hTERT反义寡核苷酸抑制Hut78细胞端粒酶活性及诱导细胞凋亡的研究

徐秀莲；戚金亮；尚淑贤；陈声利；曾学思；孙建方

关键词：淋巴瘤, T细胞, 皮肤, 寡核苷酸类, 反义, 端粒, 末端转移酶

摘要：目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株端粒酶活性及细胞生长的影响,为CTCL基因治疗提供新的基因靶点.方法采用脂质体介导的基因转染方法,将不同浓度(10μmol/L、20 μmol/L、30 μmol/L)的寡核苷酸分别导入CTCL细胞株Hut78中;分别于不同的时间,应用端粒酶重复序列扩增及酶联免疫吸附方法(PCR-ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞仪技术等动态观察转染细胞中端粒酶活性、hTERT mRNA表达以及细胞凋亡的变化.结果经hTERT反义寡核苷酸(AODN)作用72 h后,细胞端粒酶的活性明显下降,hTERT mRNA的表达减弱,并可观察到细胞凋亡,凋亡细胞发生率为13.05%.细胞生长抑制作用有明显的时效性,以30μmol/L、72 h时下降明显.而有义寡核苷酸(SODN)组和对照组以上指标均无明显变化(P＞0.05).结论hTERT反义寡核苷酸可显著抑制CTCL细胞的端粒酶活性,抑制细胞生长增殖,诱导细胞凋亡.

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多部位红色毛癣菌感染分离菌株DNA分型研究

目的探讨多部位红色毛癣菌感染不同部位分离菌株基因型的差异.方法采用巢式PCR扩增真菌rDNA非转录间隔区(NTS)中Trs-1片段,检测基因多态性.并比较同一患者不同感染部位分离菌株的基因型差异.结果受试36株菌株按照PCR指纹图共分为10型,基因型分布与感染部位关系不大.在17例受试患者中,8例不同感染部位分离得到的菌株基因型有差异,且与不同感染部位的病程差异无关.结论多部位红色毛癣菌感染可能为多菌株引起,提示部分多部位皮肤癣菌感染患者不同部位皮肤癣菌感染的传染源可能来源于外界,而与机体原已存在的感染灶关系可能不大.

作者：陈辉；刘维达；沈永年刊期： 2005年第12期
卡波西形血管内皮瘤一例

患者男,21岁,因左下肢肿胀、疼痛4个月,伴结节、肿块2个月入院.4个月前患者出现左下肢肿胀,轻度疼痛.2个月前左下肢、腹股沟、会阴部出现蓝紫色及暗红色结节,逐渐增大.

作者：罗益金；林宝珠；曾凡钦；陈明春刊期： 2005年第12期
巨大疣状血管瘤一例

患者男,21岁,因右小腿疣状增生物21年来诊.患者出生时即发现右小腿胫前有一约2 cm×2 cm的紫红色近圆形增生物,无自觉症状.皮损随年龄增长而增多,向上延至右臀部,向下至右足趾,表面变为黑褐色且粗糙坚硬,易出血.夏季易出血感染甚至生蛆,伴恶臭及疼痛.

作者：倪海洋；齐蔓莉；刘全忠；傅志宜刊期： 2005年第12期
环氧化酶2在蕈样肉芽肿皮损组织中的表达

环氧化酶(cyclooxygenase,COX)是体内花生四烯酸合成前列腺素的限速酶.COX有COX-1和COX-2两种亚型,其中COX-2为诱导型酶,而COX-1恒定表达于多种组织细胞.许多研究表明,在肿瘤细胞的增殖和转移以及一些炎性疾病中,均伴有COX-2活性的增强和前列腺素合成的增加[1,2].我们研究了15例蕈样肉芽肿病损组织中COX-2的表达情况,以探讨COX-2在蕈样肉芽肿中的作用.

