酵素-Ⅱ分离人神经干细胞球

孙剑瑞；杨波；杜英；宋来君；李国喜；张清勇；胡祥；胡平生；徐虹；王云龙

关键词：神经干细胞, 酵素-Ⅱ, 人

摘要：目的:寻找一种有效分离神经干细胞球并获得大量单个神经干细胞的方法.方法:取20周胎龄人胚胎脑组织分离单细胞,应用DMEM/F12培养基培养形成神经干细胞球,取神经干细胞球,分别以2.50 g/L、1.25 g/L胰蛋白酶及0.6 u/ml、1.2 u/ml、1.8 u/ml、2.4 u/ml酵素-Ⅱ(DispaseⅡ)消化,观察消化过程及细胞形态,对消化后的单个细胞进行培养,观察细胞生长情况,并进行免疫细胞化学染色鉴定.结果:各浓度DispaseⅡ均能较完全地消化神经干细胞球,其中1.2 u/ml、1.8 u/ml DispaseⅡ消化后的细胞生长状况佳.胰蛋白酶消化后细胞有较大的损伤,成活细胞少.消化后的细胞Nestin抗体染色结果(+),证实为神经干细胞.结论:一定浓度的DispaseⅡ消化神经干细胞球后,可获得大量成活单个神经干细胞.

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腹腔镜下子宫肌瘤挖除术98例护理体会

腹腔镜手术是近几年开展的微创手术,具有损伤小、术中出血少、术后皮肤不留瘢痕、患者机体恢复快、住院时间短等优点[1].2000年10月至2004年7月,行腹腔镜下子宫肌瘤挖除术98例,疗效满意,现将护理体会报道如下.

作者：王雪芳；杨继梅刊期： 2005年第03期
血管活性药物海绵体内注射致阴茎异常勃起46例处理体会

阴茎异常勃起是指阴茎长时间持续勃起,并出现一系列病理、生理变化,自然情况下较少见.血管活性药物海绵体内注射(ICI)可以导致阴茎异常勃起[1].1993年12月至2003年12月,本科采用阴茎海绵体内注射罂粟碱和前列腺素(PGE1)等药物检查、诊断和治疗勃起功能障碍(ED)940例,发生阴茎异常勃起46例(4.89%),妥善处理后,均未出现严重后果,现报道如下.

作者：邵立钦刊期： 2005年第03期
经Ⅱ型胶原修饰后的PLGA对诱导后的骨髓基质干细胞粘附及分化的影响

目的:了解单纯聚乙醇酸和聚乳酸共聚物(PLGA)以及经Ⅱ型胶原表面修饰后的PLGA,对诱导后的骨髓间充质干细胞(MSC)粘附、增殖及分化的影响.方法:抽取成年兔骨髓,流式细胞仪分离骨髓MSC,以含胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)及转化生长因子β3(TGF-β3)的无血清F-12培养基诱导培养.取2周后MSC,接种于24孔培养板,其中Ⅱ型胶原修饰PLGA材料的12孔为实验组,对照组为单纯PLGA材料的另12孔.采用RT-PCR、细胞计数、免疫组化、MTT等方法检测细胞生长、粘附及分化情况.结果:诱导后的MSC,表达Ⅱ型前胶原mRNA,且能在经Ⅱ型胶原修饰的PLGA上粘附、增殖,并持续表达Ⅱ型胶原;而单纯PLGA使其脱分化.结论:Ⅱ型胶原能促进经诱导的MSC在PLGA上粘附、增殖并维持软骨细胞表型.

作者：许建中；范东伟；张文霞刊期： 2005年第03期
高位胆管癌24例外科治疗体会

高位胆管癌是指发生于左、右肝管,左右肝管汇合处和肝总管上1/3段的黏膜上皮癌,又称Klastskin瘤或肝门部肝管癌,约占肝外胆管癌的58%～75%[1].因其特殊的解剖关系及生物学特征,手术切除率极低.作者回顾分析本院1994年2月至2003年8月收治的24例高位胆管癌患者的临床资料,现报道如下.

作者：张举明刊期： 2005年第03期
丙种球蛋白治疗新生儿ABO溶血46例

1999年7月至2002年10月,作者在常规治疗的基础上,静脉应用丙种球蛋白(IVIG)治疗新生儿ABO溶血病46例,疗效满意,现报道如下.

