沈景刚；周梅华；李雪；吴迪；鲁严
目的:检测错配修复基因hMLH1在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的甲基化水平并分析其预后意义.方法:调取有完整随访资料的68例CRC患者术后组织蜡块,所有患者均接受5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)及其衍生物为基础的辅助化疗4-6个周期,显微切割结合甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测hMLH1基因启动子区域甲基化.结果:68例CRC组织中,16例(23.5％)检出hMLH1基因启动子甲基化,显著高于相应正常组织(3/68,4.4％,P=0.001).尽管hMLH1基因异常甲基化与患者临床病理参数无关,生存分析表明hMLH1甲基化与无进展生存(progression-free survival,PFS)和总生存(overall survival,OS)获益有关(P值分别为0.039、0.045).结论:hMLH1基因甲基化可望成为5-Fu辅助化疗CRC患者预后判断的新型分子标记.
作者：朱卉；汪竹；袁昕；焦南林；张有为；童建东 刊期： 2012年第03期
目的:研究促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)与胎儿生长发育的相关性.方法:根据出生体重与胎龄的关系将新生儿分为3组:小于胎龄儿(SGA组)30例、大于胎龄儿(LGA组)30例、适于胎龄儿(AGA组)30例,分别测定出生时身长、体重,放射免疫法测定脐血ACTH以及Cor水平.结果:脐血ACTH水平分别为:LGA组(26.46±7.73) ng/ml、AGA组(28.64±7.12)ng/ml、SGA组(29.30±8.33) ng/ml,三组间比较无显著差异(P=0.336),脐血Cor水平分别为LGA组(7.11±2.70) ng/ml、AGA组(11.84±3.88) ng/ml、SGA组(18.80±5.27) ng/ml,三组间比较:SGA组＞AGA组＞LGA组,各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:血清Cor与胎儿生长发育相关,对生长发育起调节作用.
作者：王旭；朱子阳；石星 刊期： 2012年第03期
颅脑外伤术后并发大面积脑梗死病例并不少见,是一种严重并发症,有极高的病死率及致残率.三峡大学第三临床医学院葛洲坝中心医院于2004年5月～2009年12月共收治颅脑外伤术后并发大面积脑梗死患者16例,现报告如下.
作者：刘从国；张光辉；程浩；徐昌林；孙拯 刊期： 2012年第03期
目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TET)联合化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:MKN-45细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,细胞长至亚单层后加TET和(或)PTX,连续培养48 h.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖情况,DAPI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果:TET和PTX单药或联合均呈剂量依赖性地抑制MKN-45细胞增殖,两药联合时IC50较两药单用时显著降低(P＜0.05).DAPI染色和流式细胞仪显示TET和PTX联合用药组细胞凋亡率显著高于单药组(P＜0.05).结论:TET联合PTX对胃癌细胞的增殖抑制及凋亡诱导有良好的协同效应.
作者：郑锡凤；李晓林；何晓璞；徐伟；唐丹；张皓；孙为豪 刊期： 2012年第03期
目的:观察完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导炎症性疼痛的现象,并探究背根神经节(DRG)部位注射神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)抑制剂7-硝基吲唑(7-nitroindazole,7-NI)对于炎症性疼痛是否有镇痛作用并简要探讨其镇痛机制.方法:小鼠足底注射10 μl CFA诱导炎症性疼痛动物模型,使用von Frey纤维丝采用up-and-down的方法测定小鼠的50％足底回缩阈值(50％ paw withdrawal threshold,50％PWT)作为痛觉行为学的评价指标.在小鼠的背根神经节部位微量注射10 μg 7-NI观察50％PWT的变化情况.用免疫印迹的方法观察炎症相关的降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)在CFA诱导模型后、造模后给予7-NI和nNOS基因敲除小鼠造模后的表达情况.结果:与DMSO组相比,7-NI组造模后2～12 h 50％PWT显著升高.观察到CGRP的表达量在CFA诱导后增加,而在给予7-NI和nNOS基因敲除组内CGRP的表达增加可以被逆转.结论:小鼠DRG部位注射7-NI对炎症性疼痛具有镇痛作用,且炎症性疼痛中CGRP表达量的增加可能是一氧化氮(nitric oxide,NO)在DRG内起疼痛敏感性作用的下游机制.