作者：王雅坤；赵玉铭；陈光；程琳；金光玉；陈洪铎刊期： 2005年第12期
肿瘤坏死因子α在扁平苔藓皮损中的表达

肿瘤坏死因子α(TNF-α)属于前炎性细胞因子,能调节机体多种细胞的增殖和分化,介导炎症反应,参与免疫调节、免疫病理和组织修复过程[1].

作者：丁政云；李鑫；王欣；赵保廷；高顺强；刘丽娟；蔡丽；徐素芹刊期： 2005年第12期
p73蛋白在正常人皮肤和表皮肿瘤中的表达

目的探讨p73蛋白在正常人皮肤和不同表皮肿瘤皮损中的表达及意义.方法应用免疫组化方法检测19例脂溢性角化病、16例基底细胞癌、11例Bowen病、5例鳞状细胞癌及10例正常人皮肤p73、p53、Ki67的表达.结果在正常人表皮基底层、毛囊外毛根鞘外层基底样细胞和皮脂腺生发细胞有p73的表达;在基底细胞癌和脂溢性角化病的基底样细胞、Bowen病中异形性明显的瘤细胞p73呈高表达,鳞状细胞癌和脂溢性角化病中的鳞状细胞呈弱阳性或不表达.脂溢性角化病、Bowen病、基底细胞癌、鳞状细胞癌之间p73蛋白表达差异有统计学意义(H=12.71,P＜0.01),其中基底细胞癌的表达强.Ki67在皮肤肿瘤之间差异也有统计学意义(H=14.12,P＜0.01),但p53差异无统计学意义(H=2.058,P＞0.05).在各组样本中,p73的表达与p53、Ki67无显著相关性(P＞0.05).结论p73蛋白可能在皮肤分化中起重要作用.

作者：沈宏；唐旭；王一玲；许爱娥刊期： 2005年第12期
以巨大水疱为主要表现的固定性药疹一例

患者男,43岁.因躯干、四肢起红斑、大疱2 d,于2004年12月24日就诊.患者因上呼吸道感染、发热,自服解热镇痛、抗感冒药,第3天,躯干、四肢起散在性红斑,继而在红斑基础上起大疱,自觉痒及灼痛,并伴轻微畏寒、头痛、乏力、食欲减退等症状.

作者：徐海涛；张开明；李新华刊期： 2005年第12期
伴发副肿瘤性天疱疮的Castleman瘤——附10例报告

目的了解Castleman瘤伴发副肿瘤性天疱疮的临床特点.方法分析总结我科诊治的10例Castleman瘤伴发副肿瘤性天疱疮的临床特点和治疗方法.结果Castleman瘤为我国常见伴发副肿瘤性天疱疮的肿瘤,其临床表现、皮损和肿瘤的病理学特点、CT及免疫学特点都较独特.肿瘤切除手术中给予静脉滴注丙种球蛋白,对降低术后呼吸道症状的出现,使患者早日康复是有益的.结论由于肿瘤直接产生抗体致病,因此早期诊断、早期切除肿瘤,是成功治疗本病的关键.

作者：朱学骏；王京；陈喜雪；王仁贵；张澜波；李挺；王爱平；杨淑霞；涂平；李若瑜；吴艳；杨海珍；季素珍刊期： 2005年第12期
遗传性对称性色素异常症一家系的DSRAD基因突变鉴定

遗传性对称性色素异常症(DSH,MIM127400)是一种好发于四肢末端的色素沉着伴色素减退的常染色体显性遗传病.2003年高敏等[1]将DSH的致病基因定位到1q11-1q21上,姜祎群等[2]和李明等[3]近也证实了这一结果.我们发现一个DSH家系,通过引物设计、PCR扩增和直接测序,分析了该家系DSRAD/ADAR1基因的致病性突变.

