学术投稿

人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu的建立及其耐药机制的初步探讨

张厚斌;时开网;杨士勇

关键词:胰腺肿瘤, 多药耐药, 5-氟尿嘧啶, 细胞系
摘要:目的:建立人胰腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株Patu8988/5-Fu,观察其生物学特性并初步探讨其耐药机制.方法:采用5-Fu体外低浓度梯度递增联合大剂量冲击诱导法诱导培养人胰腺癌细胞株Patu8988,10个月建立获得性Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株,光镜观察形态学变化;MTT法分析Patu8988/5-Fu耐药谱;绘制细胞生长曲线,计算倍增时间;流式细胞术分析亲子代细胞的细胞周期分布;RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及多药耐药基因(MDR1)的表达情况;罗丹明外排实验检测Patu8988/5-Fu细胞膜上的P-糖蛋白(P-gp)泵功能;Annexin V-FITC染色流式细胞术分析两种细胞株在受到5-Fu作用后的凋亡情况.结果:成功建立了人胰腺癌Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株模型.与亲本细胞株Patu8988相比,Patu8988/5-Fu在形态学上发生了一系列变化;其对5-Fu、阿霉素(ADM)和吉西他滨(GEM)的耐药指数分别达到36.98(P<0.01)、2.76(P<0.05)和2.42(P<0.01);与亲本细胞株相比生长速度变慢,倍增时间延长(P<0.01);G0/G1期细胞分布比率略增多,而S期比率显著减少(P<0.01),G2/M期比率明显增加(P<0.05).HIF-1α(P<0.01)、MDR1 mRNA(P<0.05)的表达亦明显高于亲本细胞株Patu8988.罗丹明在耐药细胞株内的积聚量低于亲本细胞株(P<0.01);在不同浓度梯度的5-Fu作用下Patu8988/5-Fu的凋亡率都较亲本细胞低(P<0.01).结论:利用体外浓度梯度倍增法建立了稳定传代的人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu.HIF-1α介导的凋亡耐受和通过上调主要耐药基因MDR1的表达可能在不同程度上参与了Patu8988/5-Fu获得性耐药的产生.
南京医科大学学报(自然科学版)杂志相关文献
  • 异种骨髓间充质干细胞胸腺修饰诱导免疫耐受的可行性研究

    目的:确定骨髓间充质干细胞(BMSCs)在异种胸腺内的演化过程,为进一步进行BMSCs胸腺修饰诱导异种免疫耐受的研究提供可行性依据.方法:取豚鼠BMSCs经分离纯化体外扩增至第3代,并行胎牛血清-Fe2O3和4,6-二咪基-4-联苯基吲哚(DAPI)标记,标记后的豚鼠BMSCs行胸腺注射,7天后进行切片普鲁士蓝-中性红染色和荧光显微镜观察豚鼠BMSCs演变过程.结果:BMSCs移植至异种胸腺中能够生存,并能转化为多种组织细胞成分,即仍具有多向分化能力.结论:异种BMSCs胸腺修饰在诱导异种受体移植免疫耐受方面将是可行的.

    作者:翟光地;沈振亚 刊期: 2011年第04期

  • 葡萄柚漱口液对变异链球菌抗菌机制的研究

    目的:研究葡萄柚漱口液对变异链球菌的抗菌活性,初步探讨其抗菌机制.方法:采用液体稀释法测定葡萄柚漱口液对变异链球菌的小抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC);同时扫描电镜下观察葡萄柚漱口液对变异链球菌细胞壁的影响.结果:葡萄柚漱口液对变异链球菌的MIC为46.875 mg/L,MBC为93.75 mg/L.扫描电镜观察显示,葡萄柚漱口液处理后的变异链球菌出现细胞壁破裂,内容物溢出.结论:葡萄柚漱口液对体外培养的变异链球菌有明显的抑制和杀灭作用,其抑制机制可能与葡萄柚提取物破坏细胞壁结构的完整性有关.

