学术投稿

GCS通过影响凋亡相关基因致白血病细胞耐药的分子病理机制探讨

刘艳;谢平;谢可鸣;白小明;穆会君;张滨

关键词:葡萄糖神经酰胺合成酶, 苯基棕榈酰胺吗啡丙醇, 小干扰RNA, 白血病, 细胞凋亡, RT-PCR
摘要:目的 通过研究苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(PPMP)和小干扰RNA(siRNA)对白血病多药耐药细胞K562/AO2葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基闪的调节及对凋亡相关基因的影响,以探讨GCS基因致白血病多药耐药的分子病理机制.方法 应用体外细胞培养技术和RNA干扰技术观察GCS特异性的化学抑制剂PPMP及针对GCS的siRNA对K562/AO2细胞GCS基因的抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析GCS基因被抑制前后K562/AO2细胞中GCS摹因、Bcl-2基因、Bax基因的表达水平及差异.结果 PPMP和siRNA可抑制K562/AO2细胞GCS mRNA的表达,同时致相应细胞的Bcl-2基因表达下降,Bax基因则无明显变化.结论 GCS可能是通过Bcl-2信号转导途径使细胞的抗凋亡能力增强,从而导致白血病细胞的多药耐药.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • caspase-3在海马损伤后齿状回神经发生调控中的作用

    目的 探讨成年大鼠海马CA1区损毁后,齿状回(DG)细胞先增殖后减少的原因.方法 用海人酸(KA)建立单侧海马损毁模型;用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记海马DG区增殖的细胞,用免疫组织化学方法检测标记后不同时间点DG区BrdU阳性细胞,并用无偏差体视学方法定量分析;激光共聚焦显微镜检测BrdU与裂解的easpase-3的共表达.结果 实验组动物在损毁海马后各时间点DG区BrdU阳性细胞总数均比对照组明显增多,差异有统计学意义(P<

    作者:彭薇;周菊;龚珊;单立冬;蒋星红 刊期: 2009年第01期

  • 带神经血管蒂足背复合组织皮瓣一期修复手背组织缺损

    目的 总结带神经血管蒂的足背复合组织皮瓣一期修复手背组织缺损的临床疗效和经验.方法 切取带腓浅神经和趾伸肌腱或跖骨的复合足背皮瓣一期移植修复手背复合组织缺损11例.移植皮瓣面积8mc×7cm~14cm×10cm,携带肌腱多5根.少2根,其中1例移植跖骨1.7 cm.术中根据皮瓣的面积灵活选取切口,避免腓深神经外侧支损伤.结果 足背复合组织皮瓣全部成活,经6-40个月的随访,除1例需行肌腱牯连松解术,其余肌腱功能良好,掌指、指间关节自主活动度接近正常,手背感觉、外观令人满意,移植跖骨愈合;足背供区无明显不适,无趾下垂后遗症.结论 足背复合皮瓣是一期移植修复手背复合组织缺损的一种良好的选择,疗效满意;灵活的切取方法可有效降低供区的不良影响.

    作者:黄显军;刘海昌;陆志方;缪夕杭;石纲;夏春林 刊期: 2009年第01期

  • 大孔吸附树脂纯化珍珠菜总皂苷的研究

    目的 探讨大孔吸附树脂优选珍珠菜总皂苷的纯化工艺.方法 以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法测定总皂苷含量,在单因素试验的基础上,用L9(34)正交设计优化大孔吸附树脂对珍珠菜总皂苷的纯化工艺.结果 优树脂纯化工艺为:样品液pH为5.0,样品液总皂苷浓度26.75 mg/ml,洗脱剂为50%的乙醇.结论 优化了的大孔吸附树脂纯化工艺简便易行,稳定可靠.

    作者:潘海敏;唐丽华;游本刚;黄荣华 刊期: 2009年第01期

  • 正常人脑表观弥散系数值定量测量的方法

    目的 探讨佳的弥散定量测量方法,为临床及下一步的研究提供参考.方法 收集20名正常健康体检者,对其行头颅常规MRI检查及平面回波弥散加权成像(DWD检查.获得DWI图,然后在工作站上重建表观弥散系数(ADC)图.每个研究对象选6个感兴趣区(ROI),分别在DWI图及ADC图采用相应测量方法得到每个部位的不同成像方法的平均ADC值.结果 在各相异性DWI图上通过信号强度计算的丘脑ADCM、ADCP、ADCs值差异无统计学意义(P>0.05),额叶白质和内囊后肢的值差异有高度统计学意义(P<0.001);在各相异性(同性)DWI图通过信号强度计算的丘脑、额叶白质、内囊后肢ADCsve值与直接在各向异性(同性)ADC图上测量得出的ADc值差异有高度统计学意义(p<0.001).结论 额叶白质及内囊中的水分子弥散存在各相异性,丘脑中水分子弥散是各相同性的;不同的弥散定量方法所测得的ADC值有明显差异,但以通过DWI图计算出来的ADC值较为准确,定量研究脑组织的弥散还要考虑测量方法.

