施晓平;施健;徐咏;茅伟
目的 观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性.方法 通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞计数绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞生长对血清浓度的依赖.结果 GSTθ转染后抑制了HCT116细胞的生长,并且是通过G2,M和S期阻滞而导致的,GSTθ还增加了HCT116细胞对血清的依赖性.结论 GSTθ可降低HCT116细胞的恶性程度,使其对血清及营养物质的需求增加.
作者:乔惠萍;焦旸;徐加英;樊赛军 刊期: 2009年第01期
目的 探讨术后镇痛及镇痛方式对老年患者术后胰岛素抵抗程度的影响.方法 45例择期行上腹部手术的老年非糖尿病患者,随机分为3组,每组15例,I组伞麻联合硬膜外阻滞并保留术后镇痛;Ⅱ组伞麻并行术后静脉镇痛;Ⅲ组全麻后不保留术后镇痛.所有患者分别于术前(硬膜外穿刺或伞麻诱导前)、术后第1天清晨测定血浆血糖(G)、血清胰岛素(INS).计算胰岛素敏感性指数(ISI).观察记录3组术后2、4、8、16、24、48 h患者疼痛评分(VAS).结果 3组术后G、INS水平均明显高于术前,ISI均明显低于术前.差异均有统计学意义(均P<0.05).Ⅲ组术后G、INS明显高于I、Ⅱ组,ISI明显低于I、Ⅱ组,差异均有统计学意义(均P<0.05).I、Ⅱ组VAS芹异无统计学意义(P>0.05).I组和Ⅱ组术前、术后第1天G、INS、ISI差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 老年患者术后镇痛能明显改善腹部手术后胰岛素抵抗程度.小同镇痛模式对术后第1天胰岛素敏感性改变无明显影响.
作者:张清;李培龙 刊期: 2009年第01期
目的 探讨成年大鼠海马CA1区损毁后,齿状回(DG)细胞先增殖后减少的原因.方法 用海人酸(KA)建立单侧海马损毁模型;用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记海马DG区增殖的细胞,用免疫组织化学方法检测标记后不同时间点DG区BrdU阳性细胞,并用无偏差体视学方法定量分析;激光共聚焦显微镜检测BrdU与裂解的easpase-3的共表达.结果 实验组动物在损毁海马后各时间点DG区BrdU阳性细胞总数均比对照组明显增多,差异有统计学意义(P<
作者:彭薇;周菊;龚珊;单立冬;蒋星红 刊期: 2009年第01期
目的 探索影响江苏居民高血压发生的危险因素.方法 对2002年全国营养与健康状况调查中血压正常的2 532名居民进行追踪调查,并用Cox回归分析高血雎的影响因素.结果 2 532名调查对象中新发高血压600例,其中男298例.女302例.单因素Cox回归结果显示年龄、性别、经济收入、文化程度、超重肥胖、饮酒、血脂异常与高血压相关.控制混杂因素后,多因素Cox回归的结果显示,性别、年龄、超重肥胖、文化程度、血脂异常是影响高血压发生的危险因素.结论 男性、年龄上升、超量肥胖及血脂异常是高血压发生的危险因素,在高血压防治工作中应当加以重视.
作者:罗亚洲;袁宝君 刊期: 2009年第01期
目的 建立实时定量PCR检测小鼠T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTREC)水平和T细胞受体β链可变区(TRBV)CDR3的方法,推测其中的初始T细胞的数目和克隆性,评价胸腺输出功能及免疫重建,从而为胸腺输出功能及移植后T细胞免疫提供可靠的研究方法.方法 分别提取小鼠脾脏细胞基因组DNA和总RNA.PCR方法扩增DNA标本目的 片段.纯化鉴定并构建含sjTREC片段的质粒标准品.建立稳定的实时定量PCR反应检测小鼠脾脏淋巴细胞sjTREC含量的方法.采用半巢式PCR扩增TRBV基因产物.采用ABI 3700分析TRBV谱型.结果 构建了可靠的sjTREC和TCRα质粒标准品.在实时定量PCR中建立了可靠的标准曲线.建立的定量PCR方法分析可成功用于脾细胞的sjTREC含量的检测.8周龄BALB/c小鼠脾细胞sjTREC含量为(626±115)拷贝/105个脾细胞.结论 建立了可靠的定量检测小鼠T淋巴细胞中sjTREC含量的方法,建立了分析T细胞谱型的方法,为研究生理和病理条件下胸腺输出功能及T细胞免疫莺建改变提供了可靠的方法.
