学术投稿

siRNA抑制生存素基因对恶性黑素瘤细胞A375凋亡的影响

陈思远;程璟;黄长征;钱悦;涂亚庭

关键词:黑色素瘤, RNA, 小分子干扰, 生存素
摘要:目的探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375生存素基因表达后,对A375细胞凋亡的影响.方法构建针对凋亡抑制基因生存素的siRNA真核表达载体pU-生存素-siRNA,用电穿孔法转染A375细胞,采用蛋白质印迹技术检测生存素的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果转染pU-生存素-siRNA后,生存素在A375细胞中的表达(0.24±0.02)较对照组(0.98±0.21)明显下降,试验组细胞的凋亡率(83%)较对照组(28%)明显增加.结论通过RNA干扰技术可抑制生存素的表达,诱导A375细胞的凋亡增加.
中华皮肤科杂志相关文献
  • 女贞子对培养的黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的影响

    目的研究女贞子单体酪醇和齐墩果酸对人黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法采用MTT法测定细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法测定黑素含量,半定量RT-PCR检测药物对黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达的影响.结果加入酪醇72 h后,各组黑素细胞的酪氨酸酶活性和合成黑素能力明显增强,且呈浓度依赖性;酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达量分别比空白对照增加39.10%和99.26%;齐墩果酸也能明显激活酪氨酸酶(P<0.01),促进黑素合成(P<0.05),并使黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达量分别比加入无水乙醇的对照增加31.88%和17.73%.结论酪醇和齐墩果酸可能通过上调酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA的表达而增强正常人黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶活性;两者可能是女贞子中影响黑素细胞生物学活性的主要成分.

    作者:张迪敏;李永伟;尉晓冬;许爱娥 刊期: 2006年第04期

  • 蕈样肉芽肿皮损中增生性T细胞与树突细胞的研究

    目的探讨蕈样肉芽肿(MF)不同时期浸润性皮损中增生性T细胞与树突细胞的分布特征.方法皮肤肿瘤组织石蜡切片,单克隆抗体免疫组化染色.结果MF皮损中Ki-67+细胞和皮肤淋巴细胞相关抗原阳性(CLA+)细胞均明显增多,多数Ki-67+细胞CD4+和CLA+,MF肿瘤期真皮浸润组织中的Ki-67+细胞明显多于斑片期/斑块期(P<0.01),且形态多不规则,异型性明显;未见CD83+/Ki-67+树突细胞,但树突细胞周围可见大量的Ki-67+增生性T细胞,CD83+树突细胞与Ki-67+中瘤T细胞紧密接触.结论CLA+/Ki-67+T细胞在MF皮损中表达的程度和免疫病理特征对于MF的早期发现和转化进展可能具有免疫病理学诊断意义.

    作者:冯爱平;赵静;吴艳;钱悦;陈思远;连昕;涂亚庭 刊期: 2006年第04期

  • Wells综合征一例

    患者男,61岁,因右下肢和中下腹部皮肤反复糜烂伴疼痛2年入院.入院前2年,患者右踝关节部皮肤发红肿胀,伴有轻度瘙痒疼痛,局部不发热,也不伴全身发热,用抗生素治疗无效,皮肤逐渐糜烂,有大量渗出物,改服中药后皮肤糜烂面逐渐好转.入院前1年半右踝关节皮损复发,糜烂面扩展至右小腿中下段,用抗生素治疗仍无效;之后反复发作,时好时愈.

    作者:刘太华;张忠奎;许泽娟 刊期: 2006年第04期

  • 广西壮族系统性红斑狼疮与HLA-DQA1等位基因相关性研究

    系统性红斑狼疮(SLE)发病与多种HLA等位基因相关.为了解广西地区壮族SLE患者临床表现与HLA相关性,我们应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对广西壮族SLE患者进行HLA-DQA1等位基因分型研究.

    作者:苏家光;梁伶;郑文军;刘栋华;莫雪安;林有坤;严煜林 刊期: 2006年第04期

  • 碳素光促进皮肤糜烂、溃疡与伤口愈合的疗效观察

    碳素光是一种包含红外线、紫外线、磁脉冲等多种光谱的综合光,具有消炎、止痛、杀灭多种微生物、促进上皮细胞生长、促进创面愈合等作用[1].2004年3-6月,我们运用碳素光理疗仪治疗多种伴有糜烂、溃疡的皮肤病以及CO2激光治疗术后创面和慢性皮肤溃疡,取得了较好的疗效,现报道如下.

    作者:杨海平;徐丽霞;曹宁校;顾恒 刊期: 2006年第04期

  • 系统性红斑狼疮脊髓炎一例

    患者,女,48岁,反复颜面红斑、发热伴关节疼痛5年,在外院及我院多次查抗ANA抗体、抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体阳性,尿蛋白(+~++).依据美国风湿病协会诊断标准,确诊为SLE,长期口服泼尼松治疗.

