李路平
目的:探讨加热杀灭的铜绿假单胞菌(HKPA)及其外毒素A(PEA)对人单个核细胞(PBMC)TNF-α分泌的影响.方法:采用1×10 7 CFU/ml HKPA作为诱导物、50μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L PEA作为抑制物、抗PEA血清作为中和物,诱导PBMC体外产生TNF-α.ELISA法检测TNF-α浓度.结果:对照组HKPA可诱导PB-MC产生一定浓度的TNF-α;当PEA浓度≥100μg/L时,抑制TNF-α的产生(P＜0.01),TNF-α浓度与PEA的剂量呈负相关(r=-0.82,P＜0.01).抗PEA血清完全中和PEA的抑制作用,与对照组比较,TNF-α分泌量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:HKPA在体外可有效诱导PBMC产生TNF-α,PEA以剂量依赖的方式抑制TNF-α的产生.
作者：邓予晖 刊期： 2005年第03期
目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体.方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF-7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3-Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3.从质粒pIBI30-DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3-DF3-DTA.结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符.结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功.
作者：罗威；黄文广；殷涛 刊期： 2005年第03期
目的:探讨上颌窦提升术对上颌后牙区萎缩牙槽嵴患者种植义齿修复的临床应用价值.方法:56例患者植入196枚种植体,患者平均年龄60.6岁.将自体松质骨(Spongiosa)与Bio-OSS(R)混合进行上颌窦提升术,根据情况一期或二期植入种植体.种植体植入后至少6个月,选用适当的上部修复体进行义齿修复.结果:上颌窦提升术后或/和种植体植入术后,创口愈合良好,未见种植体松动或脱落,供骨区和种植术区均未见并发症.术后12个月PTVs小为-5,X线检查种植体周垂直骨吸收均不超过1 mm.种植体全部稳定地行使功能.结论:应用上颌窦提升术对上颌后牙区萎缩牙槽嵴患者进行种植义齿修复有广阔的应用前景.
作者：张克豪；Lorenzoni M；Wegscheider WA 刊期： 2005年第03期
VAD(长春新碱、阿霉素、地塞米松)方案是治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的常用方案,但部分患者存在原发耐药或缓解后复发.近年来研究发现沙利度胺(反应停,thalidomide)有治疗MM作用,并且对难治复发者也有效[1,2].作者应用沙利度胺联合VAD方案治疗24例MM,现报道如下.
作者：陈玉清；李琳；张茵；臧玉柱；席雨人；李晓雯 刊期： 2005年第03期
目的:探讨冠脉内支架植入术后再狭窄的影响因素.方法:选择随访的冠脉造影资料较全的100例冠脉内支架植入术后患者.依据术后冠脉造影复查结果将其分为无再狭窄组和再狭窄组,比较2组临床危险因素(包括年龄、性别、高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟)及靶血管病变特点(如病变部位、病变分型、病变长度、术前狭窄程度、小管腔直径、病变血管支数),分析支架内再狭窄的影响因素.结果:2组年龄、高血压患病率、糖尿病患病率、高脂血症患病率、病变部位、病变分型、病变血管支数差异无统计学意义.再狭窄组男女比例(39:6)较无再狭窄组(29:26)高(P=0.02);再狭窄组吸烟比例(80%)较无再狭窄组(58.6%)高(P=0.03);再狭窄组术前狭窄程度(94.65%±3.62%)较无再狭窄组(88.81%±3.23%)重(P=0.04);再狭窄组病变长度(23.2±10.8)mm较无再狭窄组的(17.6±11.8)mm长(P=0.04).结论:年龄、高血压患病率、糖尿病患病率、高脂血症患病率、病变部位、病变分型、病变血管支数对冠脉内支架植入术后再狭窄无关,男性、吸烟、病变长度、术前狭窄程度与其有关.
