张子祥;李德春;赵华;朱东明
目的 观察人工气道建立方式对大鼠心跳骤停模型自主循环恢复后呼吸功能、存活率的影响及改良经口气管插管法的可行性.方法 建立窒息法大鼠心跳骤停模型;30只SD大鼠随机分成经口气管插管组(n=15)和气管切开插管组(n=15)两组.观察复苏后大鼠在机械通气与自主呼吸状况下动脉血气值的变化,比较复苏后6、24、72 h生存率.结果 经口气管插管组在机械通气与自主呼吸状态下的pH值比较,差异无统计学意义(P>0.05),而气管切开组在机械通气与自主呼吸状态下的pH、PaCPO2比较,差异均有高度统计学意义(均P<0.001);同期两组间pH、Pa-CO2、PaO2比较,差异均有高度统计学意义(均P(0.001);气管切开组6、24 h存活率有明显下降趋势,72 h存活率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 对于观察时间长、需要脱机或撤除人工气道的大鼠心跳骤停模型,经口气管插管法建立人工气道优于气管切开插管法;且改良经口气管插管法是值得推荐的一种大鼠气管插管方法.
作者:赵旭明;刘励军;周保纯;肖盐 刊期: 2009年第01期
目的 通过研究苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)和小干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞K562/AO2葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基闪的调节及对凋亡相关基因的影响,以探讨GCS基因致白血病多药耐药的分子病理机制.方法 应用体外细胞培养技术和RNA干扰技术观察GCS特异性的化学抑制剂PPMP及针对GCS的siRNA对K562/AO2细胞GCS基因的抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析GCS基因被抑制前后K562/AO2细胞中GCS摹因、Bcl-2基因、Bax基因的表达水平及差异.结果 PPMP和siRNA可抑制K562/AO2细胞GCS mRNA的表达,同时致相应细胞的Bcl-2基因表达下降,Bax基因则无明显变化.结论 GCS可能是通过Bcl-2信号转导途径使细胞的抗凋亡能力增强,从而导致白血病细胞的多药耐药.
作者:刘艳;谢平;谢可鸣;白小明;穆会君;张滨 刊期: 2009年第01期
目的 探讨高血压性肾损害患者内皮功能、血小板活化指标的变化及意义.方法 选择原发性高血压患者82例,依据K/DOQI指南CKD分期分成5组,健康体检者20人为对照组.采用EUSA法测定血浆标本中血管性假性血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)、血浆11-去氢-血栓烷B2(11-DH-TXB2)、血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140),并进行统计学分析.结果 CKD各期血浆vWF、TM、11-DH-TXB2、GMP-140水平均高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01或<0.001),且随着CKD分期的升高逐渐升高,相邻两组间差异亦有统计学意义(P<0.05).经相关分析,高血压患者血浆vWF、TM、11-DH-TXB2、GMP-140与内生肌酐清除率(Ccr)成负相关,与平均动脉压成正相关.除TM外,高血压患者血浆vWF、11-DH-TXB2、GMP-140与24 h尿蛋白定量成正相关.结论 高血压患者存在不同程度的内皮功能损伤及血小板活化,两者在高血压性肾损害的发生和发展过程中起重要作用,是高血压性肾损害的发病机制之一.
作者:叶建明;郁丽霞;卢国元;陈洪磊;顾晓霞;熊燕 刊期: 2009年第01期
目的 观察转染重组BMP7腺病毒(Ad-BMP7)后,兔髓核细胞BMP7和Ⅱ型胶原的表达情况.方法 (1)取20只新西兰大白兔,15只作为实验组,5只作为实验对照组.实验组椎间盘注射Ad-BMP7,实验对照组注射携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒(Ad-GFP),另设空白对照组.(2)分别于注射后1、2、4周各处死5只实验组兔子,注射后1周处死全部实验对照组兔子.RT-PCR和免疫组织化学染色检测BMP7的表达情况,免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原的表达情况.结果 (1)实验组的髓核细胞显示了BMP7染色阳性结果,1、2、4周组阳性染色率差异无统计学意义(P>O.05).(2)实验组的髓核组织问质Ⅱ型胶原呈阳性染色,1、2、4周的灰度值单因素方差分析,差异有高度统计学意义(P<0.01);SNK两两比较,第1周与第2、第4周差异有统计学意义(P<0.05),第2、第4周间差别无统计学意义(P>0.05).结论 Ad-BMP7转染兔髓核细胞后,能获得长期表达,并能促进Ⅱ型胶原合成.
