梁钊明;盛小刚;潘光明
目的:考察何首乌不同分离部位对入正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞的杀伤作用,寻找能明显杀伤肝癌细胞但对正常肝细胞生长影响较小的分离部位,并初步探讨其对2种细胞不同作用的机制.方法:何首乌70%乙醇提取物经AB-8型大孔树脂吸附,依次用水、50%乙醇和95%乙醇洗脱得到何首乌乙醇提取物的水洗脱部位(RW)、50%乙醇洗脱部位(R50)和95%乙醇洗脱部位(R95);体外培养人正常肝L02细胞及肝癌HepG2细胞,用含何首乌各分离部位的细胞培养液与细胞共同孵育一定时间后,MTT检测及倒置镜下观察约物对L02及HepG2细胞生长的影响,筛选具有区别杀伤作用的部位,考察其剂量和时间作用效应.进一步通过Giemsa染色观察药物作用后细胞核的变化,流式细胞术检测L02细胞周期和凋亡情况.结果:MTT和倒置镜下镜检结果均表明,R50对L02细胞和HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用.Giemsa染色和流式细胞术结果表明,R50诱导2种细胞凋亡的程度不同:试验的各个时相下HepG2中凋亡细胞的比例均明显高于L02细胞(HepG2细胞中凋亡细胞的比例在24,48,72 h分别为83.62%,60.52%,74.49%,L02细胞中凋亡细胞的比例则分别为31.02%,20.57%,25.32%,2种细胞阴性对照组中凋亡细胞的比例在各个时相均小于5%),但对2种细胞的细胞周期没有明显影响.结论:何首乌提取物的R50部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用,区别杀伤作用的本质是药物诱导2种细胞凋亡的程度不同.
作者:张瑞晨;张超;孙震晓;邓巧虹 刊期: 2012年第12期
目的:系统研究中药小槐花中的化学成分.方法:利用大孔树脂,Sephadex LH-20,ODS及正相硅胶柱等色谱手段进行分离,通过多种波谱学数据分析进行化合物的结构鉴定.结果:从小槐花60%乙醇提取物中分离得到15个化合物,经结构鉴定分别为豆甾醇(1),β-谷甾醇(2),柠檬酚(3),黄槿酮A(4),异柠檬酚(5),kenusanoneⅠ (6),neophellamuretin(7),清酒缸酚(8),古柯三醇(9),黄槿酮D(10),山柰酚(11),8-prenylquercetin (12),leachianone G( 13),5,7,4'-三羟基-二氢黄酮醇(14),4H-1 -benzopyran-4-one,2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-8-(3-methyl-2-butenyl)-,(2R-trans)-(9CI)(15).结论:除化合物8外,所有化合物均为从该种植物中首次分离得到.
作者:吴瑶;罗强;孙翠玲;王光辉;陈全成;郭志坚;邹秀红;陈海峰 刊期: 2012年第12期
中药血清药物化学是阐明中药药效物质基础直接而有效的方法,然而中药化学成分的复杂性和体内过程中成分间的相互作用决定了中药体内成分分析的艰巨性.液相色谱-质谱联用技术为中药体内成分的全息表征提供了有效的分析手段,然而由于生物样品中内源性物质的严重干扰难以在采集的色谱图中直观地辨识出中药体内成分,迫切需要引入专属的成分辨识技术,以避免对中药体内成分的人为漏检.该文结合黄连在大鼠血中的移行成分分析,介绍用于质谱数据处理的质量短缺过滤技术、Metabolynx软件以及主成分分析、偏小二乘判别分析、正交偏小二乘判别分析等模式识别方法在中药体内成分辨识中的应用.
作者:闫广利;韩莹;王喜军 刊期: 2012年第12期
目的:分离黄连亲水性成分,研究其对小檗碱在HepG2细胞中糖代谢作用的影响.方法:黄连亲水性部位高速逆流色谱制备后,硅胶柱色谱法进行分离.MTT法检测HepG2细胞活力,试剂盒检测细胞消耗的葡萄糖.结果:首次从黄连水溶性组分中分离出胆碱.在实验浓度范围内,胆碱能显著增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖的能力,并显著改善小檗碱对细胞生长抑制的影响.与同剂量的小檗碱相比,100 mg·L-1胆碱与38 mg· L-1小檗碱混合后,细胞对葡萄糖的消耗增加34%,存活率上升到75%.结论:胆碱在增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖和减小小檗碱对细胞的毒副作用方面存在显著协同作用.
