学术投稿

抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤细胞增殖作用的影响

刘晓媛;张丽;张熠;明志君;杨金铭

关键词:eEF-2激酶, 人脑胶质瘤细胞LN229, NH125, 细胞增殖
摘要:目的 研究抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞增殖作用的影响,并初步探讨其可能的分子机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测抑制eEF-2激酶后LN229细胞的增殖能力,台盼蓝染色法检测细胞的存活能力,相差显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期的分布,Western blot方法检测细胞phospho-eEF2和Cleaved Caspase-3、PARP蛋白表达水平的变化.结果 抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞的增殖有显著抑制作用(P<0.05或0.01),呈现时间和剂量依赖性趋势;作用24h后,随着给药浓度的增加,LN229细胞的活力逐渐降低(P<0.05或0.01),且细胞形态也逐渐发生明显改变;NH125(0.5 μmol/L)作用24h后,LN229在S期阻滞,且出现小凋亡峰,phospho-eEF2 (Thr56)的表达明显下降,Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP的表达显著增加(P<0.05).结论 抑制eEF-2激酶后,人脑胶质瘤LN229的细胞增殖作用明显被抑制,细胞活力降低,该作用可能与其诱导的细胞周期阻滞以及其诱导的Caspase-3、PARP激活相关细胞凋亡途径有关.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 损毁炎症大鼠下丘脑弓状核对痛觉过敏的影响

    目的 观察损毁炎症大鼠下丘脑弓状核( ARC)对炎症大鼠痛觉过敏的影响.方法 用完全弗氏佐剂(CFA)建立大鼠外周组织炎症模型;采用新生期大鼠注射谷氨酸单钠(MSG)破坏ARC神经元或电解损毁成年大鼠的ARC;用辐射热-缩腿法测定炎症大鼠热痛阈的变化,用von Frey法测定机械痛阈的变化.结果 (1)大鼠在注射CFA后热痛阈和机械痛阈均明显降低,出现痛觉过敏,3h达到高峰,到第3天有所恢复并且稳定维持痛觉过敏状态,一直维持到本实验观察的第14天;(2)新生期注射MSG的大鼠在注射CFA后3h,热痛阈和机械痛阈也明显降低,出现痛觉过敏,但其痛阈降低的幅度明显小于注射高渗盐水对照的CFA组;(3)CFA炎症大鼠在电解损毁ARC之后,其热痛阈和机械痛阈与假损毁组相比,均明显上升,即痛觉过敏减轻.结论 在外周存在炎症条件下,两种方法损毁ARC都能减轻痛觉过敏.提示ARC参与外周组织炎症引起的痛觉过敏,对痛觉过敏的发生有下行易化作用.

    作者:戴友爱;龚珊;蒋星红 刊期: 2012年第05期

  • 台盼蓝着染兔晶状体后囊膜的观察

    目的 探索晶状体后囊膜被台盼蓝(TB)染色的可行性.方法 选用健康成年新西兰白兔60只(120只眼)随机分为3组(实验1组,实验2组,对照组),在手术显微镜下,完整取出晶状体,撕下前囊膜和后囊膜,分别置入不同浓度的TB溶液中染色后行光镜和电镜检查,并将所获数据进行统计学处理.结果 各实验小组前后囊膜均见染色,并随染色液浓度的增加,囊膜染色加深;光镜下观察,各实验小组的前后囊膜的组织结构较对照组未见明显改变(P>0.05);电镜下前后囊膜中,台盼蓝染色阳性数实验1组,实验2组分别与对照组比较,差异均有显著性(均P<0.01);台盼蓝染色阳性数实验1组与实验2组比较,两组差异统计学意义(P>0.05).结论 低浓度TB能有效地将晶状体后囊膜染色,起到保护透明晶体的作用.

