学术投稿

大鼠骨髓基质细胞的体外培养及鉴定

罗蔚锋;包仕尧;张志琳;刘春风;霍红梅

关键词:SD大鼠, 骨髓基质细胞, 细胞培养
摘要:目的观察大鼠骨髓基质细胞在体外培养的条件,为诱导骨髓基质分化形成神经干细胞、神经元,以及移植鼠骨髓基质细胞治疗帕金森病大鼠奠定基础.方法取60~90 g SD大鼠,体外培养骨髓基质细胞,利用倒置相差显微镜观察原代及不同传代细胞生长形态特点,并应用流式细胞仪鉴定原代及不同传代细胞表型.结果培养的骨髓基质细胞第3代,间充质干细胞的细胞表面标志CD90表达阳性的细胞已占到92.9%.造血干细胞的表面标志CD45表达阳性的细胞已从原代的73.4%降低到2.3%.结论传3代的细胞适合于细胞诱导分化,可作为理想细胞移植治疗的细胞来源.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 不同细胞因子组合对脐带血AC133+细胞体外扩增效率的影响

    目的探讨不同细胞因子组合对脐带血AC133+细胞体外扩增效率的影响.方法采用免疫荧光标记法,使用流式细胞仪测定新鲜分离的、不同培养条件下体外培养7、14d的脐带血AC133+细胞的扩增效率.结果新鲜脐带血AC133+细胞的比例为(0.93±0.2)%.短期液体扩增培养后,脐带血AC133+细胞的比例发生明显变化,其中在细胞因子SCF、FL和IL-3组合下,AC133+细胞的细胞数及扩增倍数与SCF、FL和IL-11组合相比较,差异非常显著(P<0.01).结论在体外短期扩增培养中,早期效应细胞因子能显著上调脐带血AC133+细胞的比例;用SCF、FL和IL-3组合扩增脐带血造血干/祖细胞,能够获得更高的体外扩增效率.

    作者:刘玉龙;戴宏;姜忠;周丽英;胡勤芳;郭晓葵;周剑影 刊期: 2005年第01期

  • 吗啡、曲马多、芬太尼用于术后硬膜外连续恒定镇痛的临床观察

    120例ASAⅠ~Ⅱ级的下腹部及下肢手术患者术后硬膜外连续恒定镇痛,随机分为吗啡组(M)、曲马多组(T)、芬太尼组(F)3组,每组40例,观察患者48 h内视觉模拟疼痛评分(VAS)及不良反应的发生率.结果显示:VAS评分M、T组<F组(P<0.05);恶心呕吐的发生率M组>T、F组(P<0.05);皮肤瘙痒的发生率T组<M、F组(P<0.05).提示曲马多组配方镇痛效果好,不良反应发生率低.

    作者:潘守俊;魏兴;谢红 刊期: 2005年第01期

  • 人基质金属蛋白酶-2纤维连接蛋白样片段的原核表达及单抗制备

    目的在体外原核表达基质金属蛋白酶-2(MMP-2)纤维连接蛋白样片段,制备抗MMP-2特异性的单克隆抗体.方法体外掊养EA hy926内皮细胞,收集细胞后抽提总RNA,利用所合成引物经RT-PCR获得纤维连接蛋白样片段cDNA,与PET20b(+)表达载体重组后转化大肠杆菌BL21(DE3)plus,挑选阳性克隆后,经IPTG诱导表达蛋白.蛋白经次氮基三乙酸镍琼脂糖(Ni-NTA agarose)柱纯化浓缩后免疫Balb/c小鼠,尾静脉加强后取脾细胞融合,ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水.结果原核表达MMP-2纤维连接蛋白样片段大小为21 kd,表达量占菌体总蛋白25%,经Ni-NTA agarose柱纯化后,获得了部分纯化的蛋白.小鼠脾细胞与杂交瘤细胞融合后筛选获得1株单克隆抗体.结论抗MMP-2特异性抗体的获得为MMP-2测定提供了一个有效工具,为进一步研究MMP-2的功能及探讨MMP-2在实体瘤及血液肿瘤发病过程中的作用奠定了基础.