作者：刘灵芝；侯翠红；刘恒亮 刊期： 2005年第03期
目的:探讨心肌肥大和心力衰竭(心衰)大鼠心肌细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、心肌肥大组、心衰组,每组8只.心肌肥大组和心衰组均采用缩窄腹主动脉构建模型.假手术组和心肌肥大组大鼠于第4周处死,心衰组大鼠于第12周处死.分别检测各组血流动力学和左室肥大指标,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌Bcl-2和Bax的表达.结果:心力衰竭组与心肌肥大组比较,左室收缩末压、左室舒张末压、心室内压变化大速率差异均有统计学意义(P＜0.01或0.05).心衰组较心肌肥大组心肌细胞凋亡增加,Bax表达增加,Bcl-2表达减少(P＜0.01).结论:心肌细胞凋亡在心脏由心肌肥大向衰竭的转变过程中起着重要的作用,并与凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达改变有关.
作者：付春景；郭龙辉；申琦；黄幼田；许燕 刊期： 2005年第03期
恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)也称恶性肿瘤相关物质,与恶性肿瘤的发生、发展关系密切,已应用于恶性肿瘤的早期诊断[1].为探讨TSGF与上消化道恶性肿瘤化疗疗效的关系,2001年以来,作者对126例晚期上消化道恶性肿瘤患者化疗前后分别进行了血清TSGF检测,现报道如下.
作者：王瑞玲；张士兰 刊期： 2005年第03期
目的:建立一种方便、准确测定小鼠小肠乳糖酶活性的方法.方法:采用不同pH的底物溶液与肠黏膜提取物反应,计算相应的酶活性;取不同反应时间(45 min,60 min,75 min),不同显色时间(45 min,60 min,75 min)和不同显色剂用量(2.0 ml,2.5 ml,3.0 ml)按L9(34)正交实验设计方法,测定不同条件下的底物溶液与肠黏膜反应的A值作为正交实验的评分标准.结果与结论:由正交实验得出,该方法的佳反应条件为:pH 4.6,水浴75min,显色时间45 min,显色剂用量3.0 ml;批内酶活性(0.029±0.003)U/ml,CV=2.49%,批间酶活性(0.032±0.004)U/ml,CV=4.19%.该方法具有很好的重复性和可靠性.
作者：何伟；黄磊；吕斌；黄承钰 刊期： 2005年第03期
目的:研究中药金叶败毒制剂(JYBD)抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的可能机制.方法:采用体外细胞培养技术建立HCMV感染细胞模型,应用更昔洛韦(GCV)和JYBD进行干预,采用定量RT-PCR法检测干预后不同时间感染细胞HCMV即刻早期基因IE86 mRNA的表达水平,观察感染细胞的病变进展情况,同时采用放射免疫法测定受染细胞细胞因子TNF-α和IL-6的分泌水平.结果:JYBD与GCV对HCMV IE86 mRNA的表达以及HCMV所致细胞病变有明显的抑制作用,降低受染细胞TNF-α、IL-6的分泌水平,JYBD作用弱于GCV.结论:JYBD可通过抑制HCMV IE基因的转录,促进细胞因子的分泌而发挥体外抗HCMV作用.
作者：张龑；谭丽；闻良珍 刊期： 2005年第03期
目的:比较荧光染料SYBR Green I及EB在定量PCR诊断中检测DNA的敏感性.方法:分别用琼脂糖凝胶电泳SYBR Green I染色及EB染色,检测26例21-三体综合征患者及20例正常人DNA PCR扩增产物,并进行光密度分析比较.结果:SYBR Green I染色于24个循环PCR产物带型清楚,可准确定量检测;EB染色则在28个循环才能进行定量分析.结论:荧光染料SYBR Green I染色较EB染色测量DNA敏感、快捷,在定量PCR技术中值得推广应用.
作者：张茜；谢湘芝；经承学 刊期： 2005年第03期
外阴恶性肿瘤的传统手术方法为外阴根治术加双侧腹股沟淋巴结清扫术,后者常规结扎切断双侧大隐静脉及其主要分支,术后切口皮瓣常延迟愈合,感染发生率高,且易并发下肢水肿、下肢静脉血栓形成、疼痛、感觉异常等并发症[1].1990年1月至2004年7月,作者在行上述式术时保留大隐静脉治疗外阴恶性肿瘤18例,效果较好,报道如下.