作者:陈红英;李学刚;叶小利;晋亚楠;黄静;吴金凤 刊期: 2012年第12期
目的:确定EMS诱变处理半夏悬浮细胞的适浓度和处理时间.方法:用0.1%,0.2%,0.4%,0.6%的EMS溶液,处理时间为0.5,1.0,2.0h,对半夏悬浮细胞系进行诱变处理.结果与结论:结果表明,不同浓度的EMS和不同时间处理半夏悬浮细胞,结果有明显差异,在每个处理时间下,均是随着EMS浓度的增加而悬浮细胞的存活率逐渐下降.EMS诱变半夏悬浮细胞的适宜剂量为0.4%,佳处理时间为1h.
作者:陶兴魁;张爱民;薛建平;滕井通;卢河东;薛涛 刊期: 2012年第12期
目的:研究盐酸川芎嗪对同型半胱氨酸损伤的ECV304细胞的保护作用.方法:选择人脐静脉内皮细胞ECV304作为体外研究对象,同型半胱氨酸作为造模剂,监测NOS和NO含量的变化判断其损伤程度.确定同型半胱氨酸损伤ECV304细胞时佳浓度,佳作用时间,建立内皮细胞损伤模型.在此基础上检测盐酸川芎嗪作用损伤内皮细胞NO和NOS含量,研究其对内皮细胞的保护作用.结果:同型半胱氨酸损伤ECV304细胞的适浓度为1 mmol· L-1,佳作用时间为48h,建立内皮细胞损伤模型.阳性药物硝酸甘油和盐酸川芎嗪对ECV304细胞的损伤具有保护作用,NOS和NO生成量与模型组相比显著升高.结论:盐酸川芎嗪具有ECV304细胞保护作用,本实验所建模型可用于筛选以内皮细胞保护剂为靶点的抗心肌缺血药物.
作者:许栋明;吴丹 刊期: 2012年第12期
目的:探讨人参皂苷Rg1经PEG修饰后在小鼠的组织靶向分布情况.方法:取SD小鼠随机分为2组,分别给予尾静脉注射Rg1和PEG-Rg1,于不同时间点取血并取各组织脏器,采用UPLC对样品中指标成分人参皂苷Rg1进行含量测定,计算Rg1在各组织分布的靶向系数,观察比较2组在小鼠体内的组织靶向分布情况.结果:人参皂苷Rg1组在小鼠体内各组织分布的AUC大小顺序为肝、肾、肺、心、脾,肝靶向系数为2.01;PEG修饰组在小鼠体内各组织的AUG大小顺序为肾、肝、肺、心、脾,肝靶向系数为9.21.结论:PEG修饰后,Rg1对肝组织的靶向选择性增强,同时对肾、肺组织的靶向选择性也得到增强.
作者:刘梅;王莉;胡凯莉;奉建芳 刊期: 2012年第12期
肾组织的炎症反应及其相关的组织损伤(如肾小球硬化和肾间质纤维化)是导致慢性肾脏病( chronic kidney disease,CKD)进展至终未期肾病的重要因素.其中,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路能够调控多种核转录因子的表达和生物活性,还可以影响下游炎症介质的合成,并参与炎症细胞的活化,在肾脏疾病炎症损伤中发挥着重要的作用.某些单味中药及其提取物(如大黄素、黄连素)以及一些中药复方(如益肾活血汤)可以通过调节p38MAPK信号通路而影响肾组织内炎症反应,从而,减轻肾小球、肾间质炎症损伤.