    作者:钟声;刘建党;黄晓晶;江山;卢国英 刊期: 2011年第04期

  • 结缔组织生长因子ELISA定量检测方法的建立及初步应用

    目的:建立定量检测人结缔组织生长因子(CTGF)双抗体夹心ELISA方法,并应用此方法检测人血清中CTGF含量.方法:利用简易过碘酸钠法对纯化的抗CTGF单克隆抗体(mAbs)进行HRP标记后,行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的适工作浓度;以纯化的CTGF抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法.用该方法初步对正常人、HBsAg阳性非肝癌患者及HBsAg阳性肝癌患者血清中的CTGF水平进行检测.结果:佳配对组合为抗CTGF mAb 3H5和HRP标记的抗CTGF mAb 4C5,适工作浓度分别为40μg/ml和1/4 000,该方法的平均批内、批间变异系数分别为4.59%和5.70%,灵敏度达1.46 ng/ml,平均回收率为(98.73±4.84)%.用本方法测定35例HBsAg阳性肝癌患者、76例HBsAg阳性非肝癌患者和40例正常人血清CTGF水平,与正常对照组[2.65(2.16~3.18)ng/ml]比较,HBsAg阳性非肝癌组[5.53(2.74~8.23)ng/ml]和HBsAg阳性肝癌组[8.27(4.81±13.65)ng/ml]血清CTGF水平均显著升高(P<0.001);且HBsAg阳性肝癌组与HBsAg阳性非肝癌组比较也明显升高(P=0.014).结论:建立了一种可用于检测人CTGF的双抗体夹心ELISA方法.初步应用结果表明CTGF水平在HBsAg阳性肝癌患者血清中较HBsAg阳性非肝癌患者、正常人异常升高,提示CTGF分子有望成为HBsAg阳性肝癌早期预警标志物.

    作者:詹峰;曾晓燕;张晓;徐言;张建平;焦永军 刊期: 2011年第04期

  • 不规则瞳孔无晶体眼二期人工晶体植入的探讨

    目的:探讨白内障术后不规则瞳孔无晶体眼二期人工晶体植入的手术技巧.方法:选取本院眼科自2005年3月~2009年3月18例19只眼因各种原因未能一期植入人工晶体的不规则瞳孔无晶体眼患者行二期人工晶体植入手术.根据病情选用不同的术式并观察手术结果.结果:老年性及并发性白内障术后无晶体眼的患者二期植入人工晶体后,视力提高较理想;外伤性白内障如果不伴有角膜混浊、玻璃体积血、机化及视网膜脱落等并发症,术后视力提高也较好;而先天性白内障患儿伴有弱视者视力提高不理想.结论:对于白内障术后不规则瞳孔无晶体眼的患者行二期人工晶体植入,不仅可获得良好的裸眼视力及矫正视力,同时可减少一系列并发症.

    作者:王曙红;王文奇;徐新淮;宋曙光 刊期: 2011年第04期

  • CRP基因C+1444T多态性与中国苏皖地区汉族人群ACS的易感性无关

    目的:探讨C反应蛋白(C-reactive portein,CRP)基因C+1444T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的易感性.方法:选择2003年11月~2008年5月住院的ACS患者443例(ACS组)和同期经冠脉造影排除冠心病者285例(对照组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测CRP基因C+1444T多态性.结果:ACS组的CC、CT和TT基因型以及C等位基因频率分布与对照组无显著性差异(83.7%vs 86.7%、14.4% vs 12.3%、1.8% vs 1.1%和91.0% vs 92.8%,P值分别为0.292、0.439、0.540和0.243).调整年龄、性别、吸烟、收缩压、舒张压、血糖和血脂等多因素后采用多元Logistic回归分析显示,CRP基因C+1444T多态性与ACS的发生仍无显著性关联(P>0.05).结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因C+1444T多态性与ACS的易感性无显著相关性.

