构，免疫组化法检测3组大鼠主动脉组织中AR、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）蛋白表达水平。结果：与对照组相比，假手术组主动脉形态结构基本正常，AR、MKP-1蛋白表达水平无显著改变（P＞0．05）；与对照组及假手术组相比，AR和MKP-1蛋白表达水平下降（P＜0．001）；且在高血压组AR与MKP-1蛋白的表达呈正相关（r＝0．657，P＝0．039），在对照组及假手术组无关（r＝0．589和0．436， P＞0．05）。结论：高血压VR过程中存在AR及MKP-1蛋白表达水平的改变。
作者：于超男；王颖；燕树勋；杨国杰；张彦周；杨晓村；李渊；孙丽娜 刊期： 2015年第06期
目的：提高郑州市校外青少年艾滋病相关知识知晓水平。方法：采用整群抽样的方法于2014年5月至6月抽取郑州市校外青少年372人为研究对象。先对其艾滋病知识进行基线调查，之后在该人群中开展艾滋病知识健康教育、发放艾滋病宣传材料和提供咨询服务等干预活动，干预活动结束后对该部分人群再次进行艾滋病知识调查。结果：干预前的艾滋病知识知晓率为39．2％，干预后提高到98．9％，差异有统计学意义（χ2配对＝222．001，P＜0．001）。结论：郑州市校外青少年艾滋病知识知晓率干预后得以明显提高。
作者：楚子君 刊期： 2015年第06期
作者： 刊期： 2015年第06期
嗜铬细胞瘤来源于肾上腺髓质及交感神经系统的嗜铬组织，肾上腺嗜铬细胞瘤约占90％，另10％为肾上腺外的嗜铬细胞瘤［1-3］。肾上腺外嗜铬细胞瘤主要位于腹部，多在腹主动脉旁，其他少见部位为肾门、肝门区、肝及下腔静脉之间、近胰头部位、髂窝或近髂窝血管处，腹外甚少见，心脏内者更是罕见。现将2013年11月郑州大学第一附属医院心血管外科收治的1例右心房嗜铬细胞瘤报道如下。
作者：李杰；唐丽；魏廷举；张新 刊期： 2015年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
