齐麟;李伟
目的:探讨中国阿尔茨海默病( AD)患者血清促甲状腺激素( TSH )水平的变化。方法:利用计算机及手工检索,全面检索AD患者血清TSH变化的病例对照研究,采用Stata 12.0进行meta分析。结果:共有16篇文献纳入分析,获得样本1760例,其中病例组918例,对照组842例。 Meta分析结果显示,AD患者血清TSH水平低于对照组(Z=1.987,P=0.046);失安全系数Nfs0.05为895;平均年龄为异质性因素,进一步对病例组平均年龄进行亚组分析,发现随着年龄增高,病例组和对照组之间的TSH水平差异更为明显(Z=2.110,P=0.003),采用随机效应模型合并分析的结果可靠。结论:中国AD患者TSH水平低于正常人群,低水平的血清TSH可能与AD发生、发展有关。
作者:张亚峰;孙桂香;王炳花 刊期: 2015年第06期
目的:研究不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的作用及对NF-κB通路的影响。方法:240只BALB/c小鼠随机分为方剂A组、方剂B组、模型组和空白组,每组60只。前3组采用柯萨奇B3m病毒制作实验室病毒性扩张型心肌病模型,方剂A组、方剂B组小鼠造模后分别以方剂A和方剂B灌胃治疗,模型组和空白组小鼠均灌注等量的纯水,1次/d,连续5周。比较各组小鼠的心脏质量指数。运用HE和VG染色法观察各组小鼠心肌细胞的病理学改变。采用TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡情况。采取RT-PCR法和免疫组化法检测各组小鼠心肌细胞NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果:方剂A组、方剂B组和模型组小鼠心脏质量指数、心肌胶原容积分数、凋亡心肌细胞数及NF-κB mRNA和蛋白的表达均高于空白组(P<0.05);方剂A组和方剂B组小鼠的上述5个指标均低于模型组(P<0.05);方剂A组上述5个指标均低于方剂B组(P<0.05)。结论:不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的改善作用和对NF-κB通路的影响有差异。
作者:王鸣瑞;韩明向 刊期: 2015年第06期
目的:观察重复经颅磁刺激(rTMS)对抑郁大鼠学习记忆功能及海马CA3区突触素(SYP)表达的影响。方法:SD雄性大鼠40只,随机分为对照组、抑郁组、rTMS组和伪刺激组,每组10只,后3组采用为期21 d的孤养结合慢性不可预见轻度应激制备抑郁模型。造模成功后,rTMS组给予3个疗程15 Hz的rTMS治疗;伪刺激组只施予同样次数的声音刺激而无电流脉冲。采用Morris水迷宫的定位航行实验及空间探索实验评定大鼠学习记忆功能。应用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA3区SYP蛋白的表达情况。结果:4组大鼠逃避潜伏期、原平台象限游泳时间及原平台象限游泳路程占总路程的百分比及海马CA3区SYP蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义( F=39.608、646.088、198.940、388.673,P<0.001)。与对照组比较,抑郁组、伪刺激组大鼠逃避潜伏期延长,原平台象限游泳时间缩短,原平台象限游泳路程占总路程的百分比减小,SYP蛋白表达水平降低(P<0.05);与抑郁组、伪刺激组比较,rTMS组上述指标均明显改善(P<0.05)。结论:rTMS干预可以改善抑郁模型大鼠的学习记忆功能,其机制可能与rTMS增加大鼠海马CA3区SYP的表达有关。
作者:欧阳华;白冰;赵琳;任慧聪;张朝辉 刊期: 2015年第06期