    作者:何国平;戚猛;高磊;沈丹丹;金鸣锋;杨笛;张寄南 刊期: 2011年第04期

  • 新型KATP开放剂埃他卡林对原代培养人肺动脉平滑肌细胞PCNAmRNA表达的影响

    目的:观察新型ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林(IPT)对原代培养人肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达的影响.方法:分离3~4级人肺小动脉,按照组织贴块法原代培养人肺动脉平滑肌细胞,分成对照组、缺氧组、缺氧+埃他卡林或吡那地尔组及缺氧+埃他卡林或吡那地尔+格列本脲组,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RTPCR)技术检测细胞PCNA mRNA表达.结果:缺氧使人肺动脉平滑肌细胞PCNA mRNA表达增加(3.90+0.24)倍,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);相同条件下,在缺氧的同时,分别在培养液中加入IPT 10-7、10-6、10-5mol/L,PCNA mRNA表达分别下降(26.00±2.01)%、(55.33±4.04)%、(79.00±1.00)%,与缺氧组比较差异均有显著性(P均<0.01);加入IPT 10-5mol/L前30 min,预先加入格列本脲(GLI)10-5 mol/L,IPT的抑制作用抵消,与缺氧+IPT 10-5 mol/L组比较差异有显著性(P<0.01).结论:IPT通过激活细胞KATP通道,浓度依赖性地抑制缺氧时原代培养人肺动脉平滑肌细胞PCNA mRNA表达的增加.

    作者:周燕娟;解卫平;张石江;李庆玲;朱煜明;王虹 刊期: 2011年第04期

  • 异位妊娠腹腔镜保守治疗与药物治疗效果的比较

    目的:探讨腹腔镜保守治疗异位妊娠的临床应用.方法:回顾性分析本院178例保守治疗异位妊娠的病历资料,比较不同治疗方法的住院时间、治疗效果以及对未来妊娠的影响.所有资料根据治疗方法分为两组:A组米非司酮(MTX)保守治疗73例;B组腹腔镜输卵管切开取胚105例,其中腹腔镜单纯切开取胚34例(B1组),腹腔镜切开取胚术前给予MTX(25 mg每天两次×3天)预处理48例(B2组),腹腔镜切开取胚术中使用小剂量MTX(20 mg)输卵管系膜局部注射23例(B3组).结果:A组住院时间长,持续性宫外孕发生率较高,对改善治疗后正常妊娠无优势,并且有比较明显的药物不良反应;B组住院时间短,其中B1组有发生持续性宫外孕的风险,但风险较A组低(P<0.05),B2及B3组均无持续性官外孕发生,无明显药物不良反应.结论:腹腔镜治疗异位妊娠有手术时间短、创伤小、术中出血少、术后恢复快的明显优势,对于有生育要求的女性,腹腔镜输卵管切开取胚术可能是更好的治疗方法.

    作者:梅界碑;黄宇春 刊期: 2011年第04期

  • 人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu的建立及其耐药机制的初步探讨

    目的:建立人胰腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株Patu8988/5-Fu,观察其生物学特性并初步探讨其耐药机制.方法:采用5-Fu体外低浓度梯度递增联合大剂量冲击诱导法诱导培养人胰腺癌细胞株Patu8988,10个月建立获得性Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株,光镜观察形态学变化;MTT法分析Patu8988/5-Fu耐药谱;绘制细胞生长曲线,计算倍增时间;流式细胞术分析亲子代细胞的细胞周期分布;RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及多药耐药基因(MDR1)的表达情况;罗丹明外排实验检测Patu8988/5-Fu细胞膜上的P-糖蛋白(P-gp)泵功能;Annexin V-FITC染色流式细胞术分析两种细胞株在受到5-Fu作用后的凋亡情况.结果:成功建立了人胰腺癌Patu8988/5-Fu多药耐药细胞株模型.与亲本细胞株Patu8988相比,Patu8988/5-Fu在形态学上发生了一系列变化;其对5-Fu、阿霉素(ADM)和吉西他滨(GEM)的耐药指数分别达到36.98(P<0.01)、2.76(P<0.05)和2.42(P<0.01);与亲本细胞株相比生长速度变慢,倍增时间延长(P<0.01);G0/G1期细胞分布比率略增多,而S期比率显著减少(P<0.01),G2/M期比率明显增加(P<0.05).HIF-1α(P<0.01)、MDR1 mRNA(P<0.05)的表达亦明显高于亲本细胞株Patu8988.罗丹明在耐药细胞株内的积聚量低于亲本细胞株(P<0.01);在不同浓度梯度的5-Fu作用下Patu8988/5-Fu的凋亡率都较亲本细胞低(P<0.01).结论:利用体外浓度梯度倍增法建立了稳定传代的人胰腺癌耐药细胞株Patu8988/5-Fu.HIF-1α介导的凋亡耐受和通过上调主要耐药基因MDR1的表达可能在不同程度上参与了Patu8988/5-Fu获得性耐药的产生.