作者：孙伟翔；徐海兵；朱东亚 刊期： 2012年第03期
目的:探讨下调miR-27a对U87胶质瘤细胞的影响.方法:分别用慢病毒干扰质粒miRZip-27a anti-miR-27a microRNA construct或慢病毒空质粒pGreenPuro Scramble Hairpin Control-Construct与慢病毒包装质粒混合物共转染293T细胞,获得慢病毒颗粒命名为Lt-I和Lt-NC.然后分别用慢病毒Lt-I和Lt-NC感染U87胶质瘤细胞,通过流式细胞仪筛选出稳定感染的U87胶质瘤细胞.通过定量PCR法分别检测稳定感染的U87细胞和未感染的空白U87细胞miR-27a,CCK-8法检测胶质瘤细胞增殖情况,Transwell侵袭试验检测胶质瘤细胞的侵袭能力.结果:相对于未感染慢病毒的空白U87胶质瘤细胞,稳定感染Lt-I的U87胶质瘤细胞miR-27a表达明显下调、细胞增殖减缓、侵袭能力降低,而感染Lt-NC组(阴性对照组)则未见此改变.结论:miR-27a的下调能有效抑制U87胶质瘤细胞的增殖,降低U87胶质瘤细胞的侵袭能力.
作者：包庆泉；冯素银；邵君飞 刊期： 2012年第03期
目的:构建系统表达S100A16基因型小鼠,为研究S100A16基因的生物学功能提供模型动物.方法:将S100A16cDNA插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射方法建立转基因小鼠.PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用定量PCR(QPCR)方法筛选高表达品系.结果:成功构建S100A16转基因载体,建立了S100A16转基因小鼠,通过PCR及QPCR方法筛选出两个高表达品系(line A,line B).结论:建立了系统表达S100A16的转基因小鼠,转入的S100A16基因在脂肪、肝脏、肌肉、肺等组织高表达,为研究S100A16的生物学功能特别是在肥胖中的作用及机制提供了动物模型.
作者：杜新丽；薛一；张媛媛；张日华；刘云 刊期： 2012年第03期
目的:总结主动脉窦瘤的临床特点和外科手术治疗方法.方法:82例主动脉窦瘤破裂患者均于体外循环下行主动脉窦瘤修补术.其中右冠窦破入右室48例,右冠窦破入右房16例,无冠窦破入右房18例.本组包括室间隔缺损39例,主动脉瓣关闭不全23例.除修补窦瘤外,同时行室间隔缺损修补术39例,主动脉瓣置换术5例,主动脉瓣成形术16例,右心室流出道疏通术5例,二尖瓣置换术1例,三尖瓣成形术8例,肺动脉瓣穿孔修补1例,主动脉瓣下狭窄切除1例.结果:本组患者全部治愈出院.术后1例因残余分流行二次手术矫治,术后主动脉瓣中度反流再次成型术1例,轻度主动脉瓣关闭不全4例,微量残余分流2例.随访患者无死亡,手术治疗效果良好,心功能改善明显.结论:主动脉窦瘤破裂明确诊断即为手术指征.应尽早手术,采取适当、有效的手术方法,疗效满意.
作者：李倩；刘林力；陈立华；于丁；马千里；刘苏 刊期： 2012年第03期
目的:探讨高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株MS-1凋亡及其可能机制.方法:体外培养MS-1细胞,用含有不同浓度葡萄糖(5.6、25.0和33.6 mmol/L)的培养液分组培养12、24h.流式细胞术分析各组细胞凋亡率变化；四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖率变化；RT-PCR分析GRP78、CHOP、caspase-3、caspase- 12 mRNA表达变化情况；Western blot分析GRP78、CHOP蛋白表达变化情况.结果:与5.6 mmol/L组相比,培养12 h及24h后,25.0和33.6 mmol/L组MS-1细胞凋亡率显著增加(P＜0.05);而细胞增殖率显著下降(P＜0.05),且呈浓度和时间依赖性.进一步研究表明,在高糖刺激12 h及24h后,caspase-3、caspase-12 mRNA表达显著上调(P＜0.05),CHOP mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P＜0.05)；而GRP78 mRNA和蛋白表达水平在刺激12 h后显著上调,24h后却显著下降(P＜0.05).结论:高糖可以促进胰岛内皮细胞凋亡增加,并呈浓度和时间依赖性升高,其机制可能与启动胰岛内皮细胞内质网应激有关.
