学术投稿

人血小板膜糖蛋白GPIbα(H1-V289)的原核表达及其生物活性研究

马珍妮;董宁征;白霞;杨剑峰;谢丽倩;阮长耿

关键词:血小板膜糖蛋白GPIbα, 血小板聚集, 瑞斯托霉素
摘要:目的 获得重组的血小板膜糖蛋白GPIbα的N端片段(1-289氨基酸),进一步研究其在血栓与止血过程中的生物功能.方法 利用质粒pCMV3(编码GPIbαH1-V289)设计引物,构建pQE30-GPIbα(H1-V289)表达载体,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达蛋白.用Ni-NTA琼脂糖层析柱不同pH值梯度淋洗法纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产品纯度和免疫学活性,并观察重组蛋白对瑞斯托霉素和ADP诱导血小板聚集的影响.结果 成功获得纯度较高的重组GPIbα(H1-V289)蛋白,浓度为0.6 mg/ml.Western blot检测结果显示,抗GPIbα单抗SZ2能在34 kd区域显示条带.而且纯品能有效抑制瑞斯托霉素诱导的血小板聚集,对ADP诱导的反应无抑制作用.结论 重组蛋白具有较好的免疫原性和生物活性,并可以大量获得,为开发抗血栓药物奠定了基础.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 创伤性室间隔缺损或瓣膜腱索断裂的诊断与外科治疗

    创伤性室间隔缺损或瓣膜腱索断裂临床上较为少见,后果严重.1994年6月至2008年1月我院收治心脏外伤患者23例,其中心内结构损伤者8例,现报道如下.1 临床资料

    作者:纪勇;陈国强;黄斌;吴松;沈凯;虞桂平 刊期: 2010年第06期

  • 瑞芬太尼靶控输注在妇科腹腔镜手术中的应用

    目的 观察不同靶控浓度的瑞芬太尼复合丙泊酚全凭静脉麻醉对妇科腹腔镜手术所致的应激反应抑制程度及血流动力学变化,探讨靶控输注瑞芬太尼的合适浓度.方法 ASA Ⅰ~Ⅱ级妇科腹腔镜手术病人90例,随机分为3组,每组30例,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组瑞芬太尼靶控输注浓度分别为3、5、7 ng/ml,3组丙泊酚靶控输注浓度均为4μg/ml.麻醉维持瑞芬太尼和丙泊酚靶控输注浓度与诱导时相同,术中均给予阿曲库胺0.1 mg/kg维持肌松.观察和测定麻醉前10 min(T1)、插管后1 min(T2)、气腹后20 min(T3)、术毕解除气腹后20 min(T4)时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血糖,记录术毕停药后患者呼之睁眼时间、拔管时间、气腹时间.结果 3组MAP在T2同T1比较,均显著下降(均P<0.01).3组HR在T2、T3同T1比较,均显著下降(P<0.01).血糖在T4时,组间比较有统计学意义(P<0.05),3组血糖均较T1时明显升高(P<0.05或<0.01).结论 对于妇科腹腔镜手术,靶控输注5~7 ng/ml瑞芬太尼复合丙泊酚可以更有效地抑制CO2气腹所致的应激反应,且以瑞芬太尼5 ng/ml复合丙泊酚4μg/ml更能维持血流动力学的稳定,术后恢复良好,并发症少.

    作者:谢阳;方志源;赵建华 刊期: 2010年第06期

  • 氢质子磁共振波谱技术在脑肿瘤诊断中的应用

    目的 探讨氢质子磁共振波谱技术(1H-MRS)在脑肿瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值.方法 67例均采用点分辨波谱序列定位技术,获得单体素波谱,并将NAA/Cr、Cho/Cr及NAA/Cho等指标按病理类型分组进行分析.所有病例均以对侧相应部位的正常脑组织作为自身对照.结果 脑肿瘤的1H-MRS表现与正常脑组织有明显不同(P<0.05),表现为Cho/Cr比值升高,NAA/Cr和NAA/Cho比值下降,不同类型、不同级别的脑肿瘤之间也存在着差异.结论 1H-MRS可提供组织生化和代谢方面的信息,为脑肿瘤的诊断及鉴别诊断提供较为可靠的依据.