    作者:李建华;曾抗;周再高;李莉;于娜沙 刊期: 2006年第04期

  • CD147 siRNA对恶性黑素瘤细胞株A375增殖及CD147表达的影响

    目的研究CD147 siRNA转染对恶性黑素瘤细胞株A375中CD147表达及细胞增殖的影响.方法将前期构建的重组质粒pSUPER/CD147 siRNA稳定转染至恶性黑素瘤细胞株A375中,采用半定量RT-PCR法检测转染细胞中CD147 mRNA的表达.采用MTT法检测转染pSUPER/CD147 siRNA对肿瘤细胞增殖的影响.结果转染了pSUPER/CD147 siRNA的恶性黑素瘤细胞株A375中CD147 mRNA表达水平显著下调,其在转染后24 h、48 h和72 h的增殖水平均显著下降.结论siRNA转染能有效抑制恶性黑素瘤细胞株A375中CD147的表达,且能抑制肿瘤细胞的增殖能力.

    作者:陈翔;林静;林伟;粟娟;陈明亮;施为;谢红付;陈服文 刊期: 2006年第04期

  • SV40T抗原基因转染正常人黑素细胞的研究

    目的研究SV40 T抗原基因对体外培养的人正常黑素细胞的转化作用.方法用阳离子聚合物SofastTM介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体SV40T-pEGFP导入原代培养的正常人黑素细胞进行稳定表达,G418筛选出阳性克隆,挑独立的单克隆扩大培养,检测SV40T抗原基因及SV40T蛋白在黑素细胞内的表达.结果分离获得转化细胞阳性克隆,提取DNA及RNA后用PCR法成功扩增出288 bp的片段,免疫组化及蛋白质印迹结果证实,转染黑素细胞核内有SV40T蛋白表达.结论SV40T抗原基因可以成功诱导人黑素细胞的转化.

    作者:王鹰;邓军;杨希川;郝飞;钟白玉;叶庆佾 刊期: 2006年第04期

  • 天津市0~6岁儿童特应性皮炎患病率调查

    目的了解天津市城市和农村0~6岁儿童特应性皮炎(AD)的患病率及患病因素.方法采取整群抽样方法,依据儿童哮喘和过敏国际研究协作组问卷,对天津市城市和农村0~6岁儿童进行问卷调查.结果本次调查涉及天津市城市和农村,收回问卷3 749份,有效问卷3 708份,有41份因填写不规范而未被录入数据库进行统计学分析.城市应答率为84.9%,农村应答率为79.3%,总应答率为82.7%.所调查人群的年龄在不同性别间及城市和农村间分布均衡.经过对调查资料的分析,儿童AD的患病率为2.9%,其中城市为3.5%,农村为2.4%,城市AD患病率高于农村(χ2=3.98,P<0.05).结论天津市AD的患病率为2.9%,城市AD患病率为3.5%,农村AD的患病率为2.4%.

    作者:曾三武;Coenraads PJ;汤乃军;纪黎明;高文新;奚丹;金京姬;魏文国 刊期: 2006年第04期

  • 环丙沙星引起大疱性表皮松解萎缩坏死型药疹一例

    患者女,41岁,于2004年9月8日因咽痛、咳嗽,当天下午4时口服环丙沙星250 mg(中美天津史克药业有限公司出品,批号04040532),2 h后,自觉双眼睑发痒,之后又服250 mg,7 h后出现双眼睑红肿,结膜充血,夜间口中起大量水疱并破破溃.次日面颈部、躯干、四肢起红斑,其上有大量水疱、大疱,疱壁松弛,体温39.6℃左右.住当地医院治疗,给予氟美松30 mg、头孢曲松2 g静脉滴注每日1次.

    作者:吴国春 刊期: 2006年第04期

  • 白癜风相关基因-1的确认及其序列分析

    目的探讨白癜风患者黑素细胞VIT-1基因转录水平的表达情况,分析该基因序列的差异性.方法用半定量RT-PCR法检测黑素细胞VIT-1基因表达水平,克隆VIT-1 ORF cDNA全长并测序,序列差异由CLUSTAL W(1.83)软件分析.结果黑素细胞的VIT-1基因ORF含有81 bp的内含子,为FBXO11的3′端的部分序列,白癜风患者黑素细胞VIT-1基因表达量下降.结论VIT-1不是一个新基因,而是FBXO11,属于F-box蛋白家族成员.

    作者:李永伟;张迪敏;尉晓冬;章一近;许爱娥 刊期: 2006年第04期

  • 丘疹性荨麻疹病因学系统评价

    目的明确丘疹性荨麻疹的病因为单纯性节肢动物等昆虫叮咬所致(单因说),还是也可因食物过敏、消化功能紊乱及感染等引起(多因说).方法应用计算机和人工检索国内外与丘疹性荨麻疹病因学研究有关的文献,按照循证医学系统评价方法分析支持单因说或支持多因说的证据.结果自1952年以来病因学研究的22篇外文文献均支持昆虫叮咬是该病的原因,纳入的9篇中文文献中有7篇支持昆虫叮咬为致病因素,提到其他病因的另2篇文献的可信度存在疑问.从流行病学、组织病理、实验及临床研究证据均支持昆虫叮咬过敏的单因说,未发现其他原因致病的确凿证据.结论丘疹性荨麻疹可能是由于昆虫叮咬引起的过敏所致,其他假说尚缺乏充分依据.