作者:刘巍;成红兵;严建军;王鹏翔 刊期: 2009年第01期
目的 研究重组腺病毒Ad-hIL-24对A549肺癌细胞的影响.方法 将载有hIL-24基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-hIL-24)感染A549肺癌细胞,RT-PCR法检测hIL-24基因的表达,光学显微镜及荧光显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,运用MTT法和流式细胞术(FCM)分别检测其对A549细胞的生长抑制及凋亡效应,通过免疫细胞化学分析caspase-3的变化.结果 Ad-hIL-24感染A549细胞后有hIL-24目的基因的转录,可明显抑制A549细胞的生长,凋亡率明显增加,并能上调caspase-3的表达.结论 腺病毒介导的hIL-24基因具有抑制A549肺癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用.
作者:陈华昕;杨吉成;盛伟华;谢宇锋;黄建安;朱晔涵 刊期: 2009年第01期
目的 克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,构建能同时表达两基因的重组腺病毒活载体,为研制能有效防治结核病的重组腺病毒活载体疫苗打下基础.方法 首先利用PCR技术克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,将两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体中,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.该穿梭质粒转化含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,经间源重组获得复制缺陷型重组腺病毒载体pAdeasy-1-pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.PacI酶切线性化该质粒,转染AD293细胞进行病毒包装.结果 ESAT-6和CFP-10基因成功克隆,其序列与GenBank公布的一致.两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体,获得的重组穿梭质粒经同源重组,成功获得复制缺陷型重组腺病毒质粒Adeasy-1-pShuttle-CMV.ESAT-6-IRES-CFP-10,转染该质粒的AD293细胞出现细胞病变效应.结论 成功克隆了分枝杆菌的ESAT6和CFP-10基因,构建了含IRES串连的ESAT-6和CFP-10基因的重组腺病毒,为重组病毒活载体疫苗的研制奠定了基础.
作者:房红莹;罗满林;王蕾;顾冠彬;邓碧亮 刊期: 2009年第01期
目的 借助三维时间飞跃法磁共振血管成像(3D TOF MRA)检查,分析短暂性腩缺血发作(TIA)患者与供血脑动脉病变的关系.探讨3D TOF MRA检查方法对TIA患者的诊断价值.方法 临床确诊TIA患者48例,其中频发,TIA患者15例,非频发TIA患者33例.均行3D TOF MRA检查,采集的源图像进行三维重建.比较两组TIA患者责任血管狭窄程度.结果 48例患者中44例有血管狭窄(91.67%);频发TIA患者均有血管狭窄,其中狭窄程度≥70%有11例(73.33%),50%-70%有4例(26.67%),且14例有粥样硬化斑块;非频发TIA患者29例有血管狭窄,其中狭窄程度≥70%有7例(21.21%),狭窄程度50%-70%有16例(48.49%),狭窄程度<50%有6例(18.19%).频发TIA患者与非频发TIA患者脑血管狭窄≥70%的发生率差异有统计学意义(P<0.05).结论 3D TOF MRA能无创、快速、有效、准确地显示,TIA患者责任血管狭窄程度,对临床确定进一步治疗方案有重要作用.
作者:黄瑾瑜;郭亮 刊期: 2009年第01期
目的 研究RPB5调节蛋白RMP在γ射线诱导的SMMC-7721肝癌细胞凋亡过程中的表达,探讨RMP在细胞凋亡及维系细胞DNA稳定性中的作用.方法 不同剂量60Coγ射线照射SMMC-7721肝癌细胞和HL-7702正常肝细胞,观察细胞形态变化;PI染色观察细胞凋亡;流式细胞技术检测肝癌细胞周期变化及细胞凋亡;半定量RT-PCR法检测RMP基因在肝癌细胞及正常肝细胞中的表达以及凋亡相关基因hax、bcl-2在肝癌细胞中的表达.结果 随着照射剂量增加,肝癌细胞形态发生明显改变;PI染色观察细胞凋亡增多;流式细胞仪检测结果显示随着照射剂量增加,细胞凋亡明显增多,差异有统计学意义(P<0.05),细胞周期G1期增高,而S期降低,差异有统计学意义(火0.05);RMP基因相对表达量增加'bax,bcl-2增加,与未照射组相比,差异有统计学意义(P
作者:李敏;谷俊侠;杨慧翠;盛伟华;连晓宁;曹锴;魏文祥 刊期: 2009年第01期
目的 观察油酸致小鼠早期急性肺损伤(ALI)中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的变化.方法 48只BALB/c小鼠随机分为两组,每组24只.ALI组从尾静脉注射油酸0.9 ml/kg制备ALI模型;正常对照组注入等量生理盐水.8 h后每组随机抽半数小鼠处死后行肺泡灌洗(BAL).另一半小鼠右肺称重后烘干,左肺留取病理标本;分别测定肺湿/干质量比、肺泡灌洗液(BALF)总细胞计数、中性粒细胞计数、蛋白含量变化;ELISA测定血清和BALF中自细胞介素6(IL-6)、VEGF的含量;免疫组化法检测组织中VEGF表达的变化.结果 AU组肺湿/干质量比、BALF中蛋白含和总细胞计数、中性粒细胞计数、血清和BALF中IL-6含量、血清VEGF含量与正常对照组比较均明显升高,AU组BALF中VEGF的含量和肺组织中VEGF表达积分吸光度值(IA)较正常对照组均明显降低,以上比较的差异均有统计学意义(均P
作者:金钧;郭强;黄芳;王俊;徐华;李娜;黄建安 刊期: 2009年第01期
目的 观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性.方法 通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞计数绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞生长对血清浓度的依赖.结果 GSTθ转染后抑制了HCT116细胞的生长,并且是通过G2,M和S期阻滞而导致的,GSTθ还增加了HCT116细胞对血清的依赖性.结论 GSTθ可降低HCT116细胞的恶性程度,使其对血清及营养物质的需求增加.