    作者:曹钰;冯建国;刘瑶 刊期: 2012年第05期

  • 低氧对小鼠胚胎干细胞诱导分化成心肌细胞的影响

    目的 探讨在胚胎干细胞诱导分化过程的不同阶段进行低氧处理对分化心肌细胞的影响.方法 建立胚胎干细胞向心肌细胞诱导分化的实验方法,在分化过程的不同阶段采取低氧(氧浓度为4%)处理,并设立常氧组(约为20%)作为对照,用免疫荧光鉴定分化后的心肌细胞,以流式细胞术检测低氧对分化心肌细胞的增殖、分化、凋亡的影响.结果 分化细胞经免疫荧光检测显示,部分细胞呈α辅肌动蛋白阳性(红色)、心肌肌钙蛋白I阳性(绿色);分化细胞经流式检测显示,与常氧组相比,悬滴低氧组α-actinin阳性细胞和cTnI阳性细胞的比率分别提高了12.55% (P <0.01)和6.11%(P<0.05),悬浮低氧组凋亡比率与常氧组相比明显提高(P<0.01),悬滴低氧组处于S期的细胞比率与常氧组相比明显降低(p<0.01).结论 在胚胎干细胞向心肌细胞的定向诱导分化过程中,采用悬滴阶段低氧处理,使心肌特异性蛋白阳性细胞比率提高,细胞凋亡率稳定,细胞增殖能力因细胞分化成熟而有所降低,为低氧处理的佳方案.

    作者:张昊;张于娟;吕娟秀;匡翰哲;徐智策;茅彩萍 刊期: 2012年第05期

  • 尼莫地平对阿尔茨海默病大鼠认知功能的影响

    目的 探讨缝隙连接(GJ)在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用,研究尼莫地平对于认知功能的影响及对脑内缝隙连接蛋白(Cx)的调节作用.方法 采用脑室内注射Aβ25-35制备的大鼠阿尔茨海默病模型,利用Y迷宫检测大鼠的学习记忆功能,研究尼莫地平对于认知功能的影响,采用免疫印迹方法检测大鼠海马Cx43的表达水平.结果 同AD组相比,尼莫地平治疗大鼠Y迷宫中正确反应次数增多,说明尼莫地平可改善AD大鼠的学习记忆功能.与对照组相比,AD大鼠海马Cx43蛋白表达增高,而尼莫地平可以降低AD大鼠海马Cx43表达水平.结论 钙通道阻滞剂尼莫地平可以改善AD大鼠的学习记忆功能,这可能与其影响海马Cx43表达水平有关.

    作者:段晓宇;张正春;蔡秀英;蒋建华;孔岩;徐耑 刊期: 2012年第05期

  • 白及多糖琥珀酸酯的抗氧化活性研究

    目的 研究琥珀酸酯改性白及多糖的抗氧化活性.方法 分别采用Fenton法和邻苯三酚自氧化法测定不同取代度(DS)白及多糖琥珀酸酯BT-2( DS=0.38)、BT-3(DS =0.69)、BT-4( DS=0.85)对OH·和O2-·的抗氧化活性.结果 白及多糖琥珀酸酯对OH·的半数清除率浓度(mg/ml)依次为1.48±0.01( BT-4)、2.65±0.01( BT-3)、2.79±0.02 (BT-2);对O2-·的半数清除率浓度(mg/ml)依次为1.38±0.06(BT-4)、6.44±0.02( BT-3)、21.33±0.13 (BT-2).结果显示,不同取代度白及多糖琥珀酸酯对OH·和O2-·的清除能力大小依次为BT-4> BT-3> BT-2(P<0.05)结论 白及多糖琥珀酸酯的抗OH·和O2-·活性随取代度增大而显著增强.