作者：赵红霞；王秀琴；杨丽娟；盛修贵 刊期： 2005年第03期
体外循环(CPB)期间及术后,血液稀释、低温及其他因素可以引起甲状腺激素代谢的变化,表现为血浆三碘甲状腺原氨酸(T3)或甲状腺素(T4)低下,而促甲状腺激素(TSH)则基本正常,此种情况称为低T3综合征,会对机体产生一定影响[1,2].作者观察了11例心脏手术患者体外循环前后血浆甲状腺激素的变化,报道如下.
作者：钱建华；韩冬梅；林洪启 刊期： 2005年第03期
目的:探讨CYP17基因-34 bp处T→C碱基置换与多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法,对中国汉族人118例PCOS患者和106例对照组的CYP17基因-34 bp碱基置换进行检测;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清睾酮(T)水平,比较CYP17基因多态性与PCOS患者T水平之间的关系.结果:中国汉族人PCOS组CYP17基因型频率分布为9.9%(A1A1)、56.4%(A1A2)、33.7%(A2A2),对照组为20.0%(A1A1)、52.0%(A1A2)、28.0%(A2A2),2组间比较差异无统计学意义(x2=0.190,P＞0.05);PCOS组A1、A2等位基因频率为38.1%、61.9%,对照组为46.0%、54.0%,2组间比较差异无统计学意义(x2=3.032,P＞0.05);PCOS组A2A2基因型组的T水平((1.63±o.58)μg/L)高于A1A2组((1.30±0.85)μg/L)和A1 A1组((1.00±0.66)μg/L)(P＜0.05),且含A2组(A1A2,A2A2)的T水平((1.43±0.67)μg/L)显著高于不含A2组(A1A1)的T水平(P＜0.05).结论:CYP17基因-34 bp处T→C碱基置换的存在与PCOS高T血症之间有一定的相关性,可能是PCOS的易感基因之一.
作者：谭丽；张蕾；朱桂金 刊期： 2005年第03期
目的:探讨高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响.方法:利用HG预处理人体主要的炎症细胞多形核白细胞(PMN),测定PAF刺激下PMN产生的炎症介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和白三烯B4(LTB4).结果:PAF可刺激PMN产生炎症介质TNF-α、LTB4;HG能完全抑制PAF所致的PMN产生TNF-α,HG能部分抑制PAF所致的PMN产生LTB4;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6及IL-8无影响.结论:HG作为PAF拮抗剂,可抑制炎症介质产生而发挥抗炎作用.
作者：万鼎铭；徐从高；张茂宏 刊期： 2005年第03期
目的:构建人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT,并观察融合蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法从人肝癌组织中扩增出带有EcoR I酶切位点的hTERT基因片段,与pGEM-T Easy连接,转化感受态大肠杆菌JMl09,经蓝-白筛选、PCR扩增等筛选阳性菌落,用EcoR I酶切获取目的片段,并与EcoR I酶切过的pGEX-4T-1质粒连接,重组子转化BL21感受态大肠杆菌,PCR扩增筛选出阳性菌落.基因测序并用Omega 2.0软件比较分析重组质粒中hTERT基因片段与GenBank中的已知序列的同源性.通过诱导pGEX-4T-1融合蛋白表达,用抗hTERT多抗对融合蛋白进行Western blot鉴定,薄层凝胶光密度扫描测定融合蛋白表达量.结果:PCR扩增等方法证实,人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT构建成功,其中hTERT基因片段与GenBank中相应基因同源性为98.73%,氨基酸序列同源性为99.68%.Western blot检出GST-hTERT融合蛋白,其表达量达28.4%.结论:成功构建了pGEX-4T-1-hTERT原核重组质粒并获得高度表达.