    作者:张厚斌;时开网;杨士勇 刊期: 2011年第04期

  • 胃肠道肿瘤患者腹内脂肪脂联素的表达及临床意义

    目的:探讨胃肠道肿瘤患者腹内脂肪组织中脂联素mRNA的表达及其临床意义.方法:临床收集39例胃肠道肿瘤手术患者(其中转移组21例,未转移组18例)和20例非肿瘤正常对照组腹内脂肪;提取脂肪组织中总RNA,采用real-time PCR技术检测脂联素的表达水平.结果:胃肠道肿瘤组脂肪组织脂联素水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),肿瘤转移组(3.85±1.41)较未转移组(4.90±1.06)脂联素表达水平降低,但差异无统计学意义(P>0.05).结论:脂肪组织脂联素表达水平降低与胃肠道肿瘤发生相关,为肿瘤治疗的新途径提供理论依据.

    作者:杨瑞雪;马向华;沈捷 刊期: 2011年第04期

  • 系统性红斑狼疮伴发热的临床分析

    目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者病程中伴发热的鉴别诊断.方法:回顾性分析86例SLE伴发热患者,收集整理其临床资料,分为病情活动组及感染组进行各项指标的比较.结果:86例SLE患者中,病情活动组30例,感染组56例.病情活动组系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDAI)较感染组高,C-反应蛋白(CRP)、白细胞、补体较感染组低(P<0.05),两组血沉无统计学差异.结论:SLE患者病程中伴发热感染是重要原因,CPP升高与感染密切相关,是重要的参考指标.尽早诊断选择恰当的治疗方法是改善预后的关键.

    作者:杜迅;任天丽 刊期: 2011年第04期

  • 大鼠切口痛模型中氯化锂对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响

    目的:在大鼠切口痛模型中,观察氯化锂对瑞芬太尼引起的痛觉过敏的影响.方法:42只SD雄性大鼠,随机分成7组:对照组(C组);切口痛组(Ⅰ组);瑞芬太尼组(R组);切口痛+氯化锂组(IL组);切口痛+瑞芬太尼+低浓度氯化锂组(RL1组);切口痛+瑞芬太尼+中等浓度氯化锂组(RL2组);切口痛+瑞芬太尼+高浓度氯化锂组(RL3组).每组6只.IL组给予氯化锂36 mg/kg体重;RL1、RL2、RL3组分别给予氯化锂9、18、36 mg/kg体重,均在七氟醚吸入前10 min腹腔注射,体积均为0.4 ml,而C、I、R组给予生理盐水0.4 ml.R组和各RL组均在七氟醚吸入后15 min在皮下以0.8 ml/h的速度泵人瑞芬太尼40 μg/kg体重,C、I、IL组泵生理盐水.除C组外均做切口痛模型.各组均测定并计算出术前24 h(T0)、术后6 h(T1)、24 h(T2)、48 h(T3)大鼠右后爪的机械缩足反射阈值(PMW)及热缩足反射潜伏期(PWTL).结果:在T1、T2、T3时点,与I组相比,R组的PMW和PWTL明显降低(P<0.05).与Ⅰ组相比,IL组能缓解PMW和PWTL的降低(P<0.05).与R组比,各RL组能明显缓解PMW和PWTL的降低(P<0.05).结论:在大鼠切口痛模型中,瑞芬太尼可以诱发切口周围组织的痛觉过敏;氯化锂可以提高切口痛的阈值并预防瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.