    作者:王虎成;孙燕;俞樱露;刘江云;蔡培烈;杨世林 刊期: 2012年第05期

  • B族维生素治疗对脑梗死患者血清同型半胱氨酸的影响及其临床意义

    目的 观察B族维生素治疗急性脑梗死前后患者血清同型半胱氨酸(Hcy)的变化,评估其对脑梗死患者神经功能恢复的影响.方法 选择急性脑梗死患者90例,根据治疗方法分为2组,对照组:给予抗血小板、改善循环等常规治疗;观察组:在对照组常规治疗基础上,给予B族维生素治疗.4周后比较两组患者治疗前后血清Hcy浓度的变化,进行神经功能缺损评分(NIHSS).结果 观察组治疗后血清Hcy浓度及NIHSS均明显低于治疗前及对照组治疗后(均P <0.05);血清Hcy浓度及NIHSS之间无明显相关性(P>0.05).结论 B族维生素有助于降低血清Hcy,改善急性脑梗死患者的神经功能.

    作者:盛潇磊;雷进;王建林 刊期: 2012年第05期

  • Wernicke脑病患者的MRI表现特点分析

    目的 探讨出血性脑灰质炎综合征(Wernicke脑病)的MRI表现,为临床更好地诊治该病提供依据.方法 回顾性分析2008年至2011年该院收治的7例Wernicke脑病患者的临床和影像学资料.所有患者均采用T2WI、T1WI、DWI序列,4例加扫FLAIR序列,4例行MR增强扫描.4例治疗后复查MRI.结果 初诊7例患者中,累及中脑导水管4例,第四脑室周边灰质核团5例,丘脑内侧2例,双侧乳头体1例,主要表现为T2WI、FLAIR高信号,T1WI等低/稍低信号,DWI稍高/等低信号.增强扫描的4例中,2例部分病变区域轻中度强化.强化2例患者中,1例为饮酒患者,且见双侧乳头体强化.复查图像显示病变区域减少,行增强者强化范围减少.临床随访经硫胺素治疗后6例症状得以改善,1例病情较为严重,治疗效果欠佳.结论 Wernicke脑病具有较为典型的发病部位及影像学特点,早期诊断并给予硫胺素治疗有效.

    作者:庞红艳;杨晓春;司安创 刊期: 2012年第05期

  • 沙门菌质粒对细菌生物膜形式的影响

    目的 研究伤寒沙门菌质粒pRST98对生物膜形成的影响.方法 将携带pRST98的野生型伤寒沙门菌于30℃和37℃培养3d,用半定量法确定生物膜形成的适宜温度.将稀释的菌液于30℃分别培养12 h、1d、2d、3d、4d和5d,用半定量法确定生物膜成熟的时间.分别用携带pRST98的野生型伤寒沙门菌,消除pRST98的突变株及pRST98的回补株建立生物膜模型,用结晶紫染色法,半定量法和扫描电镜观察三种株受试菌形成生物膜的能力.结果 在30℃培养时细菌生物膜形成能力高于37℃,此温度为沙门菌生物膜形成的适宜温度;3d时生物膜趋于成熟;野生株和回补株形成生物膜的能力显著高于突变株.结论 伤寒沙门菌质粒pRST98与该菌生物膜形成密切相关.

    作者:廖莉;吴淑燕;李嫄渊;刘珍;黄瑞 刊期: 2012年第05期

  • 共培养体系中TGF-β1沉默大肠癌LoVo细胞对巨噬细胞IL-12和TNF-α分泌的影响

    目的 研究TGF-β1沉默人大肠癌LoVo细胞对人巨噬细胞系28SC免疫功能的影响.方法 将构建的TGF-β1siRNA稳定表达LoVo细胞与人巨噬细胞系28SC共培养,酶联免疫吸附实验检测培养液中IL-12和TNF-α水平,同时设立对照组空载体pSUPER-neo-gfp稳定转染LoVo细胞+28SC.结果 TGF-β1siRNALoVo+ 28SC组IL-12和TNF-α分泌量高于对照组(均P<0.05);TGF-β1+28SC组IL-12和TNF-α分泌量与LoVo +28SC组之间无明显差异(P>0.05).结论 大肠癌LoVo细胞分泌的TGF-β1能通过影响IL-12和TNF-α的分泌抑制巨噬细胞的免疫功能,有望通过阻断TGF-β1信号转导改善肿瘤免疫微环境抑制大肠癌的发生发展.

