学术投稿

SV40T抗原基因转染正常人黑素细胞的研究

王鹰;邓军;杨希川;郝飞;钟白玉;叶庆佾

关键词:黑素细胞, 猴病毒40, 抗原, 病毒, 肿瘤
摘要:目的研究SV40 T抗原基因对体外培养的人正常黑素细胞的转化作用.方法用阳离子聚合物SofastTM介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体SV40T-pEGFP导入原代培养的正常人黑素细胞进行稳定表达,G418筛选出阳性克隆,挑独立的单克隆扩大培养,检测SV40T抗原基因及SV40T蛋白在黑素细胞内的表达.结果分离获得转化细胞阳性克隆,提取DNA及RNA后用PCR法成功扩增出288 bp的片段,免疫组化及蛋白质印迹结果证实,转染黑素细胞核内有SV40T蛋白表达.结论SV40T抗原基因可以成功诱导人黑素细胞的转化.
中华皮肤科杂志相关文献
  • 天疱疮和类天疱疮患者唾液与血液中自身抗体的检测

    本研究应用大疱性类天疱疮(BP)和寻常型天疱疮(PV)患者口腔中的唾液进行自身抗体检测,并与其在血清中的滴度相比较,以确定这些患者唾液与血清抗体的相关性及在疾病诊断中的意义[1-3].

    作者:王雅坤;郭英军;金光玉;赵玉铭;陈光;陈洪铎 刊期: 2006年第04期

  • 外阴获得性淋巴管瘤一例

    患者女,50岁,因外阴出现多个疣状增殖性皮损1年于2005年4月6日来我院就诊.1年前患者双侧大阴唇出现散在几个丘疱疹,米粒大小,无痛痒感,皮损破溃,有透亮液体流出.皮损不断增多、增大,逐渐累及双侧大阴唇内外侧,部分皮损融合呈乳头瘤样改变,走路时感摩擦不适.在当地医院曾以疱疹给予抗病毒治疗,无效.既往有丹毒病史四五年,发病部位位于右大腿伸侧.2004年发作3次,腹部皮肤也受累,有时伴发热.抗生素治疗有效.

    作者:孙怡;王玉坤 刊期: 2006年第04期

  • 天津市0~6岁儿童特应性皮炎患病率调查

    目的了解天津市城市和农村0~6岁儿童特应性皮炎(AD)的患病率及患病因素.方法采取整群抽样方法,依据儿童哮喘和过敏国际研究协作组问卷,对天津市城市和农村0~6岁儿童进行问卷调查.结果本次调查涉及天津市城市和农村,收回问卷3 749份,有效问卷3 708份,有41份因填写不规范而未被录入数据库进行统计学分析.城市应答率为84.9%,农村应答率为79.3%,总应答率为82.7%.所调查人群的年龄在不同性别间及城市和农村间分布均衡.经过对调查资料的分析,儿童AD的患病率为2.9%,其中城市为3.5%,农村为2.4%,城市AD患病率高于农村(χ2=3.98,P<0.05).结论天津市AD的患病率为2.9%,城市AD患病率为3.5%,农村AD的患病率为2.4%.

    作者:曾三武;Coenraads PJ;汤乃军;纪黎明;高文新;奚丹;金京姬;魏文国 刊期: 2006年第04期

  • CD147 siRNA对恶性黑素瘤细胞株A375增殖及CD147表达的影响

    目的研究CD147 siRNA转染对恶性黑素瘤细胞株A375中CD147表达及细胞增殖的影响.方法将前期构建的重组质粒pSUPER/CD147 siRNA稳定转染至恶性黑素瘤细胞株A375中,采用半定量RT-PCR法检测转染细胞中CD147 mRNA的表达.采用MTT法检测转染pSUPER/CD147 siRNA对肿瘤细胞增殖的影响.结果转染了pSUPER/CD147 siRNA的恶性黑素瘤细胞株A375中CD147 mRNA表达水平显著下调,其在转染后24 h、48 h和72 h的增殖水平均显著下降.结论siRNA转染能有效抑制恶性黑素瘤细胞株A375中CD147的表达,且能抑制肿瘤细胞的增殖能力.

    作者:陈翔;林静;林伟;粟娟;陈明亮;施为;谢红付;陈服文 刊期: 2006年第04期

  • 平阳霉素局部注射治疗多发性跖疣临床疗效观察

    跖疣是临床皮肤科的常见病,治疗较为困难,因跖疣发生在足底或趾间等受挤压部位,病变损害常较深,有时可深达肌层组织.以往多采用冷冻、电凝、药物、针刺等治疗,但多数患者不能一次治愈,复发率高[1].我科于2003年6月至2004年12月,采用平阳霉素局部注射治疗多发性跖疣108例,获满意疗效,现报道如下.

