魏立;李建有;孙俊英
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK cells)的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用.方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变.结果 经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达(4.8~5.0)×109,活性细胞比例>90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3+,CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义(P<0.01).实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法.
作者:沈丽琴;戴宏;庄志祥 刊期: 2009年第03期
目的 探讨肠内营养在重症急性胰腺炎(SAP)治疗中的应用价值.方法 分析30例SAP患者的临床资料,按营养支持不同分为肠内营养(EN)16例和全胃肠外营养(TPN)14例.观察两组治疗结果及临床指标的变化.结果营养支持2周后,两组患者的APACHEⅡ评分、CTSI较前显著降低,且EN组的各项评分均显著低于TPN组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).营养支持后两组的血糖、血清白蛋白、血钙和血肌酐均较前有显著改善,差异有高度统计学意义(P<0.01),但两组之间各项指标的差异无统计学意义(P>0.05).同时,EN组平均住院天数明显缩短,中转手术率、感染率、病死率方面EN组均明显低于TPN组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 EN治疗SAP疗效优于TPN,应用于临床是安全可行的.
作者:华晨;刘励军 刊期: 2009年第03期
目的 探讨保留子宫双侧动脉在子宫切除术中的临床应用价值.方法 将60例行单纯子宫切除术患者随机分为保留子宫动脉筋膜内子宫切除组(简称改进组)和筋膜内常规全子宫切除组(简称传统组),每组各30例.探讨两组术后相关恢复指标及对卵巢功能、性激素等的影响.结果 改进组与传统组之间的手术及术后恢复情况,各指标的差异无统计学意义(P>0.05).对于血清FSH、E2,传统组术后与术前相比,差异有统计学意义(P<0.05);改进组术后与术前相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 保留子宫动脉行子宫切除术,对近期卵巢功能影响小,不易引起更年期症状.其远期疗效仍需深入研究.
作者:邓云;付曙娅 刊期: 2009年第03期
目的 通过将骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上,研究BMSCs的生长及成神经分化情况.方法 用家蚕丝素、柞蚕丝素分别与聚乳酸共混制成静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维,将第5代大鼠BMSCs培养其上,于24 h后通过活细胞工作站观察细胞的黏附情况,并进行表型鉴定及存活检测.接种后待细胞长至60%左右,用bFGF/BHA诱导细胞成神经分化,并设多聚赖氨酸组进行对照.在诱导5 h和维持48 h时,观察细胞的形态学改变,通过免疫荧光法鉴定神经细胞特异性标志物Nestin,β-Ⅲ-Tubulin和NCAM的表达并进行定量统计分析.结果 BMSCs在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上的黏附情况良好,细胞生长于纳米纤维上.存活检测中几乎未发现死细胞,多数细胞在材料上可存活.神经分化的形态学改变与多聚赖氨酸组一致,并且培养在纳米纤维上的细胞分化时出现的突起可缠绕在纺丝纤维上.神经特异标志的表达情况与多聚赖氨酸对照组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 静电纺丝素,聚乳酸纳米纤维具有良好的生物相容性,可支持BMSCs的黏附及成神经分化,且对细胞生存无毒性.
作者:宋琳;朱爱思;徐路尧;张锋;左宝齐;王敏;包普花;张焕相 刊期: 2009年第03期
目的 探讨再生柞蚕丝素蛋白对小鼠间充质干细胞体外生长和分化的支持作用.方法 采用再生家蚕丝素蛋白、再生柞蚕丝素蛋白、Ⅰ型胶原、普通细胞培养板为研究对象,观察小鼠间充质干细胞(C3HIOT1/2)在这4种生物材料上的黏附、生长及表面抗原的变化.利用光学显微镜观察细胞生长形态,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪测定细胞表型.结果 再生柞蚕丝素蛋白对细胞生长形态、细胞表面抗原表达均无影响.培养第6天C3HIOT1/2细胞在再生柞蚕丝素膜上增殖明显,与其他3种生物材料的差异有统计学意义(P<0.05).结论 再生柞蚕丝素蛋白在体外支持C3H10T1/2细胞的黏附、生长,具有很好的组织相容性.