作者:赵青;万毅刚;王朝俊;魏晴雪;陈好利;孟宪杰;姚建 刊期: 2012年第12期
目的:研究白术内酯Ⅰ对卡介苗(BCC)联合脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其可能的机制.方法:昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照药联苯双酯组和白术内酯Ⅰ低、中、高剂量组(60,120,240mg·kg-1),每组12只.BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤,比较各组小鼠的肝脏、脾脏系数,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬酸氨基转移酶(AST)的含量、肝匀浆液中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的含量以及血浆和肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α),NO,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量,HE染色切片观察肝组织病理学变化.结果:白术内酯Ⅰ与联苯双酯均可显著降低免疫性肝损伤小鼠增加的肝脏指数、脾脏指数(P<0.05),改善肝脏组织病理学变化和肝脏组织病理学分级,减轻BCG联合LPS所致肝损伤的炎症反应;对免疫性肝损伤中肝匀浆MDA产生和GSH-px水平有明显改善作用.结论:白术内酯Ⅰ对免疫性肝损伤具有显著的保护作用,并且在实验剂量范围内呈显著的剂量依赖性.抑制NO,iNOS,TNF-α等炎症介质的释放或过强表达可能是其主要的作用机制.
作者:王嫦鹤;耿庆光;王雨轩 刊期: 2012年第12期
目的:对大伸筋草的原植物龙骨马尾杉Huperzia carinata环阿屯醇合成酶(cycloartenol synthase,CAS)基因HcCAS编码区进行克隆及序列分析.方法:根据本实验室已报道的龙骨马尾杉转录组高通量测序结果分析获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的CAS基因序列,采用RT-PCR技术,以龙骨马尾杉根、茎、叶混合样品总RNA为模板克隆得到龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,并对HcCAS蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析.结果:序列分析表明,所克隆的HcCAS基因编码区开放阅读框(open reading frame,ORF)长为2 274 bp,编码757个氨基酸残基,命名为HcCASI(GenBank登陆号JN790125).结论:该研究在国内外首次获得龙骨马尾杉HcCAS基因的编码区序列,为进一步研究HcCAS蛋白在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及酶活性位点的鉴定奠定基础.
作者:牛云云;罗红梅;陈士林;黄林芳 刊期: 2012年第12期
目的:探讨牛黄上清胶囊及牛黄上清片治疗复发性口腔溃疡的临床疗效.方法:选择我院门诊确诊的复发性口腔溃疡患者120例,随机分成3组,每组40例,各组年龄、性别、病情均无显著性差异.对照组口服维生素B2片并配合锡类散外用;胶囊组除对照组治疗外,再加服牛黄上清胶囊,一次3粒,一日2次;片剂组除对照组治疗外,再加服牛黄上清片,一次4片,一日2次;以2周为一疗程,共治疗2个疗程.结果:经2个疗程治疗后胶囊组治愈11例,显效19例,有效8例,无效2例,总有效率95.0%,治愈率27.5%;片剂组治愈7例,显效16例,有效13例,无效4例,总有效率90.0%,治愈率17.5%;对照组治愈1例,显效14例,有效12例,无效13例,总有效率67.5%,治愈率2.5%.与对照组比较,片剂组及胶囊组在总有效率及治愈率均有显著性差异;胶囊组与片剂组相比较,总有效率无显著性差异,治愈率有显著性差异.结论:在服用维生素B2及锡类散的基础治疗下,再加服牛黄上清胶囊及牛黄上清片可以显著提高复发性口腔溃疡的临床疗效,总有效率无显著差异,但胶囊组的治愈率明显高于片剂组.
作者:李秀红;吕燊;李波;张燕;王如伟;方玲 刊期: 2012年第12期
目的:初步研究莪术醇促进血管生成的活性及作用机制,为临床用药提供依据.方法:采用斑马鱼生物模式,观察莪术醇对斑马鱼胚胎体节间血管生长、成鱼剪尾后血管再生和仔鱼切尾后组织再生情况.采用相对荧光定量PCR法检测仔鱼切尾后体内血管内皮生长因子(VEGFA)及受体(VEGFR2)基因的表达.结果:莪术醇能使斑马鱼胚胎体节间血管侧生出新的血管,使成鱼剪尾后血管再生加快,使仔鱼切尾后尾部再生加快.且莪术醇能提高仔鱼体内VEGFA及VEGFR2基因的表达量,促进仔鱼切尾后的尾部再生.结论:莪术醇能促进斑马鱼的血管生成,提高仔鱼切尾后体内VEGFA及VEGFR2基因的表达量,促进尾部再生.