作者：刘璇；徐宽枫；陈恒；许馨予；杨涛 刊期： 2012年第03期
目的:观察耐吉西他滨胰腺癌细胞株(SW1990/GZ)上皮间质转化的现象.方法:倒置显微镜下观察亲代SW1990细胞与SW1990/GZ细胞的形态差别;流式细胞仪检测细胞周期；免疫印迹法(Western blot)检测上皮间质转化相关蛋白表达；Transwell小室测定细胞侵袭迁移能力；通过表面特异抗原(CD44+、CD24+和CD133+)标记流式细胞仪检测肿瘤干细胞比例.结果:在形态学上,SW1990/GZ表现出明显的间质细胞特征,与亲代SW1990相比处于G1期的细胞无明显差异；SW 1990/GZ细胞低表达上皮细胞标志物E-cadherin,而高表达间质细胞的标记物Vimentin; SW1990/GZ细胞侵袭和迁移能力明显增强(P＜0.01)；与亲代细胞SW1990相比,SW1990/GZ细胞中CD44+CD24+细胞比例以及CD133+细胞比例分别提高了2倍和4倍以上(P＜0.01).结论:SW1990耐吉西他滨细胞株(SW1990/GZ)发生了明显的上皮间质转化过程,肿瘤干细胞比例明显增多.
作者：王辉；张烨；吴峻立；徐泽宽；苗毅 刊期： 2012年第03期
目的:采用经济、可靠的方法合成2,6-二甲基-L-酪氨酸.方法:通过O-乙氧甲酰基-3,5-二甲基-4-氯甲基苯酚和(S)-2-[N-(苄基脯氨酰基)-氨基]-二苯甲酮-Ni-甘氨酸[(S)-BPB-Ni-Gly,手性Ni络合物]络合物缩合的方法立体选择性地合成2.6-二甲基-L-酪氨酸.结果:由3,5-二甲基苯酚出发经4步反应得到2,6-二甲基-L-酪氨酸,总收率34.3％.结论:该法具有原料廉价易得、反应条件温和、可重复的特点.
作者：郁蕾蕾；陈佳佳；刘金春；李晓闻；常磊；厉廷有 刊期： 2012年第03期
目的:探讨甲状腺良、恶性病变CT征象的鉴别与诊断.方法:选取南京医科大学附属无锡人民医院收治的120例甲状腺病变患者,观察CT图像中甲状腺病变的密度、钙化、包膜、边缘、强化方式等表现,对比分析良恶性病变之间的不同点,并分析与病理结果的相符率.结果:本组120例甲状腺病变患者中,术前CT诊断为良性病变89例、恶性病变31例,该诊断和术后病理结果比较,差异无统计学意义(P＞ 0.05).甲状腺良恶性病变CT征象对比:两者微小钙化、无包膜、边缘不清及病灶是否单发方面具有统计学差异(P＜0.05),而在密度是否均匀、有无壁结节及强化方式方面无统计学意义(P＞0.05).结论:甲状腺病变患者采用CT检查进行术前诊断,可以较准确地区分其良恶性；病灶边缘不规则、境界不清,细小钙化、无包膜是甲状腺恶性病变的特征性表现,包膜完整、结节呈囊性多为良性病变,仔细观察CT征象有助于鉴别与诊断.
作者：陆艳艳；邹新农；李威 刊期： 2012年第03期
目的:评估尿沉淀细胞TWIST1基因启动子甲基化状态在膀胱癌诊断中的价值.方法:用实时荧光定量PCR的方法,对50例临床确诊的膀胱癌患者、13例非肿瘤性尿路疾病患者、7例健康志愿者检测了尿沉淀细胞TWIST1基因启动子的甲基化状态;同时行尿脱落细胞学检查.结果:50例膀胱癌患者中尿脱落细胞TWIST1基因启动子甲基化阳性率为64.0％(32/50),对照组均未发现甲基化改变,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).TWIST1基因启动子甲基化率有随组织分期升高的趋势,但在不同分级、分期膀胱癌中的差异无显著性.实时荧光定量PCR法检测尿液中TWIST1基因启动子甲基化的敏感性和特异性分别为64.0％、100.0％.而尿脱落细胞学检查阳性率为48.0％( 24/50),其敏感性和特异性分别为48.0％和100.0％.结论:尿脱落细胞TWIST1基因启动子的甲基化检测诊断膀胱癌敏感性和特异性均较高,且无创、无痛苦,可作为早期诊断膀胱癌的敏感指标.