    作者:刘学清;曾抗;兰海梅 刊期: 2006年第04期

  • 环丙沙星引起大疱性表皮松解萎缩坏死型药疹一例

    患者女,41岁,于2004年9月8日因咽痛、咳嗽,当天下午4时口服环丙沙星250 mg(中美天津史克药业有限公司出品,批号04040532),2 h后,自觉双眼睑发痒,之后又服250 mg,7 h后出现双眼睑红肿,结膜充血,夜间口中起大量水疱并破破溃.次日面颈部、躯干、四肢起红斑,其上有大量水疱、大疱,疱壁松弛,体温39.6℃左右.住当地医院治疗,给予氟美松30 mg、头孢曲松2 g静脉滴注每日1次.

    作者:吴国春 刊期: 2006年第04期

  • 人毛囊内无色素黑素细胞的原子力显微镜观察

    目的用原子力显微镜观察人头发毛囊内无色素黑素细胞的表面结构.方法分离酶Ⅱ消化带毛囊的头皮,游离单个毛囊,以胰酶/EDTA消化之,获取细胞悬液,以添加黑素细胞生长物质的254培养基重悬细胞,常规培养.传第3代后接种到内置云母片的6孔培养板中,细胞贴附到云母片上后,固定,原子力显微镜常温常压下,触摸式扫描.结果毛囊无色素性黑素细胞多呈梭形,有2个突起,少数有3个树突.每个树突无明显的二级分枝,个别在树突侧缘有隆起.在一级树突的顶端可见丝状伪足.结论毛囊内无色素性黑素细胞形态不成熟,不能转运黑素颗粒到角质形成细胞,但它有黑素小体运动的物质基础--丝状伪足.

    作者:张汝芝;朱文元;鲍永军;夏明玉;马佳 刊期: 2006年第04期

  • 皮肤颗粒细胞瘤一例

    患者女,38岁.因左侧腹股沟起结节10个月,表面出现破溃伴轻度瘙痒1个月来我院就诊.患者自诉10个月前偶然发现左侧腹股沟出现一黄豆大皮下结节,无自觉症状,逐渐增大,未诊治.近1个月表面出现破溃,伴轻度瘙痒及触痛.患者平素体健,否认外伤史,家族史无特殊.

    作者:杨希川;叶庆佾;郝飞;阎衡;钟白玉 刊期: 2006年第04期

  • siRNA抑制生存素基因对恶性黑素瘤细胞A375凋亡的影响

    目的探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375生存素基因表达后,对A375细胞凋亡的影响.方法构建针对凋亡抑制基因生存素的siRNA真核表达载体pU-生存素-siRNA,用电穿孔法转染A375细胞,采用蛋白质印迹技术检测生存素的表达,并用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果转染pU-生存素-siRNA后,生存素在A375细胞中的表达(0.24±0.02)较对照组(0.98±0.21)明显下降,试验组细胞的凋亡率(83%)较对照组(28%)明显增加.结论通过RNA干扰技术可抑制生存素的表达,诱导A375细胞的凋亡增加.

    作者:陈思远;程璟;黄长征;钱悦;涂亚庭 刊期: 2006年第04期

  • 副肿瘤性天疱疮一例

    患者男,36岁,因口腔黏膜糜烂、溃疡2个月,全身红斑、丘疹1个月,加重3 d,于2004年11月27日来我院就诊.患者于2个月前无明显诱因颊黏膜、舌面出现糜烂、溃疡,自觉疼痛.

    作者:陈洪;纪华安;肖尹;丁素先;马秀亮;詹庆霞;王庆文 刊期: 2006年第04期

  • 黏液水肿性苔藓

    黏液水肿性苔藓(lichen myxedematosus,LM)又称丘疹性黏蛋白沉积症(papular mucinosis)、硬化性黏液水肿(scleromyxedema).临床以局限性或全身性苔藓样丘疹及硬皮病样改变,病理以皮肤中纤维母细胞增殖、酸性黏多糖过度沉积为特征.它是临床上比较少见的一种慢性进展性代谢障碍性疾病.

    作者:肖子娥;罗迪青 刊期: 2006年第04期

  • 皮肤Rosai-Dorfman病一例

    患者女,52岁.2个月前无意中发现右上臂一鸽蛋大小肿块,质地较硬,无压痛,表皮发红,未予重视.1个月前无明显诱因出现发热,体温波动于37.5℃~39.6℃,常于凌晨2时及午后体温升高,伴有畏寒、多汗、恶心及全身乏力等症状.自述曾长时间接触过聚乙烯类物质.否认有外伤史及其他疾病史.