    作者:顾新华;周辰超;谭纪伏;袁政;柳燕东;罗家乐;季清华;王益;陈城;高蓓;王守立 刊期: 2012年第05期

  • 人脑星形细胞瘤中VEGF和NET-1蛋白的表达及其与瘤内血管生长、肿瘤分级的相关性

    目的 研究NET-1蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)在脑星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤血管的临床病理特征的相关性.方法 采用免疫组织化学技术检测脑星形细胞瘤活检标本中NET-1和VEGF的表达,单因素分析与肿瘤中微血管密度(MVD)的相关性,Spearman分析指标之间的相关性.结果 NET-1和VEGF在人脑星形细胞瘤表达的阳性率分别为63.33% (38/60)、58.33% (35/60),两者在肿瘤病变低级别组与高级别组间的表达差异有统计学意义(均P<0.05);MVD均数在NET-1和VEGF不同表达强度的组间差异有统计学意义(均P<0.05).结论 NET-1和VEGF在人脑星形细胞瘤的高级别肿瘤中的表达显著高于低级别肿瘤,并与肿瘤中的MVD成显著相关性,因此对脑星形细胞瘤的分级具有潜在的诊断价值.

    作者:严峻;龚筱倩;陈莉 刊期: 2012年第05期

  • 血清高尔基体糖蛋白-73检测对肝癌的诊断价值

    目的 研究血清高尔基体糖蛋白-73( GP-73)对肝癌的诊断价值.方法 时间分辨荧光免疫检测法(TR-FIA)检测79例肝癌、47例肝硬化、30例慢性肝炎及28名正常人血清中GP-73浓度,分析GP-73阳性率与肝癌大小及门脉转移的关系;同步比较GP-73浓度与γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)诊断肝癌的灵敏度及特异度,探讨三者对肝癌的联合诊断价值.结果 肝癌组血清GP-73浓度明显高于肝硬化组、慢性肝炎组及正常对照组(均P <0.05).根据ROC曲线,当界值为78.1 ng/L时,曲线下面积为0.814,GP-73对肝癌诊断敏感度及特异度分别为73.4%和79.0%.肝癌患者GP-73阳性率与肿瘤大小及有无门脉转移无相关性;血清GP-73、GGT-Ⅱ及AFP之间无相关性,联合检测三项指标可将诊断敏感度提高至96.3%.结论 联合检测GP-73、GGT-Ⅱ和AFP可提高肝癌定性诊断水平.

    作者:李莉;陈不尤;肖明兵;倪润洲 刊期: 2012年第05期

  • 复方虫草提取物对实验性肺纤维化大鼠的影响

    目的 探讨复方虫草提取物对实验性肺纤维化大鼠的影响及其相关机制.方法 采取大鼠气管内注入博莱霉素的方法制备肺纤维化模型,分别在给予复方虫草提取物后第7、14、28天处死大鼠后测定肺系数、肺组织羟脯氨酸( HYP)含量、谷胱甘肽(GSH)的活力、总抗氧化能力(T-AOC)水平及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白和mRNA表达水平;取固定部位肺组织做病理组织学检查.以泼尼松作为阳性药对照观察.结果 复方虫草提取物能明显改善纤维化病变,降低肺系数、肺组织HYP含量及TGF-β1 mRNA、TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平,尤其第28天显著(P<0.01或<0.05),且能明显升高GSH活力、T-AOC水平(P<O.01或0.05).结论复方虫草提取物可减轻肺泡炎症和肺纤维化的范围及程度,其作用机制可能与抗氧化作用和降低TGF-β1的表达进而抑制肺肌成纤维细胞的活化有关.