    作者:魏友平;沈钧康;张彩元 刊期: 2009年第01期

  • 华法林对心房颤动患者血小板活化状态的影响

    目的 探讨华法林抗栓治疗对心房颤动(房颤)患者的血小板活化状态的影响.方法 选择106例45-80岁的非瓣膜病持续性房颤患者,随机分为两组,分别给予华法林(INR在1.5-2.5)(华法林组)和阿司匹林150 mg/d(阿司匹林组)治疗并随访1年.于治疗前、治疗后6和12个月,检查血小板计数和血小板大聚集率(MAR),测定血浆血小板α颗粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-k-PGF1α)水平.结果 治疗后,华法林组的GMP-140[(31.27±11.47)ng/ml vs(14.08±5.96)ng/ml]和TXB2(112.04 pg/ml vs 90.70 pg/ml)显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),阿司匹林组的血小板MAR[(60.54±26.45)% vs(23.29±17.29)]、GMP-140[(31.18±9.78)ng/mlvs(13.11±5.35)ng/ml)、TXB2(103.73 pg/ml vs 38.79 pg/ml)和TXB2/6-k-PGF1α(0.54 vs O.20)显著降低,差异有统计学意义(均P<0.05).Pearson相关分析发现,治疗后GMP-140和TXB2的降低幅度与各自治疗前水平成正相关.随访期间无血栓栓塞和严重出血并发症发生.结论 华法林对房颤患者的血小板活化有抑制作用,但其作用弱于阿司匹林.

    作者:李曦;谢英;张维君;温绍君;赵瑞祥;张妍;彭新界;王龙华;周玉杰;文杰;刘雅 刊期: 2009年第01期

  • 术后镇痛对老年患者上腹部手术胰岛素敏感性的影响

    目的 探讨术后镇痛及镇痛方式对老年患者术后胰岛素抵抗程度的影响.方法 45例择期行上腹部手术的老年非糖尿病患者,随机分为3组,每组15例,I组伞麻联合硬膜外阻滞并保留术后镇痛;Ⅱ组伞麻并行术后静脉镇痛;Ⅲ组全麻后不保留术后镇痛.所有患者分别于术前(硬膜外穿刺或伞麻诱导前)、术后第1天清晨测定血浆血糖(G)、血清胰岛素(INS).计算胰岛素敏感性指数(ISI).观察记录3组术后2、4、8、16、24、48 h患者疼痛评分(VAS).结果 3组术后G、INS水平均明显高于术前,ISI均明显低于术前.差异均有统计学意义(均P<0.05).Ⅲ组术后G、INS明显高于I、Ⅱ组,ISI明显低于I、Ⅱ组,差异均有统计学意义(均P<0.05).I、Ⅱ组VAS芹异无统计学意义(P>0.05).I组和Ⅱ组术前、术后第1天G、INS、ISI差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 老年患者术后镇痛能明显改善腹部手术后胰岛素抵抗程度.小同镇痛模式对术后第1天胰岛素敏感性改变无明显影响.

    作者:张清;李培龙 刊期: 2009年第01期

  • 人抗黏病毒蛋白-MxA基因克隆及在大肠杆菌中的表达

    目的 克隆人抗黏病毒蛋白-MxA基因,构建其原核表达载体并进行表达、纯化、活性鉴定,为深入开展该蛋白功能的研究奠定基础.方法 从IFN-β诱导的A549细胞系中提取总RNA,通过RT-pCR技术扩增出MxA全长cDNA,克隆于pUC119载体,酶切鉴定后并经测序证实序列正确,再克隆于pET-32a(+)载体上构建表达载体pET-32a(+)-MxA,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达并优化诱导条件,通过NTA-Agarose亲和层析和割胶电洗脱法获取纯化MxA蛋白,用SDS-PACE电泳分析表达产物,并通过对病毒VSV的抑制作用鉴定其活性.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示RT-PCR扩增出两条片段,大小同预计片段相符,并经测序证实与公布的MxA基因序列一致;重组载体转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳初步鉴定,目的 蛋白约占总菌体蛋白的25%,与预计的分子量91 kd相一致.用NTA-Agarose亲和层析法可获得纯度>95%的目的 蛋白,割胶电洗脱回收法可获得纯度>90%的目的 蛋白.结论 克隆了人抗黏病毒蛋白-MxA基因,克隆基因在大肠杆菌中获得了较高水平的表达,并通过两种方法获得了该蛋白的纯化物.

