于超男；王颖；燕树勋；杨国杰；张彦周；杨晓村；李渊；孙丽娜
目的：探讨Wnt／β-连环蛋白（β-catenin ）通路对大鼠脑出血的保护作用机制。方法：96只成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑出血组、脑出血假干预组、siDkk-1干预组4组，采用Real-time PCR方法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中Wnt-1和糖原合成酶激酶3β（ GSK-3β） mRNA表达的变化，采用Western blot法检测各组大鼠脑出血后24、72 h脑组织中β-catenin表达的变化，各组大鼠处死前均进行行为学检测。结果：大鼠脑出血后24和72 h，Wnt-1 mRNA水平与假手术组相比均降低，经siDkk-1干预后，Wnt-1 mRNA水平较脑出血假干预组升高（F＝9．040和26．400， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，GSK-3βmRNA 水平与假手术组相比均升高，经siDkk-1干预后，GSK-3βmRNA水平较脑出血假干预组下降（F＝41．100和17．800， P均＜0．001）。大鼠脑出血后24和72 h，β-catenin蛋白的表达较假手术组均升高，经siDkk-1干预后，其表达较脑出血假干预组进一步升高（ F＝15．100和14．000， P均＜0．05）。大鼠脑出血后24和72 h，刺激触须前肢上抬比例较假手术组降低，经siDkk-1干预后，前肢上抬比例较脑出血假干预组升高（F＝2450．000和2230．000，P均＜0．001）。结论：Wnt／β-catenin通路对脑出血大鼠有保护作用，可能是通过活化Wnt-1、抑制GSK-3β，进而导致β-catenin 在胞浆中聚集、移位入核后启动Wnt下游靶基因的转录所致。
作者：李治华；陈曦；臧卫东；郭付有 刊期： 2015年第06期
目的：探讨PPARγ上调对PCOS患者卵巢颗粒细胞P450 arom mRNA表达的调控作用及对T转化效应的影响。方法：提取10例雄激素正常的PCOS 患者（ NA-PCOS组）、10例伴高雄激素血症的PCOS患者（ HA-PCOS组）及10例仅因输卵管因素不孕患者（对照组）的卵巢颗粒细胞，分别给予0、1、10 nmol／L的PPARγ激动剂罗格列酮培养48 h后，采用RT-PCR测定PPARγ、P450 arom mRNA的表达，采用 ELISA法测定培养液中E2值，计算T转化率。结果：PPARγ上调后，3组患者P450arom mRNA 的表达均降低，T转化率下降，尤其是HA-PCOS 组（P＜0．05）。 PPARγ上调（10 nmol／L罗格列酮处理）后，HA-PCOS组卵巢颗粒细胞中PPARγmRNA的表达水平和T转化率负相关，P450arom mRNA的表达水平和T转化率正相关（r＝－0．633、0．829，P＜0．05）。结论：PPARγ可能通过抑制P450 arom参与PCOS高雄激素血症的发生。
作者：王碧君；郭艺红；张慧红；李婧；杨新红 刊期： 2015年第06期
目的：研究不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的作用及对NF-κB通路的影响。方法：240只BALB／c小鼠随机分为方剂A组、方剂B组、模型组和空白组，每组60只。前3组采用柯萨奇B3m病毒制作实验室病毒性扩张型心肌病模型，方剂A组、方剂B组小鼠造模后分别以方剂A和方剂B灌胃治疗，模型组和空白组小鼠均灌注等量的纯水，1次／d，连续5周。比较各组小鼠的心脏质量指数。运用HE和VG染色法观察各组小鼠心肌细胞的病理学改变。采用TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡情况。采取RT-PCR法和免疫组化法检测各组小鼠心肌细胞NF-κB mRNA和蛋白的表达情况。结果：方剂A组、方剂B组和模型组小鼠心脏质量指数、心肌胶原容积分数、凋亡心肌细胞数及NF-κB mRNA和蛋白的表达均高于空白组（P＜0．05）；方剂A组和方剂B组小鼠的上述5个指标均低于模型组（P＜0．05）；方剂A组上述5个指标均低于方剂B组（P＜0．05）。结论：不同活血化瘀方对扩张型心肌病小鼠心肌细胞的改善作用和对NF-κB通路的影响有差异。
作者：王鸣瑞；韩明向 刊期： 2015年第06期
