王碧君；郭艺红；张慧红；李婧；杨新红
目的：提高郑州市校外青少年艾滋病相关知识知晓水平。方法：采用整群抽样的方法于2014年5月至6月抽取郑州市校外青少年372人为研究对象。先对其艾滋病知识进行基线调查，之后在该人群中开展艾滋病知识健康教育、发放艾滋病宣传材料和提供咨询服务等干预活动，干预活动结束后对该部分人群再次进行艾滋病知识调查。结果：干预前的艾滋病知识知晓率为39．2％，干预后提高到98．9％，差异有统计学意义（χ2配对＝222．001，P＜0．001）。结论：郑州市校外青少年艾滋病知识知晓率干预后得以明显提高。
作者：楚子君 刊期： 2015年第06期
目的：制备人微管蛋白抗体，并用其观察大鼠死亡后肾脏组织中微管蛋白的降解规律与死亡时间的关系。方法：通过分子生物学方法制备小鼠抗人微管蛋白多克隆抗体。取48只大鼠，分为断颈致死组和溺死组，每组24只，采用Western blot观察死亡后24、48、72和96 h大鼠肾脏组织中微管蛋白的降解规律。结果：制备的小鼠抗人微管蛋白多克隆抗体效价超过1砄8000；2组大鼠死亡后，肾脏组织中微管蛋白均呈逐步降解的趋势；断颈致死组大鼠死后96 h肾脏组织检测不到微管蛋白；溺死组大鼠死后72 h肾脏组织检测不到微管蛋白。结论：大鼠死亡后，肾脏组织中微管蛋白呈逐步降解的趋势；溺死和断颈大鼠死亡后肾脏组织中微管蛋白的降解速度存在差异。
作者：齐麟；李伟 刊期： 2015年第06期
目的：研究枸杞多糖及其硫酸酯体外免疫和抗肿瘤活性。方法：分别采用水提一步醇沉法和分步醇沉法提取不同的多糖LBPS30、LBPS70和LBPSt，纯化后用氯磺酸-吡啶法修饰得到3种硫酸化枸杞多糖sLBPS30、sLB-PS70和sLBPSt。采用MTT法检测多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖和食管癌EC109细胞抑制的影响，ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-2、IFN-γ和IL-24的含量，划痕法检测细胞迁移情况。结果：sLBPSt和 sLBPS30的淋巴细胞增殖率和不同时间点对EC109细胞的抑制率都较高； sLBPSt组细胞上清液中4种淋巴细胞因子含量均显著高于细胞对照组（P＜0．05）；sLBPSt组细胞迁移数显著低于其余各组（P＜0．05）。结论：硫酸化修饰能显著增强体外脾淋巴细胞增殖，促进淋巴细胞四种细胞因子的分泌，并能抑制EC109细胞生长，降低EC109细胞迁移速率，且与硫酸基含量有一定的关系。 sLBPSt和sLBPS30总体效果较好。
作者：王君敏；薛敬礼；葛蓓蕾；庄玉伟；杜春燕；薛昆 刊期： 2015年第06期
目的：获取结核分枝杆菌mpt59和esxA基因编码的原核表达融合蛋白，并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法：PCR扩增含有柔性链接肽段的esxA核苷酸序列，并将其连接至原核表达载体pET28a上，再将mpt59连接至pET28a-esxA上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后，用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白，并用于结核患者的诊断。结果：成功构建了原核表达载体pET28a-esxA-mpt59，转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测，结果表明其诊断结核的灵敏度为97．8％，特异度为100％。结论：构建了含mpt59和esxA融合抗原基因的原核表达载体，并诱导表达了融合蛋白，为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。
作者：石洁；朱岩昆；郑丹薇；马晓光；王少华；李辉；邢进；吴彩霞 刊期： 2015年第06期
目的：探讨Wnt／β-连环蛋白（β-catenin ）通路对大鼠脑出血的保护作用机制。方法：96只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑出血组、脑出血假干预组、siDkk-1干预组4组，采用Real-time PCR方法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中Wnt-1和糖原合成酶激酶3β（ GSK-3β） mRNA表达的变化，采用Western blot法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中β-catenin表达的变化，各组大鼠处死前均进行行为学检测。结果：大鼠脑出血后24和72 h，Wnt-1 mRNA水平与假手术组相比均降低，经siDkk-1干预后，Wnt-1 mRNA水平较脑出血假干预组升高（F＝9．