目的:探讨特发性弱精子症患者精子中TEKT3表达的特点。方法:采用非连续密度梯度离心法分离、纯化正常对照组和弱精子症组精子标本各35份,分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中TEKT3 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,弱精子症组TEKT3 mRNA 和蛋白表达均显著降低(t =9.610、10.090,P<0.001),相关性分析显示弱精子症组精子TEKT3 mRNA和蛋白表达水平与前向运动精子率呈正相关(r=0.684, P=0.001;r=0.483,P=0.013)。结论:TEKT3表达降低可能在特发性弱精子症发病中具有重要作用。
作者:李玉山;陈河涛;杨夕阳;王全先;刘军杰;王琳凯;苏彦华;孙琳 刊期: 2015年第06期
目的:研究不同粒径羟基磷灰石( HA)对人工早期龋的再矿化作用。方法:应用离体人恒前磨牙制备早期釉质龋标本50个,随机分为5组(n=10):阳性对照组(NaF溶液)、阴性对照组(去离子水)、30 nm HA组、60 nm HA组和12μm HA组,用显微硬度计检测标本脱矿前后表面显微硬度,并用扫描电镜观察各组样本脱矿前后的形态;按照分组进行早期龋体外循环实验12 d,同法测定体外循环后各组样本的表面显微硬度,并观察其形态。结果:与阴性对照组相比,各HA组均能提高标本的表面显微硬度,且随着粒径的减小,其表面显微硬度增大( F=86.272,P<0.001)。扫描电镜下观察,30 nm HA组和60 nm HA组的脱矿区有针状或短棒状晶体颗粒沉积,表面变得均匀、平整,且以30 nm HA组的再矿化效果更佳,12μm HA组的再矿化效果不明显。结论:HA能有效促进早期釉质龋的再矿化;纳米级HA优于微米级HA,且随着粒径的减小,其再矿化效果更佳。
作者:刘成霞;申晓青;徐平平 刊期: 2015年第06期
目的:研究枸杞多糖及其硫酸酯体外免疫和抗肿瘤活性。方法:分别采用水提一步醇沉法和分步醇沉法提取不同的多糖LBPS30、LBPS70和LBPSt,纯化后用氯磺酸-吡啶法修饰得到3种硫酸化枸杞多糖sLBPS30、sLB-PS70和sLBPSt。采用MTT法检测多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖和食管癌EC109细胞抑制的影响,ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-2、IFN-γ和IL-24的含量,划痕法检测细胞迁移情况。结果:sLBPSt和 sLBPS30的淋巴细胞增殖率和不同时间点对EC109细胞的抑制率都较高; sLBPSt组细胞上清液中4种淋巴细胞因子含量均显著高于细胞对照组(P<0.05);sLBPSt组细胞迁移数显著低于其余各组(P<0.05)。结论:硫酸化修饰能显著增强体外脾淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞四种细胞因子的分泌,并能抑制EC109细胞生长,降低EC109细胞迁移速率,且与硫酸基含量有一定的关系。 sLBPSt和sLBPS30总体效果较好。
作者:王君敏;薛敬礼;葛蓓蕾;庄玉伟;杜春燕;薛昆 刊期: 2015年第06期
目的:建立黄曲霉菌感染小鼠角膜动物模型,并观察病变后不同时期角膜组织病理学变化。方法:用培养接种棒对40只C57 BL/6小鼠进行仿真临床角膜划痕导致真菌感染。在第1、3、5、7和14天行裂隙灯显微镜检查评分,随后处死小鼠制作角膜铺片,免疫荧光染色后进行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果:术后第1、3和5天,接种眼临床评分升高迅速,在第5天达到峰值,随后第7和14天临床评分逐渐降低;术后第1天接种眼角膜缘组织已有中性粒细胞浸润、角膜巩膜缘血管扩张充血等明显急性炎症变化,第3天角膜巩膜缘出现新生血管芽,中性粒细胞向角膜中央溃疡灶浸润、聚集,第5天中性粒细胞浸润进一步加重,见侵入角膜基质层放射状生长的新生血管,第7天中性粒细胞浸润仍较严重,新生血管向角膜中央溃疡灶生长明显,管腔增粗,第14天中性粒细胞明显减少,新生血管萎缩、减少。结论:成功建立黄曲霉菌角膜炎小鼠动物模型;感染第5天可能是角膜炎症过程中的关键时间窗。
作者:张伟宏;蒋莉莉;汪晓凯;赵秋民;杨东斌;黄贯峰;张焕云;杨阳;梁芳;韩雷;吴细丕 刊期: 2015年第06期