作者：陆明；钱麟；潘彬；陈建刚；赵枰 刊期： 2012年第03期
目的:探讨64层螺旋CT血管成像(CTA)在肠系膜上动脉(SMA)夹层诊断中的应用价值.方法:回顾性分析15例经64层螺旋CT证实SMA夹层患者的临床及影像资料,结合横断位图像及后处理重建图像,分析总结SMA夹层的影像学特征.结果:64层螺旋CTA的典型表现为:动脉期SMA弧形充缺损影,与主动脉夹层的真假腔类似,真腔变细,呈线样改变,假腔扩大,挤压真腔；9例可清晰显示内膜片,12例患者假腔在动脉期呈低密度影,3例患者假腔呈瘤样扩张,动脉期呈高密度影,1例假腔不规则强化,考虑假腔内伴血栓形成;后处理图像亦可清楚显示夹层累及范围及侧枝情况.结论:64层螺旋CTA及后处理技术能够无创、快速、准确的显示SMA夹层,为SMA夹层的病情评估提供可靠信息,对及时采取相应的治疗措施、降低肠缺血、坏死的发生率具有重要的临床意义.
作者：林林；江泓；谈旭东 刊期： 2012年第03期
目的:建立简单有效地获取IκB激酶复合物ε(inhibitor-κB kinaseε,IKKε)基因敲除小鼠血管内皮细胞的培养方法.方法:在超净台中取小鼠主动脉,撕去其外膜和脂肪组织,纵行剖开血管,切成1 mm × 1mm的血管块,内面朝下贴于培养皿底部,加入含内皮细胞生长辅助因子(ECGS)的DMEM培养液,贴壁培养；用倒置显微镜观察细胞形态并用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光的方法进行鉴定.结果:72 h后在倒置显微镜下可见内皮细胞从血管块边缘游出,12～14 d血管内皮细胞融合成片,Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测呈阳性.结论:本方法可获取纯度高、结构和功能良好的IKKε基因敲除小鼠血管内皮细胞.
作者：戚永超；陈文；朱一帆；万辛；曹长春；陈鑫 刊期： 2012年第03期
目的:立体选择性地合成(s)-2,4,6-三甲基苯丙氨酸.方法:2.4,6-三甲基苯甲酸还原生成2,4,6-三甲基苯甲醇(1),再溴化生成2,4,6-三甲基溴苄(2),所得溴苄和(S)-BPB-Ni-Gly络合物(3)缩合,经分离立体选择性地得到(S)-Tmp-BPB-Ni络合物(4),(4)经酸解得到(S)-2,4,6-三甲基苯丙氨酸(5).结果:以52.8％的总收率立体选择性地合成得到(S)-2,4,6-三甲基苯丙氨酸.结论:本合成方法原料廉价易得、操作简单、反应收率高.
作者：李晓闻；郁蕾蕾；刘金春；陈佳佳；常磊；厉廷有 刊期： 2012年第03期
目的:观察单次剂量5-氟尿嘧啶(5-Fu)对多器官功能障碍大鼠多脏器功能及其存活时间的影响.方法:应用多发性骨折+烫伤+绿脓杆菌感染方法制造SD大鼠急性多器官功能障碍模型.动物被随机分成多器官功能障碍综合征模型组(MODS模型组,n=36)和模型+5-Fu(50 mg/kg)处理组(5-Fu组,n=26),每组分4个亚组.分别于模型复制成功后24、48、72、96 h处死大鼠,取血进行外周血白细胞计数,检测白细胞功能、肝肾功能、心肌酶谱,同时观察动物的死亡率.结果:与MODS模型组动物比较,实验早中期5 -Fu抑制了动物外周血白细胞计数增加.5-Fu对白细胞的呼吸爆发无影响；但能下调白细胞CD11b表达.实验期间,5-Fu处理组大鼠死亡率明显降低,血清丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶、磷酸肌酸激酶和肌酸激酶同工酶活性、尿素氮等指标改善不显著,但实验组血糖值波动平缓,而对照组血糖进行性上升.结论:单次给予5-Fu能够对多器官功能障碍模型大鼠产生器官保护作用.