作者:谢炜;王泳;古彦铮;潘建忠;徐颖;徐云云;李明忠;张学光 刊期: 2009年第03期
目的 构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,并研究其对B细胞淋巴瘤Raji细胞的干扰效果.方法 根据GenBank提供的bcl-2 cDNA序列,设计并合成两对短发夹结构的互补DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至载体pGenensil-1构建重组质粒,予以酶切和DNA测序鉴定.脂质体介导重组质粒转染Raji细胞,采用RT-PCR法观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果 酶切及测序鉴定表明,成功构建bcl-2 shRNA的质粒表达载体pGenesil-1-bcl-2-544和pGenesil-1-bci-2-1009.转染Raji细胞48 h后,RT-PCR结果显示Raji细胞中bcl-2 mRNA表达分别下调了(31.95±3.02)%和(47.57±2.88)%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Raji细胞凋亡率分别为(14.25±0.84)%和(11.96±0.79)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,它能有效沉默bcl-2基因在B细胞淋巴瘤中的表达并促进B细胞淋巴瘤Raji细胞凋亡.
作者:秦陈浩;申咏梅;宋妙丽;冯萍 刊期: 2009年第03期
目的 比较膝关节各物理检查对半月板损伤的诊断价值,并探讨膝关节各物理检查的相瓦关系.方法 将磁共振提示膝关节半月板Ⅲ°损伤患者47例(其中内外侧半月板都损伤24例)体检发现的膝关节物理阳性体征与手术所见进行对照,并行多个率的多重比较分析及四格表法的统计学分析.结果 47例患者中,麦氏试验阳性者41例,膝关节间歇压痛点阳性者39例,股四头肌萎缩阳性者33例,研磨试验阳性者28例,重力试验阳性者24例,蹲走试验阳性者22例,膝过伸试验阳性者20例,浮髌试验阳性者17例,膝过屈试验阳性者14例.其中关节间隙压痛、麦氏试验、股四头肌萎缩对半月板损伤的诊断价值优于其他物理检查,差异均有高度统计学意义(均P<0.001);膝关节内外间隙压痛对半月板损伤的定位优于其他方法,与手术所见相关性高(P>0.05);各物理检查具有一定相关性与互补性,选取适当的物理检查组合可提高半月板损伤的诊断率.结论 膝关节各物理检查对半月板损伤的诊断缺乏特异性,但都具有一定的参考价值,对初步判定半月板损伤部位有相当的临床意义.
作者:陈绩;华锦明;胡学彬 刊期: 2009年第03期
目的 探讨多基因表达及相互作用与口腔癌前病变癌变的关系.方法 采用免疫组织化学ABC法对76例上皮异常增生和84例正常口腔黏膜p53、Ki-67、p16和cyclin D1的表达进行研究,并对上皮异常增生患者实际癌变率做了3年追踪调查.结果 口腔黏膜癌前病变组织p53和Ki-67表达明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义(P<0.05);p53和Ki-67同时过度表达与实际口腔癌前病变癌变率密切相关;口腔黏膜癌前病变组织中存在p16和cyclinD1表达失衡现象.结论 p53和Ki-67同时过度表达及p16和cyclinD1表达失衡是口腔黏膜癌前病变癌变的重要标志.