    作者:刘鹏;吴康;王坤;葛正珍;孟祥勋 刊期: 2009年第01期

  • 腹腔注射内皮抑素腺病毒治疗原位胰腺癌的实验研究

    目的 探讨腹腔注射内皮抑素腺病毒治疗裸鼠原位胰腺癌的机制,观测其疗效.方法 通过细胞内同源重组方法构建携带内皮抑素重组腺病毒Ad-mEndo,体外转染胰腺癌细胞株AsPC-1、BxPC-3,并测定感染的胰腺癌细胞上清液(鼠源性内皮抑索)mEndostatin蛋白的表达.荷瘤裸鼠腹腔注射腺病毒液Ad-mEndo,观察原位胰腺癌肿瘤的大小及测定肿瘤微血管密度.结果 重组腺病毒Ad-mEndo体外能转染胰腺癌细胞株,并表达mEndostatin mRNA及蛋白.重组腺病毒Ad-mEndo治疗组肿瘤体积和微血管密度均显著小于生理盐水组,差异均有高度统计学意义(均P

    作者:张子祥;李德春;赵华;朱东明 刊期: 2009年第01期

  • 不同成熟时期山羊卵母细胞冷冻保存研究

    目的 比较山羊卵母细胞在不同成熟时期解冻后体外成熟、体外受精及胚胎发育能力.方法 收集山羊生殖泡(GV)期未成熟卵和成熟卵,分5组行开放式拉细麦管(OPS)法玻璃化冷冻,I组:直接冷冻GV期卵;Ⅱ组:GV期卵在体外培养(IVC)8 h后冷冻;Ⅲ组:GV期卵在IVC 16 h后冷冻;Ⅳ组:GV期卵体外培养成熟(IVM)后冷冻;V组:直接冷冻体内成熟卵.解冻后比较各组卵受精率、卵裂率及8细胞胚胎形成率.结果 I组(GV期卵)冷冻解冻后存活率达56.8%,显著高于Ⅱ组(33.3%)、Ⅲ组(31.6%)、Ⅳ组(28.9%)及V组(30.4%),差异有高度统计学意义(均P<0.01).各组体外受精率、卵裂率及8细胞胚胎形成率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用OPS法玻璃化冷冻山羊GV期卵较冷冻其他成熟时期卵效果好.

    作者:吴志南;丁家桐;沈宗姬 刊期: 2009年第01期

  • 硫酸镁对放射性脑损伤大鼠海马齿状回Fos蛋白表达的影响

    目的 探讨硫酸镁(MgSO4)对电离辐射诱发的大鼠急性放射性脑损伤的神经保护作用机制.方法 将18只成年SD大鼠随机分为空白对照组、对照组和MgSO4用药组,用5 MeV电子线对实验大鼠进行加Gy全脑单次垂直照射,照射后2 h采用免疫荧光组织化学法观察海马齿状回Fos蛋白的表达情况.用药组动物于照射前1d、照射前30 min和照射后即刻分别3次给予10%MgSO4(400 mg/kg)缓慢腹腔注射.结果 全脑照射可使大鼠海马齿状回Fos阳性细胞数较空白对照组显著增多,差异有高度统计学意义(P

    作者:邹容;蒋星红;周希平;涂彧 刊期: 2009年第01期

  • 人工气道方式对心脏骤停模型复苏的影响

    目的 观察人工气道建立方式对大鼠心跳骤停模型自主循环恢复后呼吸功能、存活率的影响及改良经口气管插管法的可行性.方法 建立窒息法大鼠心跳骤停模型;30只SD大鼠随机分成经口气管插管组(n=15)和气管切开插管组(n=15)两组.观察复苏后大鼠在机械通气与自主呼吸状况下动脉血气值的变化,比较复苏后6、24、72 h生存率.结果 经口气管插管组在机械通气与自主呼吸状态下的pH值比较,差异无统计学意义(P>0.05),而气管切开组在机械通气与自主呼吸状态下的pH、PaCPO2比较,差异均有高度统计学意义(均P<0.001);同期两组间pH、Pa-CO2、PaO2比较,差异均有高度统计学意义(均P(0.001);气管切开组6、24 h存活率有明显下降趋势,72 h存活率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 对于观察时间长、需要脱机或撤除人工气道的大鼠心跳骤停模型,经口气管插管法建立人工气道优于气管切开插管法;且改良经口气管插管法是值得推荐的一种大鼠气管插管方法.