目的：对豫医卷毛大鼠的Krt71基因进行比较生物学分析。方法：采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Krt71的cDNA序列进行克隆、测序，并与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的Krt71 cDNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果：获得了豫医卷毛大鼠Krt71基因全长1573 bp的cDNA序列（ GenBank登录号：KF303588）。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的同源性分别为99．9％、95．2％、88．5％、87．5％、88．0％、88．1％、88．1％，氨基酸序列的同源性分别为99．9％、98．9％、92．4％、91．2％、91．4％、92．3％、92．1％。结论：Krt71基因在哺乳动物进化过程中具有较高的保守性，是一个具有重要功能的“持家基因”。
作者：张明昊；章金涛 刊期： 2015年第06期
目的：研究枸杞多糖及其硫酸酯体外免疫和抗肿瘤活性。方法：分别采用水提一步醇沉法和分步醇沉法提取不同的多糖LBPS30、LBPS70和LBPSt，纯化后用氯磺酸-吡啶法修饰得到3种硫酸化枸杞多糖sLBPS30、sLB-PS70和sLBPSt。采用MTT法检测多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖和食管癌EC109细胞抑制的影响，ELISA法检测细胞上清液中TNF-α、IL-2、IFN-γ和IL-24的含量，划痕法检测细胞迁移情况。结果：sLBPSt和 sLBPS30的淋巴细胞增殖率和不同时间点对EC109细胞的抑制率都较高； sLBPSt组细胞上清液中4种淋巴细胞因子含量均显著高于细胞对照组（P＜0．05）；sLBPSt组细胞迁移数显著低于其余各组（P＜0．05）。结论：硫酸化修饰能显著增强体外脾淋巴细胞增殖，促进淋巴细胞四种细胞因子的分泌，并能抑制EC109细胞生长，降低EC109细胞迁移速率，且与硫酸基含量有一定的关系。 sLBPSt和sLBPS30总体效果较好。
作者：王君敏；薛敬礼；葛蓓蕾；庄玉伟；杜春燕；薛昆 刊期： 2015年第06期
目的：研究不同粒径羟基磷灰石（ HA）对人工早期龋的再矿化作用。方法：应用离体人恒前磨牙制备早期釉质龋标本50个，随机分为5组（n＝10）：阳性对照组（NaF溶液）、阴性对照组（去离子水）、30 nm HA组、60 nm HA组和12μm HA组，用显微硬度计检测标本脱矿前后表面显微硬度，并用扫描电镜观察各组样本脱矿前后的形态；按照分组进行早期龋体外循环实验12 d，同法测定体外循环后各组样本的表面显微硬度，并观察其形态。结果：与阴性对照组相比，各HA组均能提高标本的表面显微硬度，且随着粒径的减小，其表面显微硬度增大（ F＝86．272，P＜0．001）。扫描电镜下观察，30 nm HA组和60 nm HA组的脱矿区有针状或短棒状晶体颗粒沉积，表面变得均匀、平整，且以30 nm HA组的再矿化效果更佳，12μm HA组的再矿化效果不明显。结论：HA能有效促进早期釉质龋的再矿化；纳米级HA优于微米级HA，且随着粒径的减小，其再矿化效果更佳。
作者：刘成霞；申晓青；徐平平 刊期： 2015年第06期
目的：探索脑动静脉畸形（CAVM）与脑血管内皮生长因子（VEGF）之间的关系。方法：对30例CAVM病变血管及病变周围血管组织标本行HE染色，观察血管的组织学改变。采用免疫组化法和Western blot法检测血管中VEGF蛋白的表达，采用荧光定量PCR法检测血管中VEGF mRNA的表达。以32例正常脑组织血管标本作对照。结果：CAVM病变血管和病变周围血管较正常脑血管发生明显改变。荧光定量PCR和Western blot 检测结果显示，CAVM病变血管和病变周围血管组织中VEGF mRNA和蛋白表达水平均高于正常脑血管（P均＜0．05）， CAVM病变血管中VEGF mRNA和蛋白表达水平高于病变周围血管（t配对＝19．095，3．216，P＜0．05）。结论：VEGF可能对CAVM的发生和发展起着重要作用。
作者：田甜；孙雅菲；于淼；张继伟；呼铁民；王维兴；王广 刊期： 2015年第06期