目的:建立RP-HPLC法测定生物转化液中利斯的明中间体含量及ee值的方法。方法:以Lux 3u Cellu-lose-1为手性分离柱,以正己烷砄异丙醇(V砄V=92.5砄7.5)为流动相,检测波长217 nm,进样量20μL。结果:中间体能够完全分离,在测定中间体含量的同时能够测定样品的ee值。结论:该方法准确、灵敏、精密度良好,适合生物转化液中利斯的明中间体含量及ee值的测定。
作者:李永红;周方方;付路平;刘宏民 刊期: 2015年第06期
目的:探讨对反复种植失败( RIF)患者进行人工干预后,着床窗口期子宫内膜组织中溶血磷脂酸受体3(LPAR3)和同源框基因11(HOXA-11)表达变化对临床结局的影响。方法:将92例因输卵管因素不孕的RIF患者分为搔刮组(子宫内膜搔刮,n=31)、中成药组(调经促孕丸,n=31)、未干预组(n=30)。采用RT-PCR和Western blot方法检测3组患者窗口期子宫内膜组织中LPAR3和HOXA-11 mRNA和蛋白表达的情况,并观察3组患者临床妊娠率的差异。结果:搔刮组、中成药组患者窗口期子宫内膜组织中LPAR3和HOXA-11 mRNA及蛋白表达量高于未干预组,差异有统计学意义(F=57.463和60.771,P<0.001;F=48.816和40.313,P<0.001),而前两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。搔刮组、中成药组复苏周期临床妊娠率分别是48.4%和32.3%,均高于未干预组(16.7%),差异有统计学意义(χ2=6.908,P=0.032),但前两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子宫内膜搔刮术和口服调经促孕丸2种干预措施均可以改善子宫内膜容受性,提高RIF患者的临床妊娠率。
作者:赵华;王兴玲;李丽;李豫峰 刊期: 2015年第06期
脊髓小脑共济失调( spinocerebellar ataxia ,SCA)是一组具有临床和遗传异质性的神经系统遗传疾病[1-2],多呈常染色体显性遗传,主要表现为慢性进行性加重的肢体共济失调、构音障碍及眼球运动障碍,影像学研究[1-4]表明病变主要累及大脑、小脑、脑干及脊髓。目前报道[1,5-6]的SCA亚型多达40种,其发病年龄及临床症状多数相互重叠,因此仅仅依据临床表型特征及影像学评估对患者诊断分型较为困难,而基因检测则有助于明确诊断。该研究主要对临床诊断为SCA的一家系9例患者及有血缘关系、临床表现正常的27例家系成员进行基因检测,以确定基因型,同时对患者的临床特点进行总结分析,为临床诊断提供相关资料。
作者:夏明荣;黄月;张杰文;李书剑 刊期: 2015年第06期
目的:探讨河南省青少年吸烟行为的影响因素,为有针对性地预防和控制青少年吸烟提供科学依据。方法:采用多阶段分层整群随机抽样方法,全省抽取16个调查点48所初中共7789名学生进行问卷调查。结果:河南省青少年尝试吸烟率和现在吸烟率分别为20.87%和5.87%。单因素分析结果显示青少年的尝试吸烟率和现在吸烟率均为男生高于女生,且随着年龄的增长,每周零花钱的增多,烟草广告暴露程度、父母吸烟和好朋友吸烟比例、看到老师吸烟频率的增高而增高(P<0.001)。多因素logistic回归分析显示青少年尝试吸烟和现在吸烟行为的危险因素均包括男生、每周零花钱21~元组和>40元组、好朋友吸烟、看到老师在学校吸烟及认为在社交场合吸烟使人更舒服,好朋友吸烟是重要的影响因素;保护因素包括认为吸烟能使年轻人减少吸引力及在社交场合吸烟使人更不舒服[OR(95%CI)=0.762(0.651~0.900)、0.661(0.552~0.798)和0.710(0.527~0.953)、0.421(0.321~0.560)]。结论:青少年吸烟受多方面因素的影响,好朋友吸烟是重要的影响因素,在开展青少年吸烟防控工作时尤其应注重同伴控烟教育。
作者:孙盼盼;王卫峰;周刚;李建彬 刊期: 2015年第06期