040和26．400， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，GSK-3βmRNA 水平与假手术组相比均升高，经siDkk-1干预后，GSK-3βmRNA水平较脑出血假干预组下降（F＝41．100和17．800， P均＜0．001）。大鼠脑出血后24和72 h，β-catenin蛋白的表达较假手术组均升高，经siDkk-1干预后，其表达较脑出血假干预组进一步升高（ F＝15．100和14．000， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，刺激触须前肢上抬比例较假手术组降低，经siDkk-1干预后，前肢上抬比例较脑出血假干预组升高（F＝2450．000和2230．000，P均＜0．001）。结论：Wnt／β-catenin通路对脑出血大鼠有保护作用，可能是通过活化Wnt-1、抑制GSK-3β，进而导致β-catenin 在胞浆中聚集、移位入核后启动Wnt下游靶基因的转录所致。
作者：李治华；陈曦；臧卫东；郭付有 刊期： 2015年第06期
脊髓小脑共济失调（ spinocerebellar ataxia ，SCA）是一组具有临床和遗传异质性的神经系统遗传疾病［1-2］，多呈常染色体显性遗传，主要表现为慢性进行性加重的肢体共济失调、构音障碍及眼球运动障碍，影像学研究［1-4］表明病变主要累及大脑、小脑、脑干及脊髓。目前报道［1，5-6］的SCA亚型多达40种，其发病年龄及临床症状多数相互重叠，因此仅仅依据临床表型特征及影像学评估对患者诊断分型较为困难，而基因检测则有助于明确诊断。该研究主要对临床诊断为SCA的一家系9例患者及有血缘关系、临床表现正常的27例家系成员进行基因检测，以确定基因型，同时对患者的临床特点进行总结分析，为临床诊断提供相关资料。
作者：夏明荣；黄月；张杰文；李书剑 刊期： 2015年第06期
目的：研究不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的作用及对NF-κB通路的影响。方法：240只BALB／c小鼠随机分为方剂A组、方剂B组、模型组和空白组，每组60只。前3组采用柯萨奇B3m病毒制作实验室病毒性扩张型心肌病模型，方剂A组、方剂B组小鼠造模后分别以方剂A和方剂B灌胃治疗，模型组和空白组小鼠均灌注等量的纯水，1次／d，连续5周。比较各组小鼠的心脏质量指数。运用HE和VG染色法观察各组小鼠心肌细胞的病理学改变。采用TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡情况。采取RT-PCR法和免疫组化法检测各组小鼠心肌细胞NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果：方剂A组、方剂B组和模型组小鼠心脏质量指数、心肌胶原容积分数、凋亡心肌细胞数及NF-κB mRNA和蛋白的表达均高于空白组（P＜0．05）；方剂A组和方剂B组小鼠的上述5个指标均低于模型组（P＜0．05）；方剂A组上述5个指标均低于方剂B组（P＜0．05）。结论：不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的改善作用和对NF-κB通路的影响有差异。
作者：王鸣瑞；韩明向 刊期： 2015年第06期
目的：建立RP-HPLC法测定生物转化液中利斯的明中间体含量及ee值的方法。方法：以Lux 3u Cellu-lose-1为手性分离柱，以正己烷砄异丙醇（V砄V＝92．5砄7．5）为流动相，检测波长217 nm，进样量20μL。结果：中间体能够完全分离，在测定中间体含量的同时能够测定样品的ee值。结论：该方法准确、灵敏、精密度良好，适合生物转化液中利斯的明中间体含量及ee值的测定。
作者：李永红；周方方；付路平；刘宏民 刊期： 2015年第06期
目的：探索脑动静脉畸形（CAVM）与脑血管内皮生长因子（VEGF）之间的关系。方法：对30例CAVM病变血管及病变周围血管组织标本行HE染色，观察血管的组织学改变。采用免疫组化法和Western blot法检测血管中VEGF蛋白的表达，采用荧光定量PCR法检测血管中VEGF mRNA的表达。以32例正常脑组织血管标本作对照。结果：CAVM病变血管和病变周围血管较正常脑血管发生明显改变。荧光定量PCR和Western blot 检测结果显示，CAVM病变血管和病变周围血管组织中VEGF mRNA和蛋白表达水平均高于正常脑血管（P均＜0．05）， CAVM病变血管中VEGF mRNA和蛋白表达水平高于病变周围血管（t配对＝19．095，3．216，P＜0．05）。结论：VEGF可能对CAVM的发生和发展起着重要作用。