目的：构建长QT综合征（ LQTS ）2型hERG 基因G604 S突变的真核表达载体G604 S-hERG-pcDNA3、G604S-hERG-pEGFP。方法：采用重叠延伸PCR 法在pEGM-hERG基础上构建G604S突变体PGEM-hERG-G604S，通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pcDNA3和pEGFP-C2中并测序验证，用脂质体转染法将G604 S-hERG-pEGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果：构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证hERG基因1810位点碱基G突变为A，构建的G604 S-hERG-pEGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论：成功构建hERG基因G604 S h-ERG-pcDNA3和G604 S-hERG-pEGFP表达载体。
作者：韩稳琦；霍建华；李国良；蒋永荣；武金娥；孙超峰 刊期： 2015年第06期
目的：探讨睾酮受体（ AR）蛋白表达水平的改变对高血压大鼠血管重构（ VR）的影响及其信号转导机制。方法：将30只大鼠随机分为对照组、假手术组、高血压组3组（每组10只）。采用“两肾一夹”法制备肾血管性高血压大鼠模型。 HE染色观察主动脉组织形态结构，免疫组化法检测3组大鼠主动脉组织中AR、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）蛋白表达水平。结果：与对照组相比，假手术组主动脉形态结构基本正常，AR、MKP-1蛋白表达水平无显著改变（P＞0．05）；与对照组及假手术组相比，AR和MKP-1蛋白表达水平下降（P＜0．001）；且在高血压组AR与MKP-1蛋白的表达呈正相关（r＝0．657，P＝0．039），在对照组及假手术组无关（r＝0．589和0．436， P＞0．05）。结论：高血压VR过程中存在AR及MKP-1蛋白表达水平的改变。
作者：于超男；王颖；燕树勋；杨国杰；张彦周；杨晓村；李渊；孙丽娜 刊期： 2015年第06期
目的：探讨口腔扁平苔藓（OLP）患者情绪障碍与唾液皮质醇和脱氢表雄酮（DHEA）水平的相关性。方法：采用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评定非糜烂型OLP组（40例）、糜烂型OLP组（31例）和对照组（31例）的焦虑、抑郁状况，并在早晨采集唾液，通过放射免疫法对受试者的唾液皮质醇和DHEA水平进行测定，分析量表得分与唾液皮质醇和DHEA水平的相关性。结果：3组受试者的HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平差异均有统计学意义（F＝15．892、4．876和14．375，P＜0．05），糜烂型OLP组HAMA得分、HAMD得分、唾液皮质醇水平均高于对照组和非糜烂型OLP组（P＜0．05）。糜烂型OLP组唾液皮质醇水平与HAMA得分和HAMD得分（r＝0．965、0．923，P ＜0．001）呈正相关，而唾液 DHEA 水平与 HAMA 得分和 HAMD 得分（r ＝－0．948、－0．966，P＜0．001）呈负相关。非糜烂型 OLP组唾液皮质醇水平与 HAMA 得分和HAMD 得分（r ＝0．963、0．957，P＜0．001）呈正相关，而唾液DHEA水平与HAMA得分和HAMD得分（ r＝－0．962、－0．971，P＜0．001）呈负相关。结论：糜烂型OLP的发生、发展与焦虑、抑郁等情绪障碍有关，其作用机制可能是通过应激反应导致糜烂型OLP患者的唾液皮质醇水平升高，但是否与唾液DHEA水平的降低相关还有待进一步的研究。
作者：莫珩；高承志；王少杰；曲姗 刊期： 2015年第06期
目的：探讨河南省青少年吸烟行为的影响因素，为有针对性地预防和控制青少年吸烟提供科学依据。方法：采用多阶段分层整群随机抽样方法，全省抽取16个调查点48所初中共7789名学生进行问卷调查。结果：河南省青少年尝试吸烟率和现在吸烟率分别为20．87％和5．87％。单因素分析结果显示青少年的尝试吸烟率和现在吸烟率均为男生高于女生，且随着年龄的增长，每周零花钱的增多，烟草广告暴露程度、父母吸烟和好朋友吸烟比例、看到老师吸烟频率的增高而增高（P＜0．001）。多因素logistic回归分析显示青少年尝试吸烟和现在吸烟行为的危险因素均包括男生、每周零花钱21～元组和＞40元组、好朋友吸烟、看到老师在学校吸烟及认为在社交场合吸烟使人更舒服，好朋友吸烟是重要的影响因素；保护因素包括认为吸烟能使年轻人减少吸引力及在社交场合吸烟使人更不舒服[OR（95％CI）＝0．762（0．651～0．900）、0．661（0．552～0．798）和0．710（0．527～0．953）、0．421（0．321～0．560）]。结论：青少年吸烟受多方面因素的影响，好朋友吸烟是重要的影响因素，在开展青少年吸烟防控工作时尤其应注重同伴控烟教育。