目的:研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法:组织学水平研究中,配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本;细胞学水平研究中,选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系hFOB1.19;采用免疫组化法检测组织学水平Notch1及HES1蛋白的表达,采用Western blot及Real-time PCR法检测组织学及细胞学水平Notch1、HES1蛋白及mRNA的表达。用Notch1-siRNA沉默U2OS细胞中Notch1基因后,应用Western blot及Real-time PCR法检测U2OS细胞中Notch1及HES1的表达,Transwell法检测U2OS侵袭能力的变化。结果:相比于正常组织,骨肉瘤组织中Notch1、HES1 mRNA和蛋白呈高表达(t配对=22.567,14.830和8.439,7.100,P<0.001)。 U2OS细胞中Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达强于hFOB1.19细胞(t=11.053,20.482和28.845,34.681,P<0.001)。沉默Notch1基因后,U2OS细胞Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达下降(t=6.294,9.209和9.151,13.953,P<0.05),侵袭能力下降(t=71.387,P<0.001)。结论:Notch1和HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达,沉默Notch1基因可降低U2OS细胞侵袭能力。
作者:王勇;赵伟;马骥 刊期: 2015年第06期
目的:构建长QT综合征( LQTS )2型hERG 基因G604 S突变的真核表达载体G604 S-hERG-pcDNA3、G604S-hERG-pEGFP。方法:采用重叠延伸PCR 法在pEGM-hERG基础上构建G604S突变体PGEM-hERG-G604S,通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pcDNA3和pEGFP-C2中并测序验证,用脂质体转染法将G604 S-hERG-pEGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果:构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证hERG基因1810位点碱基G突变为A,构建的G604 S-hERG-pEGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论:成功构建hERG基因G604 S h-ERG-pcDNA3和G604 S-hERG-pEGFP表达载体。
作者:韩稳琦;霍建华;李国良;蒋永荣;武金娥;孙超峰 刊期: 2015年第06期
目的:获取结核分枝杆菌mpt59和esxA基因编码的原核表达融合蛋白,并将该蛋白初步用于结核患者的快速诊断。方法:PCR扩增含有柔性链接肽段的esxA核苷酸序列,并将其连接至原核表达载体pET28a上,再将mpt59连接至pET28a-esxA上。该融合蛋白在大肠杆菌BL21中原核表达后,用镍珠子进行亲和纯化。采用垂直电泳和免疫印迹分析重组蛋白,并用于结核患者的诊断。结果:成功构建了原核表达载体pET28a-esxA-mpt59,转化大肠杆菌BL21后经诱导产生了高水平的表达产物。用该纯化蛋白进行ELISA检测,结果表明其诊断结核的灵敏度为97.8%,特异度为100%。结论:构建了含mpt59和esxA融合抗原基因的原核表达载体,并诱导表达了融合蛋白,为进一步研究结核分枝杆菌疫苗或诊断试剂奠定了基础。
作者:石洁;朱岩昆;郑丹薇;马晓光;王少华;李辉;邢进;吴彩霞 刊期: 2015年第06期