作者：田甜；孙雅菲；于淼；张继伟；呼铁民；王维兴；王广 刊期： 2015年第06期
目的：探讨子宫内膜腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1（ IGFBP-rP1）基因的甲基化状态及其与IGFBP-rP1 mRNA、蛋白表达之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测45例子宫内膜腺癌、30例子宫内膜单纯性增生和30例子宫内膜不典型增生组织中IGFBP-rP1基因启动子区和第一外显子区CpG岛的甲基化状态；采用实时荧光定量PCR和免疫组化SP法分别检测上述3种组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达。结果：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率高于其在第一外显子区的甲基化率（χ2＝6．429，P＝0．011）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率低于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝14．659，P＝0．001）。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达均高于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织（F＝8．619、χ2＝23．611，P均＜0．05）；在启动子区发生IGFBP-rP1基因甲基化的子宫内膜腺癌组织中，其mRNA的表达水平低于未甲基化组（t＝4．758，P＝0．001），其蛋白的表达与甲基化状态呈负关联（rP ＝－0．625，P＜0．001）。结论：子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因甲基化主要发生在启动子区，且呈低甲基化状态；IGFBP-rP1启动子区的低甲基化状态可能是IGFBP-rP1基因在子宫内膜腺癌组织中高表达的调控机制之一。
作者：郭瑞霞；范丽君；李艳敏 刊期： 2015年第06期
目的：探讨特发性弱精子症患者精子中TEKT3表达的特点。方法：采用非连续密度梯度离心法分离、纯化正常对照组和弱精子症组精子标本各35份，分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中TEKT3 mRNA和蛋白的表达。结果：与正常对照组比较，弱精子症组TEKT3 mRNA 和蛋白表达均显著降低（t ＝9．610、10．090，P＜0．001），相关性分析显示弱精子症组精子TEKT3 mRNA和蛋白表达水平与前向运动精子率呈正相关（r＝0．684， P＝0．001；r＝0．483，P＝0．013）。结论：TEKT3表达降低可能在特发性弱精子症发病中具有重要作用。
作者：李玉山；陈河涛；杨夕阳；王全先；刘军杰；王琳凯；苏彦华；孙琳 刊期： 2015年第06期
目的：建立黄曲霉菌感染小鼠角膜动物模型，并观察病变后不同时期角膜组织病理学变化。方法：用培养接种棒对40只C57 BL／6小鼠进行仿真临床角膜划痕导致真菌感染。在第1、3、5、7和14天行裂隙灯显微镜检查评分，随后处死小鼠制作角膜铺片，免疫荧光染色后进行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果：术后第1、3和5天，接种眼临床评分升高迅速，在第5天达到峰值，随后第7和14天临床评分逐渐降低；术后第1天接种眼角膜缘组织已有中性粒细胞浸润、角膜巩膜缘血管扩张充血等明显急性炎症变化，第3天角膜巩膜缘出现新生血管芽，中性粒细胞向角膜中央溃疡灶浸润、聚集，第5天中性粒细胞浸润进一步加重，见侵入角膜基质层放射状生长的新生血管，第7天中性粒细胞浸润仍较严重，新生血管向角膜中央溃疡灶生长明显，管腔增粗，第14天中性粒细胞明显减少，新生血管萎缩、减少。结论：成功建立黄曲霉菌角膜炎小鼠动物模型；感染第5天可能是角膜炎症过程中的关键时间窗。
作者：张伟宏；蒋莉莉；汪晓凯；赵秋民；杨东斌；黄贯峰；张焕云；杨阳；梁芳；韩雷；吴细丕 刊期： 2015年第06期
