学术投稿

PCR在消减文库构建中的应用

殷智榕;高冬玲;陈奎生;姜国忠;张云汉

关键词:PCR, 重组阳性克隆, 消减文库
摘要:目的: 消减文库构建过程中,用PCR技术快速筛选重组阳性克隆。方法:将白色单菌落加入氨苄抗性LB培养液中,37 ℃摇振培养过夜,取细菌悬液作PCR模板。结果和结论:以PCR方法筛查重组阳性克隆,可以简便快速鉴定重组阳性克隆,不需提取质粒。筛选重组阳性克隆可直接用细菌悬液作PCR模板,在消减文库构建时,能大大提高工作效率。
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 大肠癌患者外周血中癌细胞角蛋白20的检测

    目的: 以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血大肠癌细胞,探讨大肠癌患者外周血中癌细胞存在的临床意义。方法:应用RT-PCR方法检测47例不同Dukes分期结肠癌患者及其肝转移患者外周血中大肠癌细胞角蛋白20(CK20),并以大肠癌组织(20例)和正常健康人外周血(20例)为对照。结果:正常健康人外周血中未见CK20 mRNA表达,大肠癌患者外周血中CK20 mRNA检出率达40.4%(19/47),Dukes B,C,D期患者外周血CK20 mRNA检出率分别为25.0%(5/20),41.2%(7/17)和87.5%(7/8),(P<0.05)。肝转移患者CK20 mRNA检出率为87.5%(7/8),无肝转移患者检出率为30.8%(12/39)(P<0.01)。结论:CK20可作为肿瘤标志物,用于检测外周血中的大肠癌细胞,预测肿瘤复发及转移,识别高危患者。

    作者:刘新郑;师玉海;李遂柱 刊期: 2001年第02期

  • 大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶样神经元至背海马投射观察

    目的: 观察大鼠蓝斑至背海马投射纤维的递质性质。方法:用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法和免疫组织化学相结合的双重标记技术研究蓝斑TH样神经元至背海马投射。结果:在双侧蓝斑内可见到HRP标记细胞、TH阳性反应细胞和TH-HRP双标细胞,同侧明显多于对侧。结论:背海马接受双侧蓝斑纤维的投射,并呈同侧优势。

    作者:王建祯;马朝显;崔建军;周明付;张华;林玲;汤善钧 刊期: 2001年第02期

  • 自体肾移植治疗肾血管性高血压18例护理体会

    肾血管性高血压约占高血压病例的5%~10%[1],其中75%~80%为女性患者[2],好发于40岁以下。其病因以大动脉炎为主,外科治疗方法很多,但各有一定局限性,且远期效果不明显。自体肾移植是将患肾移植至同侧髂窝,肾动、静脉分别与髂血管进行吻合。该法避免应用人工或自体血管,吻合口不发生异物反应或萎缩改变,且大动脉炎一般不影响髂内动脉,移植肾血供好,近年采用较多。1994年1月至1998年12月,行自体肾移植18例,术后效果满意,现将护理体会介绍如下。

    作者:李书慧;刘凤然;宋玉凤 刊期: 2001年第02期

  • 宫颈上皮内瘤样病变组织中端粒酶活性的测定

    目的:测定宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织中端粒酶活性,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用和早期诊断的价值。方法:应用端粒酶TRAP-ELISA法对27例宫颈组织(16例CIN、11例正常宫颈)进行端粒酶活性测定。结果:CIN端粒酶活性阳性率为56.25% (9/16),而11例正常宫颈组织中均无端粒酶活性阳性表达,CIN及对照组端粒酶活性A值分别为(0.371±0.219)和(0.039±0.048),2组比较差异有显著性(P<0.01)。不同级别CIN中端粒酶活性差异无显著性。结论:宫颈癌前病变组织中存在端粒酶活性,端粒酶的激活是宫颈癌的早期事件,在宫颈癌发生发展中起重要作用,可能成为宫颈癌及癌前病变早期诊断和病情监测的指标。

    作者:张梦真;乔玉环;史惠蓉;王福丰 刊期: 2001年第02期

  • 药物局部注射治疗翼状胬肉90例

    翼状胬肉是眼科结膜病中的常见病,多发病,对于进行期或影响视力者主要以手术治疗为主,但术后复发率高,且复发的胬肉进展快。1997年至1999年采用平阳霉素加醋酸泼尼松龙局部注射治疗原发性及复发性胬肉,效果满意,报道如下。

    作者:杨红伟;吴欣 刊期: 2001年第02期

  • 封髓疗法应急治疗急性牙髓炎280例

    急性牙髓炎在口腔科急症中为常见,其应急治疗方法国内教科书上提倡开髓引流[1]。作者1996年~2000年在急性牙髓炎的应急处理中试用了如下方法:采用局麻下冠髓切除术加具有缩血管效应的失活剂棉球的封髓疗法,取得了较为满意的效果。