目的:探讨睾酮受体( AR)蛋白表达水平的改变对高血压大鼠血管重构( VR)的影响及其信号转导机制。方法:将30只大鼠随机分为对照组、假手术组、高血压组3组(每组10只)。采用“两肾一夹”法制备肾血管性高血压大鼠模型。 HE染色观察主动脉组织形态结构,免疫组化法检测3组大鼠主动脉组织中AR、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表达水平。结果:与对照组相比,假手术组主动脉形态结构基本正常,AR、MKP-1蛋白表达水平无显著改变(P>0.05);与对照组及假手术组相比,AR和MKP-1蛋白表达水平下降(P<0.001);且在高血压组AR与MKP-1蛋白的表达呈正相关(r=0.657,P=0.039),在对照组及假手术组无关(r=0.589和0.436, P>0.05)。结论:高血压VR过程中存在AR及MKP-1蛋白表达水平的改变。
作者:于超男;王颖;燕树勋;杨国杰;张彦周;杨晓村;李渊;孙丽娜 刊期: 2015年第06期
目的:探讨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin )通路对大鼠脑出血的保护作用机制。方法:96只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑出血组、脑出血假干预组、siDkk-1干预组4组,采用Real-time PCR方法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中Wnt-1和糖原合成酶激酶3β( GSK-3β) mRNA表达的变化,采用Western blot法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中β-catenin表达的变化,各组大鼠处死前均进行行为学检测。结果:大鼠脑出血后24和72 h,Wnt-1 mRNA水平与假手术组相比均降低,经siDkk-1干预后,Wnt-1 mRNA水平较脑出血假干预组升高(F=9.040和26.400, P均<0.05)。大鼠脑出血后24和72 h,GSK-3βmRNA 水平与假手术组相比均升高,经siDkk-1干预后,GSK-3βmRNA水平较脑出血假干预组下降(F=41.100和17.800, P均<0.001)。大鼠脑出血后24和72 h,β-catenin蛋白的表达较假手术组均升高,经siDkk-1干预后,其表达较脑出血假干预组进一步升高( F=15.100和14.000, P均<0.05)。大鼠脑出血后24和72 h,刺激触须前肢上抬比例较假手术组降低,经siDkk-1干预后,前肢上抬比例较脑出血假干预组升高(F=2450.000和2230.000,P均<0.001)。结论:Wnt/β-catenin通路对脑出血大鼠有保护作用,可能是通过活化Wnt-1、抑制GSK-3β,进而导致β-catenin 在胞浆中聚集、移位入核后启动Wnt下游靶基因的转录所致。
作者:李治华;陈曦;臧卫东;郭付有 刊期: 2015年第06期
目的:通过RNA干扰抑制食管癌细胞Eca-109 survivin基因的表达,观察survivin基因沉默对Eca -109细胞增殖与凋亡的影响。方法:构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染Eca -109细胞(干扰组),同时设转染无关干扰质粒的Eca-109细胞为阴性对照,未转染细胞为空白对照。采用Western blot 检测sur-vivin基因沉默效果,MTT、平板克隆形成实验及流式细胞术分析干扰前后Eca-109细胞增殖与凋亡的变化。结果:与两对照组相比,干扰组Survivin蛋白的表达降低(F=79.397,P<0.001);MTT检测结果显示,干扰组抑制细胞增殖效果优于两对照组,而平板克隆形成实验显示干扰组克隆形成率低于两对照组(F=1620.26, P<0.001);流式细胞术分析显示,干扰组凋亡指数高于两对照组(F=2284.205,P<0.001)。结论:RNA干扰可特异性沉默survivin基因的表达,抑制Eca-109细胞的增殖,诱导细胞凋亡。
作者:牛朝霞;李宁宁;陈洁;李宜培;彭蕤蕤;秦紫芳 刊期: 2015年第06期