作者：张学奇；吴慧珍；林霖霖；李秉煦刊期： 2005年第12期
白介素18结合蛋白在银屑病患者外周血单一核细胞中的表达

银屑病的致病机制至今尚未明了,目前大多数人认为Th1细胞介导的细胞免疫在其发病中起着重要作用.白介素18结合蛋白(IL-18BP)有拮抗IL-18功能,抑制干扰素γ(IFN-γ)的产生,以早期Th1细胞因子抑制剂的形式参与Th1反应的调控.

作者：黄琼；郑志忠；项蕾红；祝禄川刊期： 2005年第12期
检测泌尿生殖道感染常见性病病原体基因芯片的构建

目的建立检测泌尿生殖道性传播感染常见病原体的基因芯片技术.方法首先将9种目的病原体分为病毒、细菌及低级真核生物三类,分别设计1对荧光标记的通用引物,利用多重PCR技术使3对引物置于同一反应体系进行扩增,再将特异性探针点样于玻片上制备成基因芯片,与扩增产物进行杂交、扫描并分析结果.结果单重PCR和多重PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳均可见相应的阳性条带.扩增产物与基因芯片杂交后扫描,各病原体均可见荧光信号,与所对应的特异性探针位置相吻合.结论本研究初步构建的基因芯片技术具有特异、灵敏、快速及能一次性同时检测多种病原体的特点.

作者：吴黎明；孙建方；蒋明军；刘全俊；陈岳明；张红河刊期： 2005年第12期
皮肤原发性血管纤维黏液性T细胞淋巴瘤一例

目的探讨皮肤原发性T细胞淋巴瘤一些新的临床病理亚型特点.方法对1例具有新的临床病理特点的T细胞淋巴瘤多次活检、多种病理方法检查及临床资料综合分析,包括常规H-E染色、特殊染色、免疫组化染色、基因重排及PCR检测.结果皮损为柔软的多发结节,并有黏液囊肿形成;肿瘤细胞以小T淋巴细胞为主,主要浸润真皮及皮下,无明显亲表皮现象.部分肿瘤细胞有亲血管现象,伴明显血管纤维黏液样基质.免疫组化及特殊染色结果显示,CD3,CD43,CD45RO均阳性,CD56少数阳性;CD68,CD79α,CD20,CD30,CD117,ALK,S-100,CD45R,EMA,SMA均阴性;黏液基质阿新蓝染色阳性;基因重排TCR-β阳性;PCR检测EBV病毒阴性.结论伴血管纤维黏液样基质的T细胞淋巴瘤是皮肤原发性T细胞淋巴瘤一种新的、独特的亚型,不属于亲表皮的蕈样肉芽肿亚型.

作者：翁艳；刘晋红；于桥医；马萍；杨漪；廖松林刊期： 2005年第12期
儿童腹股沟尖锐湿疣一例

患者男,1岁零8个月.发现腹股沟疣状赘生物伴瘙痒2月.患儿母亲于就诊前2个月发现患儿右腹股沟区有数个米粒大小疣状丘疹,随之皮损迅速增大,数目增多,部分皮损逐渐融合成条带状赘生物,皮损呈红褐色,无破溃及出血,自觉瘙痒.在当地医院就诊,曾诊断为痣及皮肤肿瘤等,未治疗.

作者：李玉叶；何黎刊期： 2005年第12期
恶性黑素瘤和普通痣细胞痣组织中双链RNA依赖的蛋白激酶的表达

目的探讨恶性黑素瘤和普通痣细胞痣组织中双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)的表达情况,并分析PKR与恶性黑素瘤的细胞增殖程度及临床病理参数的关系.方法应用免疫组化法检测42例恶性黑素瘤及25例普通痣细胞痣组织中PKR及增殖细胞核抗原的表达.结果恶性黑素瘤中PKR阳性表达率显著高于普通痣细胞痣组织.恶性黑素瘤中PKR的表达水平与增殖细胞核抗原的表达呈显著负相关;与患者性别、年龄、有无淋巴结转移及TNM分级等临床病理特征均无明显相关性.结论PKR在恶性黑素瘤细胞增殖过程中具有重要作用.