    作者:胡晓慧;蒋菊香;董宁征;沈飞;阮长耿 刊期: 2005年第01期

  • 急性胰腺炎患者血小板计数变化规律及临床意义

    目的探讨急性胰腺炎(AP)时血小板计数的变化规律及其临床意义.方法回顾性分析AP不同病程、严重程度、性别、年龄的血小板计数变化的特点.结果AP发病第1天中有49%的患者血小板计数<100×109/L,该比例随后逐渐下降(r=-0.85);平均血小板计数在起病的前2周内呈上升趋势(r=0.96),且不同发病天数间的平均血小板计数有显著差异(P<0.01).病程中后期,部分患者的血小板计数>300×109/L,其比例随病程时间延长而升高(r=0.83);上述变化在不同性别中无明显差异,但≥60岁的患者中血小板计数<100×109/L的比例明显高于<60岁者(P<0.05).重症胰腺炎(SAP)患者发病前3天首次血小板计数<100×109/L的比例(57%)明显多于轻症AP患者(19%,P<0.001),病程中血小板计数>300×109/L的比例(29%)也明显多于轻症患者(7%,P<0.001).如以发病后首次血小板计数<100×109/L为标准预测SAP,其敏感性59%,特异性81%,阳性预测值51%,阴性预测值85%.结论AP发病时血小板计数有下降趋势,随着病程延长,血小板计数有增高趋势,血小板计数<100×109/L对预测SAP有较高的特异性.

    作者:袁苏徐 刊期: 2005年第01期

  • 重组组织型纤溶酶原激活剂治疗急性肺栓塞9例

    采用重组组织型纤溶酶原激活剂(RT-PA)2 h微泵输入治疗肺栓塞9例,总有效率为89%,无严重并发症.提示RT-PA溶栓疗法治疗急性肺栓塞疗效显著,副作用少,可明显降低其病死率及致残率.

    作者:惠复新;吴艳;汪家坤;邹黎菲 刊期: 2005年第01期

  • PCR检测胃黏膜和唾液中的幽门螺杆菌

    运用聚合酶链反应(PCR)分别检测48例患者的胃黏膜和唾液标本中的幽门螺杆菌(Hp).结果对于胃黏膜Hp而言,组织学检查和PCR具有高度一致性.在胃黏膜Hp阳性的36例患者中,唾液标本的检出率为72.2%(26/36).在胃黏膜Hp阴性的12例患者中,有2例患者的唾液Hp呈阳性(16.7%).提示口腔感染可能是Hp的主要传播途径之一.PCR检测唾液Hp是一种有效的非侵入性Hp诊断方法,适用于Hp感染流行病学的调查.

    作者:华江;郑家驹;王毓明;李明珍 刊期: 2005年第01期

  • 两种术式治疗早期非小细胞肺癌的对比研究

    分析79例早期(T1N0M0)非小细胞肺癌(NSCLC)的手术效果,其中电视胸腔镜楔形切除术21例,开胸肺叶切除术58例.比较两组间的术后并发症、病死率、复发率、生存率及肺功能等情况.结果:肿瘤的组织类型、术后并发症发生率和病死率及后期肺功能无显著性差异.胸腔镜组患者的年龄偏大,慢性阻塞性肺病(COPD)发病率高,肺功能较差;与肺叶切除组相比,胸腔镜组平均住院日明显减少,局部复发率增高,差异有统计学意义.两组的1年生存率相似(胸腔镜组95%,肺叶切除组91%),5年生存率有明显差异(胸腔镜组65%,肺叶切除组70%,P<0.05).提示对有心肺功能损害的早期NSCLC患者,电视胸腔镜楔形切除术是一种可行的外科治疗,但由于局部复发率较高,只要患者心肺功能能耐受,仍应首选肺叶切除术.

    作者:李厚怀;沈振亚;许栋生;于曙东;余云生;叶文学;焦鹏;黄浩岳;周晓彤 刊期: 2005年第01期

  • 两种锁骨钩钢板治疗Ⅲ°肩锁关节脱位疗效比较

    对34例新鲜肩锁关节脱位Ⅲ°患者分别采用A0 Synthes公司提供的锁骨钩钢板及威联德公司提供的Wolter锁骨钩钢板固定.结果除1例外,所有患者均获复位,功能满意,两种治疗方法临床效果比较无显著差异.认为两种锁骨钩钢板均能满意治疗TossyⅢ°新鲜肩锁关节脱位,但AO锁骨钩钢板操作相对简便,手术创伤小.

    作者:朱晓宇;杨惠林;杨同其;徐耀增 刊期: 2005年第01期

  • PACU内腹腔镜和剖腹胆囊切除术后并发症的比较

    采用Roberta的麻醉后治疗室(PACU)并发症指标,对腹腔镜和剖腹胆囊切除术后患者在PACU内的并发症进行比较分析.结果表明,两组患者呼吸和循环并发症无明显差异;腹腔镜组恶心呕吐的发生率明显高于剖腹组;ASAⅢ级患者并发症的发生率明显高于ASAⅠ、Ⅱ级患者,尤其是腹腔镜组;剖腹组疼痛的发生率高于腹腔镜组;其他并发症的发生率两组无明显差异.提示要对ASAⅢ级以上的患者尤其是腹腔镜手术的患者,加强术中和术后的管理,严密监测,对出现的并发症及时处理,提高麻醉安全性.