作者:陈广华;吴德沛;王易;常惠荣;朱子玲;冯宇锋 刊期: 2009年第01期
目的 探讨腹腔镜胃痛根治术治疗部分进展期胃癌的可行性和效果.方法 对9例进展期胃癌患者的临床资料进行分析,其中根治性远侧胃次全切除术8例,根治性近侧胃次全切除术1例.结果 9例患者无中转开腹,平均手术时间(260±109)min,平均术中出血量(120±42)ml,平均淋巴结清除数(5.7±2.2)枚,切缘距肿瘤平均长度(6.3±0.5)cm,平均术后进食时间(5.8±2.1)d,平均术后住院天数(12.5±3.4)d,未发生吻合口漏、十二指肠残端漏及死亡.结论 腹腔镜胃癌根治术治疗部分进展期胃癌在技术上是可行的,近期疗效良好,远期疗效有待进一步研究.
作者:范小庆;邢春根;吴浩荣;王浩炜;龚巍 刊期: 2009年第01期
目的 总结带神经血管蒂的足背复合组织皮瓣一期修复手背组织缺损的临床疗效和经验.方法 切取带腓浅神经和趾伸肌腱或跖骨的复合足背皮瓣一期移植修复手背复合组织缺损11例.移植皮瓣面积8mc×7cm~14cm×10cm,携带肌腱多5根.少2根,其中1例移植跖骨1.7 cm.术中根据皮瓣的面积灵活选取切口,避免腓深神经外侧支损伤.结果 足背复合组织皮瓣全部成活,经6-40个月的随访,除1例需行肌腱牯连松解术,其余肌腱功能良好,掌指、指间关节自主活动度接近正常,手背感觉、外观令人满意,移植跖骨愈合;足背供区无明显不适,无趾下垂后遗症.结论 足背复合皮瓣是一期移植修复手背复合组织缺损的一种良好的选择,疗效满意;灵活的切取方法可有效降低供区的不良影响.
作者:黄显军;刘海昌;陆志方;缪夕杭;石纲;夏春林 刊期: 2009年第01期
目的 寻找IRM-2小鼠体内存在的与辐射抗性相关的基因.方法 提取IRM-2小鼠和其亲代小鼠脾细胞总RNA,利用mRNA差异显示技术挑选差异表达片段,对每一条差异带进行特异PCR扩增、克隆和测序.结果 获得IRM-2小鼠独有而亲代小鼠均无的cDNA差异带75条,经测序获得52条差异cDNA序列.与GenBank基因库同源性比较,得到21条与小鼠已知基因不同源的表达序列标签(EST).结论 21条EsT提示IRM-2小鼠体内可能存在辐射抗性相关基因,为进一步分离和鉴定辐射抗性相关基因奠定了基础.
作者:王芹;岳井银;李进;宋力;刘强;穆传杰;吴红英 刊期: 2009年第01期
目的 探讨腹腔注射内皮抑素腺病毒治疗裸鼠原位胰腺癌的机制,观测其疗效.方法 通过细胞内同源重组方法构建携带内皮抑素重组腺病毒Ad-mEndo,体外转染胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3,并测定感染的胰腺癌细胞上清液(鼠源性内皮抑索)mEndostatin蛋白的表达.荷瘤裸鼠腹腔注射腺病毒液Ad-mEndo,观察原位胰腺癌肿瘤的大小及测定肿瘤微血管密度.结果 重组腺病毒Ad-mEndo体外能转染胰腺癌细胞株,并表达mEndostatin mRNA及蛋白.重组腺病毒Ad-mEndo治疗组肿瘤体积和微血管密度均显著小于生理盐水组,差异均有高度统计学意义(均P
作者:张子祥;李德春;赵华;朱东明 刊期: 2009年第01期
目的 探讨加味大柴胡汤对阻塞性黄疸大鼠TLR4 mRNA表达的影响.方法 制作急性阻塞性黄疸大鼠模型,分为7、14、21 d 3个时段,每个时段分为胆总管结扎+加味大柴胡汤组(BDL+MMDB)、胆总管结扎+生理盐水组(BDL+NS)、假手术+生理盐水组(SO+NS)3个组,每组6只大鼠.在不同时相点,检测内毒素、肝功能及用RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达情况.结果 胆总管结扎后7、14、21 d f1静脉血浆内毒素的含量逐渐增加;TLR4 mRNA表达上调;TB增加.加味大柴胡汤治疗7、14、21 d后门静脉血浆内毒素的含量下降,TLR4 mRNA表达逐渐下调;TB 降低,肝功能损伤减轻.结论 加味大柴胡汤可以通过下调TLR4mRNA表达来降低血浆内毒素水平,从而减轻肝脏损害.