目的:探讨血清肿瘤标志物检测结合决策树模型在肝癌诊断中的价值。方法:运用肿瘤标志物定量检测试剂盒对119例肝部良性疾病及98例肝癌患者血清中9项肿瘤标志[甲胎蛋白( AFP)、癌胚抗原( CEA)、CA125、CA242、CA199、神经元特异性烯醇化酶( NSE)、铁蛋白( Ferritin)、人生长激素( HGH)和CA153]水平进行检测,应用logistic回归筛选肿瘤标志物,并于筛选前后建立决策树模型和Fisher判别分析模型。结果:肝癌组9项血清肿瘤标志物水平均高于肝良性疾病组(P<0.05)。筛选前基于9项肿瘤标志物、筛选后基于3项肿瘤标志物分别建立Fisher判别分析模型、决策树模型,其预测准确度分别为76.5%、91.2%、74.4%、90.8%。筛选前后决策树模型ROC曲线的AUC分别为0.912和0.908,高于Fisher判别分析的0.745和0.727(Z=4.512和4.589,P均<0.05);但决策树模型和Fisher判别分析筛选前后自身相比,差异均无统计学意义(Z=1.855和1.122,P均>0.05)。结论:基于3项血清肿瘤标志物建立的决策树模型诊断肝癌的效果优于 Fisher 判别分析。
作者:张永;李晓勇;宋瑜;周百中;崔卫东;赵甦;陈艳军;杨战锋;郜宇;杨华 刊期: 2015年第06期
目的:探讨CK19、Galectin-3及CD56在良恶性卵巢甲状腺肿鉴别诊断中的应用价值。方法:采用免疫组化法检测6例卵巢甲状腺癌和10例卵巢甲状腺肿组织中CK19、Galectin-3及CD56蛋白表达情况。结果:卵巢甲状腺癌组织中CK19、Galectin-3蛋白的表达高于卵巢甲状腺肿组织(t=4.807,3.835,P均<0.05),CD56蛋白的表达低于卵巢甲状腺肿组织(t=3.105,P均<0.05)。分别利用CK19、Galectin-3及CD56蛋白表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积(AUC)分别为0.983、0.933和0.867;以其中1个指标恶性即判定为恶性,则3者联合检测对良恶性卵巢甲状腺肿鉴别诊断的灵敏度可达100%。结论:CK19、Galectin-3及CD56对卵巢甲状腺肿良恶性的鉴别有很好的应用价值。
作者:邵世清;杨少琴;黄贵;田君;张红霞;王社莲 刊期: 2015年第06期
目的:探讨子宫内膜腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1( IGFBP-rP1)基因的甲基化状态及其与IGFBP-rP1 mRNA、蛋白表达之间的关系。方法:采用甲基化特异性PCR检测45例子宫内膜腺癌、30例子宫内膜单纯性增生和30例子宫内膜不典型增生组织中IGFBP-rP1基因启动子区和第一外显子区CpG岛的甲基化状态;采用实时荧光定量PCR和免疫组化SP法分别检测上述3种组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达。结果:子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率高于其在第一外显子区的甲基化率(χ2=6.429,P=0.011)。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因在启动子区的甲基化率低于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织(F=14.659,P=0.001)。子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1 mRNA和蛋白的表达均高于子宫内膜不典型增生组织和单纯性增生组织(F=8.619、χ2=23.611,P均<0.05);在启动子区发生IGFBP-rP1基因甲基化的子宫内膜腺癌组织中,其mRNA的表达水平低于未甲基化组(t=4.758,P=0.001),其蛋白的表达与甲基化状态呈负关联(rP =-0.625,P<0.001)。结论:子宫内膜腺癌组织中IGFBP-rP1基因甲基化主要发生在启动子区,且呈低甲基化状态;IGFBP-rP1启动子区的低甲基化状态可能是IGFBP-rP1基因在子宫内膜腺癌组织中高表达的调控机制之一。
作者:郭瑞霞;范丽君;李艳敏 刊期: 2015年第06期