作者:马三成;赵今;Paul Speight 刊期: 2009年第03期
目的 分析卵巢癌患者癌组织、癌旁组织及正常卵巢黏膜组织双向凝胶电泳的蛋白质表达图谱,寻找差异表达的蛋白质.方法 采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离卵巢癌患者配对癌组织、癌旁组织及正常卵巢黏膜组织的总蛋白,银染显色,PD Quest 2DE软件分析差异表达的蛋白质点;凝胶经银染显色后,Bio-Rad凝胶扫描仪扫描,Imagemaster图像软件分析,差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离-两级飞行时间串联质谱法进行鉴定.结果 获得了重复性较好的双向凝胶电泳银染图谱.3组胶的平均匹配率分别为:癌组织83.4%、癌旁组织81.2%、正常卵巢黏膜组织88.1%.斑点位置偏差等电聚焦方向上为(1.21±0.27)mm,SDS-PAGE方向上为(1.03±0.28)mm.差异分析共获得164个差异表达的蛋白质点;有差异性表达的8种蛋白质中有4种为结合珠蛋白的亚型.结论 双向凝胶电泳-质谱技术能分离卵巢癌组织的总蛋白,并获得重复性较好的结果;结合珠蛋白能为诊断卵巢癌提供诊断手段.
作者:李玉华;杨留才;孙炯;索艳君;凡利俊 刊期: 2009年第03期
目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在糖尿病小鼠体内的归巢和对小鼠糖尿病的治疗作用.方法 体外分离和培养出绿色荧光蛋白(GFP)小鼠的mMSCs,经尾静脉将其移植到同品系糖尿病小鼠模型体内.观察GFP-mMSCs在受体体内的分布,检测移植后小鼠血糖、胰岛素、体质量和尿量的变化.结果 接受了mMSCs移植的糖尿病小鼠血糖得到一定控制,血清胰岛素增加,体质量恢复,尿量减少,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).mMSCs移植后30 d,在糖尿病小鼠的心脏、肺脏、肝脏、胰腺及肾脏中检测出GFP-mMSCs的分布,但以胰腺和肾脏为多.结论 mMSCs在糖尿病小鼠体内有向胰腺归巢的倾向,并对糖尿病有一定的治疗效果.
作者:陆玉华;朱铭岩;陈健;王志伟;钱海鑫 刊期: 2009年第03期
目的 比较人工股骨头置换与股骨近端髓内钉(PFN)内固定治疗股骨粗隆间骨折的疗效.方法 对53例高龄股骨粗隆间骨折,随机分别采用人工股骨头置换术28例,PNF内固定25例治疗,术后随访6个月以上,比较两组间在手术情况、术后并发症、术后髋部功能评分等方面的差异.结果 两组患者在手术时间、术中出血方面的差异无统计学意义(P>0.05),但术后并发症、卧床时间人工股骨头置换组优于PFN组,差异有统计学意义(分别P<0.05和<0.01).术后髋关节功能Harris评分术后1、3个月人工股骨头置换组明显高于PFN组,差异有统计学意义(P<0.05),而术后6、12个月两组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 人工股骨头置换术是股骨粗隆间骨折内固定术较为合理的替代术式.
作者:成亮;邹天明;陈广祥;王东来;韦敏祥 刊期: 2009年第03期
目的 探讨分化型甲状腺癌外科治疗的方式及效果.方法 回顾性分析132例分化型甲状腺癌的临床资料.结果 乳头状癌96例,滤泡状癌36例,证实有淋巴结转移35例(淋巴结转移率28.51%).Ⅰ期癌31例,Ⅱ期癌42例,Ⅲ期癌10例,Ⅳ期癌49例.行患侧甲状腺全切+峡部切除+对侧甲状腺大部切除术98例,其中行功能性颈淋巴结清扫术26例,标准颈淋巴结清扫术18例;行患侧甲状腺全切+峡部切除术11例,其中行颈淋巴结清扫术1例;行双侧甲状腺全切除术23例,其中行颈淋巴结清扫术10例.包括双侧颈淋巴结功能性清扫术8例.随访89例,仅有8例死亡,其中死于甲状腺癌复发或转移7例.结论 分化型甲状腺癌,应采取个体化手术方案,推荐手术方式为患侧甲状腺及峡部全切除+对侧大部切除术.不推荐预防性颈淋巴结清扫术;常规行Ⅵ区淋巴结清扫术;如Ⅵ区或颈部肿大淋巴结阳性,则行功能性颈淋巴结清扫术.