作者:田丽莉;董建勇;黄长江 刊期: 2012年第12期
目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shankl表达的影响.方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10mg· kg-1·d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1·d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠.灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测.结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05).PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复.Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05).结论:姜黄素增加APP/PSI双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基闵小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力.
作者:魏鹏;李瑞晟;王虹;任映;孙海芸;杨金铎;王蓬文 刊期: 2012年第12期
目的:研究比较大黄4种饮片水提液在大鼠肠道菌群中的代谢转化情况.方法:在厌氧条件下,分别将大黄4种饮片水提液与大鼠肠道菌试液在37℃温孵,采用HPLC-DAD,HPLC-MS/MS对可被肠道菌群代谢转化的成分及代谢产物进行定性分析,并根据各母体化合物在不同孵育时间的的色谱峰面积变化分析其代谢转化趋势.结果:蒽醌类化合物、没食子酰葡萄糖苷类化合物、萘苷类化合物能在肠道菌群的作用下发生代谢转化.其中,蒽醌类化合物占有绝对优势,在发现的17个代谢物中初步推测有12个由蒽醌类化合物转化而来.实验还发现,随着孵育时间的增加,不同饮同中同一成分代谢转化的趋势不尽相同.结论:炮制改变了大黄饮片所含成分的组合及比例关系,对它们的肠道菌群转化产生了影响.
作者:宋瑞;田媛;张尊建 刊期: 2012年第12期
目的:分析大鼠灌胃刺五加提取物后血浆、胆汁、尿液和粪便中异嗪皮啶(M0)及其代谢产物.方法:健康雄性wistar大鼠按325 mg·kg-1的剂量灌胃给予刺五加提取物,分别采集给药后1,1.5,2,4,6h肝门静脉血液并用SPE技术制备血浆;采集0~12h胆汁并用SPE技术制备;0~12 h,12 ~24 h分别采集尿液和粪便样品并制备样品,采用UPLC-Q-TOF-MS技术和Metabolynx XS软件联合的方法分析.结果:在大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中检测到M0,在血浆和胆汁中检测到代谢物异嗪皮啶葡萄糖醛酸苷(M1).其中M1是首次报道的异嗪皮啶代谢产物.结论:异嗪皮啶在大鼠体内以葡萄糖醛酸形式代谢,终又以异嗪皮啶形式排出体外.
作者:刘树民;孙强;白云;卢芳;闫广利;包顺茹 刊期: 2012年第12期
慢性心衰作为现代医学中难攻克的难题之一,是心血管疾病的重要致死原因,在全球医疗支出中占据着极大的比例,慢性心力衰竭病人的诊治进行系统的管理可有效的改善患者生活质量,削减医疗开支.慢性心衰的疾病管理的开展已取得一定成效,但以中医特色思想为理念的管理模式,目前国内只有较少中医医院在开展探索性实践,该文综述中西医结合慢性心衰疾病研究的必要性及其国内外研究的进展.
作者:梁钊明;盛小刚;潘光明 刊期: 2012年第12期
绝经后骨质疏松症是更年期妇女的常见全身性骨代谢疾病,体内雌激素水平下降是其重要病因.激素替代疗法(HRT)虽然在多年的临床实践中有着良好和肯定的疗效,但其在提高妇科肿瘤发生率等方面具有明显的副作用.临床实践已经证明,多种妇科中药方剂、单味中药及中药植物雌激素样活性成分对骨质疏松症有确凿疗效且副作用小.其主要通过作用于靶组织、靶细胞的雌激素受体并进而影响其下游信号传导通路中骨代谢相关调节蛋白和因子的表达情况,达到对骨质疏松症的防治效果.同时,近年来雌激素相关受体的研究也为全面揭示中药及其活性成分抗骨质疏松症的作用机制提供了新的可能角度和途径.