作者：孙盼盼；王卫峰；周刚；李建彬 刊期： 2015年第06期
促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）是由肾脏分泌的一种活性糖蛋白，作用于骨髓中红系造血祖细胞，能促进其增殖、分化。1977年从再生障碍性贫血患者的尿液中分离提纯得到EPO后［1］，人们第一次能够用重组人EPO治疗慢性肾脏病贫血和化疗导致的非髓性恶性肿瘤相关的贫血。近年来研究［2-3］发现其不仅具有促进骨髓造血作用，还有一系列非造血作用，如抗炎、抗凋亡、抗氧化应激等。作者针对EPO研究的新进展及其在临床的应用综述如下。
作者：文建国；冯锦锦 刊期： 2015年第06期
目的：制备人微管蛋白抗体，并用其观察大鼠死亡后肾脏组织中微管蛋白的降解规律与死亡时间的关系。方法：通过分子生物学方法制备小鼠抗人微管蛋白多克隆抗体。取48只大鼠，分为断颈致死组和溺死组，每组24只，采用Western blot观察死亡后24、48、72和96 h大鼠肾脏组织中微管蛋白的降解规律。结果：制备的小鼠抗人微管蛋白多克隆抗体效价超过1砄8000；2组大鼠死亡后，肾脏组织中微管蛋白均呈逐步降解的趋势；断颈致死组大鼠死后96 h肾脏组织检测不到微管蛋白；溺死组大鼠死后72 h肾脏组织检测不到微管蛋白。结论：大鼠死亡后，肾脏组织中微管蛋白呈逐步降解的趋势；溺死和断颈大鼠死亡后肾脏组织中微管蛋白的降解速度存在差异。
作者：齐麟；李伟 刊期： 2015年第06期
目的：通过RNA干扰抑制食管癌细胞Eca-109 survivin基因的表达，观察survivin基因沉默对Eca -109细胞增殖与凋亡的影响。方法：构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染Eca -109细胞（干扰组），同时设转染无关干扰质粒的Eca-109细胞为阴性对照，未转染细胞为空白对照。采用Western blot 检测sur-vivin基因沉默效果，MTT、平板克隆形成实验及流式细胞术分析干扰前后Eca-109细胞增殖与凋亡的变化。结果：与两对照组相比，干扰组Survivin蛋白的表达降低（F＝79．397，P＜0．001）；MTT检测结果显示，干扰组抑制细胞增殖效果优于两对照组，而平板克隆形成实验显示干扰组克隆形成率低于两对照组（F＝1620．26， P＜0．001）；流式细胞术分析显示，干扰组凋亡指数高于两对照组（F＝2284．205，P＜0．001）。结论：RNA干扰可特异性沉默survivin基因的表达，抑制Eca-109细胞的增殖，诱导细胞凋亡。
作者：牛朝霞；李宁宁；陈洁；李宜培；彭蕤蕤；秦紫芳 刊期： 2015年第06期
嗜铬细胞瘤来源于肾上腺髓质及交感神经系统的嗜铬组织，肾上腺嗜铬细胞瘤约占90％，另10％为肾上腺外的嗜铬细胞瘤［1-3］。肾上腺外嗜铬细胞瘤主要位于腹部，多在腹主动脉旁，其他少见部位为肾门、肝门区、肝及下腔静脉之间、近胰头部位、髂窝或近髂窝血管处，腹外甚少见，心脏内者更是罕见。现将2013年11月郑州大学第一附属医院心血管外科收治的1例右心房嗜铬细胞瘤报道如下。
作者：李杰；唐丽；魏廷举；张新 刊期： 2015年第06期
目的：探讨特发性弱精子症患者精子中TEKT3表达的特点。方法：采用非连续密度梯度离心法分离、纯化正常对照组和弱精子症组精子标本各35份，分别采用RT-PCR和Western blot检测精子中TEKT3 mRNA和蛋白的表达。结果：与正常对照组比较，弱精子症组TEKT3 mRNA 和蛋白表达均显著降低（t ＝9．610、10．090，P＜0．001），相关性分析显示弱精子症组精子TEKT3 mRNA和蛋白表达水平与前向运动精子率呈正相关（r＝0．684， P＝0．001；r＝0．483，P＝0．013）。结论：TEKT3表达降低可能在特发性弱精子症发病中具有重要作用。
作者：李玉山；陈河涛；杨夕阳；王全先；刘军杰；王琳凯；苏彦华；孙琳 刊期： 2015年第06期