作者:徐博;蒋国勤 刊期: 2009年第03期
目的 探讨难治性抑郁症(TRD)的临床特征.方法 收集TRD和非难治性抑郁症(NTRD)各60例.自制问卷调查一般情况及临床特征,用汉密尔顿抑郁量表(HAMD17)评定抑郁症状,测定甲状腺功能,进行统计学分析.结果TRD组发作次数、阳性家族史、残留症状显著多于NTRD组,差异有高度统计学意义(P<0.001).HAMD17总分两组差异有统计学意义(P<0.05),因子分析TRD组阻滞分显著高于NTRD组,睡眠分显著低于NTRD组,差异均有高度统计学意义(P<0.01).结论 抑郁症阳性家族史、抑郁症残留症状、疾病严重程度、阻滞症状、发作次数多、本次病程长与难治性有关.
作者:任列;吴爱勤;兰光华;孙菊水;朱义平 刊期: 2009年第03期
目的 探讨内镜黏膜下剥离术(ESD)治疗胃间质瘤的疗效和安全性.方法 对胃间质瘤应用头端弯曲的针形切开刀进行ESD治疗:(1)黏膜下注射生理盐水;(2)预切开病变周围黏膜;(3)剥离黏膜下层组织显露病变,一次性完整切除病变.结果 24例胃间质瘤,20例病变一次性完整剥离,4例未能剥离后接受外科手术.ESD手术时间25~140 min(平均62.5 min).1例术中出现消化道穿孔,应用金属夹成功闭合.术中平均出血量约50 ml,术后均未出现出血.亦未出现其他并发症.结论 ESD治疗胃间质瘤安全、有效,大多可以一次性完整切除病变,提供完整的病理学诊断资料,达到外科手术同样的疗效.
作者:徐进康;徐宏伟 刊期: 2009年第03期
目的 探讨梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的比例及其临床意义.方法 应用流式细胞分析仪检测42例梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例,并与30名正常人群的检测结果相对照.结果 梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞比例[(8.94±6.72)%]较正常人对照组[(5.36±4.5)%]显著增高,差异有高度统计学意义(P<0.01),但其与快速血浆反应素试验(RPR)滴度无相关性(P>0.05).结论 梅毒患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例较高,它们对梅毒患者具有免疫抑制功能.
作者:展富琴;冯萍;顾爱萍;曹伟;朱梅俪;茅挺;孙兰云;孙燕 刊期: 2009年第03期
目的 探讨婴幼儿喘息与呼吸道病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体感染及过敏的关系.方法 选择毛细支气管炎(毛支)患儿142例、反复喘息患儿138例、普通肺炎患儿134例,进行呼吸道合胞病毒(RSV),腺病毒(Adv),流感病毒A型、B型(InfA、InfB),副流感病毒1、2、3型(Pinf1、Pinf2、Pinf3),人类偏肺病毒(hMPV)8种病毒和肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)检测,同时进行食物过敏原筛查(fx5E)和吸入过敏原筛查(phadiatop)及过敏性疾病史收集.结果 毛支组和反复喘息组RSV和hMPV阳性率均高于肺炎组;反复喘息组MP、CP阳性率高于毛支组和肺炎组;反复喘息组食物过敏原和吸入过敏原阳性率以及有特应性体质和(或)特应性家族史的比例显著高于毛支组和肺炎组,以上差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01).结论 RSV、hMPV、MP、CP感染是诱发婴幼儿喘息的主要病原;MP、CP感染与过敏是影响婴幼儿反复喘息的危险因素.