作者:乔惠萍;焦旸;徐加英;樊赛军 刊期: 2009年第01期
目的 研究牛理浓度铁调素(Hepcidin)对人成骨细胞(hFOB 1.19)内铁离子转运的影响.方法 加入终浓度分别为100(A1组)、300(A2组)、600(A3组)nmol/L的Hepcidin,干预成骨细胞20 h后在激光共聚焦显微镜(CLSM)下测量细胞内的铁离子荧光强度.结果 细胞内铁离子荧光强度对照组(A0组)为5.23±1.54,A1组为20.74±4.90,A2组为21.65±6.55,A3组为22.32±6.91,与AO组相比,A1组、A2组、A3组荧光强度都明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而A1组、A2组、A3组之间的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Hepcidin具有升高成骨细胞(hFOB 1.19)内铁离子的作用,但在100~600 nmol/L剂量范围内,Hepcidin升高成骨细胞内的铁离子浓度无明显差异.
作者:赵东阳;徐又佳;张鹏;郝彦明;马勇;刘虎 刊期: 2009年第01期
目的 观察多波长激光联合卵磷脂络合碘治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)的临床疗效.方法 将确诊为CSC并排除其他眼疾的患者(37眼)分为多波长激光联合卵磷脂络合碘治疗组(联合组)、单纯多波长激光治疗组(激光组)、单纯卵磷脂络合碘治疗组(药物组),分别于治疗后2、4周和3个月观察视力、眼底,并在3个月时复查眼底血管荧光造影(FFA).结果 联合组和激光组疗效显著优于药物组,差异有高度统计学意义(P<0.001);而前两者之间在2周时差异有统计学意义(P<0.05),在4周和3个月时差异无统计学意义(P>0.05).3个月时FFA结果显示,联合组和激光组渗漏全部停止,药物组有3例仍有渗漏,但程度减轻.结论 多波长激光光凝治疗CSC疗效确切,尤其是黄光的应用增加了光凝的安全性.激光联合碘剂对光凝后视力恢复有明显促进作用,单纯药物治疗疗程长,且视力有不完伞恢复可能.
作者:季晓燕;魏晓红 刊期: 2009年第01期
目的 探讨颅脑损伤开颅术中发生急性脑膨出的原因和治疗方法.方法 回顾性分析21例颅脑损伤患者开颅术中脑膨出形成的原因及相应的治疗措施.结果 21例中死亡10例,植物生存1例,重残3例,中残5例,恢复良好2例.结论 迟发性颅内血肿、急性弥漫性脑肿胀、广泛脑挫裂伤是急性颅脑损伤开颅术中发生急性脑膨出的主要原因,术中针对不同的原因采取相应措施可获得良好疗效.
作者:尹志君 刊期: 2009年第01期
目的 探讨螺旋CT在儿童副鼻窦支气管炎诊断中的价值.方法 采用冠状位及横断位对42例反复发作儿童副鼻窦气管炎患儿行螺旋CT扫描.结果 42例支气管炎同时合并副鼻窦炎患儿的反复支气管炎发病率达100%.X线胸片以肺纹模糊显示率相对较高为93%;4岁以下年龄组肺炎样阴影显示率为80%,5-10岁年龄组肺炎样阴影显示率则相对较低,仅为35%;但肺门增浓阴影增加,从24%上升至76%.故年龄越小越易显示肺血管周围浸润阴影和肺炎样阴影;年龄越大越易显示肺门增浓影.螺旋CT扫描均有副鼻窦炎表现,以上颌窦炎为主,占94%;其中还有部分患儿腺样体肥大,占65%;年龄越小,病变越严重.结论 螺旋CT是反复发作儿童副鼻窦支气管炎患儿的有效检查方法,对诊疗有重要临床意义.