    作者:赵国庆;冉玉平;杨伯艳 刊期: 2006年第04期

  • 副肿瘤性天疱疮一例

    患者男,36岁,因口腔黏膜糜烂、溃疡2个月,全身红斑、丘疹1个月,加重3 d,于2004年11月27日来我院就诊.患者于2个月前无明显诱因颊黏膜、舌面出现糜烂、溃疡,自觉疼痛.

    作者:陈洪;纪华安;肖尹;丁素先;马秀亮;詹庆霞;王庆文 刊期: 2006年第04期

  • 平阳霉素局部注射治疗多发性跖疣临床疗效观察

    跖疣是临床皮肤科的常见病,治疗较为困难,因跖疣发生在足底或趾间等受挤压部位,病变损害常较深,有时可深达肌层组织.以往多采用冷冻、电凝、药物、针刺等治疗,但多数患者不能一次治愈,复发率高[1].我科于2003年6月至2004年12月,采用平阳霉素局部注射治疗多发性跖疣108例,获满意疗效,现报道如下.

    作者:刘学清;曾抗;兰海梅 刊期: 2006年第04期

  • 口服阿维A治疗圆形糠疹二例

    圆形糠疹(远山)[pityriasis rotunda,(Toyama)]是一种少见的角化性皮肤病.对该病目前尚缺乏有效的治疗手段,我们应用阿维A治疗2例患者,取得了满意的疗效.

    作者:王君;徐秀莲;张莹;孙建方 刊期: 2006年第04期

  • 皮肤颗粒细胞瘤一例

    患者女,38岁.因左侧腹股沟起结节10个月,表面出现破溃伴轻度瘙痒1个月来我院就诊.患者自诉10个月前偶然发现左侧腹股沟出现一黄豆大皮下结节,无自觉症状,逐渐增大,未诊治.近1个月表面出现破溃,伴轻度瘙痒及触痛.患者平素体健,否认外伤史,家族史无特殊.

    作者:杨希川;叶庆佾;郝飞;阎衡;钟白玉 刊期: 2006年第04期

  • 小剂量甲氨蝶呤治疗老年泛发性湿疹

    我们于2004年4月至2005年3月以小剂量静脉滴注甲氨蝶呤(MTX)为主药治疗了14例老年泛发性湿疹,取得了较好疗效,现报道如下.

    作者:吴铁强;顾有守 刊期: 2006年第04期

  • 小鼠酸性哺乳动物壳多糖酶基因的表达及对真菌细胞壁的水解作用

    目的克隆和表达酸性哺乳动物壳多糖酶(AMCase),分析其对红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁的水解作用.方法从小鼠胃组织中提取总RNA,逆转录成cDNA,扩增AMCase基因,并构建融合表达载体pET28a(+)-AMCase,表达和纯化AMCase蛋白.测定AMCase与红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁制备物作用后的N-乙酰氨基葡萄糖浓度.结果成功克隆了小鼠AMCase基因,表达并纯化得到了AMCase蛋白,纯化后的AMCase可以水解红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁.结论在原核系统中成功表达的AMCase基因具有水解红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁的活性,提示该蛋白具有潜在的抗真菌功能.

    作者:陈凌;沈柱;刘玉峰;刘斌;高天文 刊期: 2006年第04期

  • 容易误诊的平滑肌错构瘤一例

    患者男,18岁,右背部褐色斑疹13年,触痛伴丘疹8年.约在5岁时发现右背部指甲大褐色斑片,自觉症状不明显.皮疹渐大,8年前出现局部触痛.近1年来皮疹扩大迅速,触痛明显加重,转换体位或冬季遇冷时尤为明显,重时出现米粒大丘疹.曾被诊为硬皮病伴神经损害、咖啡斑伴神经损害、神经纤维瘤病.既往健康,否认外伤史,家族中无类似患者.

    作者:王文岭;杨蓉娅;苏有明;侯晓光 刊期: 2006年第04期

  • 外阴获得性淋巴管瘤一例

    患者女,50岁,因外阴出现多个疣状增殖性皮损1年于2005年4月6日来我院就诊.1年前患者双侧大阴唇出现散在几个丘疱疹,米粒大小,无痛痒感,皮损破溃,有透亮液体流出.皮损不断增多、增大,逐渐累及双侧大阴唇内外侧,部分皮损融合呈乳头瘤样改变,走路时感摩擦不适.在当地医院曾以疱疹给予抗病毒治疗,无效.既往有丹毒病史四五年,发病部位位于右大腿伸侧.2004年发作3次,腹部皮肤也受累,有时伴发热.抗生素治疗有效.

    作者:孙怡;王玉坤 刊期: 2006年第04期

中华皮肤科杂志

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