    作者:杨振贤;高亚枫;徐正昌;腾金宝;陈剑华;谢道海 刊期: 2010年第06期

  • 中枢内源性乙酰胆碱对颈动脉窦压力感受器反射的影响

    目的 探讨中枢内源性乙酰胆碱(ACh)对颈动脉窦压力感受器反射(CSR)的作用.方法 SD大鼠麻醉后孤离其双侧颈动脉窦区,将不同窦内压(ISP)与其对应的平均动脉压(MAP)值进行Logistic曲线方程拟合,求得ISP-MAP关系曲线及其反射特征参数,观察侧脑室注射不同剂量的拟胆碱药毒扁豆碱(PHY)对CSR的影响.结果 侧脑室分别注射低(1.8 mmol/L)、中(3.6 mmol/L)、高(5.4 mmol/L)剂量的PHY可导致ISP-MAP关系曲线在ISP 120~280 mmHg区间明显依次上移(P<0.05),ISP-增益关系曲线中部明显依次下移(P<0.05),反射参数中调定点、阈压、饱和压和大增益时的窦内压值明显增大(P<0.05),MAP反射变动范围及反射大增益明显减小(P<0.05).结论 PHY引起中枢内源性ACh增多,对CSR具有抑制性重调定作用,且这种效应呈现明显的剂量依赖性.

    作者:郁美香;赵红芬;刘丹丹;王国卿 刊期: 2010年第06期

  • 早产儿低血糖高危因素分析

    目的 分析早产儿发生低血糖的相关因素,为早产儿低血糖的防治提供依据.方法 对456例早产儿进行回顾性分析.按是否发生低血糖分为两组,并按低血糖持续时间长短再分为亚组,分别进行比较并分析低血糖的相关因素.结果 456例早产儿中,发生低血糖83例,发生率为18.2%,3例发生严重的难以纠正的低血糖患儿应用琥珀酸氢化可的松,应用肠外营养(PN)的有200例(占43.9%).与非低血糖组比较,低血糖组的胎龄明显小,窒息发生率明显高,黄疸出现时间早及住院时间明显延长.低血糖持续时间较长组的出生窒息史发生率及住院时间均明显长于持续时间短组,而PN的应用率明显低.以上差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01).结论 低血糖的发生与胎龄、出生窒息及黄疸相关;低血糖的持续时间与出生窒息及PN应用开始时间相关.早产儿低血糖延长了住院时间.

    作者:王华;朱文英;乔林霞 刊期: 2010年第06期

  • 骨质疏松症与老年骨折的相关性分析

    目的 探讨骨质疏松症与老年骨折的相关性,为预防老年骨折提供依据.方法 对苏州大学附属第一医院2007年1月至2009年12月收治的所有60岁以上的骨折患者进行分析,发现脊柱和髋部骨折排名前两位,从中筛选出165例患者接受双能量骨密度仪测定,同时另选取165例60岁以上非骨折人群作为对照,对照组也均行双能量骨密度仪测定.对两组进行对比分析.结果 骨折组骨质疏松发生率明显高于非骨折组(P<0.05).结论 骨质疏松症是老年骨折的高危因素,应重视骨质疏松症的防治,以降低老年骨折的发病率.

    作者:田一星;杨惠林;姜为民;孟斌;王根林;顾勇;李雪峰;汪李军 刊期: 2010年第06期

  • 简单乘法运算的功能磁共振成像对三重编码模型的初步研究

    目的 利用磁共振脑功能成像技术来验证简单乘法运算与三重编码模型是否匹配.方法 对13名本科生志愿者采用基于光学的单数乘法任务进行提问,同时运用1.5 T的Marconi磁共振成像系统采集其脑部的血氧水平依赖性功能成像数据.运用SPM99软件进行t检验,以获取单数运算时的脑功能图像.结果 明显激活左侧额中回、额下回、角回、视觉联合皮质区,两侧顶上小叶.结论 单数乘法运算与三重编码模型相匹配.