作者:严永东;王宇清;陈正荣;朱灿红;黄莉;季伟;张学兰;丁云芳 刊期: 2009年第03期
目的 动态研究急性冠状动脉综合征(ACS)患者住院期间静脉血中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)浓度改变及其临床意义.方法 49例冠心病患者经临床和造影证实其中有急性心肌梗死(AMT)14例、不稳定型心绞痛(UAP)19例、稳定型心绞痛(SAP)16例,在急性发作期的1、2、3、7、10天5个时间点抽取静脉血测定中性粒细胞MPO水平,选取无心绞痛发作史的健康体检老年人16人为对照组.结果 ACS(包括AMI和UAP)发作的10 d内,其MPO水平始终明显高于SAP患者和对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);第1~3天,AMI组MPO水平均高于UAP组,差异均有统计学意义(均P<0.05),第7~10天,UAP患者的MPO水平已接近AMI组,差异无统计学意义(P>0.05);SAP患者入院第1天的MPO值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但随即恢复正常.结论 动态观察MPO值的变化可预测冠心病患者冠状动脉中斑块的稳定情况,从而预测ACS事件的发生及预后.
作者:关艳丽;张立群;干朝晖;俞根龙;陈胜备 刊期: 2009年第03期
目的 研究TSC2基因的表达产物tuberin在结直肠癌中mRNA和蛋白水平的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其在结直肠癌发生中的作用.方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测40例结直肠癌与癌旁正常肠黏膜组织中tuberin mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测60例结直肠癌与癌旁正常肠黏膜组织tuberin蛋白的表达,分析tuberin mRNA和蛋白表达与临床病理特征的关系.结果 40例结直肠癌中tuberin mRNA表达量与患者年龄、性别、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移、远处转移无相关性(P>0.05),但显著低于癌旁正常组织,差异有高度统计学意义(P<0.01).tuberin蛋白在60例结直肠癌与癌旁正常肠黏膜组织中的阳性表达率分别为41.6%、75%,差异有统计学意义(P<0.05).tuberin蛋白阳性表达率与性别、组织学分级相关.结论tuberin在结直肠癌中表达下调.可能参与结直肠癌的发生.
作者:刘维明;余生元;韩复;叶凯;丘家明 刊期: 2009年第03期
目的 建立一种新的适用于治疗重症急性胰腺炎(SAP)的猪模型,为SAP肠内给药提供实验和理论依据.方法 8只太湖梅山猪随机分成SAP组和对照组,每组4只.两组均在开腹直视下置入鼻空肠管.SAP组通过胰管内注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,对照组仅行胰管插管不注射任何药物.比较两组动物一般情况、血清淀粉酶、CT评分及胰腺病理形态学改变,验证鼻空肠管置入及SAP模型诱导是否成功.结果 同对照组比较,SAP组血清淀粉酶的总体均数明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);CT、病理评分均进一步证明了鼻空肠管置入及SAP模型诱导成功.结论 在猪的SAP模型上成功置入鼻空肠营养管,为研究肠内给药在胰腺炎中的应用建立了一种简单、无创、可重复性的动物模型.
作者:林敏;陈卫昌;刘强;祝建红 刊期: 2009年第03期
目的 了解2型糖尿病患者的血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)水平,并探讨它与体脂、糖脂代谢、胰岛素敏感性及炎症因子等的相关性.方法 用酶联免疫吸附法检测了35例正常对照组(NGT)、54例初诊2型糖尿病组(NDDM)和54例病程≥5年的2型糖尿病组(LDDM)患者的空腹血清FGF-21浓度,同时测定受试者的体格指标及空腹状态下血糖、血脂、胰岛素(FINS)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等,并计算腰臀比(WHR)、体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β).结果 NDDM组和LDDM组的FGF-21水平均显著高于对照组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),但NDDM和LDDM组间的FGF-21差异无统计学意义(P>0.05).简单相关分析显示,FGF-21与年龄、WHR、收缩压(SBP)、空腹血浆葡萄糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、HOMA-IR、hs-CRP均显著正相关,与HOMA-β成显著负相关.多元逐步回归分析表明,空腹血清胰岛素(FINS)、HOMA-IR、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和hs-CRP是血清FGF-21的独立相关因素.Logistic回归分析表明,FGF-21与2型糖尿病成正相关.结论 FGF-21可能参与了2型糖尿病的发生和发展.
作者:朱蓓;王进红;成兴波;蒋伏松 刊期: 2009年第03期