    作者:李尚锋 刊期: 2001年第02期

  • 蜂胶酊治疗复发性口腔溃疡31例

    蜂胶是一种优良的天然药物,其药用价值早在三千多年前的中国古典医学著作《神农本草经》中就有记载。目前有不少资料报道了蜂胶在医学领域多个学科中的应用,但应用于口腔科的报道较少。采用质量分数为20%的蜂胶酊治疗复发性口腔溃疡31例36处,疗效满意,现介绍如下。

    作者:姚嫣;王玲 刊期: 2001年第02期

  • A型肉毒毒素治疗偏侧面肌痉挛20例

    1979年Scott首先注射A型肉毒毒素(botulium botox A,BTX-A)治疗斜视取得成功[1],以后该方法越来越多地被用于其他疾病的治疗[2]。用BTX-A治疗神经系统多种运动障碍性疾病成为国外目前研究的热点,国内也正在开展该方面研究。现将用BTX-A治疗偏侧面肌痉挛20例结果报道如下。

    作者:连亚军;王左生;李月琴;马奎云 刊期: 2001年第02期

  • 慢性胃炎患者红细胞免疫功能的改变

    目的: 探讨慢性胃炎患者红细胞免疫功能的改变。方法: 对83例慢性胃炎患者,采用免疫粘附酵母菌花环法测其红细胞CR1活性,采用免疫粘附促进因子(RFER)百分率及抑制因子(RFIR)百分率试验测定其血清中红细胞免疫粘附调节因子。 结果: 慢性胃炎组与正常对照组相比,红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)率、RFER百分率降低(P<0.01,P<0.05),红细胞免疫复合物(RBC-ICR)花环率与RFIR百分率增高(P<0.05,P<0.01);治疗后RBC-C3bRR,RBC-ICR,RFER,RFIR分别为(17.21±2.91),(6.62±1.36),(81.32±5.63)和(28.11±3.11),除RFIR外均有明显恢复。慢性胃炎组HP阳性者RBC-C3bRR低于HP阴性患者,RBC-ICR高于HP阴性患者。结论: 慢性胃炎患者红细胞免疫功能低下,HP的感染可能是导致其红细胞免疫功能低下的主要原因之一。

    作者:穆永臣;王瑞勤;李建军;杨军;焦连华 刊期: 2001年第02期

  • 心血管病患者拔牙术300例护理

    1997年至1999年,对300例心血管疾病患者在拔牙手术中采用了相应的治疗护理措施,现将临床护理报道如下。

    作者:李峰;蔺敏 刊期: 2001年第02期

  • 肝管空肠宫颈式吻合术在胆道重建中的应用

    目的:探讨胆道重建后抗反流的方法。方法:本组 32例,男 11例,女21例,年龄10 d~14岁,在胆道重建中,均采用肝管空肠宫颈式吻合术式。结果: 32例均痊愈出院。随访 3个月~ 8 a,均未见腹痛、黄疸、发热。其中 24例患儿经B超检查,未见胆管狭窄及扩张。 X线钡餐检查,未见有钡剂反流入胆管。结论:肝管空肠宫颈式吻合术在胆道重建中有较好的抗反流作用。

    作者:庞艳丽;范应中;张谦;夏自强 刊期: 2001年第02期

  • 99mTc-MIBI脑显像评价胶质瘤恶性程度

    目的: 评价99mTc-MIBI脑显像判断胶质瘤恶性程度的价值。方法:受检查者共32例,其中胶质瘤24例,均经CT或MRI检查,确定肿瘤部位,正常对照8例。于静脉注射99mTc-MIBI 555~740 MBq(15~20 mCi)后15~30 min(early phase,EP)和2~3 h(delayed phase,DP)分别进行单光子发射型计算机断层(SPECT)显像。采用病变部位的平均放射性计数除以对侧相应部位的平均放射性计数(T/C)和病变部位的平均放射性计数除以脉络丛部位的平均放射性计数(T/CP)两种半定量的方法判断胶质瘤摄取99mTc-MIBI的程度。根据术后组织病理学检查,采用Kernohan分类法,将患者分为低级(low-grade,LG)恶性(包括Ⅰ级和Ⅱ级)13例和高级(high-grade,HG)恶性(包括Ⅲ级和Ⅳ级)11例2组。结果:在EP中,LG组与HG组的T/C值分别为(1.06±0.31)和(2.65±0.85),两组之间差异有显著性。以1.6为界限,鉴别LG与HG的灵敏度、特异度和准确性分别为90%、100%和95%。结论:99mTc-MIBI脑显像可作为一种无创性的术前评价胶质瘤恶性程度的方法。