    作者:张妤;郭亮;胡春洪;谢道海;陈建华 刊期: 2010年第06期

  • 单侧额颞开颅治疗双额叶挫裂伤22例疗效分析

    目的 总结单侧额颞开颅治疗双额叶挫裂伤的诊治经验与教训.方法 对22例双额叶挫裂伤的临床资料进行回顾性分析.结果 伤后3个月按GOS分级标准,恢复良好18例,中残2例,重残1例,植物生存1例.结论 部分双额叶挫裂伤患者单侧额颞开颅同样能有效清除双额叶挫裂伤,并有缩短手术时间、减轻医源性损伤等优点.

    作者:冯鸣;周幽心;孙春明 刊期: 2010年第06期

  • 胃空肠旁路术对非肥胖型糖尿病小鼠的影响

    目的 观察Roux-en-Y胃空肠旁路术(GBP)对链脲霉菌素(STZ)所致非肥胖型糖尿病小鼠模型血糖等的影响,血糖与体质量变化的关系及手术的安全性.方法 成年雄性C 57BL/6小鼠经腹腔注射STZ(200 mg/kg),建立非肥胖型糖尿病模型.成模后小鼠随机分为3组:GBP组(DMOP组)、假手术组(DMFOP组)、未处理组(DM组),另设立正常对照组3组:正常未手术组(N组)、正常假手术组(NFOP)组和正常手术组(NOP).分别测术前和术后第1、2、3、4、5、6周各组实验动物的随机血糖及体质量变化,观察术后生存情况.结果 (1)与DM、DMFOP组相比,DMOP组的小鼠血糖下降明显,并可维持到术后6周以上(实验观察结束).(2)GBP后,糖尿病小鼠的体质量不降低.(3)DMFOP组(15/16)与DMOP组(2/16)比较,小鼠围手术期死亡率差异有高度统计学意义(P<0.01).结论 (1)GBP对非肥胖型糖尿病小鼠具有降血糖作用,且降糖作用与体质量变化无明显相关性.(2)GBP是较为安全的术式.

    作者:周建平;王洪山;高晓东;常文举;宋陆军 刊期: 2010年第06期

  • 单侧椎弓根外途径椎体后凸成形术治疗胸椎骨质疏松性压缩性骨折

    目的 探讨经椎弓根外途径椎体后凸成形术治疗胸椎骨质疏松性压缩性骨折的疗效及安全性.方法 分析2008年1月至2009年1月期间对16例胸椎骨质疏松性压缩骨折椎体行单侧椎弓根外途径椎体后凸成形术患者,MRI确定责任椎体22个.记录手术时间及透视次数.采用视觉模拟评分、Oswstry功能障碍指数评估患者手术前后及末次随访时的疼痛程度及日常功能.通过X线测量评估患者术前、术后椎体高度及后凸畸形纠正情况.结果 所有患者均顺利完成手术,1例患者出现少量椎间隙骨水泥渗漏,但无症状性并发症,1例患者出现肋间神经受损的症状.平均手术时间为31 min,透视次数为19.1次.术后胸背痛明显缓解,随访12~24个月(平均14.2个月).VAS评分术前为(8.2±1.1)分,术后3 d时为(2.6±0.8)分,末次随访时为(2.8±1.1)分.ODI评分术前为(69.2±1.2)分,术后3 d时为(32.2±1.1)分,末次随访时为(35.1±1.8)分.术后椎体前缘高度、中部高度及Cobb's角与术前比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 经椎弓根外途径椎体后凸成形术治疗胸椎骨质疏松性压缩性骨折是有效的,能减少术者及患者的放射暴露时间.