作者：张巧；赵国强；刘红梅；宫亚欧；丁兰萍；薛乐勋；杨胜利 刊期： 2005年第03期
目的:考察不同提取方法对山茱萸总皂苷含量测定的影响.方法:分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70%乙醇回流提取、体积分数为70%乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法,以人参皂苷Re作对照品,比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量.结果及结论:不同提取方法对皂苷含量有较大的影响,超临界CO2提取技术无溶剂残留,操作温度低,对环境友好,提取效率高,皂苷含量是传统溶剂提取的1.5～2.0倍,有较好的应用前景.
作者：韩志慧；张景伟；赵玉丛；李新宝；刘国际 刊期： 2005年第03期
窝沟封闭剂涂布窝沟不仅是预防窝沟龋发生的一种有效方法,而且可用于窝沟可疑龋和初期龋的治疗[1].作者使用窝沟封闭剂治疗早期窝沟龋效果较好,报道如下.
作者：曹俊英 刊期： 2005年第03期
目的:研究哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23表达与哮喘发病的关系.方法:采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法检测48例哮喘发作期儿童和29例哮喘缓解期儿童外周血CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率和血清IgE水平,并以30例健康儿童作对照.结果:哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率及血清IgE水平均高于哮喘缓解组和正常对照组(P＜0.05).哮喘缓解组CD23+淋巴细胞百分率和IgE水平明显高于正常对照组(P＜0.05);哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率与血清IgE水平呈正相关(r=0.726,0.739,0.714,P均＜0.05).哮喘缓解组和正常对照组上述指标与血清IgE水平不相关.结论:CD21、CD23的表达在哮喘发病过程中发挥重要作用.
作者：杨红 刊期： 2005年第03期
目的:观察体外培养的人骨髓间充质干细胞(MSCs)部分生物学特性.方法:自健康人骨髓中分离出MSCs,进行原代培养,第5 d首次更换培养液,以去除未贴壁细胞,以后每周换液2次,细胞铺满整个培养瓶底90%时开始传代培养.倒置相差显微镜下观察原代及传代细胞形态及生长特性,并绘制传代细胞的生长曲线.流式细胞仪检测第3代MSCs细胞表面分子CD29、CD44,以进行MSCs鉴定.结果:MSCs体外培养为贴壁生长.MSCs原代培养约18～21 d才达传代要求;传代培养细胞生长潜伏期仅24～36 h,对数增长期约3～5 d,之后为平台期,4～6 d传1代.传至第8代,出现凋亡征象.第3代MSCs细胞表面CD29、CD44的表达率分别为90.6%和91.5%,MSCs均一性较高.结论:从人骨髓中分离出的MSCs在体外环境中具有很强的自我更新和分裂增殖能力.
作者：法宪恩；王利霞；侯剑峰；张瑞成；王海永；杨辰垣 刊期： 2005年第03期
目的:了解单纯聚乙醇酸和聚乳酸共聚物(PLGA)以及经Ⅱ型胶原表面修饰后的PLGA,对诱导后的骨髓间充质干细胞(MSC)粘附、增殖及分化的影响.方法:抽取成年兔骨髓,流式细胞仪分离骨髓MSC,以含胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰ)及转化生长因子β3(TGF-β3)的无血清F-12培养基诱导培养.取2周后MSC,接种于24孔培养板,其中Ⅱ型胶原修饰PLGA材料的12孔为实验组,对照组为单纯PLGA材料的另12孔.采用RT-PCR、细胞计数、免疫组化、MTT等方法检测细胞生长、粘附及分化情况.结果:诱导后的MSC,表达Ⅱ型前胶原mRNA,且能在经Ⅱ型胶原修饰的PLGA上粘附、增殖,并持续表达Ⅱ型胶原;而单纯PLGA使其脱分化.结论:Ⅱ型胶原能促进经诱导的MSC在PLGA上粘附、增殖并维持软骨细胞表型.
作者：许建中；范东伟；张文霞 刊期： 2005年第03期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