    作者:王琛;姚维娜;马正良;顾小萍 刊期: 2011年第04期

  • 子宫输卵管声学造影评价输卵管通畅性的价值

    目的:探讨声诺维子宫输卵管声学造影(SonoVue hysterosalpingo-contrast sonography,SonoVue-HyCoSy)评价输卵管通畅性的价值.方法:对196例原发性或继发性不孕症患者389条输卵管(其中3例患者1侧输卵管切除)进行阴道超声监视下输卵管通水液HyCoSy检查,判断输卵管的通畅性,对怀疑输卵管阻塞或通而不畅的患者进行声诺维HyCoSy,判断输卵管的通畅性及阻塞部位,对诊断单侧或双侧输卵管阻塞或通而不畅患者,在进行声诺维HyCoSy 1周内行腹腔镜检查,将输卵管通畅情况及阻塞部位与腹腔镜通染液试验结果进行对照.结果:196例患者行输卵管通水液HyCoSy诊断145例患者双侧输卵管通畅,对其余51例(3例1侧输卵管切除)单侧或双侧输卵管阻塞或通而不畅患者进行了声诺维HyCoSy,诊断54条输卵管通畅,25条通而不畅,20条阻塞;对32例(其中1例1侧输卵管切除)共63条输卵管声诺维HyCoSy结果与腹腔镜通染液试验结果对照,二者评价输卵管通畅性方面差异无统计学意义.声诺维HyCoSy诊断阻塞部位的准确率为75%.结论:声诺维子宫输卵管声学造影能实时动态观察输卵管走形及其通畅情况,是一种可靠实用的检查方法,对评价输卵管的通畅性具有重要价值.

    作者:王兴田;王荣;崔建华;朱巧英;王伟 刊期: 2011年第04期

  • 血清/血浆microRNA检测方法探讨与建立

    目的:观察实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆microRNA表达水平的影响因素.方法:从样本来源、抗凝剂选择、样本储存时间等方面探讨实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆miRNA表达的影响因素.结果:miRNA表达在血清和血浆中没有明显差异,样本储存时间对miRNA的表达没有明显影响,但使用肝素抗凝会明显抑制miRNA的表达.结论:成功建立了一套标准化的血清/血浆miRNA表达检测方法.

    作者:张晓娟;董静;马红霞;胡志斌;沈洪兵 刊期: 2011年第04期

  • 重组人血管内皮抑制素注射液联合放射对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

    目的:观察分析重组人血管内皮抑制素注射液(Endostar,恩度)对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤有无放射增敏作用.方法:以CNE1细胞株建立移植瘤裸鼠模型,每4天测量空白对照组(A组)、单纯恩度用药组(B组)、单纯放射组(C组)、恩度+放射联合组(D组)肿瘤的直径,计算肿瘤体积、预期值/观察值(E/O),称取瘤重,计算肿瘤抑瘤率.恩度为瘤周注射20mg/(kg·天),连续给予10天,照射为移植瘤局部单次20Gy电子线照射.取瘤体行免疫组化染色检测HIF-1α的表达情况,透射电镜观察肿瘤细胞的凋亡情况.结果:恩度联合放射对鼻咽癌皮下移植瘤的生长有显著的抑制作用,治疗4周后肿瘤平均体积D组[(765.697±78.725)mm3]明显低于B组[(2340.186±370.606)mm3]、C组[(1454.028±180.371)mm3]及A组[(3112.452±720.764)mm3],E/O值为1.43;D组瘤重[(0.523±0.180)g]低于B组[(1.294±0.346)g]、C组[(0.926±0.233)g]及A组[(1.849±0.596)g,P<0.05];而D组抑瘤率为71.71%,明显高于C组(49.92%)和B组(30.07%),免疫组化染色显示使用恩度的治疗组HIF-1α的表达下降,透射电镜观察,与A、B、C组相比,D组肿瘤细胞数量减少,凋亡明显.结论:恩度对鼻咽癌裸鼠移植瘤有抑制作用和放射增敏作用.