    作者:周峰;杨惠林;干旻峰;邹俊;姜为民;陈亮;唐天驷 刊期: 2010年第06期

  • 经支气管针吸术在肺癌诊断中的作用

    目的 总结经支气管针吸术(TBNA)在肺癌诊断中的作用.方法 分析61例支气管镜TBNA检查患者的临床资料.其中常规胸部CT检查提示有纵隔淋巴结肿大55例,支气管外压性狭窄6例.结果 61例中,确诊肺癌43例,结节病7例,结核3例,感染性淋巴结肿大8例.43例经TBNA获取标本病理确诊为肺癌36例(36/43,83.7%).36例肺癌患者纵隔淋巴结穿刺62例次,穿刺成功50例次(50/62,80.6%);气管右前、隆突前、右主支气管前淋巴结共穿刺49次(49/62,78%).其中20例周围型肺癌TBNA诊断阳性率70%(14/20),活检诊断阳性率14.3%(2/14),刷检诊断阳性率25%(5/20),肺泡灌洗诊断阳性率25%(2/8).TBNA诊断准确率显著高于其他3种诊断方法(P<0.01).结论 对于周围型肺癌伴有纵隔淋巴结肿大及支气管外压性狭窄的患者,TBNA为更好的诊断方法.

    作者:蒋军红;衡伟;穆传勇;郭凌川;詹升华;顾冬梅;黄建安 刊期: 2010年第06期

  • 高脂血症大鼠心脏组织中src抑制的C激酶底物表达的变化

    目的 观察高脂饲料喂养的大鼠心脏组织中src抑制的C激酶底物(SSeCKS)的表达变化,探讨高脂血症对SSeCKS表达的影响.方法 高脂饮食组(n=8)和正常饮食组(n=8)SD大鼠分别经高脂饲料和普通饲料喂养16周后,测血清总胆固醇及甘油三酯;用HE染色观察心脏病理学改变;用免疫组织化学法检测SSeCKS在心脏的表达;用免疫荧光双标法观察SSeCKS在心脏中的细胞定位.结果 高脂饮食组总胆固醇和甘油三酯较正常饮食组明显升高(P<0.05);病理学观察发现高脂饮食组形成高脂性心脏病变;免疫组织化学检测发现高脂饮食组中SSeCKS表达主要分布在心内膜、心间质;免疫荧光双标发现SSeCKS与心脏组织内皮细胞和α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞部分共定位.结论 高脂饲料喂养能使大鼠形成高脂血症,并引起心脏SSeCKS表达升高,SSeCKS可能参与了心脏结构重塑及细胞凋亡,从而促进动脉粥样硬化心脏病的发展.

    作者:朱顺星;刘海鸥;刘春;王旭;黄晓冬 刊期: 2010年第06期

  • 1例身材矮小患者的分子细胞遗传学分析

    目的 明确1例身材矮小患者的分子细胞遗传学特征.方法 采用G带核型分析、Q带核型分析、荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)技术对患者染色体异常进行逐步细化分析.结果 此患者终诊断核型为46,X,der(X).ish psu dic X t(X;Y)(p11.3;p11.1)(DXZ1+,DYZ3+,DYZ1+,SRY-,PCPXYp-,PCPXYq++).ish cgh del(X)(p11.3pter),dup(Y)(p11.2).结论 结合应用染色体显带核型分析技术,FISH和CGH技术可以精确诊断患者的染色体异常.

    作者:偶健;王玮;段程颖;付文宇;李红;黄新力 刊期: 2010年第06期

  • 创伤性连枷胸手术治疗45例疗效观察

    目的 观察手术治疗创伤性连枷胸的疗效.方法 将86例以创伤性连枷胸为主的多发伤病例,随机分为手术组和保守组.手术组45例,采用镍钛记忆合金环抱式接骨器手术内固定肋骨骨折;保守组41例,采用外固定胸廓非手术保守治疗,比较两组的临床疗效.结果 手术组患者均胸壁畸形消失,而保守组中有19例患者遗留胸壁畸形.手术组患者平均住院时间、平均住ICU时间和平均机械通气时间均显著短于保守组(P<0.01),手术组患者呼吸系统并发症(包括肺部炎症、肺不张、呼吸功能衰竭)发生率显著低于保守组(P<0.01).出院3个月后,手术组患者各项肺功能指标均显著高于保守组(P<0.01).结论 肋骨内固定手术治疗创伤性连枷胸,可以迅速纠正畸形,稳定胸廓,消除反常呼吸,减少并发症,还可减轻连枷胸对患者远期肺功能的影响.镍钛记忆合金环抱式接骨器内固定肋骨骨折,手术简单、方便,疗效确切.