目的：观察重复经颅磁刺激（rTMS）对抑郁大鼠学习记忆功能及海马CA3区突触素（SYP）表达的影响。方法：SD雄性大鼠40只，随机分为对照组、抑郁组、rTMS组和伪刺激组，每组10只，后3组采用为期21 d的孤养结合慢性不可预见轻度应激制备抑郁模型。造模成功后，rTMS组给予3个疗程15 Hz的rTMS治疗；伪刺激组只施予同样次数的声音刺激而无电流脉冲。采用Morris水迷宫的定位航行实验及空间探索实验评定大鼠学习记忆功能。应用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA3区SYP蛋白的表达情况。结果：4组大鼠逃避潜伏期、原平台象限游泳时间及原平台象限游泳路程占总路程的百分比及海马CA3区SYP蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（ F＝39．608、646．088、198．940、388．673，P＜0．001）。与对照组比较，抑郁组、伪刺激组大鼠逃避潜伏期延长，原平台象限游泳时间缩短，原平台象限游泳路程占总路程的百分比减小，SYP蛋白表达水平降低（P＜0．05）；与抑郁组、伪刺激组比较，rTMS组上述指标均明显改善（P＜0．05）。结论：rTMS干预可以改善抑郁模型大鼠的学习记忆功能，其机制可能与rTMS增加大鼠海马CA3区SYP的表达有关。
作者：欧阳华；白冰；赵琳；任慧聪；张朝辉 刊期： 2015年第06期
目的：探讨对反复种植失败（ RIF）患者进行人工干预后，着床窗口期子宫内膜组织中溶血磷脂酸受体3（LPAR3）和同源框基因11（HOXA-11）表达变化对临床结局的影响。方法：将92例因输卵管因素不孕的RIF患者分为搔刮组（子宫内膜搔刮，n＝31）、中成药组（调经促孕丸，n＝31）、未干预组（n＝30）。采用RT-PCR和Western blot方法检测3组患者窗口期子宫内膜组织中LPAR3和HOXA-11 mRNA和蛋白表达的情况，并观察3组患者临床妊娠率的差异。结果：搔刮组、中成药组患者窗口期子宫内膜组织中LPAR3和HOXA-11 mRNA及蛋白表达量高于未干预组，差异有统计学意义（F＝57．463和60．771，P＜0．001；F＝48．816和40．313，P＜0．001），而前两组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。搔刮组、中成药组复苏周期临床妊娠率分别是48．4％和32．3％，均高于未干预组（16．7％），差异有统计学意义（χ2＝6．908，P＝0．032），但前两组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：子宫内膜搔刮术和口服调经促孕丸2种干预措施均可以改善子宫内膜容受性，提高RIF患者的临床妊娠率。
作者：赵华；王兴玲；李丽；李豫峰 刊期： 2015年第06期
目的：研究FATE／BJ-HCC-2基因表达与肝癌细胞迁移及侵袭的关系。方法：体外合成FATE／BJ-HCC-2基因序列特异性小干扰RNA（siRNA），转染肝癌细胞系克隆株5B4，并设非特异性siRNA转染和空白对照组。采用RT-PCR及Western blot方法检测各组细胞中 FATE／BJ-HCC-2 mRNA和蛋白的表达；通过Transwell小室模型检测各组细胞体外迁移及侵袭的能力；激光共聚焦显微镜下观察5B4及空质粒转染的对照细胞（ Mock）的骨架结构。结果：各组细胞中FATE／BJ-HCC-2 mRNA和蛋白表达差异有统计学意义（F＝15．321，P＝0．020），特异性siRNA转染组细胞低于其他2组（ P＜0．05）。抑制FATE／BJ-HCC-2基因表达后，细胞体外迁移及侵袭的能力降低（ F＝6．171和10．109，P＜0．05）。5B4细胞形态拉长，蝌蚪状，呈现迁移、游走的状态；微丝丰富，形态规则，平行贯穿于细胞全长，细胞膜周围有较多丝状伪足伸出；微管减少，分布不规则。结论：FATE／BJ-HCC-2基因表达促进肝癌细胞的迁移及侵袭。
作者：葛丽丽；朴军颜；杨小昂；尹艳慧；张毓 刊期： 2015年第06期
促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）是由肾脏分泌的一种活性糖蛋白，作用于骨髓中红系造血祖细胞，能促进其增殖、分化。1977年从再生障碍性贫血患者的尿液中分离提纯得到EPO后［1］，人们第一次能够用重组人EPO治疗慢性肾脏病贫血和化疗导致的非髓性恶性肿瘤相关的贫血。近年来研究［2-3］发现其不仅具有促进骨髓造血作用，还有一系列非造血作用，如抗炎、抗凋亡、抗氧化应激等。作者针对EPO研究的新进展及其在临床的应用综述如下。
作者：文建国；冯锦锦 刊期： 2015年第06期
目的：探讨睾酮受体（ AR）蛋白表达水平的改变对高血压大鼠血管重构（ VR）的影响及其信号转导机制。方法：将30只大鼠随机分为对照组、假手术组、高血压组3组（每组10只）。采用“两肾一夹”法制备肾血管性高血压大鼠模型。 HE染色观察主动脉组织形态结构，免疫组化法检测3组大鼠主动脉组织中AR、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）蛋白表达水平。结果：与对照组相比，假手术组主动脉形态结构基本正常，AR、MKP-1蛋白表达水平无显著改变（P＞0．05）；与对照组及假手术组相比，AR和MKP-1蛋白表达水平下降（P＜0．001）；且在高血压组AR与MKP-1蛋白的表达呈正相关（r＝0．657，P＝0．039），在对照组及假手术组无关（r＝0．589和0．436， P＞0．05）。结论：高血压VR过程中存在AR及MKP-1蛋白表达水平的改变。