作者：王玉梅；王秀芳；敬明辉刊期： 2005年第03期
郑州市社区糖尿病患者病情控制状况影响因素探讨

目的:了解社区中糖尿病患者病情控制状况的影响因素.方法:随机抽取郑州市10个居委会,对居委会内全部已确诊的227例糖尿病患者的一般情况、病程、膳食控制状况、治疗方式、病情监测、体育锻炼、糖尿病相关知识等进行调查.采空腹及早餐后2 h静脉血测血糖.空腹血糖＜7.77 mmol/L且餐后2 h血糖＜11.10 mmol/L为病情控制良好;空腹血糖≥7.77 mmol/L或餐后2 h血糖≥11.10 mmol/L为病情控制不良.采用单因素分析和Logistic回归分析各研究因素与病情控制状况之间的关系.结果:单因素分析显示:年龄、病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况、治疗方式等5个因素对病情控制状况有显著影响.Logistic回归结果表明:病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况3个因素影响糖尿病患者病情控制状况.结论:病程、糖尿病知识评分、膳食控制状况是影响糖尿病患者病情控制状况的主要因素.但科学的、正规的药物治疗对病情控制状况的影响也不应被忽视.

作者：张卫东；袁媛；郗园林刊期： 2005年第03期
前牙牙冠延长术32颗临床观察

由于临床牙冠过短或残根断端位于龈下而无法修复的牙齿,需采用牙冠延长术,以保证修复体有足够的固位及修复后牙周组织的健康[1].2001年8月至2004年8月,本科对30例32颗前牙行牙冠延长术,效果较好,报道如下.

作者：焦静刊期： 2005年第03期
高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙抗血小板活化因子的竞争抑制实验

目的:探讨槲寄生抗血小板活化因子(PAF)的有效活性成分高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)的作用机制.方法:利用不同浓度HG对[3H]PAF结合的竞争抑制实验.结果:HG能够将[3H]PAF置换下来,且置换呈剂量依赖性和饱和性的特点.结论:HG是通过PAF受体而发挥特异性的PAF拮抗剂作用.

作者：万鼎铭；徐从高；张茂宏刊期： 2005年第03期
蜈蚣、全蝎、地龙氨基酸含量测定

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作者：刘继红；尚娟；贾斌；刘宏民刊期： 2005年第03期
慢性硬膜下血肿110例治疗体会

1995年1月至2002年6月,作者共收治慢性硬膜下血肿(CSDH)110例,疗效满意,现总结如下.

作者：晋松如；王树凯刊期： 2005年第03期
肝硬化患者门脉系统血流动力学测定

2002年1月至2004年3月,作者对146例肝炎后肝硬化患者门脉系统血流动力学指标进行测定,探讨肝硬化患者门脉血流与食管静脉曲张、肝功损害程度的关系.

作者：付雪琴；姚兰杰；阎秋丽；时爱兰刊期： 2005年第03期
食管癌组织中肺耐药蛋白的表达

目的:探讨食管癌组织中肺耐药蛋白(LRP)的表达.方法:运用免疫组织化学方法检测49例存档蜡块食管癌组织、46例食管正常组织、32例新鲜食管正常及癌组织LRP蛋白的表达;对其中的32例新鲜标本,运用RT-PCR技术检测LRP mRNA的表达.结果:食管癌组织LRP蛋白阳性表达率54.3%(44/81),高于正常组织的35.9%(28/78)(x2=5.44,P＜0.05).食管癌组织中LRP mRNA的表达水平(0.54±0.05)高于正常组织的(0.39±0.04)(t=2.30,P＜0.05).LRP蛋白及mRNA的表达与食管癌病理特征不相关(P＞0.05).结论:食管癌组织中LRP的高表达可能与食管癌的耐药性有关,该特性可能独立于病理特征之外.

作者：董鑫；郝志芳；李珊珊；司源；阎爱花刊期： 2005年第03期
中药金叶败毒制剂体外抗人巨细胞病毒作用观察

目的:研究中药金叶败毒制剂(JYBD)抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的可能机制.方法:采用体外细胞培养技术建立HCMV感染细胞模型,应用更昔洛韦(GCV)和JYBD进行干预,采用定量RT-PCR法检测干预后不同时间感染细胞HCMV即刻早期基因IE86 mRNA的表达水平,观察感染细胞的病变进展情况,同时采用放射免疫法测定受染细胞细胞因子TNF-α和IL-6的分泌水平.结果:JYBD与GCV对HCMV IE86 mRNA的表达以及HCMV所致细胞病变有明显的抑制作用,降低受染细胞TNF-α、IL-6的分泌水平,JYBD作用弱于GCV.结论:JYBD可通过抑制HCMV IE基因的转录,促进细胞因子的分泌而发挥体外抗HCMV作用.