    作者:施舜缤;俞力超;朱孝中;沈振亚;郁珲 刊期: 2010年第06期

  • 重组hIL-17B/His原核蛋白表达和生物学活性初步研究

    目的 研究原核表达hIL-17B/His重组蛋白及生物学活性.方法 RT-PCR法克隆去信号肽的hIL-17B基因序列.将测序后的hIL-17B分子扩增产物插入PQE3.0载体构建hIL-17B/PQE3.0重组载体.再将该重组载体导入M15工程菌,应用异丙基B-D硫代半乳糖苷诱导后表达hIL-17B/His重组蛋白,并经Western blot实验证实.结果 获得原核表达的hIL-17B/His重组蛋白.体外实验表明,该融合蛋白具有上调入巨噬细胞TNF-α、IL-1β等分子表达的作用.结论 原核表达获得具有生物学活性的hIL-17B重组蛋白,为进一步研究该分子的生物学功能提供了物质条件.

    作者:刘高勤;李龙标;吴鸿雅;马珍妮;陆培荣;张学光 刊期: 2010年第06期

  • 影响椎体后凸成形术治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折疗效的医源性因素分析

    目的 分析医源性因素对椎体后凸成形术(KP)疗效的影响.方法 采用同种型号单球囊双侧扩张KP治疗骨质疏松性单节段椎体压缩性骨折38例.分为标准手术组(23例)和非标准手术组(15例).术前MRI显示骨折椎体在T1WI呈低信号,T2WI呈高信号,STIR序列呈高信号.排除非骨质疏松性骨折.手术疗效采用VAS评分、椎体高度的恢复和Cobb角的矫正度进行评估,同时比较骨水泥渗漏情况.结果 所有患者术后疼痛均有明显缓解或消失.标准手术组:VAS评分由术前的(8.8 ±0.9)分降至术后的(2.6±1.3)分;椎体前缘高度恢复平均为(54.8 ±32.6)%,椎体中部高度的恢复平均为(61.2±22.4)%;手术前后X线侧位片显示Cobb角平均矫正14.9°(0°~37°);椎体骨水泥灌注量平均为(4.65±1.32)(1.8~8)ml,骨水泥渗漏率为8.7%,主要渗漏至椎体血管内.非标准手术组:VAS评分由术前的(8.6±0.6)分降至术后的(3.3±1.5)分;椎体前缘高度恢复平均为(46.5±31.9)%,椎体中部高度的恢复平均为(60.1±27.6)%;手术前后X线侧位片显示Cobb's角平均矫正7.6°(0°~27°);椎体骨水泥灌注量平均为(5.45±1.53)(1.5~8.5)ml,骨水泥渗漏率为33.3%,主要渗漏至椎体周围、椎间隙和血管内等.以上两组相比,除VAS评分改善情况无明显差异(P>0.05)外,其他各项评价数据的差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01).结论 手术穿刺技术和骨水泥灌注技术对KP的疗效有明显的影响;遵循操作技术标准和参加技术培训对提高手术安全性和手术疗效非常重要.