作者：高滢；李春英；马翠玲；殷河慧；高天文刊期： 2005年第12期
聚合酶链反应快速诊断浅部真菌病

目的评价聚合酶链反应(PCR)技术直接从临床标本中检测浅部真菌病病原真菌的方法.方法采用蛋白酶K消化法和煮沸法处理临床标本,从中提取致病菌DNA,然后用真菌通用引物ITS1进行PCR扩增检测,并与直接镜检和培养法作对比.结果共收集112例临床标本,PCR检测、直接镜检和培养的敏感性分别为80.7%、96.5%和70.2%,特异性分别为100%、89.1%和100%,阳性预测值分别为100%、90.2%和100%,阴性预测值分别为83.3%、96.1%和76.4%.PCR方法在24 h内即可完成从标本处理至结果判读的全过程.结论PCR检测具有较好的特异性和准确性,且比培养缩短了近2周的时间,为临床快速诊断和及时、合理地治疗浅部真菌病提供参考.

作者：李筱芳；陈辉；崔凡；陈伟；吕桂霞；沈永年；刘维达刊期： 2005年第12期
血管内皮生长因子及其受体在尖锐湿疣组织中的表达

血管内皮生长因子(VEGF)有两种特异性受体,分别为含激酶插入区受体(KDR)和fms样酪氨酸激酶-1(Flt-1),主要分布在血管内皮细胞表面[1].研究表明在人类实体肿瘤中VEGF表达升高[2].本实验用RT-PCR方法检测VEGF、Flt-1、KDR的mRNA在尖锐湿疣组织的表达,探讨在尖锐湿疣发病机制的作用.

作者：李芃；涂亚庭；陈小强刊期： 2005年第12期
淋球菌mtr系统的IR区基因突变与其多重耐药性的关系

目的探索多传递耐药(mtr)系统反向重复序列(IR)区基因突变与淋球菌染色体介导多重耐药性的关系.方法琼脂稀释法做淋球菌药敏试验,选择耐不同药物的菌株,聚合酶链反应扩增包含IR区的目的基因,然后对扩增产物测序.结果2株敏感株及5株仅耐青霉素菌株无IR区基因突变,17株多重耐药菌株中,1株同时耐青霉素和阿奇霉素的淋球菌有IR区碱基T/A,T/A插入,其余耐药株IR区均有碱基A/T缺失.结论淋球菌染色体mtrR启动子区域的IR区基因突变会引起淋球菌多重耐药株的产生,增加淋球菌对抗生素的抗性.

作者：林能兴；张丽霞；黄长征；陈宏翔；涂亚庭刊期： 2005年第12期
指状瘢痕疙瘩一例

患者男,50岁,农民,因左腹部指状增生物7年于2004年10月22日就诊.患者于1989年11月因膀胱结石行手术治疗.术后1年于切口顶端出现一约3～4 cm长的指状增生物,无自觉不适,未予治疗,后自行脱落.

作者：李靖华；周晓鸿刊期： 2005年第12期
皮肤转移性恶性血管内皮细胞瘤一例

患者男,41岁.因左小腿肿块1年半,咯血6个月,全身紫色结节3个月入院.患者于1年半前于左小腿近腘窝深部触及一山核桃大小肿块,不痛不痒,未行诊治.

作者：马东红；劳力民刊期： 2005年第12期
坏疽性脓皮病合并药疹一例

患者女,61岁,因左上胸溃疡伴疼痛7个月,于2004年12月4日就诊.患者7个月前发现左锁骨有一蚕豆大小结节,无不适,到某医院外科求诊,拟脂肪瘤行手术切除.术后常规换药、抗菌治疗,创面无愈合,且其周围逐渐出现反复坏死,剧烈疼痛,又先后4次拟诊术后感染,窦道形成,行外科手术,术后使用多种抗生素,病情继续恶化.既往史无异常.

作者：廖列辉；张锡宝；范瑞强；刘文静刊期： 2005年第12期