作者：卞建民；江强；章世海 刊期： 2012年第03期
目的:探讨Y微缺失与同源染色体联会异常在精子发生障碍中的意义.方法:选择无Y微缺失的单纯精子发生障碍患者3例、合并有Y微缺失和AZFc缺失的精子发生障碍患者3例、无Y微缺失的精子发生正常者(3例)为对照组；利用免疫荧光技术比较3组睾丸组织中精母细胞的同源染色体联会情况,包括联会复合体(synaptonemal complexes,SC)上gap和split出现的数目.结果:SC中出现gap的频率在对照组为10％、单纯精子发生障碍组为22％、合并有Y微缺失的精子发生障碍组为25％.两个精子发生障碍组与对照组相比均有显著性差异(P＜0.05),两个精子发生障碍组之间无统计学差异.SC中出现split的频率对照组为1％、单纯精子发生障碍组为13％、合并有Y微缺失的精子发生障碍组为15％.两个精子发生障碍组与对照组相比均有显著性差异(P＜0.01),两个精子发生障碍组之间无统计学差异.结论:精母细胞中同源染色体联会异常是影响精子发生的重要机制之一,Y微缺失的睾丸组织精母细胞中同源染色体联会异常有加重的趋势.
作者：张秋芳；黄翔；闫丽盈；乔杰 刊期： 2012年第03期
目的:高血压脑出血后血浆脂联素浓度变化及其与炎症因子相关性研究.方法:选择43例脑出血患者及30例对照组患者,用酶联免疫法检测其入院后第1、2、3、5、7天的血浆脂联素浓度及入院时白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,放射免疫法检测高敏C-反应蛋白(CRP)浓度,分析高血压脑出血后血浆脂联素与炎症因子之间的相关性.结果:患者脑出血后,血浆脂联素浓度在6h内明显升高,在24h达高峰,持续2d后逐渐下降.实验组血浆脂联素浓度、CRP、IL-6及TNF-α均不同程度高于对照组.相关分析显示血浆脂联素浓度与炎症因子之间呈正相关.结论:高血压脑出血患者血浆脂联素呈动态变化过程,且可能与CRP、IL-6及TNF-α共同参与了脑出血后的炎症反应,是脑出血后脑组织损伤的重要机制之一.
作者：王宏；王文宏；游洋；苏正 刊期： 2012年第03期
目的:观察腺病毒介导胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)的表达情况及Exendin-4/GLP- 1R系统对BM-MSCs细胞增殖及凋亡的影响.方法:利用Ad.Max系统构建含GLP-1R基因的腺病毒表达载体Ad.GLP-1R,感染小鼠BM-MSCs.采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光方法检测GLP-1R的表达情况.用Exendin-4刺激感染Ad.GLP- 1R的BM-MSCs,通过细胞计数和流式细胞术检测细胞生长曲线、细胞周期及细胞凋亡的变化.结果:腺病毒对小鼠BM-MSCs有较高的感染效率,病毒感染复数(MOI)为400时,感染率高达89.5％.BM-MSCs不表达GLP-1R,感染Ad.GLP- 1R后有效表达GLP-1R基因和蛋白.Ad.GLP-1R感染BM-MSCs后,Exendin-4刺激组细胞生长曲线显著高于未刺激组(P＜ 0.05).细胞周期检测结果显示,刺激组G0/G1期细胞数显著下降、G2/M期细胞数明显升高,增殖指数(S+G2/M)亦显著增加(P均＜ 0.01).而细胞凋亡率无明显变化.结论:Ad.GLP-1R可以有效感染BM-MSCs,获得高表达GLP-1R的BM-MSCs.Exendin-4可以促进Ad.GLP- 1R感染的BM-MSCs增殖.
作者：张勤凤；朱剑；徐宽枫；陈恒；杨涛；武晓泓 刊期： 2012年第03期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