    作者:韩星敏;刘保平;孙红卫;孙秉奇;常建东 刊期: 2001年第02期

  • 妊娠高血压综合征患者硫酸镁治疗前后血浆内皮素含量的变化

    目的: 测定妊娠高血压综合征(妊高征)患者血浆内皮素含量的变化,探讨硫酸镁治疗妊高征的机制。方法:采用放射免疫测定法观察36例妊高征患者(妊高征组)血浆内皮素水平和硫酸镁治疗4 h时内皮素的变化,并以14例同期正常妊娠妇女作对照。结果:中、重度妊高征组患者血浆内皮素水平比同期正常妊娠妇女高(P<0.05),硫酸镁治疗4 h后血浆内皮素含量较治疗前显著降低(P<0.05),而轻度妊高征患者硫酸镁治疗后血浆内皮素较治疗前差异无显著性(P>0.05)。结论:硫酸镁可以通过调节妊高征患者血浆内皮素含量而起到治疗妊高征的作用。

    作者:郑新杰;郭瑞霞 刊期: 2001年第02期

  • 卵巢上皮性癌组织中细胞周期素D1的表达

    目的:探讨细胞周期素D1(CyclinD1)表达在卵巢上皮性癌发病中的作用。方法:应用SABC免疫组化技术,检测40例卵巢上皮性癌、12例良性卵巢上皮性肿瘤和10例正常卵巢组织中CyclinD1的表达,并对其表达与卵巢上皮性癌临床分期、组织学分级、组织学类型和生存时间的关系进行探讨。结果:CyclinD1阳性表达多见于临床期别晚和生存期短的病例组(P<0.05),低分化者阳性表达高于高分化者,Ⅲ级与Ⅱ级、Ⅰ级比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:CyclinD1表达与卵巢上皮性癌的临床病理指标有关,对估计其进展、判断预后有重要意义。

    作者:赵先兰;乔玉环;史惠蓉 刊期: 2001年第02期

  • 甲硝唑洁霉素糊剂联合碘酚治疗妊娠期牙龈炎32例

    传统治疗妊娠期牙龈炎的方法是牙齿洁治术后,碘酚牙周上药,但疗效不甚满意。采用甲硝唑洁霉素糊剂与碘酚交替牙周上药,临床观察疗效显著,现报道如下。

    作者:黄玉婷;韩振廷;李守珍;尚铁伟 刊期: 2001年第02期

  • 冠状动脉完全闭塞性病变的介入治疗

    目的: 探讨经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)治疗冠状动脉完全闭塞性病变的临床价值。方法:将37例患者按病程分为3组,A组(急性心肌梗死组,病程2~9 h)13例,B组(病程≤3个月)11例,C组(病程>3个月)13例。A组行直接PTCA,其余2组行择期PTCA。结果:A组13支血管成功12支(92.3%),发生急性血管闭塞1例;B组12支血管成功11支(91.6%);C组14支血管成功10支(71.4%)。无并发症发生。共植入支架21个(53.8%)。随访2~26个月效果良好。结论:冠状动脉完全闭塞性病变,急性期及梗死早期PTCA成功率高,随着闭塞时间延长成功率下降,但介入治疗仍可改善相当一部分患者预后,且无并发症发生。

    作者:许桂枝;马业新 刊期: 2001年第02期

  • 冠状动脉搭桥术10例麻醉体会

    本院在1999年间,实施冠状动脉搭桥术(CABG)10例,效果满意。现将麻醉处理体会总结如下。

    作者:刘爱英 刊期: 2001年第02期

  • 颈总动脉及其分支类型的观测

    目的: 为临床施行颈外动脉结扎术提供形态学依据。方法:解剖53具经体积分数为10%福尔马林固定的成人尸体,暴露头颈部的血管,测量甲状腺上动脉起始部位距颈总动脉分叉及甲状腺上动脉和舌动脉的距离,并观察颈外动脉的分支形状,颈内动脉与颈外动脉的位置关系。结果和结论:甲状腺上动脉起始于颈外动脉、颈总动脉分叉水平、颈总动脉分叉水平以下者分别占44.34%,28.30%和27.36%;颈外动脉分支形状有树枝状和丛状,以树枝状为主(94.34%);颈内动脉与颈外动脉的位置多为后外与前内的关系。但不能就此认为甲状腺上动脉起始处的动脉就是颈外动脉,也不能单凭颈内动脉与颈外动脉的位置关系来判断颈内与颈外动脉。

    作者:王英;陈雪梅;孙慧茹;武军令;岳永豪;王又林 刊期: 2001年第02期

  • 铸造支架牙 合垫可摘义齿修复牙列缺损647例

    自1983年起,本科开展铸造支架牙 合垫可摘义齿修复,用于中老年人余留牙重度磨损的牙列缺损者,临床疗效良好,报道如下。

    作者:朱更生 刊期: 2001年第02期

  • 射频治疗仪治疗耳鼻喉科疾病178例

    射频治疗是近几年来用于耳鼻喉科并可很快推广的一种新技术。作者应用由广州医疗器械厂生产的华南牌SHP-Ⅱ型五官科射频治疗仪治疗慢性鼻炎、慢性咽炎等疾病,均取得较满意的效果,现报道如下。

    作者:张援;郑琰;程燕 刊期: 2001年第02期

郑州大学学报(医学版)杂志

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