作者：张龑；谭丽；闻良珍刊期： 2005年第03期
哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23及血清IgE测定

目的:研究哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23表达与哮喘发病的关系.方法:采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法检测48例哮喘发作期儿童和29例哮喘缓解期儿童外周血CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率和血清IgE水平,并以30例健康儿童作对照.结果:哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率及血清IgE水平均高于哮喘缓解组和正常对照组(P＜0.05).哮喘缓解组CD23+淋巴细胞百分率和IgE水平明显高于正常对照组(P＜0.05);哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率与血清IgE水平呈正相关(r=0.726,0.739,0.714,P均＜0.05).哮喘缓解组和正常对照组上述指标与血清IgE水平不相关.结论:CD21、CD23的表达在哮喘发病过程中发挥重要作用.

作者：杨红刊期： 2005年第03期
荧光定量PCR检测B19病毒方法的建立

目的:建立采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人微小病毒B19的方法.方法:根据B19病毒VP2基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针.将PCR扩增的B19病毒VP2区基因片段克隆入pGEM-T载体,重组质粒pGEM-T-VP2经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测;对15例B19病毒感染血标本和几种其他病毒进行PCR测定.结果:应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系;与定量对照曲线比较计算,15例B19病毒感染标本中B19拷贝数为4.8×10 5μl-1～8.7×10 8μl-1;对其他几种病毒的扩增均无信号出现.结论:成功建立了检测B19的荧光定量PCR方法,较常规PCR技术更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值.

作者：赵国强；胡军；冷弘；王岚；陈宗德刊期： 2005年第03期
高龄老年心脏性猝死患者心率变异性分析

目的:研究高龄老年人心率变异性(HRV)减低与心脏性猝死的关系.方法:回顾分析39例≥75岁心脏性猝死者的临床资料,对其死亡前6个月之内24 h动态心电图HRV进行时域和频域分析.以同期资料完整的老年健在患者作对照.结果:高龄老年人心脏性猝死组陈旧性心肌梗死、糖尿病及心功能不全患者多于对照组,HRV各参数均较对照组明显降低(P＜0.01).结论:HRV减低是预测高龄老年人心脏性猝死较有价值的指标.

作者：郑爱兰；郝道剑刊期： 2005年第03期
槲寄生中血小板活化因子拮抗剂有效成分的纯化及鉴定

目的:提纯槲寄生中血小板活化因子(PAF)拮抗剂有效活性成分并鉴定其分子结构.方法:利用硅胶柱层析分离出槲寄生乙酸乙酯剂结晶化合物及槲寄生水剂结晶化合物.再利用红外光谱分析、核磁共振谱分析和质谱分析进行分子结构鉴定.结果与结论:槲寄生中的PAF拮抗剂有效活性成分是高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙.

作者：万鼎铭；徐从高；张茂宏刊期： 2005年第03期
早期康复治疗对脑出血患者预后的影响

脑出血可增加致残率,影响患者生活质量[1].作者对42例急性脑出血患者采用常规治疗的同时辅助早期系统的康复治疗,并以常规治疗的42例作对照,探讨早期康复治疗对脑出血患者预后的影响.

作者：马丽；侯巧红；郭建超；许予明刊期： 2005年第03期
多胎妊娠15例护理体会

多胎妊娠属高危妊娠[1],孕妇并发症多,早产发生率及围产儿死亡率高,加强多胎妊娠产前、产时及产后的护理管理,对于减少母儿并发症至关重要.现将本院近3 a来共收治多胎妊娠15例的护理体会报道如下.

作者：刘爱清；程国梅刊期： 2005年第03期
婴幼儿先天性心脏病术后再次气管插管28例护理体会

婴幼儿先天性心脏病(先心病)术后可因多种原因而造成再次气管插管辅助通气.2001年至2004年,本科收治的先心病患儿在CICU行再次插管28例,现将护理体会报道如下.

作者：邱武英；张林虹；周彩峰刊期： 2005年第03期