目的：探讨中国阿尔茨海默病（ AD）患者血清促甲状腺激素（ TSH ）水平的变化。方法：利用计算机及手工检索，全面检索AD患者血清TSH变化的病例对照研究，采用Stata 12．0进行meta分析。结果：共有16篇文献纳入分析，获得样本1760例，其中病例组918例，对照组842例。 Meta分析结果显示，AD患者血清TSH水平低于对照组（Z＝1．987，P＝0．046）；失安全系数Nfs0．05为895；平均年龄为异质性因素，进一步对病例组平均年龄进行亚组分析，发现随着年龄增高，病例组和对照组之间的TSH水平差异更为明显（Z＝2．110，P＝0．003），采用随机效应模型合并分析的结果可靠。结论：中国AD患者TSH水平低于正常人群，低水平的血清TSH可能与AD发生、发展有关。
作者：张亚峰；孙桂香；王炳花 刊期： 2015年第06期
目的：探讨血清肿瘤标志物检测结合决策树模型在肝癌诊断中的价值。方法：运用肿瘤标志物定量检测试剂盒对119例肝部良性疾病及98例肝癌患者血清中9项肿瘤标志[甲胎蛋白（ AFP）、癌胚抗原（ CEA）、CA125、CA242、CA199、神经元特异性烯醇化酶（ NSE）、铁蛋白（ Ferritin）、人生长激素（ HGH）和CA153]水平进行检测，应用logistic回归筛选肿瘤标志物，并于筛选前后建立决策树模型和Fisher判别分析模型。结果：肝癌组9项血清肿瘤标志物水平均高于肝良性疾病组（P＜0．05）。筛选前基于9项肿瘤标志物、筛选后基于3项肿瘤标志物分别建立Fisher判别分析模型、决策树模型，其预测准确度分别为76．5％、91．2％、74．4％、90．8％。筛选前后决策树模型ROC曲线的AUC分别为0．912和0．908，高于Fisher判别分析的0．745和0．727（Z＝4．512和4．589，P均＜0．05）；但决策树模型和Fisher判别分析筛选前后自身相比，差异均无统计学意义（Z＝1．855和1．122，P均＞0．05）。结论：基于3项血清肿瘤标志物建立的决策树模型诊断肝癌的效果优于 Fisher 判别分析。
作者：张永；李晓勇；宋瑜；周百中；崔卫东；赵甦；陈艳军；杨战锋；郜宇；杨华 刊期： 2015年第06期
目的：探讨线粒体转录因子A（ TFAM）基因多态性与精神分裂症的关系。方法：采用PCR-RFLP及DNA序列分析技术分别对237例精神分裂症患者及246例健康对照TFAM基因rs10826178、rs4390300两多态位点进行检测及分析。结果：rs10826178与rs4390300位点等位基因与基因型频率分布在两组之间比较，差异无统计学意义（P均＞0．05）。结论：TFAM基因rs4390300、rs10826178的基因型差异可能与精神分裂症的发病无关。
作者：孙逸杰；景戈翰；杨菁；何书平；仝冬晓；王丽雯；司沛茹；金璐；程晓丽 刊期： 2015年第06期
目的：观察重复经颅磁刺激（rTMS）对抑郁大鼠学习记忆功能及海马CA3区突触素（SYP）表达的影响。方法：SD雄性大鼠40只，随机分为对照组、抑郁组、rTMS组和伪刺激组，每组10只，后3组采用为期21 d的孤养结合慢性不可预见轻度应激制备抑郁模型。造模成功后，rTMS组给予3个疗程15 Hz的rTMS治疗；伪刺激组只施予同样次数的声音刺激而无电流脉冲。采用Morris水迷宫的定位航行实验及空间探索实验评定大鼠学习记忆功能。应用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA3区SYP蛋白的表达情况。结果：4组大鼠逃避潜伏期、原平台象限游泳时间及原平台象限游泳路程占总路程的百分比及海马CA3区SYP蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（ F＝39．608、646．088、198．940、388．673，P＜0．001）。与对照组比较，抑郁组、伪刺激组大鼠逃避潜伏期延长，原平台象限游泳时间缩短，原平台象限游泳路程占总路程的百分比减小，SYP蛋白表达水平降低（P＜0．05）；与抑郁组、伪刺激组比较，rTMS组上述指标均明显改善（P＜0．05）。结论：rTMS干预可以改善抑郁模型大鼠的学习记忆功能，其机制可能与rTMS增加大鼠海马CA3区SYP的表达有关。
作者：欧阳华；白冰；赵琳；任慧聪；张朝辉 刊期： 2015年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