    作者:尹预真;周菊英;李金利 刊期: 2011年第04期

  • 270例男科就诊患者精液分析及其与年龄的关系

    目的:了解目前男性精液质量情况以及年龄对精液质量的影响.方法:选取男科门诊就诊患者中行精液检查的270例患者,分为5组:20~25岁组、26~30岁组、31~35岁组、36~40岁组以及40岁以上组,采用计算机辅助精液分析(CASA)技术以及Shorr染色法进行精液的动态和形态分析.结果:随着年龄的增长,精子活力呈逐渐下降趋势,但各精液参数在各组间比较并无明显统计学差异;31~35岁组各项精液参数指标均达到WHO标准的比率高,占该组人数的61.76%,比率低的是40岁以上组,占该组人数的50.0%.结论:随着年龄的增长,男性的精液质量呈下降趋势,但是多数男性仍然具有较好的生育能力.

    作者:徐志鹏;石亮;周六化;戴玉田 刊期: 2011年第04期

  • ECLIA法检测CMV-IgM抗体在孕妇CMV感染诊断中的临床应用

    目的:探讨电化学发光法(ECLIA)检测巨细胞病毒(CMV)-IgM对孕妇CMV感染的诊断价值.方法:对360例孕妇血清标本分别以ECLIA法及ELISA法检测CMV-IgM,同时进行PCR检测CMV-DNA,分析ECLIA法检测CMV感染的临床应用价值.结果:360例受检孕妇中,ELISA法检测CMV-IgM阳性率为8.61%,ECLIA法阳性率为7.78%,差异无统计学意义(P>0.05).ECLIA法与传统的ELISA法比较,其相对灵敏度为87.0%,特异度为99.6%,两种方法一致率为98.6%;与PCR法比较,其相对灵敏度为89.7%,特异度为91.7%,一致率为90.6%.结论:ECLIA法检测CMV-IgM是一种敏感、特异、快速的检测方法,具有良好的临床应用价值,适用于临床大批量样本快速筛查和确诊.

    作者:张婷;许飞;臧嘉;陈道桢 刊期: 2011年第04期

  • 江苏省一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率与乙肝疫苗免疫的关系

    目的:调查分析江苏省3个县一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率和乙型肝炎疫苗免疫接种史的关系,为采取针对性干预措施,提高乙型肝炎综合防治水平提供依据.方法:采用分地区整群随机抽样方法确定凋查对象,开展问卷调查,采集静脉血,检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg).结果:张家港、丹阳和泰兴的HBsAg阳性率按全国人口构成标化后分别为4.61%、6.88%和10.06%,18岁以上计划免疫前出生人群HBsAg阳性率均显著高于18岁以下计划免疫后出生人群.张家港、丹阳和泰兴3个县中18岁以上年龄组接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率均明显低于未接种乙肝疫苗人群.结论:张家港、丹阳和泰兴的乙型肝炎疫苗纳入儿童计划免疫已显成效,儿童组HBsAg阳性率明显降低,成人乙型肝炎疫苗接种也可获得明显效果,应提高成人疫苗接种率,以期降低该人群HBsAg阳性率.

    作者:王毓;翟祥军;许卫国;鲍倡俊;朱叶飞;殷晓梅;彭红;朱立国;张婷婷;陈新峰;杜国明;柳丽江;王跃进;宗俊;蒋卫平;姚根红;曹民权;吴淑华;汪华 刊期: 2011年第04期