    作者:赵旭明;刘励军;周保纯;肖盐 刊期: 2009年第01期

  • 乳腺癌术后99mTc-MDP全身骨显像联合CA15-3、CEA检测的临床价值

    目的 分析乳腺癌术后99Tc-MDP全身骨显像联合血清肿瘤标志物CA15-3、CEA检测的临床价值.方法 对124例乳腺癌患者术后行全身骨显像,同时用化学发光免疫分析仪检测患者血清中CA15-3、CEA水平,分析两者联检对骨转移诊断及疗效监测的价值.结果 28例患者出现了骨转移.其中以多发病灶和CA15-3值增高为主,骨转移组CA15-3阳性率75.0%,CEA阳性率32.2%,两者联检阳性率82.2%;非骨转移组CA15-3阳性率16.7%,CEA阳性率6.25%,两者联检阳性率17.7%.治疗有效者CA15-3多明显降低,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);无效或病情进展者CA15-3多上升或无明显下降,与治疗有效者比较.差异有高度统计学意义(P<0.01).CEA值治疗前后差异无统计学意义(P>0.05).结论 同时行骨显像与CA15-3检测有助于乳腺癌术后骨转移的诊断及疗效观察,联合CEA检测可提高敏感性;用CA15-3或CEA进行疗效评估有一定的局限性,须密切结合临床及其他检查作判断.

    作者:熊敏超;陈传新;石怡珍;刘增礼 刊期: 2009年第01期

  • 髋关节置换术后股骨假体周围骨折的治疗

    目的 探讨髋关节置换术后股骨假体周围骨折的病因及其治疗方法.方法 分析髋天节置换术后胶骨假体周围骨折患者12例的临床资料,按Vancouver分型,A型2例,采用保守治疗;B1型7例,应用形状记忆环抱器固定;C型3例,应用锁定加压接骨板内固定.结果 所有病例均获随访,随访时间12~31个,平均18.2个月,骨折均愈合,假体稳定.无感染、畸形愈合、内固定断裂等并发症发生.结论 髋关节置换术后股骨假体周围骨折的治疗比较困难,Vancouver分型标准及治疗方案是较好的指导原则.

    作者:李洪伟;孙俊英;马良波 刊期: 2009年第01期

  • 螺旋CT在儿童副鼻窦支气管炎诊断中的价值

    目的 探讨螺旋CT在儿童副鼻窦支气管炎诊断中的价值.方法 采用冠状位及横断位对42例反复发作儿童副鼻窦气管炎患儿行螺旋CT扫描.结果 42例支气管炎同时合并副鼻窦炎患儿的反复支气管炎发病率达100%.X线胸片以肺纹模糊显示率相对较高为93%;4岁以下年龄组肺炎样阴影显示率为80%,5-10岁年龄组肺炎样阴影显示率则相对较低,仅为35%;但肺门增浓阴影增加,从24%上升至76%.故年龄越小越易显示肺血管周围浸润阴影和肺炎样阴影;年龄越大越易显示肺门增浓影.螺旋CT扫描均有副鼻窦炎表现,以上颌窦炎为主,占94%;其中还有部分患儿腺样体肥大,占65%;年龄越小,病变越严重.结论 螺旋CT是反复发作儿童副鼻窦支气管炎患儿的有效检查方法,对诊疗有重要临床意义.

    作者:施晓平;施健;徐咏;茅伟 刊期: 2009年第01期

  • 江苏居民高血压相关危险因素调查

    目的 探索影响江苏居民高血压发生的危险因素.方法 对2002年全国营养与健康状况调查中血压正常的2 532名居民进行追踪调查,并用Cox回归分析高血雎的影响因素.结果 2 532名调查对象中新发高血压600例,其中男298例.女302例.单因素Cox回归结果显示年龄、性别、经济收入、文化程度、超重肥胖、饮酒、血脂异常与高血压相关.控制混杂因素后,多因素Cox回归的结果显示,性别、年龄、超重肥胖、文化程度、血脂异常是影响高血压发生的危险因素.结论 男性、年龄上升、超量肥胖及血脂异常是高血压发生的危险因素,在高血压防治工作中应当加以重视.