    作者:范瑛;魏兴;谢红 刊期: 2005年第01期

  • 脑氧饱和度及颅内压监护对不同剂量甘露醇治疗作用的评估

    目的观测不同剂量甘露醇治疗后局部脑氧饱和度(rScO2)、颅内压(ICP)的变化规律,探讨更好的甘露醇使用方法.方法选择20例重型颅脑损伤术后ICP<30 mmHg的患者为研究对象,分别每次用125、250 ml的20%甘露醇治疗1 d,总的剂量不变.同时应用近红外线光谱仪(NIRS)、颅内压监护仪持续监测rScO2、ICP,并进行分析比较.结果rScO2开始变化、出现峰值的时间都较ICP早.ICP<25 mmHg时,125 ml组比250 ml组一天中ICP、rScO2维持在正常范围的时间长(P<0.01).25 mmHg<ICP<30 mmHg时,125 ml组比250 ml组一天中ICP维持<20 mmHg、rScO2维持在正常范围的时间长(P<0.01).结论ICP<30 mmHg时,125 ml剂量的甘露醇多次使用能够更好地缓解脑水肿.rScO2对缺血缺氧比较敏感,比ICP更能反映颅脑外伤后脑灌注、脑缺血缺氧等代谢状况的变化.

    作者:金科;兰青 刊期: 2005年第01期

  • NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响

    目的观察NBT对大鼠局灶性脑缺血的影响.方法采用大鼠大脑中动脉梗塞(MCAO)造成局部脑缺血模型,观察NBT对脑缺血大鼠行为症状、脑梗死面积、脑组织含水量的影响.结果预先给予NBT 0.21 g/kg,0.42 g/kg7 d,可减轻MCAO大鼠行为障碍、减少脑梗死面积、降低脑组织的含水量(P<0.05).结论NBT对大鼠脑缺血有一定的预防作用.

    作者:周方;顾振纶;张慧灵;周文轩;郭次仪 刊期: 2005年第01期

  • 生长因子浓度和添加方式对兔间充质干细胞生长的影响

    目的探讨不同浓度bFGF和TGF-β1、bFGF不同添加方式对间充质干细胞增殖的影响.方法取兔间充质干细胞(MSCs),梯度离心,分离培养.取第4代细胞,分别添加不同浓度bFGF(0、10、50、80、100ng/ml)及序贯或同时加入TGF-β1、bFGF.观察细胞形态变化,MTT法测定各组细胞吸光值.结果各组细胞形态无显著差异.高浓度bFGF及序贯加入TGF-β1、bFGF,吸光值测定高于其他各组(P<0.05).结论bFGF浓度增加,促增殖作用加强.序贯添加TGF-β1、bFGF,小剂量可明显促进细胞增殖.

    作者:谢宗刚;董启榕 刊期: 2005年第01期

  • 层流手术室不同状态下空气细菌学的对比分析与对策

    在不同状态下对不同级别层流手术室空气的细菌进行采样,经培养后测定菌落数.结果:手术开始后30min及2 h时术中控制开门次数和人员流动数与未控制组相比,空气中菌落数均有明显差异,经控制管理后的空气菌落数明显减少(P<0.001);且手术开始后2 h时空气菌落数均比手术开始后30 min时低(P<0.05).认为手术人员对层流手术室的学习和认识亟待提高,防止其他手术间人员随意进出,参观人员必须更换清洁的洗手衣裤,以减少对术中空气的污染,降低手术患者的感染率.

    作者:王莉;钟建华;杜美兰;蒋芳琴;秦长渝;吴晨虹;盛亚敏 刊期: 2005年第01期

  • 爱尔卡因表面麻醉下非超声乳化白内障摘除及人工晶体植入术201眼报告

    对182例(201眼)白内障患者在爱尔卡因表面麻醉下行小切口非超声乳化白内障摘除及人工晶体植入术.结果所有患者在表面麻醉下均能很好地配合手术顺利完成,无1例改用其他麻醉方法.平均手术时间为16.50 min.术后1 d及1周视力≥0.5者分别占69.23%和82.97%.表明爱尔卡因表面麻醉小切口非超声乳化白内障摘除及人工晶体植入术是安全有效的.

    作者:肖前峰 刊期: 2005年第01期

  • 血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达

    目的利用基因重组技术体外表达血小板糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)胞外区片段.方法采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段cDNA,构建表达载体pET-20b(+)-GPⅥ,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达.表达产物经Ni-NTA Resin纯化后复性;使用Western blot方法鉴定重组蛋白性质.结果PCR扩增产物经测序证明与GPVI胞外区cDNA序列完全一致;酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b(+)-GPⅥ;原核细胞经诱导表达后出现新的相对分子量为32 kd的蛋白条带,诱导产物以包涵体形式存在;Western印迹分析表明重组蛋白可与抗Penta-His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合.结论正确构建了GPⅥ表达载体并成功表达重组蛋白,纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性.