作者:谢毅;陈明;谈燚;钱海鑫 刊期: 2009年第01期
目的 探讨狼疮性肾炎患者的临床表现与病理类型的关系.方法 对68例狼疮性肾炎(LN)患者行肾活检,进行临床与病理分析.结果 各病理类型中,Ⅳ型所占比例多,其次为Ⅱ型、V型.Ⅱ型、Ⅲ型主要表现为蛋白尿,且Ⅲ型患者血尿重于Ⅱ型.Ⅳ型和V+Ⅳ型高血压、血尿和肾功能不全发生率均高.V+Ⅲ型与V型蛋白尿均高于Ⅲ型,V+Ⅲ型血尿重于V型和Ⅲ型.Ⅳ型补体C3下降率、抗dsDNA阳性率及活动性指数(AI)明显高于其他类型,差异有统计学意义(P<0.05).慢性指数(CI)以IV型及V型为高,而肾小管间质病变(TIL)以Ⅲ型及Ⅳ型为重.结论 Ⅳ型是常见、活动性高、临床表现突出、预后差的一种类型,需要积极治疗.狼疮性肾炎的病理类型与临床表现有一定相关性,所以临床表现、免疫学指标要和病理结合起来共同制订治疗方案和判断预后.
作者:陈蓓蓓;石永兵 刊期: 2009年第01期
目的 研究99mTc标记抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121在荷人胰腺癌裸鼠体内的显像及生物分布,探讨其用于胰腺癌早期诊断的可行性.方法 采用皮下种植法建立荷人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,以2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰SZ-121,99mTc-葡庚糖酸钠(GH)配体交换法标记SZ-121,经裸鼠尾静脉注入99mTc-SZ-121后1、4 h对裸鼠进行γ显像,于24 h测定荷瘤小鼠体内组织的放射性分布.结果 γ显像及生物分布显示,99mTc-SZ-121被静脉注入荷瘤鼠后1 h,肿瘤即清晰显影,随时问延长趋于增浓,且瘤组织与非瘤组织的放射性比值(T/NT)也逐渐增高,肿瘤每克组织百分注射剂量率(%IDPg)曲均高于注射99mTc-IgG的对照组(P(0.05).结论 99mTc-SZ-121具有活体内定位导向能力,显像时间短,可能是一种有前途的胰腺癌显像剂.
作者:尤徐阳;万卫星;何扬;郁春景 刊期: 2009年第01期
目的 探讨南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)对人肺腺癌A549细胞的作用及其对吉非替尼(Iressa)的抗肿瘤效果.方法 通过细胞生长抑制实验和细胞集落形成实验观察Crotoxin及其与Iressa联用对人肺腺癌A549细胞的作用,生长抑制实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,集落形成实验采用平板克隆法.结果 Crotoxin对人胚肺成纤维细胞的生长无明显影响,但可明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,与Iressa联用可增强Iressa的抗肿瘤效果.结论 Crotoxin对人肺腺癌A549细胞的生长有抑制作用,与Iressa联用效应为协同或相加.
作者:叶彬;何靖康;马海涛;秦正红;邬珺超;韩蓉 刊期: 2009年第01期
目的 克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,构建能同时表达两基因的重组腺病毒活载体,为研制能有效防治结核病的重组腺病毒活载体疫苗打下基础.方法 首先利用PCR技术克隆结核分枝杆菌的ESAT-6和CFP-10基因,将两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体中,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.该穿梭质粒转化含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,经间源重组获得复制缺陷型重组腺病毒载体pAdeasy-1-pShuttle-CMV-ESAT-6-IRES-CFP-10.PacI酶切线性化该质粒,转染AD293细胞进行病毒包装.结果 ESAT-6和CFP-10基因成功克隆,其序列与GenBank公布的一致.两者通过IRES串连插入腺病毒转移载体,获得的重组穿梭质粒经同源重组,成功获得复制缺陷型重组腺病毒质粒Adeasy-1-pShuttle-CMV.ESAT-6-IRES-CFP-10,转染该质粒的AD293细胞出现细胞病变效应.结论 成功克隆了分枝杆菌的ESAT6和CFP-10基因,构建了含IRES串连的ESAT-6和CFP-10基因的重组腺病毒,为重组病毒活载体疫苗的研制奠定了基础.
作者:房红莹;罗满林;王蕾;顾冠彬;邓碧亮 刊期: 2009年第01期
目的 研究NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721生长增殖的影响.方法 常规培养SMMC7721细胞,采用SN50(36 μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内p65蛋白水平.MTT比色法检测细胞生长增殖,计算肿瘤细胞牛长抑制率.PI染色、流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,观察NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721细胞周期及凋亡的影响.结果 肝细胞癌SMMC7721细胞核内存在较高水平的p65蛋白.经SN50阻断后,MTT测定显示细胞的增殖受到明显抑制,并随时间的延长而愈渐明显,24、48、72 h后细胞增殖抑制率分别为22.77%、33.33%和38.89%,与阻断前相比,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测发现实验组G1期细胞比例高于对照组差异有统计学意义(69.5%vs56.5%,P<0.05),S期细胞比例明显降低,与阻断前相比差异有统计学意义(11.1%vs 28.6%,P<0.05),而细胞凋亡率在实验组为38.3%,对照组仅为23.2%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB信号通路阻断诱导细胞周期于G1期停滞和细胞凋亡,从而抑制了SMMC7721细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与了肝细胞癌的生长增殖与发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给肝细胞癌带来新的治疗选择.