    作者:罗亚洲;袁宝君 刊期: 2009年第01期

  • 人羊膜间充质干细胞抑制异体淋巴细胞增殖的实验研究

    目的 研究人羊膜间充质干细胞分离培养及免疫调节作用.方法 从羊膜中分离和培养间充质干细胞,并通过形态学的结构特征及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度.建立双向混合淋巴细胞反应体系,根据不同效靶比E/T(hAMSCa/PBMC)加入丝裂霉素处理过的羊膜细胞,用3H掺入法测定淋巴细胞增殖率,观察间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响.结果 从羊膜组织成功培养出间充质干细胞,细胞贴壁生长,在体外短期内可以稳定增殖和传代,细胞具有与骨髓问充质干细胞相似的表面标志,与混合淋巴细胞反应体系共同培养抑制了淋巴细胞增殖,其增殖抑制率与加入的细胞数量成正比.结论 羊膜问充质干细胞可以抑制混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞增殖,对同种异体免疫反应具有负调节作用.

    作者:孙鸿丽;吴德沛;沈云峰;毛玉文 刊期: 2009年第01期

  • GSTθ转染对HCT116细胞系的影响

    目的 观察转染了GSTθ后HCT116细胞系的生长、细胞周期的变化,以及HCT116细胞系生长对血清浓度的依赖性.方法 通过脂质体Lipofectamine将质粒载体pcDNA3及pcDNA3-GSTθ分别转染HCT116细胞获得稳定转染株,通过RT-PCR检测GSTθ的表达,细胞计数绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法检测细胞生长对血清浓度的依赖.结果 GSTθ转染后抑制了HCT116细胞的生长,并且是通过G2,M和S期阻滞而导致的,GSTθ还增加了HCT116细胞对血清的依赖性.结论 GSTθ可降低HCT116细胞的恶性程度,使其对血清及营养物质的需求增加.

    作者:乔惠萍;焦旸;徐加英;樊赛军 刊期: 2009年第01期

  • LyGDI真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立

    目的 构建Rho蛋白鸟苷解离抑制因子(LyGDI)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株.方法 PCR扩增LyGDI基因片段,构建pEGFP-C1-LyGDI真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性.脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株,RT-PCR、免疫印迹检测稳定转染的细胞株.结果 构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达LyGDI蛋白.结论 LyGDI真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究LyGDI过度表达对肿瘤侵袭性和转移的影响奠定了实验基础.

    作者:董玉金;吴纪霞;王兴丹;曹丽丽;韩琴芳;周新文 刊期: 2009年第01期

  • SiRNA和携带siRNA重组腺病毒抑制结肠癌移植瘤淋巴管生成的比较

    目的 研究RNA干扰抑制结肠癌移植瘤模型VEGF-C表达和抗肿瘤淋巴管生成的有效方法.方法 建立结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型并随机分为3组(n=8):腺病毒(Ad5F35-VEGF-C-siRNA-EGFP)组、siRNA组和PBS组,对肿瘤进行原位注射,记录各组肿瘤体积变化,免疫组织化学法检测肿瘤内微血管密度(MVD)和淋巴管密度(LVD).结果 VEGF-C干扰能抑制肿瘤生长,且腺病毒组比siRNA组生长更慢.同时免疫组化显示各组MVD值的差异无统计学意义(P>0.05),siRNA组、腺病毒组和PBS组相比,LVD值的差异有统计学意义(P

    作者:陈正荣;邢春根;何腾飞;吕孝东;吴永友;赵奎 刊期: 2009年第01期

  • NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721增殖的影响

    目的 研究NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721生长增殖的影响.方法 常规培养SMMC7721细胞,采用SN50(36 μmol/L)阻断NF-κB信号通路,Western blot检测核内p65蛋白水平.MTT比色法检测细胞生长增殖,计算肿瘤细胞牛长抑制率.PI染色、流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,观察NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721细胞周期及凋亡的影响.结果 肝细胞癌SMMC7721细胞核内存在较高水平的p65蛋白.经SN50阻断后,MTT测定显示细胞的增殖受到明显抑制,并随时间的延长而愈渐明显,24、48、72 h后细胞增殖抑制率分别为22.77%、33.33%和38.89%,与阻断前相比,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测发现实验组G1期细胞比例高于对照组差异有统计学意义(69.5%vs56.5%,P<0.05),S期细胞比例明显降低,与阻断前相比差异有统计学意义(11.1%vs 28.6%,P<0.05),而细胞凋亡率在实验组为38.3%,对照组仅为23.2%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB信号通路阻断诱导细胞周期于G1期停滞和细胞凋亡,从而抑制了SMMC7721细胞生长与增殖,提示NF-κB信号通路组成性激活参与了肝细胞癌的生长增殖与发展,以NF-κB信号通路作为治疗的靶点可能给肝细胞癌带来新的治疗选择.

    作者:姚辉华;王守立;朱宝松;韩蓉;林芳;秦正红 刊期: 2009年第01期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主办:苏州大学