    作者:孟斌;杨惠林;张洪涛;施勤;梅昕;唐天驷 刊期: 2010年第06期

  • 家庭式产房分娩5150例临床分析

    目的 探讨家庭式产房在分娩中的优越性.方法 抽取5 150例家庭式产房分娩者为观察组,再抽取5 150例普通产房分娩者为对照组.对两组产妇的分娩方式、产程、产后出血、新生儿评分及产妇满意度进行分析.结果 观察组自然产率为85.01%,产钳助产率为0.99%,剖宫产率为14.00%,阴道分娩产妇总产程时间>18 h者占0.97%,产时及产后2 h出血量>300 ml者占10.00%,产妇满意度达到98.04%;对照组自然产率为66.99%,产钳助产率为3.01%,剖宫产率为30.00%,阴道分娩产妇总产程时间>18 h者占6.99%,产时及产后2 h出血量>300 ml者占20.02%,产妇满意度达到88.99%.由此可见,观察组与对照组比较,剖宫产率明显降低(P<0.05),总产程时间明显缩短(P<0.05),产时产后2 h内出血量明显减少(P<0.05),新生儿Apgar评分和产妇满意度明显增高(P<0.05).结论 家庭式产房分娩可降低剖宫产率和产后出血量,缩短总产程时间,提高新生儿Apgar评分和产妇满意度,是一种值得推广的方法.

    作者:陈敏芝 刊期: 2010年第06期

  • 子宫及阴道脱垂行阴式子宫切除术36例疗效分析

    目的 总结中老年妇女子宫、阴道脱垂(膀胱、直肠膨出)行阴式子宫切除术的疗效及临床应用价值.方法 分析36例子宫及阴道脱垂患者的临床资料,36例均行阴式子宫切除术和阴道前后壁修补术.结果 36例患者术中经过顺利,无并发症及麻醉意外,术后切口甲级愈合,临床症状明显改善.结论 阴式子宫切除同时行阴道前后壁修补术是治疗中老年女性子宫脱垂伴(或)阴道前后壁脱垂的理想方法,其具有体表不留疤、损伤小、术后恢复快、基层医院易于开展等优势.

    作者:吴虹 刊期: 2010年第06期

  • 人工颈椎间盘置换术治疗颈椎病12例近期疗效分析

    目的 观察人工颈椎间盘置换术治疗颈椎病的短中期疗效.方法 对人工颈椎间盘置换术12例(13个节段)患者随访术后假体的位置、有无异位骨化、置换节段的运动范围变化,并用JOA评分及术后Odom评级评价临床疗效.结果 随访3一12个月(平均6.5个月),患者的JOA评分由术前的平均8.35±1.10上升至术后末次随访时的15.88±0.73(P<0.05);Odom评级优良率达到91.7%.置换节段的运动范围变化:过屈过伸活动度由术前的8.09°±0.63°上升到术后12个月的8.95°±0.64°(P<0.05);左侧屈曲活动度术前为6.11°±0.53°,术后12个月为6.25°±0.54°;右侧屈曲活动度术前为6.10°±0.52°,术后12个月为6.13°±0.51°.手术前后两侧屈曲活度差异均无统计学意义(P>0.05).未发现假体松动或下沉及异位骨化.结论 人工颈椎间盘置换术的短中期疗效是令人满意的.

    作者:钱忠来;杨惠林;姜为民;李喜功;李雪峰;唐天驷 刊期: 2010年第06期

  • 人血小板膜糖蛋白GPIbα(H1-V289)的原核表达及其生物活性研究

    目的 获得重组的血小板膜糖蛋白GPIbα的N端片段(1-289氨基酸),进一步研究其在血栓与止血过程中的生物功能.方法 利用质粒pCMV3(编码GPIbαH1-V289)设计引物,构建pQE30-GPIbα(H1-V289)表达载体,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达蛋白.用Ni-NTA琼脂糖层析柱不同pH值梯度淋洗法纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产品纯度和免疫学活性,并观察重组蛋白对瑞斯托霉素和ADP诱导血小板聚集的影响.结果 成功获得纯度较高的重组GPIbα(H1-V289)蛋白,浓度为0.6 mg/ml.Western blot检测结果显示,抗GPIbα单抗SZ2能在34 kd区域显示条带.而且纯品能有效抑制瑞斯托霉素诱导的血小板聚集,对ADP诱导的反应无抑制作用.结论 重组蛋白具有较好的免疫原性和生物活性,并可以大量获得,为开发抗血栓药物奠定了基础.

    作者:马珍妮;董宁征;白霞;杨剑峰;谢丽倩;阮长耿 刊期: 2010年第06期

苏州大学学报(医学版)杂志

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