    作者:余自强;董宁征;白霞;祝怀平;季顺东;江淼;阮长耿 刊期: 2005年第01期

  • Syndecan-1在人脑胶质瘤中的表达及临床意义

    目的通过研究黏附分子Syndecan-1在人脑胶质瘤中的表达,探讨其与胶质瘤浸润发展的关系.方法用免疫组化SP法,检测41例人脑胶质瘤手术切除标本及8例正常脑组织的Syndecan-1表达.结果Syndecan-1在胶质瘤中的表达明显低于对照组(P<0.05);胶质瘤Ⅰ~Ⅱ级组与Ⅲ~Ⅳ级组相比无显著差异(P>0.05).结论Syndecan-1与胶质瘤的浸润发展有一定的相关性.

    作者:姜华;周幽心;邵忠;傅军;黄煜伦;叶明 刊期: 2005年第01期

  • 颈前带蒂肌膜肌瓣法在中晚期喉癌手术中的应用

    对113例中晚期喉癌手术切除肿瘤后用颈前带蒂肌膜肌瓣修复喉腔行喉功能重建.结果:总拔管率为92.04%(104/113);发音评价为中及较好以上占96.46%(109/113);3年生存率为76.99%(87/113),5年生存率为56.64%(64/113).认为应用带蒂肌膜肌瓣法修复中晚期喉癌扩大切除后创面,比其他方法省时、省事,效果好.

    作者:唐云青;戴长稳;曹文华 刊期: 2005年第01期

  • 不同病理模型大鼠脾切除后细菌吞噬功能的比较

    目的比较不同病理模型大鼠脾切除后细菌的吞噬功能.方法75只Wistar大白鼠建立正常对照、肝硬化、激素负荷、免疫抑制4组动物模型,行脾切除术.所有大鼠测定中性粒细胞体外吞噬功能,计算中性粒细胞的吞噬率(PR)和吞噬指数(SI).结果大鼠中性粒细胞对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌和大肠杆菌的平均PR分别为26.25%、22.60%和22.57%,平均SI分别为4.72、3.70和3.53,后两种细菌与金黄色葡萄球菌相比均有显著性差异(P<0.05).正常对照大鼠脾切除前后对细菌的平均PR分别为39.21%和30.71%,平均SI分别为5.48和4.11,脾切除前后比较有显著性差异(P<0.05).4组模型大鼠脾切除后对细菌的平均PR分别为30.71%、20.79%、14.46%和13.86%,后三组与正常脾切组比较均有显著性差异(P<0.01),平均SI分别为4.11、3.77、3.49和3.08,免疫抑制组与正常脾切组比较有显著性差异(P<0.05).结论大鼠中性粒细胞对肺炎球菌和大肠杆菌的PR和SI较低.脾切除术后大鼠对细菌的PR和SI均有下降.不同病理状态降低大鼠对细菌的PR和SI,因此临床上对病理性脾切除患者的围手术期处理应有充分的认识和准备.

    作者:曹苇;贾鑫;张丰;卢先州;徐敏晖;池元龙 刊期: 2005年第01期

  • CD34+HPC来源的树突状细胞体外扩增和功能研究

    目的研究脐血CD34+HPC体外扩增诱导产生功能性树突状细胞(DCs) 的有效方案.方法 Ficoll分离脐血获得单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖的能力,MTT法检测特异性CTL的杀伤能力.结果 SCF+FL+GM-CSF+IL-4诱导生成的DCs激发T细胞增殖和特异性CTL的杀伤能力均高于其他组.结论 SCF+FL+GM-CSF+IL-4可有效扩增CD34+HPC并诱导产生功能性DCs.

    作者:吴明媛;黄勇;朱庭;朱一蓓;夏瑜;张学光 刊期: 2005年第01期

  • 高龄食管癌贲门癌62例手术治疗分析

    手术治疗高龄食管癌、贲门癌62例,其中左开胸经食管床胃代食管38例,右胸、腹二切口或右胸、腹、左颈三切口食管癌根治术23例,剖胸探查1例.结果61例治愈出院,死亡1例,手术病死率1.6%;半年以上生存率98.4%,1年生存率85.4%;发生并发症30例.认为高龄食管癌、贲门癌患者在条件允许情况下均应采取手术治疗,高龄患者术后并发症的发生与围术期处理密切相关.

    作者:于曙东;何靖康;朱蔚 刊期: 2005年第01期

苏州大学学报(医学版)杂志

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