作者：于超男；王颖；燕树勋；杨国杰；张彦周；杨晓村；李渊；孙丽娜 刊期： 2015年第06期
目的：探讨血清肿瘤标志物检测结合决策树模型在肝癌诊断中的价值。方法：运用肿瘤标志物定量检测试剂盒对119例肝部良性疾病及98例肝癌患者血清中9项肿瘤标志[甲胎蛋白（ AFP）、癌胚抗原（ CEA）、CA125、CA242、CA199、神经元特异性烯醇化酶（ NSE）、铁蛋白（ Ferritin）、人生长激素（ HGH）和CA153]水平进行检测，应用logistic回归筛选肿瘤标志物，并于筛选前后建立决策树模型和Fisher判别分析模型。结果：肝癌组9项血清肿瘤标志物水平均高于肝良性疾病组（P＜0．05）。筛选前基于9项肿瘤标志物、筛选后基于3项肿瘤标志物分别建立Fisher判别分析模型、决策树模型，其预测准确度分别为76．5％、91．2％、74．4％、90．8％。筛选前后决策树模型ROC曲线的AUC分别为0．912和0．908，高于Fisher判别分析的0．745和0．727（Z＝4．512和4．589，P均＜0．05）；但决策树模型和Fisher判别分析筛选前后自身相比，差异均无统计学意义（Z＝1．855和1．122，P均＞0．05）。结论：基于3项血清肿瘤标志物建立的决策树模型诊断肝癌的效果优于 Fisher 判别分析。
作者：张永；李晓勇；宋瑜；周百中；崔卫东；赵甦；陈艳军；杨战锋；郜宇；杨华 刊期： 2015年第06期
目的：探讨PPARγ上调对PCOS患者卵巢颗粒细胞P450 arom mRNA表达的调控作用及对T转化效应的影响。方法：提取10例雄激素正常的PCOS 患者（ NA-PCOS组）、10例伴高雄激素血症的PCOS患者（ HA-PCOS组）及10例仅因输卵管因素不孕患者（对照组）的卵巢颗粒细胞，分别给予0、1、10 nmol／L的PPARγ激动剂罗格列酮培养48 h后，采用RT-PCR测定PPARγ、P450 arom mRNA的表达，采用 ELISA法测定培养液中E2值，计算T转化率。结果：PPARγ上调后，3组患者P450arom mRNA 的表达均降低，T转化率下降，尤其是HA-PCOS 组（P＜0．05）。 PPARγ上调（10 nmol／L罗格列酮处理）后，HA-PCOS组卵巢颗粒细胞中PPARγmRNA的表达水平和T转化率负相关，P450arom mRNA的表达水平和T转化率正相关（r＝－0．633、0．829，P＜0．05）。结论：PPARγ可能通过抑制P450 arom参与PCOS高雄激素血症的发生。
作者：王碧君；郭艺红；张慧红；李婧；杨新红 刊期： 2015年第06期
目的：探讨口腔扁平苔藓（OLP）患者情绪障碍与唾液皮质醇和脱氢表雄酮（DHEA）水平的相关性。方法：采用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评定非糜烂型OLP组（40例）、糜烂型OLP组（31例）和对照组（31例）的焦虑、抑郁状况，并在早晨采集唾液，通过放射免疫法对受试者的唾液皮质醇和DHEA水平进行测定，分析量表得分与唾液皮质醇和DHEA水平的相关性。结果：3组受试者的HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平差异均有统计学意义（F＝15．892、4．876和14．375，P＜0．05），糜烂型OLP组HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平均高于对照组和非糜烂型OLP组（P＜0．05）。糜烂型OLP组唾液皮质醇水平与HAMA得分和HAMD得分（r＝0．965、0．923，P ＜0．001）呈正相关，而唾液 DHEA 水平与 HAMA 得分和 HAMD 得分（r ＝－0．948、－0．966，P＜0．001）呈负相关。非糜烂型 OLP组唾液皮质醇水平与 HAMA 得分和HAMD 得分（r ＝0．963、0．957，P＜0．001）呈正相关，而唾液DHEA水平与HAMA得分和HAMD得分（ r＝－0．962、－0．971，P＜0．001）呈负相关。结论：糜烂型OLP的发生、发展与焦虑、抑郁等情绪障碍有关，其作用机制可能是通过应激反应导致糜烂型OLP患者的唾液皮质醇水平升高，但是否与唾液DHEA水平的降低相关还有待进一步的研究。
作者：莫珩；高承志；王少杰；曲姗 刊期： 2015年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