作者:赵丕文;牛建昭;David Yue-Wei Lee;王继峰;孙艳玲;李亚东 刊期: 2012年第12期
目的:建立铁皮石斛原球茎与活体真菌MF24液体悬浮共培养体系,为原球茎产业化生产提供科学依据.方法:研究原球茎的培养体系是否适用于MF24真菌的生长,对光照和黑暗条件下单独培养的原球茎及与真菌共培养的原球茎的生长状况进行研究,测定生物量及增殖倍数,用HPLC分析比较原球茎中11个特征峰面积的变化.结果:MF24真菌在培养原球茎的6,7-V液体培养基中能正常生长,以1 500 lx光照8~10h·d-1会延缓真菌的生长速度.原球茎在光照或暗培养条件下都能正常生长,在原球茎培养初期加入MF24真菌,两者相互抑制生长.在原球茎的生长稳定期接入5块直径9 mm真菌菌块,对原球茎的生长和化学成分的种类无显著影响,但光照条件下共培养5d的原球茎中有10个化合物含量比对照降低13.64%~ 138.47%,暗培养条件下共培养5d的原球茎中有7个化合物含量比对照提高0.71%~12.82%,4个化合物含量比对照小幅降低3.03% ~ 14.14%.结论:在适宜的条件下,活体真菌MF24可与铁皮石斛原球茎共培养,并影响其次生代谢水平.
作者:孟志霞;舒莹;王春兰;郭顺星 刊期: 2012年第12期
目的:研究毛裂蜂斗菜中抗炎、抗氧化作用机制,对该植物中酚类化学成分进行研究.方法:采用大孔树脂,硅胶,MCI GEL CHP20P,ODS以及Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离和纯化,通过理化性质和多种波谱数据鉴定化合物的结构.结果:从毛裂蜂斗菜95%乙醇提取物中分离得到19个酚类化合物,包括磺酸化苯甲基葡萄糖苷(1),3-(4β-D-葡萄糖苷-3,5-甲氧基)-苯基-2E-丙烯醇(2),二氢丁香苷(3),党参苷Ⅱ(4),4-羟基-2,6-甲氧基苯酚-1-Oβ-D-葡萄糖苷(5),4-羟甲基-2,6-甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(6),熊果苷(7),芦丁(8),山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(9),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(10),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(11),山柰酚-3-O-α-鼠李糖甘(12),petasiphenol( 13),咖啡酸(14),绿原酸(15),2-羟基-5-乙酰基苯甲酸(16),对羟基苯甲酸(17),原儿茶醛(18),对羟基苯丙酸(19).结论:上述研究表明,毛裂蜂斗菜中的酚类化合物主要包括简单酚及其苷类化合物、咖啡酸类以及黄酮苷类化合物.其中化合物1为首次从菊科植物中分离得到,化合物2~7,9,11~12,16,19均为首次从蜂斗菜属植物中分离得到,其余化合物为首次从该植物中分离得到.其中大量化合物已经被证明具有消炎、抗菌、抗氧化等药理作用.
作者:张勇;郭夫江;曾鹏;贾琦;李医明;朱维良;陈凯先 刊期: 2012年第12期
目的:阐明苦参中“环状年轮”的结构特征及异常构造的产生,进一步讨论苦参的药用部位问题.方法:对苦参的根系及药材进行实地调查,并对其根系进行形态观察和发育解剖学研究.结果:北方部分地区生长的苦参存在横走根状茎(文中统称为“根状茎”),其与根在外观和显微特征方面都存在差异;根中的异常结构是由于次生木质部中产生了大量薄壁细胞,其中一些薄壁细胞恢复分生能力转化为异常形成层所产生;苦参横切面中的“环状年轮”与生长轮无关,从外向内依次是由韧皮纤维束呈断续的环、形成层环,以及次生木质部中的薄壁细胞环带组成.结论:苦参的入药部位为根;建议苦参饮片中“环状年轮”的描述改为“环状结构”.
作者:王军;谢晓梅;彭华胜 刊期: 2012年第12期