    作者:展瑞;冯一中;顾振纶;赵光明;张永胜;李强;郭次仪 刊期: 2012年第05期

  • 超声在注射隆乳术填充物取出术中的应用

    目的 探讨超声在注射隆乳术填充物取出术中的应用价值.方法 应用高频超声探查注射隆乳术后乳房局部情况,确定乳房注射物层次及位置,引导手术抽吸方向,动态监测取出注射物.结果 本组15例患者均在超声引导下行注射隆乳填充物取出术,伤口均I期愈合,术后经3~12个月随访复查,切口愈合佳,无明显瘢痕,超声复查无明显注射物包块残留,效果较满意.结论 超声定位引导能清晰显示注射物分布层次及范围,既能达到手术抽吸准确,又能较彻底取出异物,且对乳房损伤轻,是一种较好的手术方法.

    作者:闫磊;吴健丽;张燕;张玉群 刊期: 2012年第05期

  • 腹膜后妊娠1例

    异位妊娠的发生率有逐年上升的趋势,其中以输卵管妊娠为常见,占异位妊娠的95%,其次是宫颈、阔韧带、卵巢与腹腔妊娠[1].腹膜后妊娠是腹腔妊娠的特殊类型非常罕见.现将我院近期诊治的腹膜后妊娠1例报道如下.

    作者:金蕴洁 刊期: 2012年第05期

  • 胎儿肾脏多囊性疾病的产前超声诊断与分型

    目的 探讨胎儿肾脏多囊性疾病( FPDK)的产前超声分型特征及其临床价值.方法 对经引产证实或随访证实的54例FPDK胎儿的产前超声声像图特征进行回顾性分析.结果 产前超声诊断的54例FPDK胎儿中婴儿型多囊肾(Potter Ⅰ型)2例,均为双侧,引产后证实;多囊性发育不良肾(Potter Ⅱ型)41例,11例引产后证实,30例产后婴幼儿存活;成人型多囊肾(PotterⅢ型)2例,均为双侧,1例引产后证实,1例产后新生儿期死亡;梗阻性囊性发育不良肾(PotterⅣ型)9例,6例引产后证实,3例产后婴幼儿存活,手术切除患肾.结论 超声检查是检出FPDK的可靠方法,FPDK产前超声诊断及分型诊断准确率高,是产前早期发现胎儿肾脏多囊性疾病的首要检查方法.

    作者:姜小力;邓学东;凌晨;梁青;张丽丽 刊期: 2012年第05期

  • TRAF5在大鼠创伤性脑损伤中的表达变化及意义

    目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子5 (TRAF5)在大鼠创伤性脑损伤(TBI)中的表达变化及细胞定位情况.方法 利用大鼠锐器切割伤模型,通过Western blot方法检测脑损伤后TRAF5表达的时空变化,免疫组织化学方法检测TRAF5在脑组织中的细胞定位.结果 Western blot检测结果显示,大鼠脑损伤后,TRAF5的表达逐渐升高,损伤后5d达到高峰,此后逐渐降低恢复至正常水平;免疫组化检测结果与Western blot检测结果基本一致.免疫荧光双标记结果显示,TRAF5与星型胶质细胞(GFAP)、神经元(NeuN)之间存在共定位.结论 大鼠脑损伤可以影响TRAF5的表达,这种改变可能参与脑损伤后星型胶质细胞的活化和增殖过程.

    作者:闻峰;郭春华;徐立;何卫春;施金龙 刊期: 2012年第05期

  • 2型糖尿病合并脑梗死患者血清脂联素、超敏C反应蛋白的相关性

    目的 探讨2型糖尿病(T2DM)合并急性初发及复发脑梗死患者血清脂联素(ADP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的变化,以及两者与T2DM及脑梗死的一些危险因素的相关性.方法 对单纯T2DM患者60例(A组),T2DM合并初发脑梗死患者120例(B组),T2DM合并复发脑梗死患者122例(C组),对照组60例(D组,不伴有脑梗死及T2DM者),分别采用ELISA法及放射免疫比浊法测定血清ADP及hs-CRP水平.结果 (1)A、B、C组血清ADP水平明显低于D组,hs-CRP水平明显高于D组(均P<0.05);(2)B、C组血清ADP水平明显低于A组,hs-CRP水平明显高于A组(均P<0.05);(3)C组血清ADP水平明显低于B组,hs-CRP水平明显高于B组(均P<0.05);(4)ADP与hs-CRP水平成显著负相关(r=0.856,P<0.01).结论 血清ADP水平降低及hs-CRP水平增高均是T2DM合并脑梗死的独立危险因素,两者均可作为预测脑梗死复发的检测指标.