    作者:李雪梅;谢小志;祁旦巳;赵志光;张大贵;王宗敏;王兰 刊期: 2006年第04期

  • 阿维A治愈一例连续性肢端皮炎

    患者男,43岁.因反复甲周起红斑、脓疱5年,加重并泛发四肢2年于2003年9月5日入院.初起无诱因于左拇指甲下出现针头大的脓疱,脓疱破溃后形成红斑、黄色痂皮,继之红斑下方再次出现脓疱,如此反复未引起重视.2年前20个指趾甲出现类似损害,甲板相继消失,关节僵直,活动受限,皮损进一步向四肢近端蔓延.患病过程中无发热,曾患过肺结核,已治愈.

    作者:宋翔;林培森 刊期: 2006年第04期

  • Wells综合征一例

    患者男,61岁,因右下肢和中下腹部皮肤反复糜烂伴疼痛2年入院.入院前2年,患者右踝关节部皮肤发红肿胀,伴有轻度瘙痒疼痛,局部不发热,也不伴全身发热,用抗生素治疗无效,皮肤逐渐糜烂,有大量渗出物,改服中药后皮肤糜烂面逐渐好转.入院前1年半右踝关节皮损复发,糜烂面扩展至右小腿中下段,用抗生素治疗仍无效;之后反复发作,时好时愈.

    作者:刘太华;张忠奎;许泽娟 刊期: 2006年第04期

  • 小剂量甲氨蝶呤治疗老年泛发性湿疹

    我们于2004年4月至2005年3月以小剂量静脉滴注甲氨蝶呤(MTX)为主药治疗了14例老年泛发性湿疹,取得了较好疗效,现报道如下.

    作者:吴铁强;顾有守 刊期: 2006年第04期

  • 蕈样肉芽肿皮损中增生性T细胞与树突细胞的研究

    目的探讨蕈样肉芽肿(MF)不同时期浸润性皮损中增生性T细胞与树突细胞的分布特征.方法皮肤肿瘤组织石蜡切片,单克隆抗体免疫组化染色.结果MF皮损中Ki-67+细胞和皮肤淋巴细胞相关抗原阳性(CLA+)细胞均明显增多,多数Ki-67+细胞CD4+和CLA+,MF肿瘤期真皮浸润组织中的Ki-67+细胞明显多于斑片期/斑块期(P<0.01),且形态多不规则,异型性明显;未见CD83+/Ki-67+树突细胞,但树突细胞周围可见大量的Ki-67+增生性T细胞,CD83+树突细胞与Ki-67+中瘤T细胞紧密接触.结论CLA+/Ki-67+T细胞在MF皮损中表达的程度和免疫病理特征对于MF的早期发现和转化进展可能具有免疫病理学诊断意义.

    作者:冯爱平;赵静;吴艳;钱悦;陈思远;连昕;涂亚庭 刊期: 2006年第04期

  • 皮肤再生不良合并大疱性表皮松解症及先天性截趾一例

    患儿女,3 d.因双下肢皮肤缺损、左足趾水疱3 d,于2005年7月16日就诊.患儿出生后即被遗弃,故其出生史及家族史不详.

    作者:陈明;潘红梅 刊期: 2006年第04期

  • 银屑病发病的遗传与免疫机制

    银屑病是慢性炎症性皮肤病,其特征包括表皮角质形成细胞(KC)增生过度和异常分化,淋巴细胞(绝大多数为T细胞)浸润,真皮血管改变,如血管新生、扩张、迂曲、高内皮小血管形成.银屑病发生的复杂性体现在细胞、基因组和遗传水平上,浸润至皮肤的多种类型的白细胞改变皮肤常驻细胞的生长和分化,同时也影响1300多种基因的表达[1].

    作者:满孝勇;郑敏 刊期: 2006年第04期

  • 广西壮族系统性红斑狼疮与HLA-DQA1等位基因相关性研究

    系统性红斑狼疮(SLE)发病与多种HLA等位基因相关.为了解广西地区壮族SLE患者临床表现与HLA相关性,我们应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对广西壮族SLE患者进行HLA-DQA1等位基因分型研究.

    作者:苏家光;梁伶;郑文军;刘栋华;莫雪安;林有坤;严煜林 刊期: 2006年第04期

  • SV40T抗原基因转染正常人黑素细胞的研究

    目的研究SV40 T抗原基因对体外培养的人正常黑素细胞的转化作用.方法用阳离子聚合物SofastTM介导基因转染,将含有SV40T抗原基因的真核表达载体SV40T-pEGFP导入原代培养的正常人黑素细胞进行稳定表达,G418筛选出阳性克隆,挑独立的单克隆扩大培养,检测SV40T抗原基因及SV40T蛋白在黑素细胞内的表达.结果分离获得转化细胞阳性克隆,提取DNA及RNA后用PCR法成功扩增出288 bp的片段,免疫组化及蛋白质印迹结果证实,转染黑素细胞核内有SV40T蛋白表达.结论SV40T抗原基因可以成功诱导人黑素细胞的转化.

    作者:王鹰;邓军;杨希川;郝飞;钟白玉;叶庆佾 刊期: 2006年第04期

中华皮肤科杂志

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