  • 二甲双胍对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用及机制

    目的:探讨二甲双胍对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用以及可能的作用机制.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1),①分为正常对照(NC)组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、NC+二甲双胍组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖浓度30 mmol/L)、HG+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+二甲双胍,浓度分别是50、100、200、400 mmol/L),作用时间分别为6、12、24 h.MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖的情况;②分为NC组、NC+二甲双胍组、HG组和HG+二甲双胍组(二甲双胍浓度200 mmol/L),作用时间12 h,用Western blot;法检测各组细胞内转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-AMPK和AMPK蛋白表达的变化.结果:①与NC组相比,高糖刺激12 h后HBZY-1增殖明显,差异有显著性(P<0.01);与HG组相比,HG加二甲双胍干预12 h后,随着二甲双胍的浓度逐渐增加,对HBZY-1增殖的抑制程度逐渐加大,差异均有显著性(P均<0.01);NC+二甲双胍组与NC组相比,两组之间HBZY-1增殖差异没有显著性(P>0.05);②与NC组相比,高糖刺激12 h后HBZY-1细胞TGF-β1的表达增高而p-AMPK表达水平明显下降,差异均具有显著性(P均<0.01).与HG组相比,加用二甲双胍干预后,TGF-β1的表达水平有明显下降,p-AMPK表达水平有显著升高,差异均具有显著性(P均<0.01).4组之间AMPK表达差异无显著性(P>0.05).结论:高糖环境下HBZY-1增殖明显,二甲双胍可能通过增加肾小球系膜细胞p-AMPK的表达、降低TGF-β1的表达抑制HBZY-1的增殖.

    作者:李凌云;游娜;徐家蓉;缪珩;鲁一兵;叶小龙 刊期: 2011年第04期

  • 呼出气一氧化氮测定对儿童支气管哮喘的诊断价值

    目的:评估呼出气一氧化氮(FeNO)测定对儿童支气管哮喘诊断的临床价值.方法:选取2010年6月~9月就诊于南京市儿童医院疑似支气管哮喘的患儿87例,测定FeNO水平,以临床表现和支气管激发或舒张试验为哮喘诊断的金标准,绘制ROC曲线,结合ROC曲线明确FeNO的诊断临界点,以评价FeNO对儿童支气管哮喘的诊断价值.结果:87例患儿中诊断哮喘患儿52例,非哮喘患儿35例;哮喘组FeNO[(59.77±42.48)ppb]高于非哮喘组[(25.26±22.60)ppb,P<0.05].FEV1%与FeNO无直线相关(r=-0.151,P>0.05).FeNO与外周血嗜酸性粒细胞有相关性(r=0.546,P<0.01).ROC曲线下面积是0.818,FeNO以34.5 ppb为阈值,敏感度0.712,特异度0.686,阳性预测值0.755,阴性预测值0.605,正确率0.689.结论:FeNO测定有助于儿童支气管哮喘的诊断和鉴别诊断.

    作者:刘娜;赵德育;吴美思;丁静 刊期: 2011年第04期

  • 泰兴市2005~2009年病毒性肝炎报告质量分析

    目的:通过分析江苏省泰兴市病毒性肝炎报告病例的有关特征,分析现有的病毒性肝炎诊断、报告中存在的问题,为规范病毒性肝炎的诊断和报告提供依据.方法:收集2005~2009年泰兴市通过国家疾病监测信息报告管理系统报告的所有病毒性肝炎病例有关病例临床分类、实验室分型,以及分类、分型证据等数据,应用Excel 2007和SPSS 13.0软件对所收集的数据进行整理和分析.结果:泰兴市2005~2009年病毒性肝炎报告发病率在31.01/10万~46.63/10万之间;成人中的慢性乙型肝炎报告发病率在不同年间有明显波动,乙肝未分类报告发病率在6.25/10万~13.40/10万之间,占全部乙型肝炎报告病例的31.0%~70.2%.甲型肝炎总体呈缓慢下降趋势(趋势x2=6.10,P<0.05),而丙型肝炎呈明显上升趋势(趋势x2=82.04,P<0.01).未分型肝炎在病毒性肝炎报告病例中所占比例在16.6%~23.0%之间.报告病例的复核诊断显示,甲肝和戊肝的病原分型诊断符合率为66.7%(12/18);乙肝急、慢性分类符合率为51.35%(19/37);报告的丙肝病例主要为无症状抗体阳性人群占68.42%(13/19);报告的未分型病例中有53.97%(34/63)可进行病原分型.结论:泰兴市5年间慢性乙肝报告发病率的变化缺乏合理性,提示医疗机构执行的病毒性肝炎报告标准不准确;病毒性肝炎分型、分类诊断的准确性也有待进一步提高.

    作者:张婷婷;翟祥军;许可;鲍昌俊;王毓;彭红;汪华 刊期: 2011年第04期

南京医科大学学报(自然科学版)杂志

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