作者:施晓平;施健;徐咏;茅伟 刊期: 2009年第01期
目的 寻找IRM-2小鼠体内存在的与辐射抗性相关的基因.方法 提取IRM-2小鼠和其亲代小鼠脾细胞总RNA,利用mRNA差异显示技术挑选差异表达片段,对每一条差异带进行特异PCR扩增、克隆和测序.结果 获得IRM-2小鼠独有而亲代小鼠均无的cDNA差异带75条,经测序获得52条差异cDNA序列.与GenBank基因库同源性比较,得到21条与小鼠已知基因不同源的表达序列标签(EST).结论 21条EsT提示IRM-2小鼠体内可能存在辐射抗性相关基因,为进一步分离和鉴定辐射抗性相关基因奠定了基础.
作者:王芹;岳井银;李进;宋力;刘强;穆传杰;吴红英 刊期: 2009年第01期
目的 研究博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的病理形态学变化和三七总皂甙(PNS)的干预作用及其机制.方法 通过气管内注入BLM复制动物肺纤维化模型,于造模后第2天各治疗组开始每天给药,于给药后第7,14,28天分别随机处死一批大鼠,取肺组织行HE染色,用免疫组织化学方法检测肺组织中TGF-β1的表达,并测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量.结果 PNS能抑制实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及TGF-β1的异常升高,减轻其肺部的病理损害.结论 PNS对BLM诱导产生的肺纤维化有一定的抑制作用.
作者:武慧;冯一中;顾振纶;林军;周文轩;郭次仪 刊期: 2009年第01期
目的 构建人源Diekkopf-1(DKK-1)基因的真核表达质粒,为进一步探讨DKK-1的生物学功能奠定基础.方法 Trizol法从人新鲜胎盘组织中抽提总RNA,RT-PCR法反转录为cDNA,以cDNA为模板扩增人源DKK-1的基因序列,将真核表达载体pcDNA3.1和DKK-1的PER产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pcDNA3.1-DKK-1,转化至大肠杆菌后经菌落PER、NHe I和EcoR I双酶切及测序鉴定.结果 RT-PCR法从人胎盘中扩增出816 bp大小的目的 片段,重组质粒转化至大肠杆菌后菌落PER同样扩增出816 bp大小的目的 片段,NHe I和EcoRI双酶切重组质粒能切出两条目的 条带,测序后与C,enbank中DKK-1的cDNA对比,证明DKK-1的基因序列完全正确.结论 成功构建了pcDNA3.1-DKK-1重组质粒,为研究人源DKK-1的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础.
作者:李文帅;周幽心;许期年 刊期: 2009年第01期
目的 探讨采用Medpor支架全耳廓再造术的术式与效果.方法 26例耳廓缺如患者,采用Medpor支架、皮肤软组织扩张的耳后皮瓣覆盖行耳廓再造.结果 26例皆成功,再造耳廓外形逼真、清晰,随访6个月至5年未见吸收变形.结论 外耳廓缺损采用Medpor支架和扩张的耳后乳突区皮瓣是全耳廓再造术一种较好的方法,效果良好.
作者:张本寿;杨志刚;胡佳乐;徐志久;郑翔;魏福堂 刊期: 2009年第01期
目的 制备188Re标记丙氧鸟苷(GCV)白蛋白纳米微球(188Re-GCV-BSA-NP).方法 通过蛋白交联固化的方法制备GCV-BSA-NP,并测定GCV-BSA-NP的体外释药特性;采用预锡化直接标记法对ccv-BSA-NP进行188Re标记,同时观察188Re-GCV-BSA-NP体外稳定性.结果 GCV-BSA-NP为大小不等的规则性微球,微球直径不等,但多集中在250-290 am.GCV-BSA-NP总的标记率>90%,放化纯>95%,放射性比活度1.85x105 MBq/μmol.标记物放置于37℃的PBS(pH 7.4)溶液中,在24 h时放化纯为95%.结论 预锡化直接标记法简便快速,能够得到较高的标记物放化纯度,稳定性好,GCV-BSA-NP具有明显的缓释功能.
作者:詹惠英;唐秋莎;汤月萍;陈道桢 刊期: 2009年第01期
目的 研究端粒酶催化亚基(hTERT)在卵巢上皮肿瘤组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化S-P法检测26例恶性卵巢上皮肿瘤、8例卵巢良性上皮肿瘤组织中hTERT的阳性表达率.结果 卵巢恶性上皮肿瘤组织中的hTERT阳性表达率为65.4%,明显高于卵巢良性上皮肿瘤的12.5%,差异有统计学意义(P<0.05).hTERT表达水平与恶性卵巢上皮肿瘤病理分级、FIGO分期无关(P>0.05).结论 端粒酶的激活在卵巢癌的发生发展中可能发挥着重要作用.
作者:戴志远;栾雪峰;陈世荣;谢芳 刊期: 2009年第01期