    作者:王一沙;常青;郭婉姝 刊期: 2012年第05期

  • 64排螺旋CT动态增强扫描对膀胱移行细胞癌T分期的诊断价值

    目的 探讨64排螺旋CT(MDCT)动态增强扫描对膀胱原发性移行细胞癌(TCC)术前分期的准确性.方法 根据MDCT动态增强扫描肿瘤浸润范围及其强化CT值的动态变化,对42例病理证实为TCC的患者进行术前CT分期,并与术后病理分期进行对照.结果 MDCT动态增强扫描对TCC术前分期的总准确率为94.8%,对膀胱壁内癌灶(≤T2b期)分期的准确率为92.9%,对侵犯壁外结构肿瘤(≥T3)分期的准确率为97.6%;T1/T2期与T3/T4期癌灶CT强化均值比较:动脉期及延迟期差异有统计学意义(均P<0.05),静脉期差异无统计学意义(P>0.05).结论 MDCT动态增强扫描有助于显示肿瘤浸润范围及其强化CT值的动态变化,从而有助于提高TCC术前分期的准确性.

    作者:王启苑;范国华;崔倩 刊期: 2012年第05期

  • 老年高血压和2型糖尿病患者AGT基因多态性和颈动脉超声变化的关系

    目的 观察老年高血压及合并2型糖尿病(T2DM)患者血管紧张素原(AGT)基因多态性与颈动脉超声变化的关系.方法 选择203例住院的老年人分成高血压组(105例)、高血压合并T2DM组(38例)和对照组(健康老年体检者60人)3组.入院后测血脂,行颈动脉超声检查,采用聚合酶链反应(PCR)及限制性片段长度多态性分析法进行M235T多态性检测.结果 (1)AGT基因的TT基因型及高血压合并T2DM组的颈动脉超声异常率增高,以多支病变为主;(2)颈动脉超声有多支病变的,其血脂水平明显升高(P<0.05).结论 老年高血压和T2DM患者颈动脉超声异常发生率明显增加,而血脂水平的升高及AGT基因的TT基因型使动脉粥样硬化进一步加强.

    作者:浦剑虹;刘健;李建中;吴秀英;钱惠英 刊期: 2012年第05期

  • 人可溶性TRAIL原核表达载体的构建和蛋白表达、纯化及活性鉴定

    目的 建立高效表达可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白的原核表达载体,获得高生物学活性的TRAIL蛋白.方法 取健康人外周血提取总RNA,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pET30a中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆.重组载体转化感受态细胞BL21,优化蛋白表达条件;亲和层析法纯化重组蛋白;SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot鉴定.重组蛋白与TRAIL蛋白标准品分别作用Huh-7细胞,CCK8、流式细胞术检测蛋白生物学作用.结果 DNA测序结果证实成功构建重组质粒pET30a/TRAIL,SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot显示pET30a/TRAIL诱导的为可溶性的His-rTRAIL.CCK8、流式细胞术检测结果显示,与TRAIL蛋白标准品相比,His-rTRAIL对Huh-7细胞具有良好的促凋亡作用.结论 成功构建高效表达可溶性TRAIL蛋白的原核表达载体pET30a/TRAIL,表达的可溶性蛋白His-rTRAIL具有高度的生物学作用,为肿瘤的生物学治疗提供新的实验依据.

    作者:尤红娟;刘雯;赵金金;徐志辉;党景东;刘转转;郑葵阳;汤仁仙 刊期: 2012年第05期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主管:江苏省教育厅

主办:苏州大学