作者:姚辉华;王守立;朱宝松;韩蓉;林芳;秦正红 刊期: 2009年第01期
目的 观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的小鼠急性损伤帕金森病(PD)模型中纹状体(CPu)、黑质致密部(SNpc)、额叶皮层联合区(FrA)和腹侧被盖区(VTA)中TNF-α基因和蛋白的时程表达变化.方法 用RT-PCR和Western blot方法对MPTP诱导的小鼠PD模型中相关脑区TNF-α基因和蛋白的表达量进行检测.结果 MPTP诱导的小鼠PD模型中SNpc和CPu脑区TNF-α基因在给药后6 h和1 d有显著性表达,TNF-α蛋白在给药后12 h和1 d有显著性表达,其中1d均是表达高峰;VTA和FrA脑区TNF-α基因和蛋白的表达不显著.结论 表达增高的TNF-α可能对SNpe和VTA脑区DA能神经元及CPu和FrA脑区的DA能神经元末梢起了损伤作用,从而为深入研究PD的治疗过程提供一定的实验依据.
作者:董玉林;张志军;郁晓燕;倪衡建 刊期: 2009年第01期
目的 对比分析多种肿瘤标志物蛋白芯片法与电化学发光免疫分析法(ECLIA)对血清CA72-4的检测结果.方法 应用多种肿瘤标志物蛋白芯片法和ECLIA,同时检测137名健康体检者、67例良性疾病患者和163例恶性肿瘤患者血清CA72-4水平,并进行浓度差异性比较、相关性分析和一致件检验.结果 两种方法检测血清CA72-4的结果在3组患者中均有高度相关性(均P<0.001);对数值呈直线相关(r:0.647,P<0.001);对样本阴、阳性分类的差异无统计学意义(P>O.05),一致性良好(Kappa=0.869,P<0.001).结论 多种肿瘤标志物蛋白芯片法与ECLIA检测血清CA72-4具有近乎同等的临床检验效能.
作者:周莉莉;陆汉魁 刊期: 2009年第01期
目的 分析睾丸女性化综合征(TFS)的临床特点和处理原则.方法 分析17例TFS患者的临床特点、处理方法,并进行随访.结果 17例TFS中,完全型12例.不完全型5例.血睾酮值均高于正常高限,且完全型[(19.15±11.9)nmol/L],明显高于不完全型[(5.5±4.6)nmol/L],差异有统计学意义(P<0.05).所有患者均行睾丸切除术,其中1例睾丸病检示睾丸支持细胞-间质细胞瘤.结论 对多数TFS患者而言,年幼时可行外阴成形术,青春期后行睾丸切除术,婚前行阴道成形术.
作者:张建平;王晓春;金杭美 刊期: 2009年第01期
目的 通过研究苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)和小干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞K562/AO2葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基闪的调节及对凋亡相关基因的影响,以探讨GCS基因致白血病多药耐药的分子病理机制.方法 应用体外细胞培养技术和RNA干扰技术观察GCS特异性的化学抑制剂PPMP及针对GCS的siRNA对K562/AO2细胞GCS基因的抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析GCS基因被抑制前后K562/AO2细胞中GCS摹因、Bcl-2基因、Bax基因的表达水平及差异.结果 PPMP和siRNA可抑制K562/AO2细胞GCS mRNA的表达,同时致相应细胞的Bcl-2基因表达下降,Bax基因则无明显变化.结论 GCS可能是通过Bcl-2信号转导途径使细胞的抗凋亡能力增强,从而导致白血病细胞的多药耐药.
作者:刘艳;谢平;谢可鸣;白小明;穆会君;张滨 刊期: 2009年第01期
目的 构建携带FasL的非增殖腺病毒载体,并研究其生物学特性.方法 将人FasL全长cDNA克隆到非增殖腺病毒载体pSuCMV中,获得pSuCMVFasL重组子,经293包装细胞包装.获得氨苄青霉索抗性克隆,命名为pSuCMVFasL.体外感染人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞72 h后,Western blot检测其在HK-2细胞中的表达.结果 获得携带FasL非增殖腺病毒,滴度为7.3x 109 pfu/ml;Western blot法检测在其感染的HK-2细胞中能检测到重组的蛋白表达.结论 将FasL基因导人非增殖腺病毒载体是一种行之有效的基因转染途径,制备的非增殖腺病毒在体外能有效感染HK-2细胞,为进行体内移植免疫耐受的基因治疗研究奠定基础.
作者:平季根;严春寅;吕金星 刊期: 2009年第01期